Fas、FasL在特发性血小板减少性紫癜患者T细胞亚群表达的研究

目的探讨Fas、FasL在特发性血小板减少性紫癜（rrP）患者T细胞亚群及血小板中的表达状况及其在ITP发病机制中的作用。方法收集ITP患者及健康人群外周抗凝静脉血,分离纯化得T细胞和血小板。以PE标记的anti-CRTH2mAb和cy5标记的anti-CD4、CD8mAb及FTTC标记的anti-Fas、FasL mAb做三色流式细胞术,分析ITP患者Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas、FasL表达的变化;以FITC标记的anti-Fas、FasL mAb作单色流式细胞术,分析ITP患者血小板Fas、FasL表达的变化。结果与健康人群相比,ITP患者外周血Th、Th1、Th2细胞百分率均明显下降（P〈0．05）,Tc、Tc1、Tc2细胞百分率均无明显变化（P〉0．05）;Th、Th1、Th2及Tc、Tc1、Tc2细胞Fas、FasL表达均明显升高（P〈0．05）;同时,111P患者血小板Fas的表达明显升高（P〈0．05）,而FasL的表达无明显变化（P〉0．05）。结论ITP患者存在免疫功能失调,T细胞亚群及血小板Fas、FasL表达异常可能与ITP患者免疫病理机制有关。     

急性ITP患者T细胞亚群及血小板凋亡相关蛋白的检测

目的 检测凋亡相关蛋白Fas、FasL在急性特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿T细胞亚群及血小板中的表达，分析其在ITP发病机制中的作用。方法 收集ITP患儿及健康儿童外周抗凝静脉血，分离纯化得T细胞和血小板。以PE标记的CD30 mAb和Cy5标记的CD4、CD8 mAb及FITC标记的Fas、FasL mAb作三色流式细胞术，分析ITP患儿Th／Tc、Thl／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas、FasL表达的变化；以FITC标记的Fas、FasL mAb作单色流武细胞术，分析ITP患儿血小板Fas、FasL表达的变化。结果 与健康儿童相比，ITP患儿Th、Th1、Th2及Tc、Tc1、Tc2细胞Fas、FasL表达均显著性升高（P〈O．05）；同时，111P患儿血小板Fas的表达显著性升高（P〈0．05）而FasL的表达无明显变化（P〉0.05）。结论 ITP患儿存在免疫功能失调，T细胞亚群及血小板Fas、FasL表达异常可能与ITP免疫病理机制有关。     

特发性血小板减少性紫癜Fas—FasL表达与中医辨证分型的关系

目的：探讨特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血T淋巴细胞亚群（简称T亚群）表面凋亡调控因子Fas／FasL表达及其与中医辨证分型的关系．方法：按中医辨证分型将80例ITP患者分为4组,每组20例．以流式细胞术检测ITP患者外周血T亚群表面凋亡调控因子Fas／FasL的表达率并与对照组（正常健康志愿者20例）相同指标进行比较．结果：CD4^＋及CD8^＋外周血T亚群表面凋亡调控因子Fas／Fasl表达率ITP瘀血阻络组、血热妄行组治疗前与对照组相比较显著增加（P〈0．05）,血热妄行组治疗后显著下降,瘀血阻络组略有上升,但差异无显著性．CD4^＋及CD8^＋外周血T亚群表面凋亡调控因子Fas／Fasl表达率ITP阴虚火旺组、气虚不摄组治疗前与对照组相比较有所增加,治疗后略有上升,但差异均无显著性．结论：ITP患者中医辨证分型与Fas／FasL表达存在相关性．ITP患者较高的T亚群表面凋亡调控因子Fas,Fasl值,提示好的预后．     

Fas-FasL信号途径在ITP患者血小板凋亡中的作用研究

目的探讨Fas-FasL信号途径在原发性免疫性血小板减少症（ITP）患者血小板异常凋亡中的变化及可能的作用机制。方法选取ITP患者32例为ITP组,另择行健康体检者32例为正常对照组。采用流式细胞术检测ITP组患者（用药治疗前）与正常对照组受检者外周血PLT表面Fas的表达,调节性T细胞（Treg细胞）比率、表面Fas配体（FasL）的表达,并进行比较,分析ITP组患者以上指标的相关性。结果ITP组患者CD4+FasL+细胞比率、CD41+Fas+血小板比率均高于正常对照组受检者（均P＜0.05）,PTL与Treg细胞比率均低于正常对照组受检者（均P＜0.05）。ITP组患者PLT与CD4+FasL+细胞比率、CD41+Fas+血小板比率均呈负相关（均P＜0.05）,与Treg细胞比率呈正相关（P＜0.05）,Treg细胞比率与CD41+Fas+血小板比率呈负相关（P＜0.05）。结论血小板高表达Fas可与激活的T细胞表面FasL结合,T细胞可通过Fas-FasL途径直接介导血小板凋亡。     

