pH值对胶体金标记单克隆抗体性能的影响

目的探讨pH值对胶体金标记单克隆抗体(mAb)性能的影响。方法用K2CO3调整胶体金溶液的pH值,得到pH值在5.0~9.0范围内的胶体金溶液,并用抗肠道病毒71型(EV71)VP1 mAb进行标记,牛血清白蛋白(BSA)封闭。用紫外-可见光谱扫描监测该标记过程中胶体金的性能改变。采用Mey氏稳定化实验检测免疫金的稳定性并检测制得的成品胶体金试纸条的灵敏度。结果 EV71-VP1 mAb在胶体金溶液pH值为7.0~8.5范围内制备的免疫金较稳定,且制得试纸条灵敏度高。结论 pH值是影响胶体金稳定性、决定胶体金与mAb间作用力的重要因素,并证实了紫外-可见光谱扫描评价pH值对胶体金标记的效果,建立了用紫外-可见光谱选择最适标记pH的方法标准。     

不同神经示踪剂组合对大鼠脊髓运动神经元的逆行标记效率比较

目的:探讨神经示踪剂荧光金(FG)、真蓝(TB)和荧光红(FR)两两组合对脊髓运动神经元的标记效率差异,为再生神经重支配准确性研究奠定基础.方法;采用大鼠胫神经示踪模型,采取神经内注射与神经横断后近侧断端浸泡(20 min)2种方式,分别对FG、TB和FR的两两组合进行示踪试验.示踪术后5d,取脊髓腰膨大段冷冻纵切,共聚焦显微镜进行显微成像和计数.结果:FG联合TB示踪标记的运动神经元数量最多,其次为FG联合FR,而FR联合TB组标记细胞数最少,双标比例也最小.神经断端浸泡方式使用示踪剂时标记效率仅为神经内注射的2/3左右.结论:FG联合TB以及FG联合FR示踪对脊髓运动神经元的标记效果较好,且神经内注射使用示踪剂效果优于持续20 min的神经断端浸泡.     

逆行荧光物标记神经元技术及其应用

近年来,辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase)追踪神经联系法(HRP法)在国内已得到广泛应用。很明显,这个技术的应用对我国神经形态学研究的发展有所促进。几年前,Kuypers和他的共同工作者又报导了一种新的追踪神经通路的方法——逆行荧光物标记法     

不同浓度和pH值的壳聚糖对幽门螺杆菌抑菌作用的影响

壳聚糖是甲壳质脱乙酰衍生物 ,是一个来源丰富、无毒、可吸收降解的天然氨基葡聚糖 ,大量的研究已证实壳聚糖具有广谱的抗菌性能 ,此外它还有增强免疫、调节生理功能等功效。本文研究了在不同ｐＨ值条件下 ,不同浓度的壳聚糖对幽门螺杆菌 (Ｈｐ)的抑菌作用 ,为壳聚糖的临床应用提供实验资料。采用打孔法分别检测了浓度为1%、1.5 %、2 %、2 .5 %、3%、3.5 %、4%、5 %和ｐＨ值为 8.5、6 .5、5 .5的壳聚糖对Ｈｐ标准菌株 (Ｓｙｄｎｅｔｓｔｒａｉｎ 1,ＳＳ1)和 2株患者体内分离出的Ｈｐ菌株的抑菌作用 ,结果表明 :壳聚糖对 3种不同的Ｈｐ菌株均…     

不同pH值甲醛固定液对肾脏标本特殊染色的影响

<正>特殊染色是肾脏病理诊断不可缺少的依据,而特殊染色制片质量是否稳定直接影响到病理诊断的准确性、及时性。制片质量受多种因素影响,其中最关键的是肾脏组织光镜标本的固定,因此固定液的选择至关重要。本文将对配制的三种不同pH值的甲醛固定液用于肾脏组织光镜标本的固定情况进行比较,观察肾脏组织切片六胺银、Masson三色、高     

不同pH及封闭氨基端对甘氨酸拮抗内毒素作用的影响

目的和方法：用封闭群新西兰家兔５６只,分为７组,注射不同ｐＨ（４．０,６．０,７．４,１０．０）的甘氨酸和内毒素混合液,观察注射后体温变化,由此反映出不同ｐＨ对甘氨酸拮抗内毒素致热作用的影响。结果：甘氨酸的拮抗效果在碱性溶液中减弱、酸性溶液中增强,这种变化与ｐＨ对甘氨酸ＮＨ３＾＋端解离程度的影响是一致的。进一步用氯甲酸苄脂封闭甘氨酸的氨基端,通过鲎试验方法观察到,封闭氨基端后甘氨酸对内毒素的拮抗作     

