Leptin固相放射免疫分析法的建立

目的：研究瘦素（Leptin）固相放射免疫分析法的建立。方法：将提取的兔抗人Leptin特异性抗体IgG,包被在活化的塑料试管内壁,建立了简便、快速、高灵敏、特异的固相竞争RIA,测定人血清Leptin。结果：标准曲线范围为（0.5～24）ng/ml;测定69例健康人血清正常值为（3.68±1.46）ng/ml;最小检出值为0.38ng/ml,批内CV%为5.6%,批间CV%为8.8%;回收率为92%。本文所建方法与液相RIA标准曲线具有良好的平行性;使用两种方法平行测定88份血清Leptin浓度（1.00～7.68）ng/ml,经统计学处理两者之间具有良好的直线相关（r=0.987,P〈0.001,Y=0.977X）。结论：所建立的Leptin固相放射免疫分析法为科研及临床病人血清Leptin浓度的测定提供了一种新的检测方法。     

人前列腺特异抗原（hPSA）的纯化及放射免疫分析的建立

本文介绍前列腺特异抗原的纯化，免疫动物得到特异性抗ＰＳＡ抗体，并建成放射免疫分析。方法简便快速，灵敏度较高，准确性及重复性良好。与国外相应试剂盒比较有良好的相关性。本分析各项质量控制指标均符合ＲＩＡ的质量控制要求     

人Ⅳ型胶原放射免疫分析方法的建立

本文将人胎盘用胃蛋白酶消化、氯化钠分级沉淀及DE-52、CM-52层析提取、纯化N M胶原（ⅣC）。提取物紫外最大吸收峰在230nm,富含羟脯氨酸、羟赖氨酸,两个α链分子量分别为95000和70000,与Sigma产品特性相似。免疫新西兰兔产生的抗血清效价为1:512（间接血凝法）,与其它间质成份无或弱交叉反应。建立的放射免疫分析方法,灵敏度为8μg/L,批内及批间C.V.分别为7.3％和11.2％,测得正常献血员血清ⅣC浓度为49.77±15.00μg/L,慢性肝炎患者显著升高,并与PANASSAY ⅣC EIA法检测结果相关显著,提示本方法灵敏可靠,有推广应用价值。     

改进的人Ⅲ型前胶原放射免疫分析法

本文建立了一种经改进能特异的、敏感的测定人Ⅲ型前胶原(hPCⅢ)含量的RIA法, 并用于诊断肝硬化的临床评价.从人工流产胎皮中分离、纯化hPCⅢ,免疫家兔获取高效价抗血清.hPCⅢ标记125I, 使用双抗体 PEG分离技术, 平衡法加样, 建立RIA.结果表明, 标准曲线测定范围为40-640μg/L.与hPCⅠ的交叉反应率为0.81%、与CⅣ、CⅢ、CⅠ无交叉反应.灵敏度为6μg/L.精确度: 批内CV为4.2%; 批间CV为8.2%.平均回收率为99.9%.血清hPCⅢ正常参考值为87.5±16.2μg/L, 正常上限值为120μg/L.本文建立的改良法操作更简便、快捷.     

乳糖化人生长激素放射免疫分析方法的研究

目的：探讨鼠肝、肾匀浆中乳糖化生长激素（ｈＧＨ－Ｌ）和人生长激素（ｈＧＨ）的放射免疫分析（ＲＩＡ）方法。方法：取正常小鼠肝或肾匀浆，再在匀浆液中准确加入不同量的ｈＧＨ－Ｌ和ｈＧＨ，制得不同浓度的工作液，参照常规ＲＩＡ方法制作标准曲线。再取静脉注射ｈＧＨ－Ｌ或ｈＧＨ后不同时刻的小鼠肝和肾，经匀浆处理后，应用制作的标准曲线测定肝和肾的ｈＧＨ－Ｌ或ｈＧＨ浓度，以评价ｈＧＨ－Ｌ的体内动力学行为，并为该分析     

