基质金属蛋白酶在类似人类2型糖尿病大鼠肾病中的研究

目的 动态研究基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和其体内特异的抑制物－金属蛋白酶组织抑制剂－2（TIMP－2）在类似人类2型糖尿病大鼠肾组织的改变。方法 利用免疫组织化学观察Ⅳ型胶原在肾小球的表达,酶谱法测定肾皮质MMP－2的活性,蛋白印迹法检测肾皮质TIMP－2的含量,Northern Blot观察肾皮质MMP－2和TIMP－2的基因表达。结果 类似人类2型糖尿病大鼠肾小球Ⅳ型胶原成分表达增强,肾皮质MMP－2基因表达减弱（P＜0．01）;其活性进行性减少（P＜0．0001）,而TIMP－2基因表达（P＜0．01）及其含量逐渐增加（P＜0．01）。结论 类似人类2型糖尿病大鼠肾组织MMP－2活性进行性降低、TIMP－2含量增加,两者比例失衡为肾小球ECM成份沉积的重要原因之一,基质降解减弱也参与了2型糖尿病大鼠肾脏病变的发生和发展。     

Biosynthesis of the enediyne antitumor antibiotic C-1027 involves a new branching point in chorismate metabolism

C-1027 is an enediyne antitumor antibiotic composed of four distinct moieties: an enediyne core, a deoxy aminosugar, a beta-amino acid, and a benzoxazolinate moiety. We now show that the benzoxazolinate moiety is derived from chorismate by the sequential action of two enzymes-SgcD, a 2-amino-2-deoxyisochorismate (ADIC) synthase and SgcG, an iron-sulfur, FMN-dependent ADIC dehydrogenase-to generate 3-enolpyruvoylanthranilate (OPA), a new intermediate in chorismate metabolism. The functional elucidation and catalytic properties of each enzyme are described, including spectroscopic characterization of the products and the development of a fluorescence-based assay for kinetic analysis. SgcD joins isochorismate (IC) synthase and 4-amino-4-deoxychorismate (ADC) synthase as anthranilate synthase component I (ASI) homologues that are devoid of pyruvate lyase activity inherent in ASI; yet, in contrast to IC and ADC synthase, SgcD has retained the ability to aminate chorismate identically to that observed for ASI. The net conversion of chorismate to OPA by the tandem action of SgcD and SgcG unambiguously establishes a new branching point in chorismate metabolism.     

不同浓度脂联素对心肌细胞氧化应激损伤后GRP78及Caspase-12表达的影响及意义

目的 通过原代培养SD大鼠的乳鼠心肌细胞建立H_2O_2心肌细胞氧化应激损伤模型,观察脂联素对心肌细胞氧化应激所致内质网应激的保护作用.方法 采用酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长状态,通过α-肌动蛋白免疫荧光法对培养的心肌细胞进行鉴定.选用原代培养3～4天的心肌细胞,随机分为对照组、H_2O_2组、H_2O_2+10 mg/L脂联素组、H_2O_2+20 mg/L脂联素组和H_2O_2+30 mg/L脂联素组.实验终止后,在倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态的变化,采用化学比色法测定乳酸脱氢酶的释放,通过流式细胞术来检测心肌细胞的凋亡,用RT-PCR与western Blotting方法检测内质网应激指标GRP78和Caspase-12的表达.结果 与对照组相比,给予H_2O_2后,细胞凋亡率显著增加(70.7%±6.4%比1.0%±0.6%,P<0.05),LDH释放增加(1411.5 ±189.7 U/L比353.3 ±50.3 U/L,P<0.05),内质网伴侣蛋白GRP78以及Caspage-12在mRNA(分别为1.25±0.50比0.18 ±0.10和1.32±0.15比0.26±0.06)及蛋白水平(分别为0.92±0.50比0.37±0.10和1.24 ±0.50比0.51±0.01)表达增加(P<0.05),30 mg/L脂联素预处理后给予H_2O_2,可较大程度地逆转上述指标变化,细胞凋亡率显著下降(43.6%±3.8%),LDH释放减少(686.7±61.1 U/L),内质网伴侣蛋白GRP78以及Cagpase-12在mRNA(分别为0.56±0.03和0.83±0.04)及蛋白水平(分别为0.66±0.03和0.64±0.03)表达减少(P<0.05).结论 氧化应激使GRP78和Caspase-12表达增强,启动内质网应激,脂联素可以通过减轻内质网应激逆转H_2O_2所致的心肌细胞损伤及凋亡作用,对心肌细胞有保护作用.     

