核因子κB(NF-κB)信号通路在炎症与肿瘤中作用的研究进展

核因子κB(NF-κB)是一种能调节多种炎症和免疫基因表达的诱导性转录调节因子,能与多种细胞因子基因的启动子或增强子区NF-κB结合位点特异性结合,调控其转录和表达;进一步影响细胞的周期、自噬、衰老、凋亡,炎症反应和免疫应答等病理生理过程。同时,NF-κB是联系炎症与肿瘤的关键信号分子,对炎症及肿瘤微环境具有重要影响。NF-κB不适当的激活和表达与多种肿瘤的发生发展及肿瘤细胞的耐药性密切相关。NF-κB的激活是许多病理状态的决定因素,这使它逐渐成为相关临床疾病的治疗靶点。精细调控NF-κB活性,对于临床治疗炎症相关疾病和肿瘤将具有重要意义。     

金黄色葡萄球菌通过TLR2/PI3K信号诱导巨噬细胞的炎症反应和自噬北大核心CSCD

目的探究巨噬细胞表面Toll样受体2(TLR2)在介导金黄色葡萄球菌(SA)诱导哮喘炎症反应中的分子机制。方法通过SA刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞系建立炎症反应模型,分别用TLR2小干扰RNA(si RNA)和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理。Western blot法检测细胞裂解液中TLR2、髓样分化因子88(My D88)、PI3K、核因子κBp65(NF-κBp65)磷酸化的NF-κBp65(p-NF-κBp65)以及自噬蛋白beclin-1和微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的水平,ELISA检测细胞上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的分泌水平,激光共聚焦显微镜观察自噬溶酶体的数量。结果 SA刺激巨噬细胞活化TLR2等多种信号通路。TLR2 si RNA显著抑制PI3K、p-NF-κBp65以及自噬蛋白beclin-1和LC3B的表达,此外,自噬溶酶体的数量和TNF-α和IL-6的分泌也显著减少。3-MA在抑制自噬和炎症反应方面与TLR2 si RNA的作用效果相同。结论 TLR2通过PI3K信号通路调控金黄色葡萄球菌诱导巨噬细胞的炎症反应和自噬。     

p53 和NF-κB 信号通路在MTB 感染AECⅡ细胞中的免疫调控作用研究

目的：研究在结核分枝杆菌（MTB）感染肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）过程中,p53和NF-κB信号通路中相关信号分子是否参与了抗结核的先天免疫调控。方法：利用实时荧光定量PCR、Western blot和蛋白芯片技术,通过过表达和抑制AECⅡ细胞中的p53和NF-κB基因,分析在牛结核分枝杆菌弱毒株卡介苗（BCG）感染过程中p53和NF-κB信号通路的信号分子和细胞炎症因子的表达变化,并探讨p53与NF-κB信号通路在AECⅡ细胞抗MTB感染免疫应答中的“cross-talk”关系。结果：在A549细胞中,p53信号通路通过p53协同CBP来负调控NF-κB、TLR-4及TRAF6的表达,从而抑制NF-κB信号通路的活化,并上调IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ的表达;而NF-κB信号通路通过NF-κB协同TLR-4、TRAF6与CBP来负调控p53与MDM2的表达,从而抑制p53信号通路的激活,同时上调了IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ的表达。当BCG感染A549细胞时,p53信号通路中p53协同MDM2负调控CBP,进而上调NF-κB信号通路的TLR-4和TRAF6...     

