季德胜蛇药片体外抗疱疹病毒的药效学研究

季德胜蛇药片是一种传统的中成药，由重楼、地锦草、蟾酥皮等10多味中草药组成，具有清热解毒、活血化瘀、消肿止痛等功效，主治毒蛇、毒虫咬伤。近年来临床研究发现，该药还具有治疗带状疱疹等疾病的功效…1，提示该药具有抗疱疹病毒的作用。我们选择临床上常见、人群中多发的单纯疱疹病毒（herpes simplexvirus，HSV）和水痘带状疱疹病毒（varicella—zoster virus，VZV）作为研究对象，通过细胞内抗病毒实验，研究该药在体外抗HSV和VZV的作用，为这两种病毒感染的治疗提供新的实验依据。     

EB病毒对树突状细胞影响的研究进展

EB病毒（Epstein‐Barr virus ,EBV ）是 Epstein和Barr于1964年首次成功地在建株细胞涂片中用电镜观察到疱疹病毒颗粒,它主要感染人类口咽部的上皮细胞和B淋巴细胞,是多种恶性肿瘤（如鼻咽癌、胃癌、Burkitt 淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤等）的病因之一。树突状细胞（DC ）是目前所知的功能最强的专职抗原递呈细胞（antigen presenting cells , APC）,能高效地摄取、加工处理和递呈抗原。未成熟树突状细胞（immature dentritic cell ,imDC ）具有强大的抗原摄取能力,是机体免疫应答的主要启动者,在机体的免疫应答过程中发挥着极其重要的作用。机体局部imDC的数量与肿瘤的发生发展有密切的关系。在鼻咽部非角化癌中,imDC主要分布于癌巢内;得出结论癌巢内imDC的数量与鼻咽部非角化癌 TNM分期及淋巴结转移有关。而成熟DC能有效激活初始型 T 细胞,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节。     

PCR快速检测疱疹病毒眼部感染(简报)

近年来随着抗生素和激素的广泛使用，眼部疟疾病毒感染的发病率逐渐增高。临床常见的有：单纯疱疹性角膜炎（HSK，已成为单眼致盲的主要眼病之一）、疱疹病毒引起的急性滤泡性结角膜炎、色素膜炎（包括急性视网膜坏死）和视网膜炎等。疤疹病毒主要包括5种：单纯疱疹病毒-1型和2型（HSV－1、HSV－2）、水痘一带状疤疹病毒（VZV）、巨细胞病毒（CMV）和E－B病毒（EBV）。近年国内已有用PCR方法对HSV－1型角膜炎检测的报道，而实际上疮疹病毒眼部感染中除角膜炎的病因以HSV－1感染为主外，其它眼部感染（包括少数的角膜感染）上述5…     

肝癌HSV-TK／GCV自杀基因治疗的研究进展

GCV是一种用于抗病毒感染的药物,HSV‐TK基因表达的胸苷激酶能将GCV磷酸化成GCV‐TP取代DNA合成过程中的鸟嘌呤‐5′‐三磷酸,成为DNA合成的竞争性抑制剂,抑制DNA链延长,通过诱导凋亡机制引起细胞死亡［1］。其诱导细胞凋亡的机制还与激活P53通路、线粒体损伤、细胞毒作用等相关。HSV‐TK／GCV系统介导细胞毒作用中存在不可修复的双链DNA断裂,抑制基因的同源修复能够显著增强 HSV‐TK／GCV系统的细胞毒作用［2］。此外让转染了 HSV‐TK 基因的细胞和 TK 基因阴性细胞共培养,给予 GCV 后不仅HSV‐TK基因阳性细胞死亡,TK基因阴性细胞也发生死亡,这种现象为旁观者效应。旁观者效应的产生机制与细胞间存在物质交换相关,其中最重要的机制是细胞缝隙连接,一些对细胞缝隙连接形成起促进作用的药物如丹参酮ⅡA等可以使旁观者效应明显增强［3］。 HSV‐TK／GCV 系统通过直接杀细胞作用和旁观者效应显现出良好的抗肿瘤作用,被广泛用于各种肿瘤的治疗研究。     