慢性特发性血小板减少性紫癜患者Ⅰ类和Ⅱ类T细胞特点的研究

目的探讨慢性特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者Ⅰ类和Ⅱ类T细胞的特点。方法采取30例慢性ITP患者外周血及8例慢性ITP患者和6例遗传性球形红细胞增多症患者的脾细胞（接受脾切除的患者），应用流式细胞仪技术检测辅助T细胞（Th）CD4^＋’和细胞毒性T细胞（Tc1）CD8^＋胞质内细胞因子干扰素γ（IFN-γ）／白细胞介素（IL）-4的比例；应用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测T-bet和GATA-3 mRNA的表达水平。结果疾病活动期患者外周血Th1／Th2和Tc1／Tc2的比例（25．62和30．23）显著高于正常对照组（8．29和12．58，均P〈0．01）；缓解期患者外周血Th1／Th2和Tc1／T02的比例（9．86和10．10）与正常对照组相比，差异无统计学意义。ITP患者脾细胞Th1／Th2的比例（41．46）显著高于对照组（16．30，P〈0．01）；Tc1／T02的比例（35．80）高于对照组（16．88），但差异无统计学意义。疾病活动期患者外周血以及ITP患者脾细胞GATA-3mRNA水平明显低于对照组（是对照组的0．20和0．34倍，均P〈0．05），缓解期患者与对照组相比，差异无统计学意义（是对照组的0．97倍）。ITP患者外周血及脾细胞T-bet mRNA的表达水平与对照组相比，差异无统计学意义（是对照组的1．17和1．04倍）。结论ITP是Ⅰ类T细胞占优势的自身免疫性疾病。促进Ⅰ类T细胞模式向Ⅱ类T细胞转化可能为ITP患者提供一种潜在的免疫治疗方式。     

非小细胞肺癌Fas/FasL蛋白的表达及临床意义

目的：研究Fas／FasL蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）的表达及其临床意义。方法：应用链霉菌抗生物素蛋白2过氧化物酶（SP）法染色技术测定65例NSCLC组织标本Fas／FasL蛋白的表达水平,并分析其与病理类型、区域淋巴结转移、病理分级及TNM分期之间的关系。结果：NSCLC组织中Fas蛋白表达率显著低于正常肺组织（46．15％vs80．00％,P〈0．05）,而FasL蛋白表达率显著高于正常肺组织（49．23％vs13．33％,P〈0．05）;FasL的表达与肺癌区域淋巴结转移有关,但Fas/FasL与肿瘤病理类型、病理分级及TNM分期无关。结论：Fas／FasL蛋白可能参与了非小细胞肺癌细胞凋亡的调节;检测FasL蛋白的表达有可能为临床判断NSCLC区域淋巴结转移、病变的发展以及评估预后提供依据。     

镜检大肠癌黏膜Fas,FasL的表达与肿瘤浸润转移

目的 探讨Fas和FasL在镜检大肠癌黏膜的表达与肿瘤浸润转移的关系。方法 免疫组化（SP)法分别对51例大肠癌和42例正常大肠黏膜的镜检组织进行了Fas,FasL表达的检测。结果 42例正常大肠黏膜为Fas,FasL阳性,阳性率100％。大肠癌黏膜Fas,FasL阳性率分别为35％（18／51）和39％（20／51）。大肠癌黏膜Fas,FasL表达阳性率明显低于正常大肠黏膜（P＜0．01）。大肠癌黏膜Fas,FasL表达与局部浸润深度、淋巴结转移无关（P＞0．05）。6例肝转移者,其镜检原发灶黏膜Fas均为阴性。镜检癌黏膜同时表达Fas,FasL阳性率为12％（6／51）,Fas(-)FasL( )癌黏膜比Fas( )FasL(-)更易侵及浆膜或浆膜外（P＜0．05）。结论 Fas,FasL的表达异常与大肠癌的发生有关。Fas抗原缺失可能与大肠癌肝转移有关。     