转铁蛋白放射免疫分析方法的建立

目的 :在样品血清不作稀释的前提下建立转铁蛋白的放射免疫分析方法。方法 :通过降低标记抗原的比放射性 ,提高抗血清的浓度 ,改进曲线拟合方式等方法 ,扩大测定范围。结果 :抗血清亲和率为 3 82×10 -10 mol/L ,标记抗原的比放射性为 15 3mg/mCi,批间误差CV =5 38%批内误差CV =3 5 % ,曲线形态良好。 30例正常人的血清Tf含量为 2 81± 0 972mg/ml。结论 :在样品血清不作稀释的前提下建立转铁蛋白的放射免疫分析法 ,具有较好的临床实用价值。     

胰岛素样生长因子Ⅰ放射免疫分析及其临床初步应用

建立血清胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF－Ⅰ）的放射免疫分析（RIA）方法并初步将其应用于临床。采用血标本通过酸性乙醇提取冷冻再沉淀法,提取率达91．5％±4．4％;用乳过氧化酶法以碘－125标记IGF－I,RIA反应液中含提取液（或标准液）50μL,抗体200μL（最终滴度1：10000）,(125)I－IGF－Ⅰ200μL（约13000cpm）,4℃反应过夜,双抗分离。RIA回收率为98．1％～105．0％,批内变异系数5．4％～7．5％,批间变异系数9．1％～10．7％,灵敏度达0．01nmol／L。用此法测得垂体性诛儒患者血清IGF－Ⅰ的浓度为5．4±1．7nmol／L,它明显低于同龄正常组（49.3±26．6nmol／L）的IGF－I浓度（P＜0．001）;测得肢端肥大症患者血清IGF－Ⅰ的浓度为107．7±25．6nmol／L,它明显高于同龄正常组（26．3±12．2nmol／L）的IGF－Ⅰ浓度（P＜0．001）。RIA测定血清IGF－Ⅰ,灵敏度高,准确可靠,对垂体性侏儒及肢端肥大症的诊断有重要参考价值。     

人卵泡休止素放射免疫测定法的建立

采用亲和层析纯化的人天然卵泡休止素，建立了特异的Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ放射免疫测定法，其最小检出是每管５０ｐｇ／０．１ｍｌ，组间变异系数为２．９％，批间变异系数为４．４％，血清内添加Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ其回收率在９０％，且与Ａｃｔｉｖｉｎ、ＡＣＴＨ、ＦＳＨ等无明显交叉反应，采用此法测得的健康成年人外周血Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ水平在６．６～８．１ｎｇ／ｍｌ，男、女间无明显差异。     

猕猴黄体生成素放射免疫分析方法的建立

目的 :在生殖医学的动物实验中 ,需要检测猕猴血清中黄体生成素 (MLH)的含量 ,为此建立了猕猴血清黄体生成素 (MLH)的放射免疫分析方法。方法 :用氯胺T法制备12 5I-MLH ,兔抗MLH为第一抗体 ,羊抗兔IgG为分离剂 ,采用液相竞争法建立放射免疫分析方法。结果 :标记抗原比放射性为 6 7μg/mCi,抗体亲和常数为Ka=3 5 5× 10 -9mol/L ,标准曲线形态良好 ,r=0 991,批内误差CV =3 49% ,批间误差CV =4 6 5 % ,最小可测浓度为 0 42 μg/ml,30例正常猕猴血清检测结果为 1 17± 0 6 75 μg/ml。 结论 :MLHRIA的建立对避孕药和性生理药品的动物监测及医学研究均有重要意义。     

IGF-Ⅰ RIA的建立及初步应用

目的:建立胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)放射免疫分析并初步应用.方法:用氯胺-T法制备高比活度125I-IGF-Ⅰ,建成IGF-Ⅰ放射免疫分析.结果:本法测定范围为(20～2400)ng/ml.正常对照组血清IGF-Ⅰ含量为(173.2±46.1)ng/ml,而心力衰竭组含量为(124.5±28.9)ng/ml,显著低于正常对照组(P＜0.01).结论:该IGF-Ⅰ放免法准确,结果可靠,可应用于临床及实验研究.     

