芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠肺部炎症和肺功能的影响

目的 观察芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)痰瘀阻肺证模型大鼠肺部炎症和肺功能的影响。方法 将80只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、脾氨肽组、芪白平肺胶囊组。采用强迫游泳、被动吸烟和低氧环境复合方法复制COPD模型。观察大鼠一般状态;检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）中细胞总数和炎症细胞比例;光学显微镜下观察肺组织形态变化;ELISA法检测大鼠血清白细胞介素（interleukin, IL）-1β、IL-6、IL-8及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平;检测各组大鼠第0.3秒用力呼气容积（forced expiratory volume in 0.3 seconds, FEV0.3）、用力肺活量（forced vital capacity,FVC）、FEV0.3占FVC比值（FEV0.3/FVC）。结果 与正常组比较,模型组大鼠一般情况较差,肺功能明显降低,肺组织可见大量炎症细胞浸润,肺泡间隔明显增厚,支气管壁可见明显黏液腺增生,管腔变窄;BALF中细胞总数、单核-巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞比例均明显升高（P<0.05）;血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平明显升高（P<0.05）。与模型组比较,芪白平肺胶囊组及脾氨肽组大鼠肺组织病理变化明显改善;BALF中细胞总数和单核-巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞比例及血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平明显降低（P<0.05）;FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC均明显升高（P＜0.05）。其中芪白平肺胶囊组上述指标的改善程度明显大于脾氨肽组。结论 芪白平肺胶囊可明显改善COPD痰瘀阻肺证大鼠肺部炎症,改善大鼠肺功能,其机制可能与下调血清相关炎症指标及肺部炎症细胞浸润有关。     

芪白平肺胶囊对慢阻肺痰瘀阻肺证模型大鼠肺功能的影响

目的：探讨芪白平肺胶囊（原名金泰胶囊）对痰瘀阻肺证慢阻肺模型大鼠肺功能的影响。方法：采用复合因素造模方法复制痰瘀阻肺证慢阻肺大鼠模型,造模的同时给予芪自平肺胶囊、川芎嗪、硝苯地平,观察大鼠一般状况,并测定第零点3秒用力呼气容量（FEV0．3）、用力肺活量（FVC）、呼气峰流速（PEF）等肺功能指标。结果：模型组FVC、FEV0．3、FEV0．3／FVC等指标较正常组明显下降（P〈0．01）;硝苯地平组各参数较模型组无改善,川芎嗪组FVC、FEV0．3、FEV0．3／FVC较模型组有明显改善（P〈0．01）;芪自平肺胶囊可明显提高FVC、FEV0．3、FEV0．3／FVC（P〈0．01）,且高剂量组与正常组无差异,但明显优于低剂量组,呈剂量依存性。结论：芪白平肺胶囊可有效阻止痰瘀阻肺证慢阻肺模型大鼠肺功能的下降。     

芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠血清CAM-2和VEGF的影响

目的 观察芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)痰瘀阻肺证大鼠血清钙调节蛋白-2(calmodulin-2,CAM-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响,探究其作用机制.方法 将280只SD大鼠随机分为正常组(60只)、模型组(60只)、芪白平肺胶囊预防组(芪预组,40只)、芪白平肺胶囊治疗组(芪治组,40只)、尼可地尔预防组(尼预组,40只)、尼可地尔治疗组(尼治组,40只).采用连续4周的强迫游泳、烟熏和低氧应激的复合方法复制COPD痰瘀阻肺证大鼠模型.正常组和模型组分别在实验第4周、第8周、第12周各处死20只大鼠,检测血清CAM-2和VEGF水平;芪预组和尼预组均在模型复制同时预防性给药4周,分别在实验第4周、第8周各处死20只大鼠,检测血清CAM-2和VEGF水平;芪治组和尼治组均在模型复制结束后连续给药4周,分别在实验第8周、第12周各处死20只大鼠,检测血清CAM-2和VEGF水平.结果 两因素方差分析结果显示,模型因素和时间因素对大鼠血清CAM-2和VEGF水平的主效应及其交互作用均具有统计学意义(P＜0.05).在实验第4周、第8周、第12周,模型组大鼠血清CAM-2水平均显著低于正常组(P＜0.05),血清VEGF水平均显著高于正常组(P＜0.05).与同时间模型组比较,尼预组和芪预组大鼠血清CAM-2水平显著升高(P＜0.05),而血清VEGF水平显著降低(P＜0.05).与同时间尼预组比较,芪预组CAM-2水平显著升高(P＜0.05),VEGF水平显著降低(P＜0.05).与同一时间模型组比较,芪治组和尼治组大鼠血清CAM-2水平显著升高(P＜0.05),VEGF水平显著降低(P＜0.05);在实验第12周,芪治组大鼠血清VEGF水平显著低于尼治组(P＜0.05).结论 芪白平肺胶囊和尼可地尔预防性给药和治疗性给药均可调节COPD痰瘀阻肺证大鼠血清CAM-2和VEGF的异常,芪白平肺胶囊的远期效应优于尼可地尔.     

芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病肺血管收缩大鼠肺功能及内皮素水平-1、缺氧诱导因子-1α的影响

目的研究芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病肺血管收缩大鼠肺功能及内皮素水平-1（ET-1）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的影响及其机制。方法将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、芪白平肺胶囊预防组、尼可地尔预防组、芪白平肺胶囊治疗组、尼可地尔治疗组,每组10只,采用复合因素造模方法建立慢性阻塞性肺疾病肺血管收缩大鼠模型,给予芪白平肺胶囊及西药尼可地尔灌胃,观察大鼠的一般情况,测定各组大鼠第0.3s用力呼气量（FEV 0.3）、用力肺活量（FVC）、第0.3 s用力呼气量与用力肺活量的比值（FEV 0.3/FVC）、呼气峰流速（PEF）以及用酶联免疫吸附法测定血清ET-1,Hif-1α含量。结果模型组较正常对照组血清ET-1、Hif-1α显著提高（P〈0.01）;肺功能FEV 0.3、FVC、FEV 0.3/FVC、PEF显著下降（P〈0.01）,各预防及治疗组与模型组均有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）,但芪白平肺胶囊预防组较模型组差异更显著（P〈0.01）,芪白平肺胶囊预防组与正常组无统计学意义（P〉0.05）,并且明显优于芪白平肺治疗组。结论芪白平肺胶囊早期预防可改善慢性阻塞性肺疾病肺血管收缩大鼠肺功能,降低ET-1、Hif-1α含量从而达到治疗慢性阻塞性肺疾病肺血管收缩的作用。     

芪白平肺胶囊对COPD合并抑郁大鼠海马组织5-HT1AR、DA-1、DA-5表达的影响

【目的】观察芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并抑郁大鼠海马组织中的单胺类神经递质5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)及多巴胺(DA)亚型受体DA-1、DA-5表达的影响,探讨芪白平肺胶囊的干预机制。【方法】将90只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、COPD合并抑郁组、芪白平肺胶囊组、文拉法辛组、芪白平肺胶囊+文拉法辛组。采用烟熏、断食、断水、游泳、水平摇晃、夹尾巴等方法,复制COPD合并抑郁大鼠模型。观察芪白平肺胶囊对COPD合并抑郁大鼠肺功能和一般表征的影响;采用实时定量逆转录—聚合酶链反应(RT-q PCR)测定大脑海马区5-HT1AR mRNA的转录水平,Western blot法检测海马区DA-1、DA-5受体蛋白表达。【结果】COPD合并抑郁组大鼠第0.3秒用力呼气容量(FEV0.3)、用力肺活量(FVC)和FEV0.3/FVC等肺功能参数值较正常组显著下降(P0.01),芪白平肺胶囊组、芪白平肺胶囊+文拉法辛组和文拉法辛组的肺功能参数值较COPD合并抑郁组均有不同程度的上升(P0.01)。与正常组比较,COPD合并抑郁组大鼠大脑海马区5-HT1AR mRNA及DA-1、DA-5蛋白表达水平显著降低(P0.05)。芪白平肺胶囊组、文拉法辛组和芪白平肺胶囊+文拉法辛组也存在大脑海马区5-HT1AR mRNA转录水平及DA-1、DA-5蛋白表达的降低,但程度较轻。与COPD合并抑郁组比较,芪白平肺胶囊组、文拉法辛组和芪白平肺胶囊+文拉法辛组的5-HT1AR mRNA转录水平和DA-1、DA-5受体蛋白表达量显著增加(均P0.05)。【结论】芪白平肺胶囊可提高COPD合并抑郁大鼠大脑神经递质5-HT1AR mRNA转录水平和DA-1、DA-5蛋白的含量。     

