DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的定位研究

目的研究二价金属离子转运体1(divalent metal transporter 1,DMT1)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层内的定位分布,探讨DMT1异常表达影响脑铁代谢平衡从而参与AD发病的可能机制。方法应用免疫组织化学方法观察DMT1在9月龄APPsw/PS1小鼠大脑皮层的阳性分布;应用免疫荧光双标技术和共聚焦激光扫描显微镜观察DMT1蛋白和β淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内的一致性分布和位置关系。结果APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内均有DMT1阳性表达;DMT1和Aβ免疫双标发现DMT1免疫阳性产物与Aβ共存于老年斑,二者分布具有一致性。结论DMT1在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑内大量表达,其分布与Aβ具有一致性,提示DMT1可能参与AD脑内Aβ沉积和老年斑形成。     

外源性神经生长因子对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节

目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节。方法:鼻腔给予小鼠NGF治疗14周,应用免疫组织化学检测小鼠脑内β淀粉样蛋白(Aβ)老年斑的分布,应用免疫印迹检测小鼠脑内糖原合酶激酶3β(GSK3β)、p-GSK3β、β-连环蛋白(β-catenin)和p-β-catenin的表达。结果:Aβ免疫组织化学显色结果显示,与对照组小鼠大脑内的Aβ老年斑相比较,NGF治疗组转基因小鼠大脑内的Aβ老年斑数量减少了30.22%,沉积减少了35.85%,差异有统计学意义。免疫印迹结果显示,外源性NGF减少APP/PS1转基因小鼠脑内GSK3β的表达,增加β-catenin的表达。结论:外源性NGF可能通过抑制GSK3β的活性和增加β-catenin的活性,激活Wnt/β-catenin信号通路,对神经元起保护作用。     

高压氧通过激活CREB/BDNF信号通路减轻阿尔茨海默病小鼠海马神经元突触损伤

目的:探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对阿尔茨海默病APP/PS1转基因(trangenic,TG)小鼠海马神经元突触损伤的影响及其作用机制。方法:将6月龄雄性APP/PS1 TG小鼠随机分为TG组、HBO组及环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)抑制剂H89组,每组10只;另取10只同龄雄性野生型(wild-type,WT)C57BL/6小鼠作为阴性对照组(WT组)。HBO和H89组小鼠进行高压氧治疗6个疗程;WT组及TG组小鼠不给予治疗。Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力;筑巢实验检测小鼠智力改变;尼氏染色检测各组小鼠海马神经元中尼氏体表达;real-time PCR检测小鼠海马区CREB及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)mRNA的表达;Western blot检测小鼠海马区突触素(synapsin,SYN)、突触后致密区蛋白95(postsynaptic density protein 95,PSD95)...     

β淀粉样蛋白及代谢酶类在阿尔茨海默病和糖尿病模型小鼠脑内的表达

目的观察阿尔茨海默病(AD)和糖尿病模型小鼠脑内β淀粉样蛋白(Aβ)及代谢相关酶类的表达情况,以便从分子水平找到糖尿病并发AD的实验室依据。方法 5月龄双转基因痴呆症模型小鼠(APP/PS1双转基因小鼠)、ob/ob T2DM肥胖模型小鼠和野生型C57BL/6J小鼠为对照,分别用免疫组化染色、ELISA和Western blot检测脑内老年斑(SP)、Aβ含量及Aβ代谢酶类的表达情况。结果 APP/PS1小鼠大脑皮质及海马均可见一定数量的SP;ob/ob小鼠大脑皮质内偶可见SP,而对照组未见SP。与对照小鼠相比,APP/PS1与ob/ob小鼠脑内Aβ40、Aβ42的含量明显升高(P0.05);但APP/PS1小鼠脑内Aβ水平显著高于ob/ob小鼠(P0.05)。APP在APP/PS1小鼠脑内的表达显著高于其他两组小鼠;在ob/ob小鼠脑内的表达要强于对照小鼠(P0.05)。Aβ生成的关键酶BACE1在APP/PS1与ob/ob小鼠脑内的表达显著高于对照小鼠(P0.05),但其在APP/PS1小鼠脑内的表达要强于ob/ob小鼠(P0.05)。Aβ降解的关键酶IDE在APP/PS1与ob/ob小鼠脑内的表达显著低于对照小鼠(P0.05),且在ob/ob小鼠脑内表达最低。结论 Aβ生成与降解的异常以及其异常聚集沉积不仅发生在早期AD脑内,同时也发生在T2DM脑内,提示Aβ过表达可能是促进2型糖尿病并发AD的重要原因之一。     