多西环素通过上调自噬调控脂多糖诱导的THP-1细胞炎症因子水平

目的:探讨细胞自噬对多西环素调控脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞引发炎症反应的影响及其分子机制。方法:利用LPS刺激人单核/巨噬细胞系THP-1建立炎症反应细胞模型,用多西环素进行干预。通过测定细胞培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)等细胞因子评估炎症水平;通过Western blot法检测LC3B、核因子κB(NF-κB)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)等蛋白水平评估细胞自噬水平及对炎症细胞信号通路的影响。利用3-甲基腺嘌呤(3-MA)和雷帕霉素分别抑制和促进细胞自噬,研究自噬对多西环素调控LPS刺激THP-1细胞炎症因子水平的影响。结果:LPS刺激THP-1细胞诱导细胞因子TNF-α及IL-8快速释放,12 h左右达到峰值;多西环素有效地抑制了LPS诱导的细胞因子产生(P0.05)。多西环素增加了LPS诱导的THP-1细胞自噬水平,且多西环素本身是一种自噬诱导剂。LPS上调p-mTOR蛋白水平,而多西环素抑制p-mTOR的蛋白水平,提示多西环素通过mTOR依赖的途径而LPS通过非mTOR依赖的途径诱导自噬。进一步研究显示,联用LPS、雷帕霉素及多西环素抑制了NF-κB的蛋白水平,雷帕霉素增加了多西环素对细胞因子生成的抑制;反之,自噬抑制剂3-MA减弱了多西环素对NF-κB的抑制效应,同时减弱了多西环素对炎症因子生成的抑制效应。结论:自噬参与多西环素调控LPS刺激单核/巨噬细胞引起的炎症反应。     

糖原合成激酶3β在急性肝衰竭免疫炎症反应中的作用及机制研究进展

糖原合成激酶3β(GSK3β)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,能够调节物质代谢、细胞生长及免疫炎症反应。近期研究发现GSK3β在急性肝衰竭中能够通过激活NF-κB炎症信号通路、增强IRF3固有免疫反应、促进氧化应激及抑制自噬等方式促进炎症反应。     

p62参与柳氮磺吡啶抑制NF-κB信号途径和诱导人神经胶质瘤U251细胞凋亡机制的研究

<正>目的:以人神经胶质瘤U251细胞为研究对象,从p62参与核转录因子κB(NF-κB)信号途径活化角度,探讨柳氮磺吡啶(SAS)抑制NF-κB信号途径和诱导U251细胞发生凋亡的机制。方法:构建p62 siRNA表达载体,MTT法检测细胞生存率,萤光素酶报告基因分析检测NF-κB转录活性,Western blotting法和间接免疫荧光法检测细胞自噬、凋亡。结果:SAS抑制U251     

栀子苷抑制甲型流感病毒感染细胞中Toll样受体7/核因子-κB信号通路

目的 研究栀子苷对甲型流感病毒H3N2感染所致的Toll样受体7(Toll-like receptors7,TLR7)及其介导的细胞内转录因子核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)活性及前炎症细胞因子TNF-α和IL-6释放的影响,以探讨栀子苷干预甲型流感病毒作用的分子生物学机制.方法 甲型流感病毒H3N2作为刺激因素,利用双荧光素酶顺式报告系统和免疫荧光实验检测栀子苷对NF-κB转录活性及NF-κB核转位的影响.RT-PCR法进一步验证栀子苷对NF-κB上下游靶基因TLR7、TNF-α和IL-6 mRNA表达水平的影响.结果 通过NF-κB双萤光素酶报告系统检测发现,与正常对照组比较,病毒感染的细胞中NF-κB荧光素酶报告活性明显升高;与病毒损伤组比较,栀子苷治疗组NF-κB荧光素酶报告活性明显受到抑制.荧光倒置显微镜下观察NF-κB p65磷酸化水平及核转位变化结果显示,病毒感染的细胞中NF-κB磷酸化水平及人核率明显升高;与病毒损伤组比较,栀子苷治疗组NF-κB磷酸化水平及入核率明显受到抑制.RT-PCR结果显示栀子苷能明显抑制病毒诱导的TLR7、TNF-α和IL-6 mRNA的高表达.结论 栀子苷可拮抗甲型流感病毒H3N2感染细胞中TLR7介导的细胞内转录因子NF-κB信号转导通路的活化,并可抑制其下游靶基因TNF-α和IL-6 mRNA的高表达水平来发挥抗病毒感染的作用.     

