首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到18条相似文献,搜索用时 78 毫秒
1.
目的:探讨自体外周血干细胞动员时,恶性血液病患者的骨髓及外周血CD34^+和T细胞亚群的动态变化特点。方法:16例拟行自体外周血干细胞移植患者,在应用化疗+G—CSF方法动员外周血干细胞期间,以流式细胞仪测定骨髓及外周血CD34^+和T细胞亚群动态变化情况。结果:化疗后应用G—CSF48h后,骨髓中CD34^+细胞开始明显增加(P〈0.01),在应用G—CSF72h后,外周血中CD34^+细胞开始明显增加(P〈0.01),96h后,两者达峰值。较未应用G—CSF时差异显著(P〈0.01)。T淋巴细胞亚群比例处于倒置状态且变化不明显(P〉0.05)。结论:恶性血液病患者在应用化疔+G—CSF方法动员外周血干细胞时,其骨髓及外周血CD34^+细胞逐渐增加,于96h后达高峰,T细胞亚群变化不明显。  相似文献   

2.
陈捷  周淑芸  冯茹 《解放军医学杂志》2002,27(12):1063-1065
为探讨骨髓的造血干细胞和动员的外周血造血干细胞在基因表达水平是否有差别,作者以CD34抗原作为造血干细胞的标记,筛选出同一个供者的静息散骨髓和经G-CSF(granulocyte colony-stimulating factor)动员后的外周血CD34^ 细胞,用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术检测两种来源的CD34^ 细胞的基因表达差异。结果发现,动员外周血CD34^ 细胞有11个高表达基因,主要涉及的基因有核蛋白、转录调节因子、锌指蛋白和干扰素相关的分析。提示动员外周血CD34^ 细胞与静息期骨髓CD34^ 细胞基因表达谱并不完全相同,从而导致其生物学行为的差异。因此,进一步的研究可能对造血干细胞的迁移、归巢过程有更深的了解,对如何加速造血干细胞移植后造血功能的恢复具有一定的意义。  相似文献   

3.
4.
目的 探讨减量、分次使用聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(Pegylated-recombinant human Granulocyte-Colony Stimulating Factor, PEG-rhG-CSF)在减轻急性白血病化疗后粒细胞缺乏的作用;方法 18例巩固化疗阶段急性白血病患者,化疗后粒细胞缺乏期使用半量PEG-rhG-CSF(3 mg),观察中性粒细胞数目绝对值(Absolute Neutrophil Count,ANC)和外周血CD34+细胞数(PB CD34+)、Ⅲ~VI度粒细胞减少持续时间、中性粒细胞减少发热(Febrile Neutropenia,FN)发生率及安全性。 结果 18例患者给药后仅有9例达到预期目的(A组),另9例患者一次给药无法达到提升粒细胞的作用(B组),在第6天追加半量长效刺激因子后达预期目的。观察两组结果显示:A组给药后ANC和PB CD34+逐步升高,在第5天达峰值,均值分别为ANC(9.36±8.81)×109 /L和PB CD34+ 为(1.122±1.907)。B组ANC在第一次给药后快速上升,第1天达峰值[(4.72±6.96)×109/L],之后4 d 内快速下降至粒细胞缺乏水平,第6天第二次给药后ANC再次开始升高,在第11天ANC均达1.0×109/L以上,均值为(4.67±6.23)×109 /L。PB CD34+细胞数呈缓慢上升过程,每日均值均低于A组,第11天峰值(0.202±0.337)比A组第0天(0.294±0.770)低。两组在年龄、性别、肿瘤类型、化疗周期数方面无统计学意义,差异考虑与化疗方案(含大剂量阿糖胞苷及DCAG、DHAG预激方案)有关。A组给药后Ⅲ~VI度粒细胞减少持续时间(0.78±0.83)d显著短于B组(6.78±1.56)d,两组差异具有统计学意义(P <0.05)。两组FN发生率分别为A组33.3%和B组55.6%,差异无统计学意义(P >0.05)。两组主要不良反应为肌痛,均未见三级以上不良反应,发生率差异无统计学意义(P >0.05)。对比B组两次用药后同等天数对ANC和PB CD34+动员效果上均无统计学意义(P >0.05)。结论 在巩固化疗的急性白血病患者中使用半量PEG-rhG-CSF(3 mg)安全、有效,可对部分患者起到预防粒细胞减少的作用。对一次使用在5 d内无法达到有效提升中性粒细胞的患者,追加使用仍然有效,且无不良反应发生。对于使用高强度或预激方案化疗患者,给药后出现PB CD34+提升较慢的患者,尤其是用药时、外周血CD34+数值较低的患者,可能是需要考虑二次给药的人群。  相似文献   

