乙型肝炎病毒（ayw型）转基因小鼠的建立

目的：建立遗传上稳定的、带有乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ａｙｗ亚型的转基因小鼠品系。方法：通过对受精卵显微注射进行基因转移的途径制备转基因小鼠，以ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂产、ＥＬＩＳＡ、组织切片免疫组化和透射电镜等方法，分析所导入ＤＮＡ在转基因小鼠体内的功能情况。结果：得到２１只建立者小鼠，在它们的血清中检测到了ＨＢｓＡＧ和ＨＢｅＡｇ的存在，还在肝细胞中观察到了ＨＢＶ样病毒颗粒。结论：ＨＢＶ基因组ＤＮ     

血HBsAg,HBeAg阳性孕妇外周血单个核细胞HBV感染的研究

血ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ阳性孕妇外周血单个核细胞ＨＢＶ感染的研究［门可，徐德忠，闫永平ｅｔａｌ．中华妇产科杂志，１９９６；３１（１０）：５９７］目的：探讨ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ阳性孕妇外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染状况及其在...     

乙型肝炎病毒核心启动子热点突变与HBcAg存在状态

目的：研究乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）核心启动子（ＢＣＰ）区１７６２位和１７６４位热点突变对ＨＢｅＡｇ存在状态的影响。方法：采用错配引物的ＰＣＲ结合限制性内切酶技术检测９０例不同ＨＢｅＧａ状态的ＨＢＶ无症状携带者的ＨＢＶＢＣＰ热点突变。结果：６０例ＨＢｅＡｇ阴性者中ＨＢＶＢＣＰ热点突变者２６例（４３．３％）,其中２０例伴有ＨＢＶ前Ｃ区（Ｐｒｅ－Ｃ）区１８９６位热点突变;３０例ＨＢｅＡｇ阳性者中仅３例（１     

聚合酶链反应检测HBV─DNA及临床意义的再认识

采用聚合酶链反应检测１１４例肝病患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：１１４例患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３５．９６％，其中ＡＨ、ＣＰＨ、ＣＡＮ、ＬＣ组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为４１．６７％、２１．４３％、５３．６６％和２６．３１％；ＨＢｅＡｇ（＋）组３９．０２％，抗ＨＢｃ（＋）组２２．７３％，ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｃ（＋）组４３．３７％，抗ＨＢｓ（＋）组４１．１８％；ＨＢＶＭ（－）组１１．１１％。结果提示：①ＣＡＨ组阳性率较高（５３．６６％）；②抗ＨＢｅ（＋）患者血清中有高滴度ＨＢＶ－ＤＮＡ，提示仍有传染性；③抗ＨＢｅ（＋）、抗ＨＢｓ（＋）、ＨＢＶＭ（－）的患者ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性可能为ＨＢＶ的变异株感染。     

PCR与ELISA在检测乙型肝炎病毒标志物中的应用比较

目的：观察ＰＣＲ与ＥＬＩＳＡ法在检测乙肝病毒标志物中的差异。方法：用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法对８０３例疑似乙肝者做了ＨＢＶＤＮＡ和乙肝五项指标检查，并进行比较。结果：在ＨＢｓＡｇ（＋）的７３６例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率５８．７７％。ＨＢｅＡｇ（＋）的３５３例中ＨＢＤＮＡ阳性率为９６．３％。ＨＢｅＡｇ（－）的４０８例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率为２３．０％。ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ均（－）的２５例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率     

PCR检测HBeAg阳性血清中HBVC基因的结果分析

ＰＣＲ检测ＨＢｅＡｇ阳性血清中ＨＢＶＣ基因的结果分析朱华强谭显清绵阳市中心医院检验科（６２１０００）达川市中医院（６３５０００）机体感染乙肝病毒（ＨＢＶ）后，由于ＨＢＶ基因表达和机体的体液免疫应答，血中可出现ＨＢｓＡｇＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｓ、抗ＨＢｃ等...     

核酶对2.2.15细胞中HBeAg表达抑制作用的初步观察

目的：观察针对Ｈ了Ｃ区双位点核酶对２．２．１５细胞中ＨＢｅＡｇ表达的抑制作用。方法：利用亚克隆技术,从质粒ｐＧＥＭ－Ｒｚ１２３切下ＥｃｏＲ１－ＢａｍＨ１片段克隆于真核表达质料ｐＢＢＳ２１２中,将该质料转染２．２．１５细胞,用ＥＬＩＳＡ及免疫组化方法观察该核酶对ＨＢｅＡｇ合成的抑制作用。结果：细胞表达出针对ＨＢＶ Ｃ区核酶,该核酶对ＨＢｅＡｇ的抑制制达４８．６％。结论：该双位点核酶可能通过针对ＨＢＶ     