不同pH值对几种常见暗色致病真菌生长的影响

目的观察不同pH值对几种暗色致病真菌生长的影响。方法将裴氏着色真菌、紧密着色真菌、疣状瓶霉、卡氏支孢霉、皮炎外瓶霉、甄氏外瓶霉、假阿利什菌、链格孢和申克氏孢子丝菌接种在pH值为1～14的沙氏培养基上,观察其生长情况。结果几种着色真菌在pH值为5、6、7的沙氏培养基上均生长良好;疣状瓶霉、皮炎外瓶霉适宜生长的pH值范围较广,在pH值为4～12的培养基上均生长良好;在pH值为1、2、14的培养基上以上6种真菌均不生长。假阿利什菌在pH4～14的培养基上可生长,链格孢、申克氏孢子丝菌在pH3～14的培养基上可生长。结论 pH值对几种着色真菌、外瓶霉、假阿利什菌、链格孢和申克氏孢子丝菌的生长均有不同程度的影响。皮炎外瓶霉、疣状瓶霉较裴氏着色真菌、卡氏支孢霉适宜生长的pH值范围广。     

异体神经移植后再生神经的荧光逆行标记

本文用ＷＩＳＴＡＲ大鼠作为实验模型，切除１ｃｍ坐骨神经，再用同系ＷＩＳＴＡＲ大鼠从骨神经行异体桥接，修复坐骨神经的缺损。用ＦＬＵＲＯ－ＧＯＬＤ（Ｆ．Ｇ）或ＦＡＳＴ ＢＬＵＥ（Ｆ．Ｂ）两种荧光标记物，进行示踪检验，证实ＷＩＳＴＡＲ鼠异体神经桥接能修复周围神经的缺损。     

异体神经移植后再生神经的荧光逆行标记

本文用WI ST AR大鼠作为实验模型,切除1cm坐骨神经,再用同系WI ST AR大鼠坐骨神经行异体桥接,修复坐骨神经的缺损。用FLURO—GO LD(F、G)或FAST、BLUE(F、B)两种荧光标记物,进行示踪检验,证实WISTAR鼠异体神经桥接能修复周围神经的缺损。     

不同多胺基化合物对化学标记非放射性核酸探针的影响

溴介导法进行非放射性核酸探针的标记原理是在碱性条件下,DNA探针分子中嘌呤碱基C-8位和嘧啶碱基C-5位被N-溴-丁二酰亚胺中的溴取代,溴化的核酸探针和多胺化合物反应,在探针链中导入伯胺基团,进一步与带活化基团的标记物反应得到标记的探针(Keller et al,Anal.Biochem.,1988,170:441)。用该法进行标记具有步骤简单及标记位点不涉及氢键结合部     

不同标记线制备方法对脊柱连接棒疲劳性能的影响

目的 研究不同标记线制备工艺对脊柱后路内固定系统连接棒疲劳性能和系统压缩疲劳性能的影响。 方法根据 YY/ T 0119. 4—2014 标准对脊柱连接棒进行 4 点弯曲疲劳测试。 在一定应力作用下,依据 YY/ T 0857—2011 对 激光标记线连接棒和双色彩氧标记线连接棒进行系统压缩疲劳试验。 结果 在 715 MPa 应力下,自制激光标记线连接棒和竞品厂家激光标记线连接棒疲劳寿命较无标记线连接棒分别下降了 95% 和 98% ;与未标记连接棒相比,激光标记连接棒疲劳强度由 742 MPa 下降至 342 MPa,降低了 54% 。 双色彩氧连接棒的疲劳寿命和疲劳强度与无标记线连接棒相当。 双色彩氧连接棒系统压缩疲劳强度较激光标记连接棒提高约 20% 。 结论 激光制备标记线显著降低了脊柱连接棒的疲劳性能和系统的压缩疲劳强度,改进的双色彩氧工艺制备标记线对连接棒的疲劳性能无影响,能有效降低临床断裂风险,为连接棒的性能改善和工艺开发提供参考。     