二代测序辅助诊断水痘-带状疱疹病毒性脑膜炎1例

<正>水痘-带状疱疹病毒性脑膜炎是由潜伏在脑神经节、背根神经节或神经轴的自主神经节中的水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)再次激活引起的中枢神经系统(central nervous system,CNS)并发症,如不能及时有效地接受治疗,可能会危及生命^[1]。宏基因组学第二代测序技术(metagenomics next-generation sequencing,mNGS)大大提高了VZV脑膜炎诊断的精准性。现将我院神经内科收治的1例经脑脊液mNGS检测出VZV感染引起的病毒性脑膜炎报道如下。     

免疫低下人群感染水痘-带状疱疹病毒38例的临床特征

  目的  探讨免疫低下人群感染水痘-带状疱疹病毒（varicella-zoster virus,VZV）的临床特征。  方法  收集昆明市第三人民医院2020年1月至2021年12月间,收治的免疫低下人群感染VZV38例为观察组,40例普通人群感染VZV为对照组,对其临床资料进行回顾性的分析,观察2组的心肌酶、肝功能、肾功能等评估脏器功能的指标;以及IL-6、IL-8、CD+4 T淋巴细胞等评估机体免疫的指标。  结果  将2组的肝功能、心肌酶进行对比,观察组GGT/AST/ALT、LDH/CK 均高于对照组,差异有统计学意义（P < 0.05）。将2组的CREA进行对比: 2组人群CREA,差异无统计学意义（P > 0.05）。2组的细胞因子IL-6、IL-8对比;观察组IL-6、IL-8均高于对照组,差异有统计学意义（P < 0.05）。2组CD4＋T淋巴细胞数对比,观察组CD4＋T淋巴细胞数低于对照组,差异有统计学意义（P < 0.05）。  结论  免疫低下人群感染VZV,由于免疫被抑制,更容易诱发细胞因子风暴,病情更重,常易合并器官功能障碍甚至衰竭,病情进展快,若能早期识别,积极救治,能改善其预后。     

干细胞移植后内脏水痘-带状疱疹病毒感染：引起严重腹痛的可能原因

水痘-带状疱疹病毒（VZV）的激活是干细胞移植（SCT）术后的常见并发症。当在腹腔内发生VZV感染时，这种感染就是致命性的。内脏的VZV感染不常见，在SCT术后患也很难被诊断。从腹痛发作开始至皮疹发生这一间隔期会延误特异性抗病毒治疗的最初效应，并且症状往往容易被误诊为外科疾病或移植物抗宿主疾病。作报道了1例53岁男性患，因多发性骨髓瘤进行了自体干细胞移植，在术后71个月发生了内脏VZV感染，引起肝炎、黑便及不完全性肠梗阻。     

动脉粥样硬化性进展性卒中患者血清疱疹病毒IgM抗体的检测及意义

目的：探讨动脉粥样硬化性进展性卒中与人类疱疹病毒感染之间的关系。方法：应用金标免疫斑点法检测人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV)，单纯疱疹病毒（herpes simplex virus HSV)1例和2型IgM抗体，同时与对照组比较，结果：动脉粥样硬化性进展性卒中组（herpes simplex virus,HSV)1型和2型IgM抗体，同时与对照组比较。结果：动脉粥样硬化性进展性卒中组HCMV和HSV IgM抗体总阳性率为91．07％（51／56），对照组为29．33％（61／208），有显著性差异（P＜0．01），其中HCMV和HSV－1 IgM抗体阳性率分别为51．79％（29／56）和23．21％（13／56），对照组分别为12．50％（26／208）和5．77％（12／208），均有显著性差异（P均＜0．01），HSV－2 IgM阳性率为16．07％（9／56），对照组为11．06％（23／208），两者无显著性差异（P＞0．05）。结论：HCMV和HSV－1感染与动脉粥样硬化性进展性卒中的发病及病情进展有关。     