海带多糖通过抑制NF-κB和JNK通路减轻放射诱导的小鼠下颌下腺炎症反应

目的:探讨海带多糖(LJP)对放射(Rad)诱导的小鼠下颌下腺炎症反应的抑制作用,并初步探讨其可能机制。方法:96只雄性昆明小鼠随机分为对照(Ctrl)组、LJP组、Rad组和LJP+Rad组,每组24只。在Rad处理前1周连续给药,采用[60Co]γ射线创建放射性下颌下腺损伤模型并观察小鼠Rad处理后1 d、3 d、7 d和14 d的唾液量变化;采用苏木精-伊红(HE)染色观察下颌下腺组织形态学改变;免疫组织化学法检测下颌下腺组织中核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化JNK(p-JNK)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的蛋白表达;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、MCP-1及巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)的表达;免疫荧光法检测下颌下腺核因子κB(NF-κB)p65亚基和JNK的定位。结果:与Ctrl组相比,Rad组小鼠唾液量显著降低(P0.05),镜下可见大量炎症细胞浸润,且NF-κB和JNK信号通路相关炎症因子和蛋白表达显著增强(P0.05);而LJP干预可以减轻小鼠下颌下腺炎症,并显著抑制NF-κB和JNK信号通路相关蛋白的表达。结论:LJP可以减轻Rad诱导的小鼠下颌下腺炎症反应,其机制可能与抑制NF-κB和JNK信号通路有关。     

沉默NF-κB p65基因下调TNF-α诱导的肺泡上皮细胞的炎症反应

目的建立急性肺损伤体外细胞炎症模型,探讨NF-κB p65基因沉默减轻细胞炎症、保护肺结构细胞的可行性。方法以TNF-α(10 ng/ml)刺激肺泡Ⅱ型上皮细胞(A549),运用RNA干扰技术沉默NF-κB p65基因,采用RT-PCR及Westernblotting法检测沉默效率,ELISA法检测细胞培养上清中IL-1β、IL-8、IL-10等炎症因子浓度。结果 TNF-α刺激A549细胞可在基因水平上调NF-κB p65的表达,并增加NF-κB蛋白的核转位,上调细胞培养上清中IL-1β、IL-8、IL-10的浓度;预转染NF-κB p65 siRNA可在基因水平及蛋白水平有效沉默NF-κB p65表达,降低上述各炎症因子浓度(P<0.05)。结论急性肺损伤体外细胞炎症模型构建成功,RNA干扰技术能有效沉默该模型NF-κB p65基因,下调炎症反应水平,保护肺泡上皮细胞,为急性肺损伤免疫调控机制的研究和基因靶向治疗提供实验依据。     

肺炎支原体感染对BALB/c小鼠TLR4/NF-κB信号通路表达的影响

目的探讨肺炎支原体(MP)感染对BALB/c小鼠TLR4/NF-κB信号通路表达的影响。方法BALB/c小鼠80只,随机分成肺炎支原体感染组和对照组,每组40只,分别于接种后3d、7d、14d、21d,,用ELISA试剂盒检测肺泡灌流液(BALF)IL-4和IL-6含量;HE染色观察肺脏病理组织学变化;用Western blot实验检测肺组织TLR4、Myd88与NF-κB表达变化。结果肺泡灌流液中IL-4和IL-6含量于感染后7 d时达到高峰,而后呈下降趋势;感染MP 3d后,BALB/c小鼠肺组织即出现间质性炎症改变,7d时炎症最明显,14d时炎症逐渐减轻;感染MP后,BALB/c小鼠肺组织TLR4、Myd88与NF-κB表达水平显著升高。结论肺炎支原体感染激活TLR4/NF-κB信号通路。     

NF-κB信号通路在骨及相关疾病中的作用的研究进展

NF-κB是一类核转录因子,可与其靶基因启动子区的DNA序列结合,而启动基因转录的功能。它们广泛参与胚胎发育、细胞增殖、细胞凋亡、免疫反应、炎症反应、病毒感染等过程。目前研究已经证实NF-κB信号通路在骨的发育和形成中具有重要的调控作用,NF-κB信号通路的阻断可导致骨发育异常或相关疾病的发生。NF-κB通过调控成骨细胞、破骨细胞、骨细胞和软骨细胞的增殖、分化和凋亡等生物学过程,调控骨的发育和重塑,并在骨相关疾病的发生中发挥重要的调控作用。     