ELISA法与PCR法联合检测乙肝病毒标记物临床价值探讨

用酶联免疫吸附法与聚合酶链反应法,联合检测１１３例病毒性肝炎患者血清乙肝病毒免疫学标记物（ＨＢＶ－Ｍ）与分子生物学标记物（ＨＢＶ－ＤＮＡ０。结果显示,ＨＢｓＡｇ（＋）,ＨＢｅＡｇ（＋）,抗ＨＢｅ（＋）组,ＨＢｓＡｇ（＋）,抗ＨＢｅ（＋）,抗ＨＢｃ（＋）组,ＨＢｓＡｇ（＋）,ＨＢｅＡｇ（－）,抗ＨＢｃ（＋／－）组,抗ＨＢ（＋）,抗ＨＢｓ（＋）组及ＨＢＶ－Ｍ全阴组,ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为１００％,     

传染病学

一、病毒性肝炎近年来核酸疫苗作为一种能有效地刺激机体产生特异性免疫应答的全新免疫方法而备受关注。乙型肝炎病毒核心抗原 (ＨＢｃＡｇ)是细胞毒Ｔ细胞 (ＣＴＬ)识别和攻击被ＨＢＶ感染细胞的主要靶抗原。南京大学第一医院在观察到ＨＢｃＡｇ核酸疫苗具有良好的细胞和体液免疫原性的基础上 ,分别单用ＨＢｃＡｇ核酸疫苗和疫苗加免疫佐剂ＱＳ 2 1对ＢＡＬＢ/Ｃ和Ｃ5 7ＢＬ/ 6小鼠进行免疫[1] 。结果发现ＱＳ 2 1对ＨＢｃＡｇ核酸疫苗所诱导的小鼠特异性抗体及ＣＴＬ应答均有增强作用。为进一步观察该核酸疫苗对非人灵长类动物的免疫原性 …     

聚合酶链反应检测HBV—DNA及临床意义的再认识

采用聚合酶链反应检测１１４例肝病患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：１１４例患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率３５．９６％，其中ＡＨ、ＣＰＨ、ＣＡＨ、ＬＣ组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为４１．６７％、２１．４３％、５３．６６％和２６．３１％；ＨＢｅＡｇ（＋）组３９．０２％，抗ＨＢｃ（＋）组２２．７３％，ＨＢｓＡｇ（＋）、抗ＨＢｃ（＋）组４３．３７％，抗ＨＢｓ（＋）组４１．１８％；ＨＢＶＭ（－）组１１．１１％。结果     

拉米夫定抗HBV效应的临床观察

目的：观察拉米夫定（３ＴＣ）抗ＨＢＶ的启动效应。方法：将４０例慢性乙型肝炎患者分为４组（Ａ～Ｄ）,每组１０例。Ａ组为原干扰素初治无效组（完成疗程,≥４５针）,而此次治疗前ＨＢｅＡｇＣＯＩ≥２０的提示ＨＢＶＣ高复制状态者,以３ＴＣ伍用ＩＦＮα治疗;Ｃ组为初次抗病毒治疗的ＨＢｅＡｇ,ＣＯＩ≥２０的慢乙肝患者,单以３ＴＣ治疗;Ｂ、Ｄ组分别为Ａ、Ｃ组的配对对照组。以ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶ ＤＮＡ的双阴转率与ＡＬＴ复常率作为完全应答的疗效评估指标。结果：Ａ组的即、近及一年持续的完全应答率分别为６０％、５０％与４０％,疗效明显（Ｐ〈０．０５）;而Ｃ组则为３０％、３０％与２０％,未能提供满意疗效（Ｐ〉０．０５）。结论：对ＩＦＮα初治无效的ＨＢＶ高复制的慢乙肝患者,３ＴＣ伍用ＩＦＮα治疗有效,并提示３ＴＣ有明显的抗ＨＢＶ效应。     

精神科住院患者乙肝病毒感染状况调查

目的：探讨精神科住院患者乙肝病毒（ＨＢＶ）感染状况,为防治ＨＢＶ 的院内感染提供参考依据。方法：采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对１２９５ 例住院精神病患者进行血清ＨＢＶ标志物检测。结果：血清ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ 五项ＨＢＶ 标志物阳性率分别为８．７３％ 、３１．０４％ 、２．７％ 、２１．７８％ 、１５．２９％ ,ＨＢＶ 总感染率为４３．６３％ ;５６５ 例阳性标本检出ＨＢＶ感染模式１５ 种,ＨＢｓＡｇ（＋ ）、抗－ＨＢｓ（－ ）、ＨＢｅＡｇ（－ ）、抗－ＨＢｅ（＋ ）、抗－ＨＢｃ（＋ ）（小三阳）占１２．２％ ,ＨＢｓＡｇ（＋ ）、抗－ＨＢｓ（－ ）、ＨＢｅＡｇ（＋ ）、抗－ＨＢｅ（－ ）、抗－ＨＢｃ（＋ ）（大三阳）占５．８４％ 。结论：精神科住院患者中存在ＨＢＶ 传染源,病区应加强监测、隔离、消毒等综合性措施,预防住院患者ＨＢＶ 的院内感染     