疑似CMV和HSV感染患儿的血清学检测及其临床意义

巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）和单纯疱疹病毒（herpes simplex virus，HSV）是TORCH这组致畸微生物中的两种重要病原体。这两种病原体均可引起胎儿流产、早产、宫内发育迟滞、畸形、死胎和新生儿死亡等，对优生优育与人口素质构成极大威胁。本文采用酶联免疫吸附法（ELISA）对1986例疑似CMV和HSV感染患儿进行血清学检测，并分析感染患儿的主要临床表现，现总结报道如下。     

单纯疱疹病毒脑炎的早期诊断与治疗

单纯疱疹病毒脑炎（herpes simplex virus encephalitis,HSE）是一种散发性脑炎,发病无明显季节性,亦无性别差异,主要见于6个月以上儿童和成人。病原体为单纯疱疹病毒（herpes simplex virus,HSV）,是疱疹病毒科中的一种嗜神经性的双链DNA包膜病毒,当累及中枢神经系统后常侵犯大脑颞叶、额叶及边缘系统,导致脑组织出血性坏死及（或）变态反应性脑损害。根据HSV包膜糖蛋白抗原性的不同分为HSV-1和HSV-2。成人HSE多由HSV-1复发性感染所致,被激活的病毒沿三又神经或嗅神经逆行向内到达邻近脑基底部的脑组织,病变多局限于颞叶和额叶;HSV-2可引发生殖系疾病和新生儿脑炎。     

唾液中差异性蛋白在2型糖尿病早期诊断中的临床研究

目的：探讨唾液中的胱抑素C（Cys‐C）、α2‐巨球蛋白（α2‐MG）、α1‐抗胰蛋白酶（A1AT）及转甲状腺素蛋白（TTR）在2型糖尿病早期诊断中的临床意义及运用。方法选取体检正常人群38例（正常组）,空腹血糖升高患者23例（IFG组）,糖耐量患者31例（IGT组）及2型糖尿病患者86例（2‐DM组）,通过免疫印迹检测4组人群唾液中Cys‐C、α2‐MG、A1AT 及TTR蛋白的表达并进行半定量分析。同时通过ELISA方法对唾液及血液中Cys‐C、α2‐MG、A1AT及TTR进行定量分析后研究其相关性。同时,根据 ELISA 定量结果对Cys‐C、α2‐MG、A1AT 及TTR绘制ROC曲线,确定各指标检测的特异性和灵敏度。结果免疫印迹条带进行半定量及ELISA定量检测均表明2‐DM 组患者唾液中 Cys‐C、α2‐MG、A1AT 明显上调,而 TTR蛋白无明显变化。唾液及血液中 Cys‐C、α2‐MG、A1AT及 TTR呈正相关,且唾液中Cys‐C、α2‐MG与血液中血糖浓度呈正相关。ROC曲线表明唾液中Cys‐C、α2‐MG可作为2‐DM早期诊断标志物。结论通过唾液中Cys‐C、α2‐MG的检测,可在2‐DM 早期进行筛查,并在糖尿病早期予以干预治疗,具有潜在的临床运用价值。     

H2型松弛素促进人血管平滑肌细胞迁移的作用及机制

目的：探讨H2型松弛素（Relaxin‐2）对血管平滑肌细胞（VSMCs）迁移的作用及分子机制。方法采用划痕实验和Transwell实验检测Relaxin‐2对VSMCs的迁移作用;采用蛋白质印迹法检测其对细胞信号蛋白丝氨酸苏氨酸蛋白激酶（Akt）、细胞外信号调节激酶（ERK）、核因子‐κB（NF‐κB） p65的影响。结果 Relaxin‐2可剂量依赖性促进VSMCs的迁移,应用NF‐κB抑制剂BAY 11‐7082可阻断Relaxin‐2诱导的基质金属蛋白酶‐9（MMP‐9）和基质金属蛋白酶‐2（MMP‐2）的表达,磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）抑制剂LY294002和ERK抑制剂 U0126预处理可以降低Relaxin‐2引起的NF‐κB p65的激活。结论 Relaxin‐2可能通过活化PI3K／Akt和ERK信号通路激活NF‐κB p65,进而促进MMP‐9和MMP‐2的表达,从而诱导VSMCs迁移效应。     