豚鼠脑桥被盖部位HRP逆行标记的传入联系

本研究应用HRP微电泳技术,将HRP注射至豚鼠脑桥的腹侧被盖和背侧被盖,追踪其逆行传入投射。将HRP注射至脑桥腹侧被盖后,中脑上丘腹侧的中脑水管周围灰质和网状结构交界处(MSR),具有较密集的标记神经元。此外,在下丘腹侧的楔状核(MLR)、三叉神经脊束核、延髓网状巨细胞核、前庭内和外侧核、蓝斑及其腹侧的网状结构部分以及脊髓颈膨大灰质,也观察到了标记细胞。将HRP注射至脑桥背侧被盖后,脑桥尾侧网状核和延髓巨细胞网状核的标记神经元较多,前庭内、外侧核和外侧楔束核也见到标记细胞,中脑部位仅在红核及其附近见到少量标记细胞。蓝斑及其腹侧的网状结构部分和脊髓灰质未见标记细胞。     

pH值对黑色素瘤细胞生长的影响

目的观察不同pH值的培养液对黑色素瘤细胞增殖的影响。方法体外培养黑色素瘤细胞,分为对照组和不同PH值组,采用MTT比色法观察黑色素瘤细胞增殖情况。结果与对照组相比,酸碱性环境对黑色素瘤细胞的增殖均有显著抑制作用。结论体外酸性和碱性环境均抑制黑色素瘤细胞的生长     

大鼠异体神经移植后再生神经的荧光逆行标记

用Ｗｉｓｔａｒ大鼠作为实验模型，切除１ｃｍ坐骨神经，再用同系Ｗｉｓｔａｒ大鼠坐骨神经行异体桥接，修复坐骨神经的缺损。用Ｆｌｕｏｒｏ－Ｇｏｌｄ或Ｆａｓｔ Ｂｌｕｅ两种荧光标记物，进行示踪检验，证实Ｗｉｓｔａｒ鼠异体神经桥接能修复周围神经的缺损。     

缓冲液pH值对免疫组化染色的影响

缓冲液ｐＨ值对免疫组化染色的影响贺占国，江泓，田玉旺，成继民本文对ＣＥＡ等１４种常用抗体，用不同ｐＨ值的缓冲液（１／１５ｍｏｌ·Ｌ－１ＰＢｓ）做免疫组化染色，并用真彩色医学图象分析仪进行染色强度测定，以探讨ＰＢＳ的ｐＨ值对免疫组化染色的影响，找出不同...     

研究神经元化学通路的逆行荧光标记和递质组织化学结合技术

一、引言神经解剖学是一门实验性很强的学科,它的发展几乎总是依赖于新技术的建立。近十多年来,由于许多灵敏的新技术的建立,使神经解剖学取得了划时代的进展。从1970年至今的13年间,先后至少出版了九本神经解剖学研究技术专著,这在神经解剖学的发展史上是少见的。新发展的技术大致可分为两类。一类主要用于追踪中枢和外周神经元的传出和传入联系,如放射自显影(包括2-去氧葡糖法),辣根过氧化物酶(HRP)和逆行荧光标记法等。另一类属于递质组织化学,包括单胺荧光组织化学、酶组织化学和免疫组织化学,主要用于鉴     

辣根过氧化物酶逆行标记鸡小脑向海马结构的直接投射

目的:观察鸡是否存在小脑向海马的直接投射.方法:将30%辣根过氧化物酶水溶液注射到鸡一侧端脑的海马结构,逆行追踪双侧端脑和小脑向海马结构的传入纤维联系.结果:在小脑,第Ⅰ～Ⅵ叶、Ⅹ叶和Ⅸ叶的前半叶皮质中的蒲氏细胞被标记.在端脑,双侧的外侧隔核、海马结构的旁海马内侧区(APHm)均有多量神经元被标记,初步表明禽类海马结构在端脑的传入联系类似于哺乳类.结论:鸡小脑蒲氏细胞存在向端脑海马结构的直接投射.     

用TMB法显示HRP逆行标记视网膜节细胞的实验技术

哺乳动物视网膜起源于中枢神经系统(CNS),因此视神经轴索切断(简称轴切Axotomy)成为研究CNS损伤及再生的良好模型。研究发现：超过90％的视网膜节细胞(RGCs)在视神经轴切后1月内死亡,因此损伤后没有足够数量的RGC8存活是阻止再生的最大障碍。目前RGC8定量分析研究多采用荧光物质逆行标记,但荧光物质标记需用荧光显微镜观察,而且荧光衰退很快,不利于阳性结果的观察保存,因而限制了其推广应用。本文用HRP在视神经断端逆行标记RGCs,