5.
脐血CD34+造血干/祖细胞及其亚群的研究   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
近年来,脐血在肿瘤、白血病和放射病的临床治疗中初步显现出广阔的前景。为进一步探讨脐血造血干/祖细胞(HSC/HPC)的生物学特性,本文作者采用单克隆抗体技术及流式细胞术检测了脐带血CD34 细胞及其亚群的分布,并与成人外周血和骨髓进行了比较,以期为脐血的合理使用提供实验资料。一、材料和方法1试剂与仪器:异硫氰酸荧光素(FITC)标记的小鼠抗人CD34单克隆抗体(MoAb),藻红蛋白(PE)标记的小鼠抗人CD38MoAb,分别以FITC及PE标记的小鼠IgG1MoAb(均为美国Pharmingen出品)。FACScan型流式…  相似文献   

6.
目的 观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对急性辐射损伤小鼠中枢及外周血淋巴细胞亚群重建的影响.方法 雌性BALB/c小鼠60只经6 Gy照射后随机分为照射组、G-CSF+照射组.G-CSF+照射组小鼠给与重组人G-CSF 100μg·kg-1·d-1皮下注射,连续14 d,照射组小鼠给与等体积磷酸盐缓冲液(PBS)皮下注射,连续14 d,另设空白对照组小鼠20只.照后7、14、21和28d颈部脱臼处死小鼠,取出胸腺制成单个核细胞悬液,使用流式细胞仪检测胸腺CD4+CD8+、CD4+CD8-、CD4-CD8+、CD4-CD8-细胞亚群的比例.使用全血细胞计数仪进行外周血白细胞计数及淋巴细胞绝对值测定,流式细胞仪检测照后14、28、60 d外周血淋巴细胞亚群比例,CCK-8法检测脂多糖(LPS)、刀豆蛋白A(ConA)刺激后脾脏淋巴细胞增殖指数.结果 照后7 d胸腺CD4+CD8+细胞比例降至最低,14 d出现反弹,21 d再次下降,以后逐渐恢复.照后28 d G-CSF+照射组CD4+CD8+细胞比例恢复正常并高于照射组(t=12.22,P<0.05).照后21 d G-CSF+照射组CD4-CD8+细胞比例亦明显高于照射组(t=3.77,P<0.05).照后7 d外周血白细胞及淋巴细胞绝对值降至最低,照后14和60 d,G-CSF+照射组CD3+CD8+T细胞比例明显高于照射组(t=4.31,5.78,P<0.05),但两组间CD3+CD4+T细胞比例在各时间点无明显差异.G-CSF+照射组B淋巴细胞比例在照后14 d明显低于照射组(t=7.3,P<0.05),但很快恢复,照后28和60 d两组B淋巴细胞比例差异无统计学意义.照后14 d,G-CSF+照射组脾脏淋巴细胞对LPS、ConA刺激的增殖指数分别为照射组的4.37和2.98倍.结论 G-CSF可促进照后胸腺细胞亚群的恢复,提高外周血淋巴细胞数量,调节外周血淋巴细胞亚群比例,提高淋巴细胞增殖功能,促进急性辐射损伤后中枢及外周免疫重建.
Abstract:
Objective To investigate the effects of recombinant human granulocyte colonystimulating factor(G-CSF) on central and peripheral lymphocyte subset reconstitution after a sublethal dose of irradiation. Methods Sixty female BALB/c mice were given a 6.0 Gy γ-ray total body irradiation (TBI) and randomly divided into 2 equal groups. The mice in G-CSF + TBI group were injected subcutaneously with recombinant human G-CSF 100 μg·kg-1·d-1 for 14 d and the mice in TBI group were injected subcutaneously with the same volume of phosphate buffered solution (PBS) once daily for 14 d. 7,14,21, and 28 d later the mice were killed and their thymus were taken out to prepare of the mononuclear cell suspension to analysis the percentage of thymic CD4 + CD8 + double positive, CD4 +CD8 - single positive, CD4 - CD8 + single positive and CD4 - CD8 - double negtive cells by flow cytometry. Peripheral blood samples were collected from the caudal vein twice a week, and the white blood cell(WBC) counts and absolute number of lymphocytes were assessed by automatic hemocyte analyzer. 14,28, and 60 d later blood samples were collected from angular vein to examine the peripheral lymphocyte subsets by flow cytometry. Cell counting kit-8 was used to detect lipopolysaccharide (LPS) or concanavalin A (ConA) stimulated splenic lymphocyte proliferation. Results The percentage of thymic CD4 + CD8 +double positive cells decreased 7 d after irradiation, rebounded at 14 d, decreased again at 21 d, and then got a permanent recovery. 28 d after irradiation the percentage of thymic CD4 + CD8 + double positive cells in the G-CSF + TBI group recovered to normal and was significantly higher than that of the TBI group (t =12. 22, P < 0. 05). 21d after irradiation the percentage of thymic CD4-CD8 + single positive cells of the G-CSF + TBI group was significantly higher than that of the TBI group (t = 3.77, P < 0. 05). The peripheral WBCs and lymphocytes decreased to the lowest levels 7 d after irradiation and then gradually increased, however, WBCs and lymphoeytes of the G-CSF + TBI group began to recover earlier and faster than the TBI group. The proportion of CD3 + CD8 + T cells of the G-CSF + TBI group was significantly higher than that of the TBI group 14 and 60 d after irradiation (t =4. 31,5.78, P <0.05). But there was no significant difference in the proportion of CD3 + CD4 + T cells between the two groups. The proportion of B lymphoeytes of the G-CSF + TBI group was significantly lower than that of the TBI group 14 d after irradiation(t =7.30, P <0.05), but it recovered quickly, and there were no significant differences in the proportion of B lymphoeytes between the two groups 28 and 60 d after irradiation. The proliferation indexes of splenic lymphocytes in response to LPS and ConA in the G-CSF + TBI group were 4. 37 and 2.98 times higher than those in the TBI group 14 d after irradiation. Conclusions G-CSF could accelerate the recovery of central and peripheral lymphocyte subsets, raise the absolute number of lymphocytes, and enhance their proliferative function, which contributes to the central and peripheral immune reconstitution after acute irradiation.  相似文献   