AMP激活蛋白激酶与家族性预激综合征发病及其机制的研究进展

AMP激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)是一个由具有催化功能的α亚基和2个具有调节功能的β和γ亚基组成的异质三聚体,因其在机体组织器官维持能量平衡的调节过程中发挥关键作用,所以又被称为"细胞能量调节器"[1].近年来,随着对AMPK研究的深入,发现AMPK在家族性预激综合征的病因及发病机制中占有非常重要的地位,现对其研究进展做一综述.     

日本血吸虫感染小鼠肝脏IL-2、TNF-α的表达及注射该因子后对肝纤维化的影响

目的 探讨小鼠感染日本血吸虫后不同时期肝脏白细胞介素2(IL-2)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达水平及注射该因子后对肝纤维化的干预。方法 小鼠感染血吸虫尾蚴后分3组,每组16只,其中2组于感染6wk后分别隔日注射(ip)IL-2和TNF-α连续4wk,另设未感染正常鼠为对照组,采用ABC免疫组织化学技术,利用多媒体病理图文定量分析,动态观察相关因子活性。结果 感染未处理组小鼠肝脏中IL-2和TNF-α含量随感染时间(8、11、14、18wk)延长而缓慢下降,而感染6wk后经腹腔注射IL-2或TNF-α组小鼠则随着相应因子的补充而显著上升,末次注射后1～8wk,肝内IL-2或TNF-α水平明显高于感染组和正常对照组(P<0.01),肝组织肉芽肿炎症反应及纤维化程度较对照组减轻。结论 小鼠6wk后(成虫排卵后)给予外源性IL-2或TNF-α注射,能诱导相应细胞因子表达增强,并有减轻肝脏炎症和肝纤维化的表现。     

NDRG2参与调控大鼠肝再生的机制

目的 阐明NDRG2(N-Myc downstream-regulated gene 2)在大鼠肝再生过程中的作用.方法 大鼠70%肝切及除后收集0 h、8 h、24 h、48 h、72 h、7 d、10 d的再生肝组织,采用Real-time PCR和Western blot方法检测大鼠肝再生过程中NDRG2及C-Myc基因和蛋白的动态变化.流式细胞仪检测腺病毒介导的高表达NDRG2对大鼠正常肝细胞系(BRL 3A)细胞周期和凋亡的影响.结果 NDRG2基因和蛋白的表达水平在肝再生达到高峰时明显下降,在肝细胞进入分化期时显著上调,其变化与C-Myc呈负相关;周期检测显示BRL 3A细胞中高表达NDRG2 48 h后,G0/G1期细胞百分比从AdLacZ组的42.80±2.17上升至59.80±3.12,S期从35.91±1.15下降至12.09±2.21;凋亡检测显示NDRG2作用使细胞凋亡率较AdLacZ组升高5.9倍,差异有统计学意义(P<0.05).结论 NDRG2通过影响细胞周期和凋亡参与调控大鼠肝再生过程.     

气体信号分子H2S在肝硬化门脉高压形成中的作用

H2S、NO及CO共同构成了机体新的气体信号分子系统,他们在体内发挥重要的生物学效应,形成独立又相互作用的体系.本文综述了气体信号分子H2S在肝硬化门脉高压发生机制中的作用及对肝脏微循环与血液动力学的影响,为肝硬化门脉高压的防治提供新的理论与策略.     