双歧杆菌脂磷壁酸对深部白色念珠菌感染小鼠细胞免疫的影响

目的：观察双歧杆菌脂磷壁酸（BLTA）对深部白色念珠菌感染小鼠细胞免疫功能的影响。方法通过尾静脉注射白色念珠菌建立免疫低下小鼠深部白色念珠菌感染模型,观察BLTA处理对小鼠胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖活性、NK细胞杀伤活性及血清细胞因子水平的影响。结果免疫低下小鼠深部感染白色念珠菌后,小鼠胸腺指数、脾脏指数和脾脏淋巴细胞增殖活性轻度下降（P＞0．05）,NK细胞杀伤活性明显下降（P＜0．05）,IL‐2、IL‐4和INF‐γ水平轻微升高（P＞0．05）,IL‐10水平明显升高（P＜0．05）;BLTA处理后,小鼠胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞增殖活性和NK细胞杀伤活性明显升高（P＜0．01）,血清IL‐2和IN F‐γ水平明显升高（ P＜0．05）,IL‐4变化不大,IL‐10明显降低（ P＜0．01）。结论 BL T A可改善免疫低下小鼠的免疫功能状态,恢复甚至增强深部感染念珠菌后受到抑制的细胞免疫应答。     

中西医结合治疗带状疱疹性眼病

带状疱疹性眼病（Herpes zoster ophthalmicus，HZO）是三叉神经节受水痘带状疱疹病毒（Varicella—zoster virus，VZV）感染所致。HZO可引起角膜炎、虹膜睫状体炎、继发性青光眼等，造成不同程度的视觉障碍。笔者于2000～2006年间采用中西医结合疗法治疗HZO34例，疗效满意，现报道如下。     

单纯疱疹病毒感染诊断方法及标本选择的探讨

目的目的探讨单纯疱疹病毒（HSV）感染诊断方法及标本的选择对诊断结果的意义。方法选择117例疑似HSV感染的皮肤科门诊患者或神经内科脑炎脑膜炎患者血清，其中53例有明显疱疹症状者同时取疱液标本，78例脑炎脑膜炎患者同时采集脑脊液标本。应用ELISA法、免疫印迹法检测血清、脑脊液中HSV—IgM抗体，应用间接免疫荧光法（IIF）检测脑脊液、疱疹液HSV抗原。结果血清、脑脊液标本ELISA法和免疫印迹法检测HSV—IgM抗体阳性率分别为70．94％、6．41％和59．83％、3．85％。脑脊液、疱疹液TIF法检测HSV抗原阳性率分别是15．38％、67．93％。结论ELISA法与免疫印迹法检测HSV—IgM抗体阳性率无显著性差异（γ=0．017，P〉0．5）；脑脊液标本供检测HSV抗原与HSVIgM抗体的阳性率差异显著（γ=13．224，P〈0．05．）；对复发感染患者采用疱疹液抗原检测相对于采用血清检测抗体对诊断HSV感染更具有临床意义。在临床上，对不同病症病程的HSV感染，选择相应适宜的诊断方法及标本种类可取得更准确的检测结果。     

口腔粘膜病变与AIDS

自1981年首例艾滋病（AIDS）发现以来，学者们就发现几乎所有AIDS患者口腔粘膜均有不同类型和不同程度的病变做为该病的主要临床表现。综合国内外学者的报道如下。1“毛刷状”口腔粘膜白斑Greanpan氏首先在男性同性恋的性伴中的舌边沿粘膜出现条纹状白斑，继而被确诊为AIDS；此后，1981一10～1985－6在旧金山和加里福尼亚洲的123例口腔粘膜白斑中有13人被确诊为AIDS，有用人血清间接免疫萤光试验阳性。2口腔疮疹；口腔疮疹是HSV—I型病毒所引起．而HSV－2则引起生殖器疤疹。AIDS免疫功能破坏．郎罕氏细胞破坏。HSV侵入。初起粘…     