齐墩果酸对宫内感染所致新生鼠肺损伤的影响研究

目的 探讨齐墩果酸对宫内感染所致新生鼠肺损伤和免疫功能的影响及可能的抗炎机制。方法 建立妊娠SD大鼠宫内感染/炎症动物模型,病理切片染色观察新生大鼠肺组织;ELISA试剂盒检测新生大鼠血清中IL-8、IL-6、IL-10含量;Westernblot法检测肺组织中TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白相对表达量。结果 齐墩果酸可降低宫内感染新生鼠肺损伤(P<0.05);孕鼠宫内感染造成仔鼠肺组织中炎症因子IL-6、IL-8和IL-10含量升高(P<0.05),齐墩果酸可降低宫内感染新生鼠炎症反应、改善免疫功能(P<0.05);Westernblot结果发现,齐墩果酸治可能是通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活发挥改善宫内感染新生鼠肺损伤的作用(P<0.05)。结论 齐墩果酸可改善宫内感染新生鼠肺损伤及免疫功能,其可能是通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活发挥作用。     

唾液支原体分别经NF-κB依赖性和非依赖性方式诱导HGEC产生IL-1β、IL-8和表达hBD-2

目的:研究唾液支原体感染牙龈上皮细胞(HEGC)后,人β防御素-2(hBD-2)的表达和IL-1β、IL-8的产生情况,以及这两者是否与NF-κB的激活有关。方法:HGEC经口腔支原体刺激后,RT-PCR检测hBD-2 mRNA表达,ELISA检测细胞因子的产生,Western blot分析NF-κB的激活情况。结果:HGEC经唾液支原体刺激3 h后能经NF-κB产生IL-8。同时唾液支原体也能以非NF-κB依赖性方式诱导hBD-2表达。IL-8的产生与hBD-2 mRNA的表达存在一定相关性。结论:hBD-2的非NF-κB依赖性表达可能与初始的炎症反应有关,IL-8的产生可能通过自分泌机制影响到上皮细胞表达hBD-2 mRNA的表达。     

研究短文伊贝沙坦对系膜增生肾炎大鼠肾核因子-κB及MMP-9的作用

核因子-κB(nuc lear factor-kappaB,NF-κB)是一种重要的核转录因子,参予细胞内信号传递,调控多种基因表达,许多肾脏疾病均伴有NF-κB转录活性异常。基质金属蛋白酶-9(m atrix m etalloprote inase-9,MMP-9)基因5′端启动子内有NF-κB的结合位点,许多细胞因子可通过这些结合位点来诱导MMP-9的表达。MMP-9的表达和活性与肾小球内的细胞增生呈正相关。血管紧张素II(angiotensinII,AngII)有调节血管张力、血流和促进细胞生长、增生以及致炎等作用,它可激活肾脏NF-κB表达,从而使NF-κB调控下的炎症因子表达上升。系膜增生性肾小…     

大蒜素对心肌纤维化的影响及对TLR4/NF-κB信号通路的作用

目的:研究大蒜素对AngⅡ诱导心肌成纤维细胞增殖和胶原蛋白分泌的作用,并探讨其对TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法:采用体外AngⅡ诱导心肌成纤维细胞增殖模型,用MTT法检测细胞增殖能力,采用ELISA法观察细胞Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的分泌,采用RT-PCR技术测定TLR4和NF-κB mRNA的表达,采用Western blot法检测TLR4和NF-κB蛋白的表达。结果:(1)大蒜素可以抑制AngⅡ诱导CF增殖,并且具有剂量依赖性(P0.01);(2)大蒜素可以抑制AngⅡ诱导CF分泌Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白,并且具有剂量依赖性(P0.01);(3)大蒜素可以抑制AngⅡ诱导CF表达TLR4和NF-κB mRNA;(4)大蒜素可以抑制AngⅡ诱导CF表达TLR4和NF-κB蛋白。结论:大蒜素可通过抑制心肌成纤维细胞增殖和减少胶原蛋白分泌而具有潜在的抗心肌纤维化作用,其作用可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。     