兴奋毒作用下皮层神经细胞Ca^2＋变化机制

目的：检测谷氨酸兴奋毒损伤时,有胞外有Ca^2 或无Ca^2 ,,或有尼莫地平和Ca^2 条件下,神经细胞内[(Ca^2 )]i的变化,方法：用Fura-2/AM体外检测新生大鼠皮层神经细胞内游离钙离子浓度的方法。结果：发现谷氨酸兴奋毒可使皮层神经细胞[Ca^2 ]i上升并有剂量依赖性,胞外无Ca^2 或加入尼莫地平时神经细胞[Ca^2 ]i虽也上升,但幅度降低。三种条件下神经细胞在兴奋毒作用下[Ca^2=]i变化各不相同。结论：表明谷氨酸活化神经细胞膜上受体,使胞内钙库动员和细胞膜Ca^2 通道开放,导致[Ca^2_]i在短时间内总体表现为持续上升,存在兴奋毒损伤过程中有膦脂酶A2活化过度参与的信使基础。     

C-erbB-2在非小细胞肺癌中表达的研究

目的探讨c-erbB-2蛋白在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SABC法检测65例原发性NSCLC和20例正常肺组织中c-erbB-2蛋白的表达水平。结果20例正常肺组织仅2例阳性表达，阳性率为10．0％。NSCLC组阳性表达率为63．1％，两组比较差异有显著性（P〈0．05）。其中鳞癌和腺癌的阳性表达率分别为62．5％和63．6％，无显著差异（P〉0．05）。在NSCLC中，c-erbB-2在病理分级Ⅰ＋Ⅱ级和Ⅲ级的阳性率分别为57．6％和68．8％；在TNM分期Ⅰ＋Ⅱ期和Ⅲ＋Ⅳ期的阳性表达率分别为60．0％和66．7％，以上两组间比较差异均无显著性（P〉0．05）。有无淋巴结转移组的阳性表达率分别为73．7％和48．1％，两组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论c-erbB-2阳性表达与NSCLC的发生，淋巴结转移呈显著正相关，高表达者提示可能伴有淋巴结转移，临床已进入晚期。     

Alcohol Dehydrogenase-2*2 Allele is Associated With Decreased Prevalence of Fetal Alcohol Syndrome in the Mixed-Ancestry Population of the Western Cape Province, South Africa

BACKGROUND: Fetal alcohol syndrome (FAS) is particularly common among the mixed-ancestry population of the Western Cape Province of South Africa and occurs at a frequency of 0.0392-0.0429 (39.2-42.9 of 1000) among 5- to 9-year-old school entrants. While FAS is clearly caused by an environmental insult, studies in twins and mice support a significant genetic contribution to risk for FAS. It is likely that the development of FAS following excessive alcohol exposure is influenced by genetic factors in both the mother and the child. Known polymorphisms of the alcohol dehydrogenase-2 (ADH2) gene resulting in isozymes with different alcohol oxidizing capacities were investigated as possible candidates for influencing the risk for FAS. METHODS: Genotyping was undertaken for the ADH2 locus in 56 FAS-affected children, their 56 mothers, and 178 control individuals of mixed ancestry from the same geographic region. The ADH2 alleles were analyzed for the three groups and the allele frequencies of the mother and FAS-affected children were independently compared with the control group. RESULTS: The ADH2*2 allele was found to be significantly more common in the control group than in the mothers of FAS-affected children (p = 0.025 +/- 0.004) and in the FAS subjects (p = 0.025 +/- 0.004). The ADH2*3 allele frequency was low and was not significantly different between the groups. CONCLUSION: The ADH2*2 allele is significantly more common in control individuals, suggesting that it may either confer protection or be a marker for a protective effect against FAS among individuals of mixed ancestry in the Western Cape Province of South Africa.     