7.
目的用18F-脱氧葡萄糖(FDG)、99Tcm-甲氧基异丁基异腈(MIBI)评价犬冷冻心肌骨髓CD34+细胞移植后心肌代谢和灌注的变化.方法12只杂种犬分为细胞移植组和对照组.用免疫磁珠法从犬肋骨骨髓分离CD34+细胞并注射到用CO2冷冻建立的慢性心肌梗死模型区,对照组注射伊思考夫改良杜尔贝可培养基(IMDM)培养液.分别于建立模型前、后4周和干细胞移植后8周行18F-FDG和99Tcm-MIBI心肌显像,评价细胞移植结果,计算冷冻心肌代谢与灌注显像的F值.干细胞移植后8周取心肌做第8因子免疫组织化学和病理检查.结果正常心肌代谢与灌注显像清晰,F值接近0,干细胞移植前、后8周冷冻心肌18F-FDG与99Tcm-MIBI显像的F值分别为5.50±1.31,5.44±0.70与1.17±0.41,1.50±0.55(P<0.01);对照组为5.53±0.80,5.54±1.29与5.00±1.55,5.08±1.46(P>0.05),骨髓CD34+细胞移植使冷冻心肌的代谢与灌注明显得到恢复.干细胞移植后8周冷冻区血管密度高于对照组(P<0.01).结论骨髓CD34+细胞移植后冷冻区存在大量活的心肌细胞.  相似文献   