放射免疫分析在血色病诊断中的应用（附一例报告）

血色病是一种罕见的代谢病,由于过多的铁质在肝、胰、心、肾、脾及皮肤等脏器组织中沉积,引起基质细胞破坏,纤维组织增生及脏器功能损害。临床上主要表现肝硬变、皮肤色素沉着、关节痛、心肌病变和内分泌改变。有些患者由于反复输血或进食铁过多引起,但大多数患者原因不明,称为原发性血色病,是一种遗传性疾病。国内1957～1990年先后有15例报告,病人均为男性。1992年4月我院见到1例现报告如下。 病例报告 患者男,25岁。8个月前因多尿、多饮、多食及消瘦,当地医院诊断“糖尿病”,给予饮食控制,口服降糖药后症状未好转伴乏力明显,于1992年4月27日转来我院进一步诊治。患者无饮酒嗜好,无慢性肝炎、反复输血及长期服用铁剂史。家族中无糖尿病患者。查体:体温37.6℃,脉搏84次/分,呼吸18次/分,血压16/10kPa,发育正常,营养中等,面部、颈、两手背皮肤呈褐灰色,面部无毛细血管扩张,无蜘蛛痣及肝掌,甲状腺不肿大,心肺末见异常。肝上界右第6肋间,肋下2.5cm,质中,脾肋下刚及,无腹水征。实验室检查:血红蛋白112g/L,白细胞4.6×10~9/L中性0.72,淋巴0.28,血小板100×10~9/L,网织红细胞0.006％。OGTT(馒头餐)血糖0′25.7mmol/L、30′,27.8mmol/L、60′ 29.8mmol/L、120′ 27.8mmol/L,180′27.0mmol/L。胰岛素兴奋试     

人血清生长激素放射免疫分析的临床应用（文献综述）

人血清生长激素(huraan growth hormone，hGH)的放射免疫分析可以直接准确侧定人血清或血浆中生长激素(GH)的浓度，是研究生理情况下垂体GH分泌的一项可靠的方法。在临床上，此项测定对hGH分泌异常的疾病如肢端肥大症、巨人症，垂体性侏儒和垂体功能低下等疾患的早期诊断有重要价值。     

人卵泡林止素放射免疫测定法的建立

采有亲和层析纯化的人天然卵泡休止素，建立了特异的Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ放射免疫测定法，其最小检出是每管５０ｐｇ／０．１ｍｌ，组间变异系数为２．９％，批间变异系数为４．４％，血清内添加Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ其回收率在９０％，且与Ａｃｔｉｖｉｎ，ＡＣＴＨ，ＦＳＨ等无明显交叉反应，采用此法测得的健康成年人外周血Ｆｏｌｌｉｓｔａｔｉｎ水平在６．６～８．１ｎｇ／ｍｌ，男，女间无明显差异。     

弓形虫的放射免疫分析与临床（文献综述）

弓形虫病(toxoplasmosis)又称弓形体病，是由弓形虫（toxoplasma gondii)所引起的一种人兽共患性疾病，广泛流行于世界各地。据文献报道全世界约有5～10亿人受其感染。人患弓形虫病，可侵犯多种脏器，其临床表现常因侵犯脏器不同而异，几乎涉及内、外、妇，儿、神经精神、传染病，肿瘤，眼，耳鼻喉等各个学科，并与输血、器官移植、免疫缺陷等有密切关系。     

放射免疫技术研究的现状及展望（综述）

放射免疫技术研究的现状及展望（综述）李振甲放免技术的广泛应用，为加速医学科学现代化进程所作出的贡献，举世公认。近１０年来非放射性免疫标记分析的研究和应用取得了引人注目的进展，其灵敏度和准确性已达到与放免相似的水平［１，２］。同时放免技术的方法学研究也...     