H_2O_2体外抗棘阿米巴作用研究

目的检测H_2O_2的抗棘阿米巴(Acanthamoebaspp.)作用。方法自角膜炎患者角膜刮片分离获得棘阿米巴复合体(AcanthamoebaLugdunensis-Acanthamoebaquina)。于培养基(PYG)培养传代。实验前将棘阿米巴用新鲜的PYG培养1d使其活化,配成2.5×10~6/ml细胞悬液加入细胞培养板,实验组各孔分别加入不同浓度H_2O_2,对照组加等量PYG,28℃24h后实验组更换新鲜PYG继续培养3d。取细胞悬液滴片,瑞氏染色,观察细胞形态变化。用定量培养法作棘阿米巴生长曲线,观察其增殖速率。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,观察H_2O_2对棘阿米巴成活率的影响。用乳酸脱氢酶(LDH)测定法测定H_2O_2对棘阿米巴的损伤。结果棘阿米巴滋养体在0.125％H_2O_2作用下,不可逆转地成为包囊,20～120h增殖率为0;1％H_2O_2可使其破裂。结论H_2O_2具有较强的抗棘阿米巴作用,有可能成为预防棘阿米巴角膜炎的理想药物。     

STAMP2基因多态性与新疆维吾尔族男性原发性高血压相关性研究

目的:研究STAMP2基因多态性与新疆维吾尔族男性原发性高血压(EH)相关性.方法:采用以流行病学调查为基础的病例-对照研究,选取291例维吾尔族男性EH患者和445例男性正常血压者作为研究对象,首先选取STAMP2基因功能区的变异位点,选取代表性变异位点应用TaqMan-PCR在大样本人群中进行基因型鉴定及病例-对照...     

SFRP2和β-catenin在大肠癌中的表达及其临床意义

目的:探讨分泌型Frizzled相关蛋白2(Secreted Frizzled-related proteins 2,SFRP2)和β-连接素(β-catenin)在大肠癌发生、发展中的作用.方法:采用免疫组化SP法检测20例正常大肠黏膜、加例非腺瘤性息肉、36例大肠腺瘤和42例大肠癌组织中的SFRP2和β-catenin蛋白的表达情况,分析二者表达的差异及其与临床病理参数的关系.结果:大肠癌和大肠腺瘤组SFRP2的阳性表达率显著低于正常大肠黏膜和非腺瘤性息肉组(28.57% VS 100.0%,95.0%;36.11% VS 100.0%,95.0%,均P＜0.05);大肠癌中β-catenin膜表达缺失率显著高于正常大肠黏膜、非腺瘤性息肉及大肠腺瘤组(52.4% VS 0%,0%,11.1%,均P＜0.05);大肠癌和大肠腺瘤组β-catenin异位表达率显著高于正常大肠黏膜和非腺瘤性息肉组(64.3% VS 0%,0%;30.6% VS 0%,0%,均P＜0.05),大肠癌β-catenin异位表达率高于大肠腺瘤(P＜0.05);SFRP2表达、β-catenin膜表达缺失及异位表达与大肠癌患者的肿瘤部位、大体形态、肿瘤直径、淋巴转移和Dukes分期无明显关系,而与大肠癌的分化程度密切相关,其中SFRP2表达还与大肠癌的浸润深度密切相关:SFRP2表达与β-catenin膜表达缺失、异位表达均呈明显负相关(r=-0.452,P=0.003;r=-0.519,P=0.000),而β-catenin膜表达缺失与异位表达呈明显正相关(r=0.782,P=0.000).结论:SFRP2和β-catenin的表达与大肠癌的发生、发展密切相关,可能是大肠癌发生的早期事件,且SFRP2表达与β-catenin膜表达缺失、异位表达均呈负相关,前者起抑癌作用,后者起促癌作用.     