8.
目的 研究G CSF对小鼠外周血树突状细胞 (DC)亚群的调节作用及其对免疫应答的影响。方法 BALB/c小鼠给予 10 μgrhG CSF皮下注射 ,每天 1次 ,连续 6天 ,第 6天分离外周血DC,用流式细胞术分析DC1(CD11c CD8a-)和DC2 (CD11c CD8a )的比例和绝对值。给予同种异体PBMC刺激一周后 ,检测外周血DC刺激T细胞增殖的能力和同种异体混合淋巴细胞反应强度。结果 G CSF处理后 ,小鼠外周血DC1的绝对值无显著变化 ,而DC2的绝对值增加 5倍(9 6± 2 6×10 6/Lvs4 5 4± 9 9× 10 6/L ,P <0 0 1) ,DC1/DC2的比值降低(4 3±1 8vs0 8±0 3,P <0 0 1) ,各组DC刺激T细胞增殖的能力无明显改变 ,但G CSF处理后经同种异体PBMC预致敏的小鼠T细胞对于此同种异体PBMC的单向混合淋巴细胞反应强度明显减低(5 17± 0 95vs1 39± 0 37,P <0 0 1)。结论 G CSF可调节外周血DC1和DC2亚群的数量和比例 ,诱导Th2免疫应答 ,抑制移植免疫应答。  相似文献   

9.
局部放疗对肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群的影响   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
应用抗人T淋巴细胞单克隆OKT系列以间接免疫酶染色法检测了局部放疔的72倒恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群比率和数量, 结果表明, 40侧乳癌术后单纯放疗患者, 放疗后外周血血小板、白细胞数。淋巴细胞数都非常显着地减少, T3、T4、比率无显着变化, 而T6比率显着地增加;T3、T4、T6.淋巴细胞教都非常显着地减少。患者免疫功能明显下降, 32例实体瘤放疗后完全消失的患者。放疗后外周血血小板、白细胞数。淋巴细胞都无显着减少T3, T4T6比率都无显着变化;T3, T4、T6淋巴细胞数都无显着减少。患者免疫功能无明显下降。两组各免疫参数减少率的比较进一步表明:有实体瘤经款疗完全消失组白细胞数。淋巴细胞数, T淋巴细胞各亚群数的减少都显着少于单纯术后放疗组。结果提示放射线对实体瘤的杀伤效应有助于提高机体免疫功能, 减轻放射线杀伤外周血备免疫细胞尤其是T淋巴细胞的副作用, 乳癌术后放疗引起免疫功能下降应引起重视。  相似文献   

10.
卡拉胶寡糖对放射损伤小鼠T细胞功能和亚型的影响   总被引:5,自引:0,他引:5  
目的探讨卡拉胶寡糖对受x射线照射小鼠T细胞功能和亚型的影响。方法采用直线加速器6MV X射线一次全身照射BALB/c小鼠,卡拉胶寡糖组照射前连续14d和照射后继续给药7d。检测小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应,胸腺细胞表达CD69变化,外周血T细胞表达IL-2、IFN-γ和TNF-α变化及CD4^ /CD8^ 比值。结果卡拉胶寡糖能有效提高脾脏T淋巴细胞的增殖能力,胸腺T细胞表达CD69显著升高,使受照射小鼠外周血T细胞产生IL-2和IFN—γ的能力显著增强,外周血T细胞表达TNF-α的能力降低,并能显著升高外周血T细胞CD4^ /CD8^ 比值。结论卡拉胶寡糖对放射损伤小鼠的T细胞功能和亚型有明显调节作用。  相似文献   

11.
目的 观察高压氧治疗对脊髓损伤患者外周血CD34+细胞及白细胞的影响.方法 将符合研究标准的21例脊髓损伤患者分为2组,对照组10例,高压氧组11例.对照组行常规治疗(手术治疗、营养神经等药物治疗及针刺),高压氧组在常规治疗基础上加高压氧治疗,1次/d,连续20d.2组于治疗前及治疗后第5、10、20天取静脉血,分别行外周血白细胞及CD34+细胞绝对值检测.结果 高压氧治疗后外周血CD34+升高(P<0.05),白细胞计数无显著变化(P>0.05).外周血CD34+细胞绝对值轮廓图显示2组变化趋势不同,高压氧组有明显升高趋势,而对照组无明显变化.结论 多次高压氧治疗可动员脊髓损伤患者的骨髓干细胞释放至外周血,使外周血CD34+细胞绝对计数保持在较高水平;而对白细胞计数无明显影响.  相似文献   