Fas和FasL在鼻息肉组织中的表达研究

目的探讨Fas和FasL因子在鼻息肉发病机制中的作用。方法应用免疫组化SP法检测24例鼻息肉组织和10例下鼻甲组织中上皮细胞、腺上皮细胞、炎性细胞Fas和FasL因子的表达，并作对比分析。结果（1）Fas和FasL因子在下鼻甲组织均有表达。（2）鼻息肉上皮细胞、腺上皮细胞中Fas阳性表达显著低于下鼻甲组织（均P〈0．01），FasL阳性表达显著大于下鼻甲组织（均P〈0．01），且FasL表达显著高于Fas；鼻息肉炎性细胞中Fas和FasL阳性表达均显著高于下鼻甲组织（均P〈0．01），而FasL表达低于Fas。结论（1）Fas／FasL系统可能参与了正常鼻黏膜的细胞更新和自稳。（2）鼻息肉上皮细胞、腺上皮细胞均存在着Fas的表达下调和FasL的表达上调，致使上皮细胞逃避了Fas／FasL系统介导的细胞凋亡而过度增殖：Fas／FasL系统在鼻息肉炎性细胞凋亡抑制中具有重要作用。     

激素治疗前后ITP患者血清CXCL10与MBL表达水平的变化研究

目的：研究原发免疫性血小板减少症（IT P ）患者血清中CXC趋化因子配体10（CXCL10）、甘露糖结合凝集素（MBL）的表达水平,探讨其在ITP发病中的临床意义。方法采用ELISA定量检测45例ITP患者激素治疗前后和20例健康者（对照组）血清CXCL10、MBL的水平。结果激素治疗前 ITP患者血清CXCL10表达水平明显高于对照组（t＝6．576,P＜0．05）,MBL水平明显低于对照组（t＝4．196,P＜0．05）;治疗后二者与治疗前比较差异有统计学意义（t＝7．399、7．714,P＜0．05）。激素治疗有效组CXCL10的表达水平与对照组比较差异无统计学意义（q＝0．871,P＞0．05）,而无效组的表达水平仍明显高于对照组和有效组（q＝8．933、8．914,P＜0．05）;激素治疗有效组MBL的表达水平与对照组比较差异无统计学意义（q＝0．966,P＞0．05）,而无效组的表达水平仍明显低于对照组和有效组（q＝3．342、2．965,P＜0．05）。结论 ITP患者不同时期血清中CXCL10、MBL的表达水平不同,提示其可能在ITP的发病及治疗过程中发挥一定的作用,有望在ITP的病情监测、预后判断及治疗方案的选择等方面提供依据。     

儿童特发性血小板减少性紫癜外周血中CD4、CD28、sFas和sFasL表达的临床研究

目的探讨T淋巴细胞表面分子CD4、CD28和凋亡蛋白sFas和sFasL在急慢性特发性血小板减少性紫癜（ITP）发病中的变化。方法用流式细胞术分别检测25例急性ITP和20例慢性ITP患儿及20例正常对照儿童外周血CD4＋ 、CD28＋、CD4＋ CD28＋的表达;用酶联免疫夹心法（ELISA）测定急性ITP和慢性ITP患儿及正常儿童外周血sFas和sFasL的水平。结果①ITP患儿外周血中CD4＋、CD28＋及CD4CD28＋表达均低于正常对照组（P〈0．05）,aITP和cITP组间没有显著差异（P〉0．05）;CD4＋细胞中CD三表达与正常对照相比无显著差异（P〉0．05）;②ITP患儿外周血淋巴细胞中的CD2s表达率与CD4表达率呈正相关（P〈0．05）;③aITP和cITP组患儿血清中的sFas和sFasL表达水平均明显高于对照组（P〈0．05）,且cITP组高于aITP组（P〈0．05）;3组之间有显著差异（P〈0．05）;④sFas和sFasL的表达水平呈正相关（r=0．660,P〈0．05）,CD28＋表达率和sFas水平没有明显相关性（P〉0．05）。结论①CD4＋T细胞分子和协同刺激分子CD28＋参与了儿童ITP的发病过程;且CD4＋分子减少并非由于协同刺激CD28分子表达降低所致,CD4T淋巴细胞无协同刺激分子CD28表达缺陷;②sFas和sFasL表达异常参与了儿童aITP和cITP的免疫病理过程,监测其变化有助于ITP的分型和预后。     