地高辛标记寡核苷酸探针对慢性乙肝患者前C基因突变的检测

目的　研究慢性乙肝患者乙肝病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区突变情况。方法　用多聚酶链反应（ＰＣＲ）结合地高辛标记的寡核苷酸探针Ｍ０（野毒株）、Ｍ１（１８９８位变异株）、Ｍ２（１８９８／１９０１位变异株）对１６５例慢性乙肝患者前Ｃ区突变情况进行检测。结果　其中１２例ＨＢｓＡｇ（＋）,ＨＢｅＡｇ（＋）,抗ＨＢｅ（－）,抗ＨＢｃ（＋）患者,ＨＢＶＤＮＡ阳性率为１００％,突变株检出率为８．３％。１５３例ＨＢｓＡｇ（＋）,ＨＢｅＡｇ（－）,抗ＨＢｅ（＋）,抗ＨＢｃ（＋）患者,ＨＢＶＤＮＡ总阳性率为１６．３％,突变株总检出率为８４％。结论　前Ｃ基因突变株主要存在于抗ＨＢｅ阳性的慢性乙肝患者体内,ＰＣＲ结合地高辛标记的寡核苷酸探针杂交技术,操作简便快捷,利于临床推广应用。     

350例病毒性肝炎患者检测HBV—DNA与HBV血清学标志物相…

采用ＰＣＲ技术对３５０例各型病毒性肝炎进行检测，旨在研究血清ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ－Ｍ之间的相关性，以确定ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ的临床意义。并以ＨＢＶ－ＤＮＡ为依据进一步考察ＨＢＶ－Ｍ的临床价值。结果显示：在ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）、抗－ＨＢｃ（＋）病例中ＨＢＶ－ＤＮＡ（＋）者１０２例（９０．２７％），说明ＨＢｅＡｇ基本可反应病毒处于复制状态；因１３７例ＨＢｅＡｇ（－）／抗－ＨＢ     

反义基因转移表达及抗乙型肝炎病毒的作用

目的观察重组逆转录病毒载体－包装细胞系统介导反义基因转移表达和抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的作用。方法将ＨＢＶａｙｗ１４０２－２９０６片段和２８３９－１９８６片段反向插入重组逆转录病毒载体质粒，分别转染ＰＡ３１７包装细胞，分别感染ＮＩＨ３Ｔ３细胞和２．２．１５细胞。结果转导的ＮＩＨ３Ｔ３细胞内有ＨＢＶ反义ＲＮＡ转录表达。ＨＢＶ反义基因重组逆转录病毒感染２．２．１５细胞后第３天，表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）表达量减少，感染后第５天，ＨＢＶ抗原表达抑制率达高峰。ｐｒｅＳ／Ｓ片段反义基因转移后，ＨＢｓＡｇ表达抑制率为７１％，ＨＢｅＡｇ抑制率为２３％；ｐｒｅＣ／Ｃ片段反义基因转移后，ＨＢ－ｓＡｇ表达抑制率为２３％，ＨＢｅＡｇ抑制率为５９％。结论逆转录病毒载体－包装细胞系统能够介导ＨＢＶ反义基因在真核细胞内转移和表达，并对ＨＢＶ复制和表达均有抑制作用。     

乙肝患者血清HBV—DNA与e,c系统相关分析及临床意义

对３７４乙型肝患者血清用地高辛探针法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ；用酶联法检测ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、ＨＢｃＡｇ、抗ＨＢｃ－ＩｇＭ。结果：ＨＢＶ－ＤＮＡ与ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ无明显相关（Ｐ〉０．０５），与ＨＢｃＡｇ、抗ＨＢＣ－ＩｇＭ呈正相关关系（ｒ＝０．１８－０．２，Ｐ〈０．０１）；ＨＢｅＡｇ组与抗ＨＢｅ组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率无明显差异（Ｐ〉０．０５），以ＨＢＶ－ＤＮＡ为标准评价ＨＢｅＡｇ、ＨＢ     