12.
CD34在放射损伤小鼠骨髓细胞的表达及其意义   总被引:4,自引:1,他引:3       下载免费PDF全文
目的 研究辐射所致造血功能障碍时造血干/祖细胞表面CD34抗原表达的变化及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及斑点杂交的方法,初步检测了昆明种小鼠受6.0Gy辐射后不同时相点时骨髓单个核细胞CD34表达量的变化,并对其可能的机理及其临床意义进行了探讨。结果 放射损伤后小鼠骨髓单个核细胞CD34表达在受照后24h即明显增高,之后一直维持在较高水平,至照后15d时仍较正常时高50%。结论 在此照射剂量时小鼠骨髓内残存的、具有造血功能的早期造血祖细胞在骨髓造血的内稳态遭到破坏后,可代偿性地迅速增加其增殖能力和细胞数量,以加速造血的恢复过程。这可能是机体对损伤导致造血功能低下时的一种代偿性增生机理。  相似文献   

13.
辐射小鼠骨髓CD34+细胞的变化及其意义   总被引:13,自引:0,他引:13       下载免费PDF全文
目的 研究γ射线照射后C57小鼠骨髓中CD34^ 细胞的数量变化规律及其意义。方法 流式细胞仪测定CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中的比例;Annexin V-FITCy试剂盒检测骨髓细胞的凋亡;细胞固定后PI染色测定细胞周期。结果 ①CD34^ 细胞在骨髓有核细胞中的比例随照射剂量的加大而降低,在5.5Gy照射后14d内小鼠CD34^ 细胞的减少表现为持续性;②小鼠照射后6h骨髓细胞凋亡率最高,以5.5Gy照射组最为明显;③5.5Gy照射后小鼠骨髓细胞周期紊乱。结论 γ射线损伤骨髓中的干祖细胞,造成骨髓中干祖细胞的数量减少,其途径之一是诱导骨髓细胞凋亡。  相似文献   

14.
目的 研究γ射线照射后C5 7小鼠骨髓中CD34 细胞的数量变化规律及其意义。方法 流式细胞仪测定CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例 ;AnnexinV FITC试剂盒检测骨髓细胞的凋亡 ;细胞固定后PI染色测定细胞周期。结果 ①CD34 细胞在骨髓有核细胞中的比例随照射剂量的加大而降低 ,在 5 5Gy照射后 14d内小鼠CD34 细胞的减少表现为持续性 ;②小鼠照射后6h骨髓细胞凋亡率最高 ,以 5 5Gy照射组最为明显 ;③ 5 5Gy照射后小鼠骨髓细胞周期紊乱。 结论 γ射线损伤骨髓中的干祖细胞 ,造成骨髓中干祖细胞的数量减少 ,其途径之一是诱导骨髓细胞凋亡。  相似文献   

15.
姜宇  何力鹏  王农荣  谢文 《武警医学》2004,15(10):740-743
 目的观察辛伐他汀动员大鼠外周血单个核CD34+细胞的作用.方法80只Wistar大鼠被随机分成辛伐他汀组和对照组.分别于给药1、2周后检测血脂水平,并用流式细胞仪行萤光激活细胞分类检测外周血单个核细胞中CD34+细胞率.结果(1)各组间血脂水平及外周血单个核细胞数无明显差别(P>0.05).(2)无论是给药第1周后还是第2周后,辛伐他汀组外周血单个核细胞CD34+细胞率较对照组明显升高(P<0.01).结论辛伐他汀可动员大鼠外周血单个核细胞中CD34+细胞.  相似文献   