Implications of the Immune Polymorphisms of the Host and the Genetic Variability of SARS-CoV-2 in the Development of COVID-19

The severe acute respiratory syndrome coronavirus-2 (SARS-CoV-2) is responsible for the current pandemic affecting almost all countries in the world. SARS-CoV-2 is the agent responsible for coronavirus disease 19 (COVID-19), which has claimed millions of lives around the world. In most patients, SARS-CoV-2 infection does not cause clinical signs. However, some infected people develop symptoms, which include loss of smell or taste, fever, dry cough, headache, severe pneumonia, as well as coagulation disorders. The aim of this work is to report genetic factors of SARS-CoV-2 and host-associated to severe COVID-19, placing special emphasis on the viral entry and molecules of the immune system involved with viral infection. Besides this, we analyze SARS-CoV-2 variants and their structural characteristics related to the binding to polymorphic angiotensin-converting enzyme type 2 (ACE2). Additionally, we also review other polymorphisms as well as some epigenetic factors involved in the immunopathogenesis of COVID-19. These factors and viral variability could explain the increment of infection rate and/or in the development of severe COVID-19.     

我国4省区5地牛带绦虫rDNA-ITS2序列分析

目的采用PCR克隆测序方法对贵州都匀、从江,云南大理及新疆乌什4地牛带绦虫标本进行研究,与台湾桃园牛带绦虫亚洲亚种地理株作比较,为贵州株、云南株和新疆株的鉴别提供分子生物学证据,并进一步探讨牛带绦虫亚洲亚种的分类学地位。方法取贵州都匀株(DY1)、贵州从江株(CJ1),云南大理株(DL1),新疆乌什株(XJ1)和台湾桃园株(TW1)成虫节片,分别抽提DNA,PCR扩增rDNA-ITS2区段,克隆rDNA-ITS2区段后作序列分析,构建不同地理株系统发育树。结果根据ITS2序列构建的系统发育树显示:系统发育树分为3支,XJ1占据上方1支;CJ1占据中间1支;而TW1、DY1和DL1组成下方1支。结论1.DY1、DL1与TW1属于牛带绦虫亚洲亚种,CJ1、XJ1属于传统牛带绦虫;2.rDNA-ITS2序列分析可用于牛带绦虫亚洲亚种与传统带绦虫分类学之研究。     

NKG2D及其配体在消化系肿瘤中的研究进展

NKG2D为NK细胞表面的C型凝集素样活化性受体,其配体主要表达于炎性细胞和肿瘤细胞表面,在正常细胞表面很少表达甚至不表达.近来实验证实肿瘤细胞中,NKG2D表达下调,而其可溶性配体的表达明显增加,NKG2D介导的抗肿瘤反应在天然免疫中起重要作用.越来越多研究者认为NKG2D及其配体对肿瘤的早期识别、诊断及治疗研究具有重要意义.本文就NKG2D及其配体的介绍、信号传导、肿瘤免疫,特别是消化系肿瘤中的研究现状和诊治中的应用等方面作一综述.     

银杏叶提取物对兔动脉粥样斑块Bcl-2和Bax表达的影响

目的 观察银杏叶提取物对家兔动脉粥样斑块Bcl-2和Bax表达的影响.方法 将40只家兔随机分为正常对照组、模型组、立普妥组和银杏叶提取物组,对比观察各组家兔斑块面积大小及斑块Bax和Bcl-2的表达.结果 银杏叶提取物组和立普妥组动脉粥样斑块面积低于模型组(P<0.01);免疫组织化学染色显示,模型组平滑肌细胞内Bcl-2和Bax的阳性细胞表达与正常对照组相比增高(P<0.05),立普妥组和银杏叶提取物组平滑肌细胞、泡沫细胞Bax的阳性细胞表达下调,Bcl-2的阳性细胞表达轻度上调,银杏叶提取物组Bax/Bcl-2降低.结论 银杏叶提取物可通过下调Bax/Bcl-2表达而抑制细胞凋亡,减少内皮细胞受损,从而抑制动脉粥样硬化的发生.