芪白平肺胶囊通过抑制PI3K/Akt通路促进低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡

目的 从细胞水平探讨芪白平肺胶囊通过磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3- kinasePI3K/蛋白激酶B（protein kinas B, Akt）通路对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs）凋亡的影响。方法 采用组织贴块法分离培养大鼠PASMCs,制备含药血清作用于低氧诱导的大鼠PASMCs,将细胞分为常氧组、低氧组、低氧＋芪白平肺胶囊含药血清组、低氧＋芪白平肺胶囊含药血清组＋LY294002组。采用细胞计数试剂盒检测芪白平肺胶囊含药血清对低氧诱导的大鼠PASMCs活性的影响;蛋白免疫印迹法检测芪白平肺胶囊含药血清单独及加入LY294002对Akt、磷酸化Akt(phosphorylated- Akt,p- Akt）、B淋巴细胞瘤2（B cell lymphoma/leukemia- 2,Bcl- 2）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶- 3（cysteine containing aspartate protein hydrolase- 3,Caspase- 3）蛋白表达水平的影响;Hoechst 33258染色观察芪白平肺胶囊含药血清对低氧诱导的大鼠PASMCs凋亡的影响。结果 20%芪白平肺胶囊含药血清能明显降低低氧诱导的大鼠PASMCs的活力（P＜0.05）,并显著上调Caspase- 3蛋白的表达水平（P＜0.05）,下调Bcl- 2、p- Akt蛋白的表达水平（P＜0.05）。加入LY294002后p- Akt蛋白的表达水平下降,且Bcl- 2表达水平下降,Caspase- 3蛋白表达水平上调（P＜0.05）。结论 芪白平肺胶囊可能通过抑制PI3K/Akt信号通路促进低氧诱导的大鼠PASMCs凋亡,减缓低氧性肺动脉高压的进程。     

芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证患者中医证候积分的影响

目的 探讨芪白平肺胶囊(原名金泰胶囊)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)的疗效.方法 将55例COPD患者随机分为治疗组(28例)与对照组(27例),在常规治疗基础上,治疗组与对照组分别加用芪白平肺胶囊与安慰剂,观察两组患者中医证候积分的变化.结果 对照组与治疗组治疗后中医证候积分均较治疗前有明显改善,(p<0.01);但治疗组较对照组改善更明显,(p<0.01).结论 芪白平肺胶囊能显著降低COPD患者的中医证候积分,对COPD患者有较好的疗效.     

金泰胶囊对慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠平均肺动脉压力的影响

目的：探讨金泰胶囊防治慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证的机制。方法：采用复合因素复制慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠模型,模型复制同时给予金泰胶囊、川芎嗪和硝苯地平进行预防,观察各药对大鼠平均肺动脉压力（mean pulmonary arterial pressure,mPAP）的影响。结果：与正常对照组比较,模型组大鼠mPAP显著升高（P〈0．01）;与模型组比较,川芎嗪组,金泰胶囊高、低剂量组大鼠mPAP显著降低（P〈0．05）;金泰胶囊高剂量组大鼠mPAP显著低于硝苯地平组、川芎嗪组和金泰胶囊低剂量组（P〈0．05）。结论：高剂量金泰胶囊防治慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证的机制可能与其降低mPAP有关。     

慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠模型的建立

[目的]采用病证结合的造模方法建立慢性阻塞性肺疾病(以下简称慢阻肺)痰瘀阻肺证大鼠模型。[方法]利用强迫游泳、烟熏、低氧环境耗伤肺气,使其肺气虚,引起痰饮瘀血内停,建立慢阻肺痰瘀阻肺证大鼠模型。4周后测大鼠肺功能、肺动脉压、血流变及心肺病理学观察。[结果]模型大鼠的症状、肺功能、肺动脉压、血流变及心肺病理学观察符合慢阻肺痰瘀阻肺证的表现。[结论]实验采用复合因素造模方法复制的慢阻肺痰瘀阻肺证模型符合中医学和现代医学原理,具有时间短、易复制、可操作性强的特点,亦符合临床的实际情况。     

Rock-1基因在缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及法舒地尔的预防作用

目的：观察小G蛋白Rho相关激酶（Rock-1）基因在大鼠缺氧性肺动脉高压（HPH）肺组织中的表达规律,探讨法舒地尔（fasudil）对HPH的预防作用。方法：72只SD大鼠随机分为缺氧模型组（H组）和缺氧＋fasudil预防组（fasudil组）,对照组（C组）。采用常压间断缺氧法复制大鼠HPH模型,右心导管测平均肺动脉压力（mPAP）,计算右心室（RV）／[左心室＋室间隔（LV＋S）]的重量比值作为右心肥厚指数,并用RT-PCR方法测定肺组织R0ck．1及平滑肌肌动蛋白（α-SMA）mRNA表达水平。结果：mPAP在缺氧7天后明显增高（P〈0．01）,并随缺氧时间的延长,进一步升高。右心肥厚指数在H组第7天开始升高。第14天与C组比较差异有显著性（P〈0．01）。与H组比较．fasudil组mPAP及右心肥厚指数均明显降低（P〈0．01）。Rock．1基因在HPH发生早期即明显上调．第7天达高峰后维持于较高水平。α-SMA基因表达第7天明显上调。第14天达高峰,至模型后期仍高于基础表达;Rock-1基因表达较α-SMA提前达到高峰,二者呈显著正相关（r=0．883,P〈0．05）;fasudil组两基因表达水平均较H组明显降低（P〈0．01）。结论：Rock-1基因在HPH大鼠肺组织中出现了明显表达异常,法舒地尔能显著降低mPAP,改善右心室肥厚．并可能通过抑制肺组织Rock-1基因表达发挥作用。     

Rho/ROCK信号转导通路在哮喘大鼠气道重塑中的作用及干预

目的 观察法舒地尔对慢性哮喘大鼠镜下气道重塑改变及肺组织RhoA和ROCKⅠ表达的影响,探讨Rho/ROCK信号转导通路在哮喘气道重塑中的作用。方法 雄性SD大鼠分为3组,建立慢性哮喘大鼠型,统计支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞计数,观察肺组织病理及超微结构的变化,测定肺内支气管壁厚度（WTt）和支气管平滑肌厚度（WTm）,免疫组化法和real-timePCR法分别检测肺组织中RhoA及ROCKⅠ表达情况。结果（1）哮喘组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞占细胞总数百分比均明显高于正常对照组（均P＜0.01）;法舒地尔干预后明显抑制炎症细胞浸润,该组BALF中细胞总数较哮喘组不同程度降低（P＜0.01）。（2）哮喘组肺组织镜下可见明显炎症性和结构性病理变化,法舒地尔组肺组织炎症反应及重塑改变较哮喘组改善。（3）哮喘组WTt和WTm较正常对照组明显增加（均P＜0.01）,法舒地尔组WTt和WTm较哮喘组明显降低（均P＜0.01）。（4）哮喘组大鼠肺组织RhoA和ROCKⅠ蛋白和mRNA的表达水平明显高于正常对照组（均P＜0.01）,法舒地尔组明显低于哮喘组（均P＜0.01）。（5）WTt、WTm均与大鼠肺组织中ROCKⅠ蛋白水平呈明显正相关（r=0.743、0.974,均P＜0.01）。结论哮喘大鼠RhoA和ROCKⅠ表达增高,法舒地尔可能通过影响RhoA和ROCKⅠ的表达,减轻气道炎症及改善气道重塑,表明Rho/ROCK信号转导通路参与哮喘气道重塑的形成。     