16.
急性心肌梗死患者外周血干细胞动员效率及安全性观察   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 观察急性心肌梗死 (AMI)患者应用G CSF行自体外周血干细胞动员的效率与安全性。方法 我院 2 0 0 3年 11月至 2 0 0 4年 8月收治的 4 5例AMI患者 ,入院后在常规AMI治疗 (药物与介入治疗 )基础上给予包涵体型G CSF ,30 0~ 6 0 0 μg d皮下注射 ,连续 5d ,第 6天经美国Baxter公司生产的CS30 0 0PLUS血细胞分离机 ,分离外周血干细胞 ,然后进行经皮经腔冠状动脉内移植自体外周血干细胞进一步治疗急性心肌梗死。动员前及动员后第 3~ 7天行外周血WBC计数检查 ,经流式细胞仪测定CD34+ 的细胞数量。并在外周血干细胞动员时观察有无不良反应 ,心绞痛或心衰加重等并发症发生 ,及一些少见的并发症 :自发性脾破裂、严重化脓性感染、高凝状态、自身免疫性疾病等发生。结果 在动员前及动员后第 3~ 7天外周血中WBC量分别为 (8.4 2± 2 .5 9)× 10 9 L、(31.2 8± 8.34)× 10 9 L、(35 .2 4± 9.38)× 10 9 L、(37.0 3± 13.0 7)× 10 9 L、(35 .34± 14 .6 8)× 10 9 L、(2 0 .35± 9.2 2 )× 10 9 L ;CD34+ 量分别为 (14 .89± 11.4 6 )× 10 6 、(6 7.78± 5 0 .88)× 10 6 、(12 4 .79± 136 .13)× 10 6 、(2 0 8.92± 2 0 6 .97)× 10 6 、(2 0 6 .10± 184 .5 7)× 10 6 、(6 6 .6 3± 5 6 .5 6 )× 10  相似文献   

17.
目的 :探讨流式细胞仪测定基因转移效率的可行性 ,并比较相同实验条件下脐带血和骨髓CD34 细胞中基因转移效率的差别 ,为基因治疗的临床应用提供方便、有效的靶细胞及基因转移方法。方法 :用细胞因子刺激靶细胞 ,以携带GFP和Neo基因的逆转录病毒载体GCGPXSN实施基因转移 ,流式细胞仪测定基因转移效率。结果 :病毒上清滴度为 1.9× 10 5CFU·ml-1,各实验组实施基因转移 48h后 ,骨髓CD34 细胞中的转移效率分别为 2 .97% ,4.75 % ,7.80 %。脐带血CD34 细胞中的转移效率分别为 12 .70 % ,15 .5 0 % ,17.0 0 %。两者相比P <0 .0 5。各实验组实施基因转移 96h后 ,骨髓CD34 细胞中的转移效率分别为 2 3 .30 % ,5 0 .5 0 % ,35 .90 %。脐带血CD34 细胞中的转移效率分别为 43.5 0 % ,76 .10 % ,6 3.30 %。两者相比P <0 .0 1。结论 :流式细胞仪可方便准确地测定基因转移效率 ,脐血CD34 细胞的基因转移效率高于骨髓CD34 细胞基因转移效率  相似文献   

18.
目的 研究过敏性哮喘、肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群及T淋巴细胞亚群改变情况,了解两种疾病患儿的免疫状况,为临床诊治提供参考.方法 收集过敏性哮喘及肺炎患儿各15例,同期选择15例健康儿童为对照,应用多色免疫荧光标记方法,检测患儿的淋巴细胞亚群,包括T细胞(CD3+)、T辅助/诱导细胞(CD4+)、T抑制/毒性细胞(CD8+)、自然杀伤细胞( CD16+ 56+)及B细胞(CD19+);应用细胞内免疫荧光标记方法,检测CD4+ IFN -y +Th1(简称Th1)、CD4+ IL -4+Th2(简称Th2)、CD4+IL- 17 +Th17(简称Th17).结果 过敏性哮喘患儿Th2、Th17与对照组比较均升高,CD3+、CD4+、CD8+、CD16+ 56+百分率明显则低于对照组及肺炎组,而CD19+及CD4+/CD8+均较对照组偏高(P<0.05).肺炎组与对照组比较,仅CD4+有明显降低.结论 过敏性哮喘与肺炎患儿存在着不同的免疫学改变,过敏性哮喘改变较肺炎更明显;检测淋巴细胞亚群及Th1、Th2和Th17,对小儿过敏性哮喘与肺炎的诊断及治疗均有参考意义.  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号