上调星形胶质细胞中PP2A对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用

目的:探讨上调星形胶质细胞中蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用。方法:构建带胶质细胞原纤维酸性蛋白启动子的e GFP-wt PP2A慢病毒,特异性上调星形胶质细胞中的PP2A。将实验小鼠随机分为野生对照+慢病毒空载体组(Con组)、APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒空载体组(APP/PS1组)和APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒感染组(PP2A组),各组小鼠经侧脑室注射慢病毒4周后,采用脑片免疫荧光检测β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)的水平,通过Golgi染色观察树突棘密度和形态学变化,电镜检测突触后致密物(postsynaptic density,PSD)的厚度,Morris水迷宫定位航行实验检测感染慢病毒后对学习和记忆的影响。结果:上调星形胶质细胞中PP2A降低APP/PS1双转基因小鼠Aβ的水平,增加树突棘密度、有突触功能的蘑菇状树突棘比例和PSD厚度,缩短寻找平台逃避潜伏期。结论:上调星形胶质细胞中PP2A改善APP/PS1双转基因小鼠AD样Aβ聚集的病理改变,具有重塑突触结构与功能和改善学习记忆能力的作用。     

FSD-C10调节阿尔茨海默病双转基因小鼠炎性微环境

目的:探讨新型Rho激酶抑制剂FSD-C10对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)模型小鼠脑内炎性微环境的调节作用。方法:采用双转染人β-淀粉样蛋白前体(β-amyloid protein precursor,APP)695swe基因和人早老素1(presenilin-1,PS1)ΔE9突变基因的8月龄小鼠作为AD动物模型,随机分为模型组和FSD-C10治疗组,分别经腹腔注射生理盐水和FSD-C10(25 mg·kg~(-1)·d~(-1))持续治疗2个月,同月龄野生型小鼠作为正常对照组。应用Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)实验检测小鼠学习和记忆能力。采用免疫组化和Western blot技术检测小鼠脑组织β-淀粉样蛋白(Aβ)、磷酸化Tau蛋白(p-Tau)、β位点APP剪切酶(BACE)、Toll样受体4(TLR-4)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)和精氨酸酶1(Arg-1)的表达。结果:与模型组相比,FSD-C10干预能显著改善APP/PS1双转基因小鼠学习和记忆能力,减少海马区Aβ1-42、p-Tau和BACE的表达,抑制脑内炎症信号通路TLRs/NF-κB轴TLR-4的表达和p-NF-κB的激活,减少i NOS的表达,增加Arg-1的表达。结论:FSD-C10干预能明显改善APP/PS1双转基因小鼠的学习和记忆能力,其机制可能是通过抑制TLRs/NF-κB信号通路激活,减少炎症因子的分泌及促进M1型炎性小胶质细胞向M2型抗炎小胶质细胞转化,从而改善APP/PS1双转基因小鼠脑组织炎症微环境。     

ZnT3与Aβ在APP/PS1转基因小鼠脑血管及脉络丛的一致性分布

目的研究锌转运蛋白3(Zinc Transporter 3,ZnT3)与β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)在APP/PS1转基因小鼠大脑血管壁及脉络丛上皮的定位分布,探讨ZnT3影响脑锌平衡从而参与AD发病的可能机制。方法应用免疫荧光技术和共聚焦激光扫描显微镜观察ZnT3和Aβ在APP/PS1转基因小鼠大脑血管壁及脉络丛上皮的共存情况。结果APP/PS1转基因小鼠侧脑室及第三、四脑室的脉络丛上皮细胞均呈ZnT3和Aβ染色阳性,二者共同表达于上皮细胞的胞质内,而细胞核未见任何着色。在APP/PS1转基因小鼠大脑皮层中,几乎所有Aβ阳性的血管壁上均有ZnT3的表达,二者的分布同样具有一致性。结论ZnT3与Aβ在APP/PS1转基因小鼠大脑血管及脉络丛上皮的一致性分布,提示ZnT3可能参与Aβ在大脑血管及脉络丛上皮的沉积。     