脉搏波传导速度和ROCK活性在冠心病诊断中的临床价值

目的：探讨臂踝脉搏波传导速度（baPWV）、Rho相关的卷曲蛋白激酶（ROCK）活性同冠心病的关系。方法根据冠脉造影结果将168例入选人群分为冠心病组（123例）和非冠心病组（45例）,测定 baPWV、ROCK活性。其中冠心病组根据主要血管病变支数不同,分为单支、双支和多支病变组。结果冠心病组的 baPWV、ROCK活性高于非冠心病组（P＜0．05）,冠脉病变支数越多,baPWV值越高（P＜0．05）。结论 baPWV、ROCK活性与冠心病相关。二者联合可用于预测及评估冠心病及其危险程度。     

Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶1的表达与老年慢性阻塞性肺疾病并发肺动脉高压患者肺动脉压的相关性

目的探讨Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)的表达与老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)并发肺动脉高压(PHT)患者肺动脉压(PAP)的相关性。方法 78例COPD患者依据患者是否并发PHT分为观察组(COPD并发PHT组)38例和对照组(单纯COPD组)40例,比较2组患者PAP、ROCK1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)水平,并对ROCK1水平与COPD并发PHT患者PAP的相关性进行分析。结果观察组患者PAP、单核细胞ROCK1及血清ROCK1、TNF-α、CRP水平显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。COPD并发PHT患者的血清和单核细胞ROCK1水平与PAP呈正相关(P<0.001)。结论血清和单核细胞内ROCK1表达升高可能与COPD患者出现PHT有关,ROCK1可以作为干预COPD向PHT进展的新靶点。     

ROCKⅡ与子痫前期发病的关系

为了解ROCKⅡ与子痫前期发病的关系,查阅国内外文献并对文献进行整理,发现ROCKⅡ在子痫前期发病过程中起一定作用,现就Rho/ROCK信号传导通路与妊娠的关系做一综述。     

CRISPR/Cas9系统构建ROCK2基因敲除肺癌细胞系

目的 利用CRISPR/Cas9编辑系统对人肺癌细胞系A549、H460细胞中Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2(ROCK2)基因进行稳定敲除,并对其敲除效果进行验证。初步探讨ROCK2基因敲除肺癌细胞株的细胞水平上的功能改变。方法 利用Rock-2 CRISPR 质粒和Rock-2 HDR 质粒转染构建A549、H460 ROCK2基因敲除稳定细胞株。蛋白质印迹法验证敲除效果、用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ROCK2基因的mRNA表达水平。平板克隆形成实验、MTT法检测各细胞株的增殖能力。结果 A549、H460肺癌细胞中ROCK2基因稳定敲除株构建成功。与原始细胞株相比,ROCK2敲除株细胞中的蛋白表达水平完全缺失,细胞内的mRNA表达水平显著下降,而且能降低A549、H460肺癌细胞的增殖能力。结论 利用CRISPR/Cas9基因编辑系统获得ROCK2基因敲除的肺癌细胞系,为进一步研究ROCK2对肺癌生长的影响奠定基础。     

Rho/ROCK2通路在阿尔茨海默病病理进程中的重要作用

Rho/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（ROCK）通路是生物体中广泛存在的经典信号通路,参与多种生理调节过程。ROCK有2种亚型,即ROCK1和ROCK2。在阿尔茨海默病（AD）患者脑中,Rho/ROCK2表现为活性上调,并伴有Aβ42水平升高,以及神经细胞突起的形态与功能异常,推测AD的发生、发展与Rho或ROCK2的高表达或过度激活有关。目前Rho/ROCK2通路被认为是预防和治疗AD的一个有效的靶通路,而Rho或ROCK2,也成为药物研发的重要靶点。研究发现,降低Rho或ROCK2的表达,或者抑制Rho或ROCK2的活性均可减少Aβ42诱导的神经毒性,保护神经元,减缓AD的发展。因此,Rho/ROCK2的特异性抑制对中枢神经损伤修复及AD的治疗有重要的意义。为此,本文针对Rho/ROCK2通路在阿尔茨海默病发展中的作用做一综述。     