过敏性哮喘患者外周血细胞因子水平变化及临床意义

目的：探讨细胞因子IL‐17、IL‐22和IL‐10在过敏性哮喘患者外周血中的变化及临床意义。方法选取过敏性哮喘患者40例（哮喘组）和健康体检者30例（对照组）,采用ELISA法检测外周血培养上清中IL‐17、IL‐22和IL‐10的表达;电化学发光免疫分析法检测血清中Ig E的水平,全自动血液分析仪检测全血嗜酸性粒细胞比率;IL‐17、IL‐22和IL‐10与哮喘严重程度进行Pearson相关性分析。结果哮喘组血清中IgE的水平及全血嗜酸性粒细胞比率高于对照组（P＜0．05）;哮喘组外周血IL‐17、IL‐22水平高于对照组,而IL‐10水平低于对照组（P＜0．05）;哮喘严重程度与IL‐17、IL‐22水平呈正相关（P＜0．01）,而与IL‐10水平呈负相关（ P＜0．05）。结论 IL‐17、IL‐22和IL‐10在过敏性哮喘的发病机制中起重要作用,动态监测其变化有利于临床诊断及治疗。     

水通道蛋白-5与多药耐药因子在结肠癌组织中的表达及其关系

目的：检测不同分化程度结肠癌组织中水通道蛋白（AQP）‐5与耐药因子的表达及相互关系。方法对45例结肠癌组织、36例癌旁组织采用实时荧光定量PCR（RT‐PCR）、蛋白免疫印迹法（Westernblot）、免疫组织化学染色检测AQP‐5及耐药因子P‐糖蛋白（P‐gp）、谷胱甘肽转移酶（GST‐π）、拓扑异构酶（TopoⅡ）、胸苷酸的限速酶（TS）的表达情况。结果免疫组织化学染色结果表明,AQP‐5主要分布于细胞膜和细胞质;RT‐PCR和Westernblot检测结果显示,结肠癌组织中AQP‐5的表达显著高于癌旁对照组（P＜0．05）,且表达量随分化程度降低而升高（P＜0．05）。免疫组织化学染色发现,P‐gp主要分布于细胞膜和细胞质,GST‐π主要分布于细胞核和细胞质,TopoⅡ主要分布于细胞核,TS主要分布于细胞质。RT‐PCR和Westernblot检测结果显示,结肠癌组织中耐药因子表达量显著高于癌旁组织（P＜0．05）,其中P‐gp、GST‐π、TopoⅡ随着分化程度降低表达增加,TS在不同分化程度结肠癌组织中表达变化不明显（P＞0．05）。AQP‐5与P‐gp、GST‐π、TopoⅡ的表达呈正相关（P＜0．05）,与TS表达无相关性（P＞0．05）。结论AQP‐5与耐药因子P‐gp、GST‐π、TopoⅡ、TS蛋白在结肠癌组织中高度表达,可能促进了结肠癌的转移和进展。     

TALE-TFs构建方法的建立及优化

目的：在传统方案的基础上建立一种经济有效且易于操作的类转录激活效应子转录因子（TALE‐TFs）的构建和功能检测方案。方法采用基于PCR的Golden gate克隆法分别尝试构建类转录激活效应物（TALEs）的六聚体、五聚体、四聚体和三聚体,比较构建结果,选择最优效果方案进行TALE‐TFs的构建。采用片段置换反应（FSR）构建了含有 TALE‐TFs结合片段的RFP质粒pminCMV ,并与TALE‐TFs进行共转染,观察红色荧光验证TALE‐TFs的转录活性。结果 TALEs中所含的串联重复模块越少,获得的构建产物越多。共转染时,TALE‐TFs使得pminCMV成功启动表达。结论该研究为不同条件下实验方案的选择提供了依据,并利用含有TALE‐TF结合片段和红色荧光的质粒建立了快捷直观的转录活性验证方法。     

带状疱疹并发水痘一例

水痘(Varicella)及带状疱疹(Herpes Zoster)是由水痘-带状疱疹病毒(Varicella-zoster virus,VZV)所引起的两种不同表现的疾病。原发感染为水痘,潜伏在感觉神经节的VZV再激活引起带状疱疹。10%~30%感染VZV的患者会患带状疱疹[1]。水痘常发生于无免疫力的儿童,带状疱疹多见于成人,但在患带状疱疹期间并发水痘较罕见。现将笔者诊治的1例带状疱