外源性NGF对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的影响

目的观察外源性神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的影响和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element bling protein,CREB)蛋白的调节作用。方法实验分为野生组(雄性5月龄C57BL/6小鼠6只,鼻腔给予生理盐水),AD组(雄性5月龄APP/PS1小鼠6只)和AD+NGF组(雄性5月龄APP/PS1小鼠6只,鼻腔给予小鼠NGF治疗14w),应用Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力变化,应用Western blot检测小鼠脑内CREB蛋白、p-CREB蛋白的表达。结果 AD+NGF组小鼠的潜伏期和找到平台前所经过的总路程均显著低于AD组小鼠,经过目标平台位置的次数明显高于AD组小鼠,游泳总路程和平均游泳速度均明显低于AD组小鼠。外源性NGF上调APP/PS1转基因小鼠脑内CREB蛋白和p-CREB蛋白的表达。结论外源性NGF改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力可能与上调CREB和p-CREB蛋白的表达相关。     

BDNF在APP/PS1转基因小鼠皮层和海马内的表达及其对学习记忆能力的影响

目的:探究脑源性神经生长因子(BDNF)在野生型小鼠和APP/PS1双转基因小鼠大脑内的表达变化及其对学习记忆能力的影响。方法:选择野生型小鼠和APP/PS1双转基因小鼠作为研究对象,刚果红染色标记Aβ斑,TUNEL法检测细胞凋亡,采用免疫荧光和Western blot方法检测BDNF在野生型和APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马内的表达,Morris水迷宫检测小鼠的空间学习记忆能力。结果:APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马区都形成Aβ斑,且12月龄小鼠Aβ斑的数量多于6月龄(P0.05)。12月龄APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马区神经元凋亡的数量多于野生型小鼠(P0.01)。野生型小鼠皮层和海马区BDNF的表达量高于APP/PS1双转基因小鼠(P0.01)。水迷宫检测显示,APP/PS1双转基因小鼠的逃逸潜伏期长于野生型小鼠,而60 s内穿越平台所位象限的次数少于野生型小鼠,且游泳轨迹杂乱无章。结论:APP/PS1双转基因型小鼠皮层和海马区BDNF的表达量低于野生型小鼠,并伴随着神经元凋亡的增加,且空间学习记忆能力降低。这些结果提示APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的降低可能与BDNF表达减少导致神经元凋亡增加有关,这也许是阿尔茨海默病的病理机制之一。     

EPA对创伤性脑损伤APP/PS1转基因小鼠淀粉样肽沉积和认知功能的作用

目的探究二十碳五烯酸(EPA)对创伤性脑损伤APP/PS1转基因小鼠淀粉样肽沉积和认知功能障碍的作用。方法对3月龄APP/PS1小鼠施行创伤性脑损伤(TBI)手术并在手术当天即开始对其进行为期30天的EPA乙酯治疗(腹腔注射,1g/Kg/d)。TBI手术30天后(小鼠4月龄),通过HE染色和免疫组织化学检测小鼠脑内淀粉样肽(Aβ)负荷,通过Y-迷宫自发变更试验和高架十字迷宫试验检测小鼠认知功能状态。结果 TBI手术造成小鼠皮层明显空洞形成和组织缺损,4月龄APP/PS1/小鼠海马区开始出现Aβ斑块,TBI可显著加重APP/PS1小鼠海马区Aβ负荷,而EPA治疗后APP/PS1小鼠海马区Aβ负荷可恢复至生理水平。4月龄APP/PS1小鼠并未出现显著认知功能损害,TBI可使APP/PS1小鼠探索活跃度、空间工作记忆和危险识别能力明显降低,EPA治疗可恢复至未损伤小鼠同等水平。结论EPA治疗可降低创伤性脑损伤AD模型小鼠脑内淀粉样斑块沉积和改善认知功能障碍。     