抗血小板溶栓素对缺糖缺氧再灌注损伤大鼠原代皮质神经细胞保护作用

目的 探讨抗血小板溶栓素(APT)对原培养大鼠皮质神经细胞缺糖缺氧损伤的保护作用及其机制。方法 大鼠原代皮质神经细胞培养6 d后,经APT 80μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、Toll样受体4(TLR4)阻断剂HTA12510μg/mL预处理24 h,皮质神经细胞缺糖缺氧3 h,恢复正常培养24 h,建立缺糖缺氧再灌注损伤模型。实验分为正常组,模型组,APT低、中、高组,HTA组。倒置显微镜下观察细胞形态,免疫组化染色鉴定神经元。MTT法检测细胞存活率。比色法检测细胞培养液中丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性。G-LISA法检测细胞中Rho蛋白A(RhoA)活性,Western-bloting检测细胞中TLR4、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)蛋白表达水平。结果 细胞培养6 d后,免疫组化鉴定显示神经细胞纯度达90%以上;与模型组比较,APT低、中、高剂量能明显增加神经细胞存活率;中、高剂量能明显降低培养液中MDA含量和LDH活性,降低细胞中RhoA活性,抑制细胞中TLR4,ROCK1/2蛋白表达。结论 APT对大鼠原代皮质神经细胞缺糖缺氧再灌注损伤有较好的保护作用,其机制与抑制TLR4、RhoA、ROCK信号通路有关。     

Skp2在前列腺癌中的研究进展

Skp2是F-box蛋白家族成员之一,参与多种细胞周期调节蛋白的泛素依赖性蛋白水解过程,从而调控细胞周期,并在多种肿瘤细胞中过表达。Skp2在前列腺癌的发生与发展、分级、分期、术后复发中起着重要的作用。探讨前列腺癌患者中Skp2的不同表达与疾病发生、进展及预后的关系,可进一步明确恶性肿瘤的发生机制,并可以作为抗肿瘤治疗的新靶点。     

死亡相关蛋白激酶与肿瘤的诊断及治疗

死亡相关蛋白激酶(DAPK)是一种凋亡的正性调节因子,可促进肿瘤细胞的分化并抑制肿瘤的转移,被认为是肿瘤的抑制剂。DAPK基因启动子超甲基化或蛋白表达异常在多种肿瘤中均可观察到,并与分级分期及预后呈一定相关,表明其在肿瘤的发生及进展中发挥一定作用,在肿瘤的早期诊断、评价预后及基因靶向治疗等方面有重要意义。现就DAPK与肿瘤的诊断与治疗的研究进展予以一综述。     

Skp2基因沉默对 SPC-A-1肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨 S 期激酶相关蛋白2（Skp2）基因沉默对肺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将 Skp2 RNA 干扰表达载体转染至 SPC-A-1肺癌细胞中,G418筛选获得阳性克隆细胞。通过实时荧光定量（RT-PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺癌细胞中 Skp2的表达。采用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐（M TT ）法检测各组肺癌细胞生长、凋亡情况。结果转染 Skp2 shRNA 表达载体的肺癌细胞中 Skp2蛋白表达量明显减少,抑制效率分别可达75．3±5．1,70．4±3．2;转染 Skp2 shRNA 表达载体的肺癌细胞生长减慢,阻滞于 G1期的增多,S 期细胞减少。 Skp2 shRNA 转染质粒组凋亡率较阴性对照组明显增加,细胞凋亡率分别为（17．5±2．8）％、（15．6±3．1）％。结论通过特异性沉默 Skp2基因的表达,可有效降低肺癌细胞中 Skp2蛋白表达水平,抑制肺癌细胞生长及增加细胞凋亡。