人瘦素放免分析法的建立及初步临床应用

瘦素是由肥胖基因编码, 由脂肪细胞合成和分泌的一种亲水性激素蛋白.本文用高纯的重组人瘦素抗原免疫家兔, 得到高效价的兔抗人瘦素多克隆抗体, 氯胺-T法制备125I-瘦素标记物, 建立人血清瘦素RIA.本方法特异性强, 灵敏度较高, 精密度较好, 其测定值与Linco公司的放免药盒有很好的一致性.用本法建立的正常参考值(BMI 18-25): 男性(34例)为2.15±1.46ng/mL,女性(36例)为7.86±3.60ng/mL.将112名健康者的检测结果分成男、女两组, 血清瘦素值与BMI之间有明显的正相关(r=0.72,P＜0.001).瘦素水平与年龄之间无明显相关性(P＞0.05).女性的促黄体激素、促卵泡激素、泌乳素、孕酮和雌二醇与瘦素无明显相关性(P＞0.05).而对于男性, 睾酮与瘦素水平成明显的负相关(r=0.792,P＜0.01).     

醛固酮（ALD）放射免疫分析的临床应用

醛固酮（Aldosterone,ALD）是肾上腺皮质球状带（Zona Glomerulosa）合成和分泌的一种调节机体水、盐代谢的皮质激素,称之为盐皮质激素或盐皮质类固醇（Mineralocorticoids）。ALD对机体能影响电解质、水的排泄及血容量,对调节机体内环境的恒定有着重要的临床意义。 1977年我国建立了血浆~3H-ALD放射免疫分析,以后又建立了血浆~（125）I-ALD免疫放射分析,经临床应用,表明对某些疾病中ALD分泌异常者,可提高其诊断符合率。 一、ALD的生理作用:ALD具有调节机体水、盐代谢,可促进肾远曲小管与集合管对Na~+的重吸收、K~+的排泄。随着大量吸收Na~+,水的重吸收也相应增加,以维持细胞外液容量。由此可见,ALD对机体起保钠、保水、排钾的作用。动物实验证实,完全切除两侧肾上腺皮质后,由于缺乏盐皮质激素而致使大量水和钠丢失,引起低容量性休克,在较短的时间即死亡,因此,说明ALD是维持生命所不可缺少的激素之一。 二、ALD分泌活动的调节:一般情况下,ALD分泌活动的调节基本上不受ACTH控制,其调节机制比较复杂,尚未完全阐明清楚。目前认为ALD分泌活动的调节与肾素、血管紧张素、血钠、血钾浓度有着密切关系。     

降钙素基因相关肽放射免疫分析的建立

本文采用皮下、腹腔内联合免疫方法获得抗降钙素基因相关肽（CGRP）抗体。利用Iedogen125I标记CGRP，经高效液相色谱（HPLC）分离纯化，建立了CGRP放射免疫分析（RIA）测定范围20－1200pg／mL，批内CV7％，批间CV12％，上常人血浆含量为50.6±24．5pg／mL（n＝25）。初步用于临床，砚察了CGRP与内皮素（ET）在高血压，十二指肠疾病中的相互关系，所得结果与正常对照组差异显著。     

胃蛋白酶原Ⅰ时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的　采用时间分辨荧光免疫分析技术建立高灵敏的胃蛋白酶原Ⅰ的快速全自动检测方法。方法　以PGⅠ单克隆抗体 80 0 3#包被板 ,双功能螯合剂异氰酸苄基二乙烯三胺四乙酸络合Eu3 及标记PGⅠ单克隆抗体 80 16 # ,发光增强系统为以 β 二酮体为主的增强液。采用平衡饱和法建立PGⅠ时间分辨荧光免疫分析 ,数据采用Log Logit法函数和四参数Logitc函数数据处理程序处理。结果　方法的批内和批间CV分别为 1.9%和 4 .7% ,平均回收率为 10 2 .6 5 % ,灵敏度为 0 .0 5 μg L ,可测范围为 3.5～ 32 8μg L ,ED2 0 、ED50 和ED80 分别为 11.34μg L、38.73μg L和 132 .3μg L。Eu3 标记抗体 2 0℃保存 8个月免疫反应性基本无损失 ,同批试剂连续 8个月应用分析结果稳定 ,临床结果与免疫放射分析法的结果相符。结论　胃蛋白酶原Ⅰ时间分辨荧光免疫分析法是目前胃蛋白酶原Ⅰ检测中最灵敏的方法 ,该分析法稳定性好 ,具有很好的应用前景。