HBeAg阴性的慢性乙型肝炎血清HBV-DNA定量检测及意义

目的　为探讨ＨＢｅＡｇ 阴性ＣＨ－ Ｂ 患者血清ＨＢＶ－ ＤＮＡ 定量检测的意义。方法　应用定量ＰＣＲ法对经肝穿活检确诊的５２ 例ＨＢｅＡｇ 阴性,３３ 例ＨＢｅＡｇ 阳性ＣＨ－ Ｂ 血清进行了ＨＢＶ－ ＤＮＡ 含量检测,并将ＨＢｅＡｇ 阳性与阴性患者ＨＢＶ－ ＤＮＡ 含量、ＨＢｅＡｇ 阴性ＨＢＶ－ ＤＮＡ 高水平与低水平患者肝脏病理损害分别进行了比较。结果　ＨＢＶ－ ＤＮＡ 含量ＨＢｅＡｇ 阳性患者显著高于阴性患者,ＨＢｅＡｇ 阴性ＨＢＶ－ ＤＮＡ 高水平患者肝脏病理损害明显重于低水平患者（ 均Ｐ＜ ００５） 。结论　提示血清ＨＢｅＡｇ 阳性;确为判断ＨＢＶ 复制的良好指标; ＨＢｅＡｇ 阴性ＨＢＶ－ ＤＮＡ 高水平者,尤以重视,及时给予抗病毒等治疗实属必要。     

LAK细胞治疗慢性活动型乙型肝炎的疗效与机理研究

目的观察淋巴因子激活杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）治疗慢性活动型乙型肝炎（ＣＡＨ）的疗效，探讨治疗机理。方法ＬＡＫ细胞治疗４０例患者，治疗前、疗程结束时，分别检测ＨＢＶＭ，ＡＬＴ，Ｔ细胞亚群，Ｂ细胞，ＩＬ－２，ｍＩＬ－２Ｒ，ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性。疗程结束１ａ复查ＨＢＶＭ。对照组４０例。结果ＬＡＫ治疗组疗程结束时，ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ转阴率分别为２２．５％和４０．０％，与对照组相比差异显著（Ｐ均＜０．００１）。疗程结束１ａ复查ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ转阴率分别达４０．０％和６８．６％。治疗后患者ＣＤ＋４细胞数及ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比值，ＩＬ－２水平及ｍＩＬ－２Ｒ表达，ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞活性均较治疗前明显升高（Ｐ均＜０．０１）。尤以ＨＢｅＡｇ转阴者，ＩＬ－２升高更显著（Ｐ均＜０．００５）。结论ＬＡＫ细胞疗法有增强免疫功能、调节免疫紊乱和清除乙肝病毒的效用，但主要不是ＬＡＫ细胞的溶细胞作用。     

胎儿LAK／IL—2治疗长期HBV无症状携带者的临床研究

应用儿脾ＬＡＫ细胞，配合ｒＩＬ－２和ｒＩＦＮ－γ治疗８例长期ＨＢＶ无症状携带者，结果表明：有７５％（６／８）的患者ＨＢｅＡｇ转阴，其中有２５％（２／８）的患者ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ均转阴，治疗后ＣＤ＾＋８Ｔ细胞稍有增高，Ｔａｃ抗原比治疗前和对照组均显著增高，血ｓＩＬ－２Ｒ，ＩＬ－８和ＮＴＦ－α治疗后均显著增高。     

PCR 法检测 HBV DNA 及其与乙肝病毒标志物关系

目的：了解乙型肝炎患者血清中乙肝病毒ＤＮＡ（ＨＢＶＤＮＡ）的检出情况，探讨其与乙肝病毒标志物的关系。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２５６例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，同时用ＥＬＩＳＡ法检测乙肝病毒五项标志物，即ＨＢｓＡｇ、抗 ＨＢｓ、抗 ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ、抗 ＨＢｅ。结果：ＨＢＶＤＮＡ的检出率在肝炎患者各临床类型之间无明显差异，而在乙肝病毒五项标志物不同组合存在状态之间有差异，以伴有ＨＢｅＡｇ（＋）的组合形式即ＨＢｓＡｇ（＋），抗 ＨＢｃ（＋），ＨＢｅＡｇ（＋）者、ＨＢＶＤＮＡ检出率最高（９４３４％），乙肝病毒五项标志物中出现抗体及其五项全阴者仍有ＨＢＶＤＮＡ检出。结论：ＨＢｅＡｇ确是ＨＢＶ活动性复制的重要标志，但仅靠乙肝病毒五项标志物的检测来判定ＨＢＶ的复制是不够准确的，同时用ＰＣＲ法检测ＨＢＶＤＮＡ能更准确反映体内ＨＢＶ复制情况。