链脲佐菌素对APP/PS1转基因小鼠脑内糖原合成酶-3α活性的影响

目的观察链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的实验性糖尿病对APP/PS1转基因小鼠脑组织中糖原合成酶-3α(GSK-3α)蛋白活性的影响。方法 3月龄APP/PS1转基因小鼠腹腔内注射STZ建立实验性糖尿病模型。使用电子天平和便携式血糖仪定期检测小鼠体重和血糖的变化。应用免疫组织化学方法和western blotting方法检测AD转基因小鼠脑组织中p-GSK-3α和GSK-3α的蛋白表达。结果动物饲养20W后,与APP/PS1转基因小鼠比较,STZ组转基因小鼠体重下降(P<0.05),血糖则明显升高(P<0.01),提示糖尿病模型诱导成功。Western blotting结果显示,STZ组APP/PS1转基因小鼠脑内p-GSK-3α蛋白表达水平较APP/PS1转基因小鼠明显降低(P<0.01),而总GSK-3α蛋白没有变化(P>0.05),两者的比值p-GSK-3α/GSK-3α下降49%(P<0.01)。免疫组化染色显示,STZ组转基因小鼠大脑皮层神经元内p-GSK-3α阳性表达明显低于转基因小鼠。结论 STZ上调APP/PS1转基因小鼠脑组织内GSK-3α蛋白活性。     

DHA改善抑郁状态下APP/PS1转基因小鼠Aβ负荷和认知功能障碍

目的探究DHA对抑郁状态下APP/PS1转基因小鼠Aβ负荷和认知功能的影响。方法对3月龄APP/PS1小鼠进行慢性非可预测轻度应激(CUMS)条件性饲养并同时进行DHA治疗。30天后,通过条件恐惧试验和新位置识别试验检测其认知功能,通过Western blotting和ELISA检测其脑内淀粉样肽(Aβ)负荷。结果经CUMS条件性饲养,APP/PS1小鼠脑内Aβ负荷和沉积倾向显著增加,认知功能出现明显缺损。DHA治疗可抑制CUMS条件性饲养后APP/PS1小鼠脑内Aβ含量和沉积趋势的上调,并使认知功能恢复至生理水平。结论 DHA可改善APP/PS1转基因小鼠抑郁状态下加重的Aβ负荷和认知功能障碍。     

雷公藤甲素抑制APP/PS1双转基因AD模型小鼠海马内Aβ沉积和老年斑形成

目的 研究雷公藤甲素(T10)对APP/PS1双转基因AD模型小鼠(APP/PS1dtg)β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积与老年斑(SP)形成的影响。 方法 取18只45月龄健康雄性APP/PS1dtg, 随机分为3组,分别以T10灌胃：5μg/(kg&#8226;d) (T10 H组)、1μg/(kg&#8226;d) (T10 L组)和等容量的溶媒灌胃（PLC组）,共计45d。45d后取材,左侧半大脑切片,6E10免疫组织化学方法染色和刚果红染色结合无偏性体视学定量分析,研究T10对海马Aβ沉积和SP形成的影响;分离右侧半海马,免疫印迹法分析海马Aβ蛋白水平的变化。 结果 与PLC组比较, T10 H组海马6E10阳性的Aβ沉积总面积减少了35％(P<0.001),SP总面积减少了32％(P<0.001); T10 L组海马Aβ斑总面积减少了18％(P<0.05), SP总面积减了21％(P<0.05); T10呈剂量依赖性抑制Aβ在APP/PS1dtg 海马的沉积和SP的形成,减少海马内Aβ蛋白水平; 免疫印迹分析也显示,T10 H组海马Aβ蛋白水平最低,PLC组Aβ蛋白水平最高,T10 L组Aβ蛋白水平介于两者之间。     