淫羊藿苷通过增强 Fas-FasL 表达活性诱导裸鼠食管癌细胞凋亡

目的：探讨淫羊藿苷（icariin ,ICA ）对裸鼠体内食管癌移植瘤生长的抑制作用,并初步探讨其机制。方法应用M T T方法和Giemsa染色法检测和观察ICA对食管癌细胞Eca‐109和 T E‐13的体外抑制作用。构建裸鼠的食管癌细胞移植性肿瘤模型,分为3组,每组6只。实验组每只裸鼠腹腔注射50 mg／kg ICA ,对照组注射相同体积的生理盐水,阳性对照组腹腔注射2 mg／kg顺铂,每2天1次,共14 d ,每3天测量肿瘤体积,实验结束后称量肿瘤质量;TUNEL染色法观察各组裸鼠肿瘤组织的组织形态变化和凋亡情况;免疫组织化学法对肿瘤组织中 Fas和 FasL蛋白的表达变化进行分析。ELISA 法检测外周血中FasL和IFN‐γ的水平。结果 ICA体外对食管癌细胞Eca‐109和T E‐13的增殖无明显的抑制作用。实验组和阳性对照组裸鼠肿瘤平均体积和质量与对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0．05）。TUNEL染色法结果显示,实验组裸鼠的肿瘤组织发生了明显的凋亡,凋亡细胞的数量较对照组明显增加（P＜0．05）。免疫组织化学实验结果表明,与对照组相比,实验组裸鼠肿瘤组织中Fas、FasL的表达明显增加（P＜0．05）。ELISA实验结果显示,实验组裸鼠外周血中FasL和IFN‐γ的水平较对照组明显增高（P＜0．05）。结论 ICA体外对食管癌细胞无明显增殖抑制作用,但是通过Fas的表达、FasL和IFN‐γ的分泌在体内诱导食管癌细胞凋亡,从而发挥抗食管癌的作用。     

FasL及FasLASODN在舌鳞癌细胞免疫逃逸中的作用

目的：研究Fas配体（FasL）及FasL反义寡脱氧核苷酸（ASODN）在舌鳞癌细胞免疫逃逸中的作用。方法对人舌鳞癌细胞中FasL表达及功能进行检测,设计合成特异FasLASODN,转染舌鳞癌细胞,封闭舌鳞癌细胞的FasL表达。通过流式细胞术、逆转录聚合酶链反应（RT‐PCR）和四唑盐（MTT）等方法,观察基因‐蛋白‐细胞效应。结果通过RT‐PCR检测提示在脂质体的量一定的情况下,在一定范围内,ASO的浓度越高,转染效率越高。MTT／FCM结果显示ASO对SCC‐9细胞的增殖有明显的抑制作用（P＜0．05）。FCM对细胞凋亡的检测结果显示反义链组与正义链组、空白对照组及脂质体组相比,总凋亡率有明显差异（P＜0．05）。结论Fas／FasL途径是口腔鳞癌细胞免疫逃逸的重要机制之一,可作为免疫治疗的新靶点。     

环氧化酶-2、Fas、FasL表达与胃癌细胞凋亡的关系

目的　研究环氧化酶 - 2 (Cox- 2 )、Fas与 Fas L在胃癌中的表达及与细胞凋亡之间的关系。　方法　采用 SP免疫组织化学法检测胃癌及癌旁组织各 6 0例标本 Cox- 2、Fas与 Fas L的表达 ,用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的 d UTP缺口末端标记法 (TUNEL )检测胃癌及癌旁组织的凋亡率。　结果　胃癌组织的 Cox- 2及 Fas L的表达明显高于癌旁组织 (P<0 .0 5 ) ,而 Fas的表达低于癌旁组织 (P<0 .0 5 )。胃癌组织的凋亡率明显低于癌旁组织 (P<0 .0 5 )。　结论　 Cox- 2、Fas及 Fas L的异常表达与胃癌细胞的凋亡有关     