Toll样受体4信号转导研究进展

Toll样受体（Toll-like-receptors,TLRs）是一个主要分布于炎症细胞的识别病源分子的受体超家族,其中TLR4主要识别革兰阴性细菌细胞壁成分脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）。LPS与TLR4结合后活化髓样分化因子88 (myeloid differentiation factor 88, MyD88)依赖性和非依赖性两条信号途径;前者活化丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）和核因子-κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）信号通路,后者活化NF-κB和干扰素调节因子-3(IFN-regulated factor-3,IRF3)信号通路。通过这些信号途径TLR4诱导炎症细胞释放炎症因子介导炎症反应;同时TLR4通过活化树突状细胞促进抗原递呈,介导先天性免疫向获得性免疫的转化。此外,TLR4能诱导磷脂酰肌醇-3激酶-蛋白激酶B（PI3K-AKT）的信号转导,LPS介导的细胞存活和增殖与TLR4活化 PI3K-AKT途径有关。     

锌对THP-1细胞自噬、NF-κB通路活化及产生白细胞介素23的影响

目的从调节自噬、NF-κB和IL-23的角度研究锌对炎症的影响及机制。方法检测锌对静息及LPS刺激的THP-1的增殖及凋亡、自噬相关蛋白水平、NF-κB p65及其磷酸化水平以及IL-23表达的影响,并探讨各指标间的关联。结果锌可轻度促进THP-1细胞凋亡、抑制其增殖,效应与浓度有关;总体上增强THP-1自噬,但在LPS刺激时、高浓度锌抑制自噬。锌可提高NF-κB p65磷酸化;可增高IL-23、但高浓度时抑制IL-23。结论锌可活化THP-1的NF-κB通路、并以剂量依赖的方式调节自噬、增殖、凋亡及IL-23的产生且各指标密切关联。提示锌的作用机制复杂,对其临床适用症及剂量应认真控制。     

谷氨酰胺对DSS诱导的小鼠结肠炎的治疗作用及机制

目的:探讨谷氨酰胺(Gln)对DSS诱导的小鼠结肠炎的治疗作用及机制。方法:8周龄BALB/c小鼠随机分为3组:Control组:对照;Gln组:DSS诱导结肠炎(4%DSS,7 d)+Gln治疗(1.5 g/kg,4周);DSS组:DSS诱导结肠炎。4周后处死小鼠评估结肠炎症、疾病活动度、上皮细胞凋亡、肠黏膜炎症因子及NF-κb(p65)信号通路。结果:Gln显著降低了DSS模型小鼠的结肠炎症、疾病活动度及上皮细胞凋亡。Gln抑制了肠黏膜NF-κb(p65)信号通路。结论:Gln治疗可减轻肠道炎症,降低肠上皮细胞凋亡,这可能是通过抑制肠黏膜NF-κB(p65)信号通路。     

人凋亡相关半胱氨酸肽酶4基因在川崎病中的表达及与核转录因子-κB信号通路的相关性

目的 探讨人凋亡相关半胱氨酸肽酶4基因(Caspase4,Casp4)在川崎病中的表达及与核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路的相关性.方法 收集上海市第六人民医院东院儿科2012年1月至2015年1月的15例川崎病患者血液样本然后提取单核细胞,采用mRNA定量检测血液中单核细胞Casp4及NF-κB信号通路相关因子表达情况,同时用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和免疫蛋白印迹方法检测Casp4蛋白及NF-κB信号通路相关因子表达情况,并对结果进行生物统计学的分析.结果 mRNA定量、ELISA和及免疫蛋白印迹方法结果表明川崎病患儿血液CASP4基因表达与健康对照组相比显著升高,NF-κB信号通路相关因子表达也发生变化.数据分析证明川崎病患儿血液中NF-κB p65和Casp4基因mRNA表达情况存在线性关系.结论 婴幼儿在受到环境因素和遗传因素影响后,NF-κB信号通路激活,NF-κB被释放进入细胞核内,引起Casp4基因变化,CASP4基因在川崎病中的高表达及与NF-κB信号通路相关.