激活APP/PS1小鼠β_2-AR增强海马神经元再生并改善记忆缺失

目的:研究β_2-肾上腺素受体(β_2-AR)对阿尔茨海默病(AD)APP/PS1转基因小鼠海马神经元再生和学习记忆的作用。方法:12只AD小鼠随机分为APP/PS1组和APP/PS1+Clen组,另选6只野生型小鼠作为对照组(WT)。APP/PS1+Clen组于第8月龄起行腹腔注射β_2-AR激动剂Clenbuterol(Clen)2 mg/kg/d,持续2个月。APP/PS1组和WT组均接受等量的0.9%生理盐水稀释的DMSO。给药后对小鼠进行Morris水迷宫试验检测小鼠的学习记忆能力,后取脑切片进行PSA-NCAM免疫组织化学染色。结果:与APP/PS1组相比,APP/PS1+Clen组逃避潜伏期明显缩短,而目标象限停留时间及经过平台次数明显增加(P0.05)。免疫组织化学法显示APP/PS1+Clen组小鼠海马区PSA-NCAM表达增强。结论:通过Clenbuterol激活APP/PS1小鼠β_2-AR可增强海马神经元再生并改善记忆缺失。     

淀粉样蛋白膜内片段疫苗对APP转基因小鼠的治疗研究

目的依据淀粉样蛋白膜内片段(intramembranous fragments of amyloid-β,IF-Aβ)的膜定位和小分子特点,在体研究IF-Aβ疫苗对淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)转基因(transgenic,Tg)小鼠的治疗作用,以期寻找较Aβ42更安全有效的治疗阿尔茨海默病(alzheimer’s disease,AD)的治疗疫苗。方法分别用PBS、KLH-IF-Aβ(50μg/只)、KLH-IF-Aβ(100μg/只)和KLH-Aβ42(100μg/只)免疫对照组、IF50组、IF100组和Aβ42组6月龄APP Tg C57BL/6J小鼠,共4次2.5月;水迷宫检测APP Tg小鼠认知功能变化;ELISA检测血清抗体和脾细胞释放γ-干扰素;组织学检测模型鼠大脑老年斑的变化;评价免疫APP Tg小鼠大脑淋巴细胞浸润情况。结果免疫4个月后,IF-Aβ疫苗对APP转基因小鼠具有良好的体液和细胞免疫原性;IF50组小鼠的认知功能加强,大脑皮层区老年斑有所减少,大脑皮层和海马区无明显的淋巴细胞浸润;IF100组小鼠的认知功能下降,大脑皮层老年斑明显减少,大脑皮层和海马区出现明显的淋巴细胞浸润;Aβ42组小鼠认知功能有所提高,大脑皮层老年斑明显减少,大脑皮层和海马区出现淋巴细胞浸润。结论在合适的免疫剂量下,与Aβ42比较,IF-Aβ对APP转基因模型小鼠的治疗更加安全有效,为AD免疫治疗的临床研究开辟了一个新的良好前景。     

β-分泌酶与阿尔茨海默病

β-分泌酶(β-site APP cleaving enzyme,BACE)在β位点裂解β淀粉样蛋白前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)并产生β淀粉样蛋白(amyloid proteinβ,Aβ),Aβ的聚集是形成阿尔茨海默病(Alzhemier’s disease,AD)患者脑中老年斑的主要原因,引起神经元损伤和认知功能减退,在AD的发病过程中起到中心和共同通道的作用。BACE的抑制剂部分抑制BACE,可使Aβ水平下降,取得明显疗效。进一步研究BACE抑制剂的作用机制,对AD治疗具有良好的前景。     

β-蜕皮甾酮对APP/PS-1转基因小鼠学习记忆能力及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察β-蜕皮甾酮对APP/PS-1转基因小鼠学习记忆能力及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法取C57小鼠6只及APP/PS-1转基因小鼠12只,C57小鼠为对照组(Control)、APP/PS-1小鼠12只随机分为模型组(APP/PS-1)和实验组(APP/PS-1+20HE),实验组APP/PS-1转基因小鼠按14.4mg/kg的剂量灌胃β-蜕皮甾酮,每日一次,对照组及模型组小鼠灌胃等量蒸馏水,连续灌胃8周,Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,尼氏染色观察各组小鼠海马组织病理学变化,免疫组化法观察海马Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果模型组小鼠与对照组小鼠相比,认知能力明显下降(P<0.01),海马Bcl-2和Bax蛋白表达均增加。实验组与模型组相比,学习记忆能力明显改善(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达增加,Bax蛋白的表达减少。结论β-蜕皮甾酮能够改善转基因小鼠的学习记忆能力,可能与促进海马Bcl-2蛋白表达和抑制Bax蛋白表达有关。     