穴位敷贴对哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞凋亡及其调控基因的影响

目的探讨穴位敷贴治疗哮喘的机理。方法将40只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、穴位敷贴治疗组、地塞米松治疗组,每组10只。处理结束后采用TUNEL法检测支气管肺泡组织EOS凋亡;免疫组化法检测凋亡相关基因Fas、Fas配体(FasL)、bcl-2表达。结果模型组豚鼠支气管肺组织EOS凋亡指数及Fas、FasL、bcl-2表达与正常对照组比较差异均无显著性。穴位敷贴组和地塞米松组EOS凋亡指数及Fas、FasL表达明显高于模型组(P<0.01);地塞米松组和穴位敷贴组之间有显著性差异,前者明显高于后者(P<0.01)。穴位敷贴组bcl-2表达低于模型组(P<0·05);地塞米松组和模型组之间差异无显著性。结论穴位敷贴可以上调支气管肺泡组织促凋亡基因Fas及其配体FasL表达、下调凋亡抑制基因bcl-2表达、促进哮喘主要炎性细胞EOS凋亡。这可能是其治疗哮喘的作用机理之一。     

特应性皮炎Th1／Th2／Th17平衡的研究

目的：探讨特应性皮炎（AD ）外周血清T h1／T h2／T h17平衡的变化规律及相关细胞因子的变化规律,以进一步探讨AD发病的免疫机制。方法采用流式荧光技术测定47例AD患者（AD组）和40例健康自愿者（对照组）外周血清中的γ‐干扰素（IFN‐γ）、白细胞介素（IL ）‐4、IL‐17、IL‐21、IL‐23水平并进行统计分析,从而分析T h1／T h2／T h17／T reg平衡在AD中变化规律。结果在AD患者血清中,IL‐4水平较对照组升高（ P＜0．05）,IL‐17、IL‐23的水平显著高于对照组（ P＜0．05）;IFN‐γ／IL‐4和IFN‐γ／IL‐17较对照组明显降低（P＜0．01）;IL‐17与AD严重程度（SCORAD）评分呈正相关（P＜0．05）。结论在 AD病程中T h1／T h2、T h1／T h17降低,T h1／T h2／T h17平衡的漂移可能是AD发病的重要机制。     

肺癌组织Fas和FasL表达及临床意义

目的：研究肺癌组织中Fas和FasL表达及临床意义。方法：采用免疫组化SP法对46例肺癌组织和30例癌旁肺组织进行Fas和FasL表达检测。结果：在肺癌组织中，Fas表达下调，FasL表达明显上调。Fas在鳞癌、腺癌和小细胞肺癌中表达水平显低于癌旁肺组织(P＜0．01)，且与肺癌的病理分级、临床分期及转移呈负相关(P＜0．05)。分化程度低、已发生转移的肺癌Fas表达水平显下调(P＜0．05)。而FasL在鳞癌、腺癌和小细胞肺癌中表达水平显高于癌旁肺组织(P＜0．05)，且与肺癌的病理分级、临床分期及转移呈正相关(P＜0．05)。分化程度低、临床分期晚及已发生转移的肺癌FasL表达水平明显上调(P＜0．05)。Fas和FasL表达水平间呈负相关(P＜0．05)。结论：肿瘤通过下调Fas、上调FasL这种表达异常在肺癌发生、发展及转移过程中可能起协同作用。Fas和FasL可能成为早期诊断肺癌的标志物之一，联合检测对判断肺癌恶性程度及预测预后有较大参考价值。     

Fas及FasL在胃癌组织非典型增生组织和正常胃粘膜中表达研究

目的:探讨细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL在胃癌发生、发展中的作用。方法:应用免疫组化(S-P法)检测Fas、FasL蛋白在胃癌组织、癌旁非典型增生组织中的表达,并应用缺口原位末端标记(TUNEL染色)检测上述组织中的细胞凋亡指数(AI)。结果:Fas、FasL在胃癌及非典型增生组织中的表达显著高于正常胃粘膜(P<0.01),正常胃粘膜组织的凋亡指数显著低于非典型增生组织(P<0.01)和胃癌组织(P<0.05)。结论:Fas、FasL的异常表达可能是胃粘膜癌变过程中细胞凋亡抑制的重要机制之一,并与胃癌的免疫逃逸有关。