10月龄APP/PS1双转基因AD小鼠海马超微结构特征的观察

目的:观察APP/PS1双转基因小鼠海马内Aβ沉积的形态特征。方法:以10月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠和C57BL/6小鼠为研究对象,采用Aβ免疫组化和透射电镜技术,观察海马部位Aβ的沉积情况及相关的病理特征。结果:在双转基因小鼠海马内存在致密性神经炎性斑块及营养障碍性突起,但脑微血管壁的Aβ沉积不甚明显;营养障碍性突起及神经细胞、微血管内皮细胞、周细胞内存在大量的自噬泡及次级溶酶体,提示该模型存在自噬溶酶体途径功能紊乱。结论:该鼠模拟了AD的老年斑及相关退行性变等病理改变,其中可能伴有细胞多种代谢的变化及血脑屏障功能的变化。从老年斑角度而言,该动物是成功的阿尔茨海默病动物模型,可用于AD的生化、病理研究及新治疗方法的探索。     

鹿茸多肽在阿尔茨海默病模型小鼠中抗氧化应激的作用机制

目的 探讨鹿茸多肽（VAP）在阿尔茨海默病（AD）模型中抗氧化应激的作用机制。 方法 选用 8 月龄雄性淀粉样前体蛋白（APP）/早老素1（PS1）双转基因小鼠随机分为模型组、VAP组,另以同窝阴性小鼠设立为对照组,每组12只。连续灌胃给药6个月后进行行为学、形态学和氧化应激相关指标检测。Western blotting 检测小鼠海马组织中APP及β-分泌酶 1（BACE1）蛋白的表达水平。另外以β-淀粉样蛋（Aβ）25～35（25 μmol/L）诱导 SH-SY5Y 细胞损伤建立AD细胞模型组,VAP组（VAP 500 mg/L+ Aβ25～35 25 μmol/L）和对照组。检测细胞凋亡、膜电位、活性氧簇（ROS）水平和氧化应激相关指标。 结果 动物实验发现,与模型组比较,VAP组小鼠逃避潜伏期缩短（P＜0.05）。模型组小鼠海马 CA1 区神经元减少且排列紊乱,VAP组排列较规则,形态有明显改善。与模型组比较,VAP组老年斑数量减少;与模型组比较,VAP组丙二醛（MDA）含量下降,超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶 （GSH-Px）含量上升,差异有统计学意义（P＜0.05）。与对照组比较,模型组APP 和BACE1含量上升,与模型组比较,VAP组APP和BACE1含量下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。细胞培养实验发现,VAP组细胞凋亡率下降。与模型组比较,VAP组线粒体膜电位上升,ROS含量明显下降,MDA含量下降,SOD和GSH-Px含量上升,差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 VAP对AD模型动物和细胞的氧化应激损伤具有保护作用,可能是通过降低ROS产生,且提高抗氧化酶系活性,减少Aβ的沉积而实现的。     

β-淀粉样蛋白和drebrin在培养的APP/PS1转基因小鼠神经元中的表达

目的: 探讨阿尔茨海默病(AD)脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)积聚与树突棘蛋白drebrin表达变化之间的关系.方法: 采用免疫细胞化学、ELISA和免疫印迹法等方法检测大脑皮层原代培养的APP/PS1转基因小鼠的神经元和同种野生型(WT)小鼠的神经元Aβ和drebrin的表达.结果: 培养至12d (days in vitro)时,可见Aβ在APP/PS1神经元胞体内聚集,培养基内的Aβ水平也同时升高;此期神经元内drebrin斑点状免疫反应产物分布较为稀疏,drebrin的表达水平下降.18d时,Aβ在胞体内聚集的基础上,向突起内延伸,培养基内的Aβ水平进一步升高;drebrin的表达则明显下降.结论: 原代培养的APP/PS1小鼠神经元内Aβ积聚的同时,树突棘蛋白drebrin的表达下降.提示AD脑内Aβ积聚可能是影响树突棘蛋白drebrin表达的因素之一.