4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的表达

目的:观察大鼠实验性舌癌癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(GST-P)的表达特点.方法:6周龄雄性SD大鼠42只,随机分为2组.实验组动物(n=30)的饮水中加入体积分数为0.001%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)水溶液7 mg/(kg·d).对照组(n=12)则仅给予饮用水.实验第2周、4周、8周、12周、16周和26周末,处死大鼠,其中实验组各5只,对照组各2只.处死动物后,从会厌部至口底前缘整体分离舌体,观察其大体形态,常规组织处理,免疫组化法检测舌黏膜组织内GST-P.结果:对照组大鼠未出现任何舌黏膜病变,舌体标本均呈GST-P阴性.实验第8周末,实验组大鼠舌黏膜开始出现上皮异常增殖,实验第16周末即有1只大鼠发生舌癌,26周实验组大鼠均出现舌癌.2周时实验组大鼠舌黏膜内开始出现GST-P阳性细胞,随着时间的推移,GST-P阳性灶数目和大小逐渐增加.结论:GST-P可能与舌癌的发生有关.GST-P阳性反应早于大鼠舌黏膜的形态学改变,可作为反映癌前细胞代谢特点的良好标记.     

4NQO诱导大鼠舌黏膜癌变过程中E-cad及PCNA的表达研究

目的 研究上皮钙依赖黏附蛋白(E-cad)和增殖细胞核抗原(PCNA)在大鼠口腔黏膜癌变过程中的表达变化,探讨其相关性.方法 采用4硝基喹啉一1一氧化物(4NQO)饮水法诱导大鼠舌癌变模型,免疫组织化学SP法检测82只大鼠舌癌变过程不同病理阶段组织中E-cad、PCNA蛋白的表达,分析E-cad与PCNA相关性.结果 在正常黏膜、上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中重度上皮异常增生和舌鳞状细胞癌组织中,E-cad的阳性率分别是100％、95.24％、92.86％、80.00％.68.75％,差异均有统计学意义(P＜0.05);PCNA的阳性率分别是9.52％,14.29％、35.71％,50％、56.25％,差异有统计学意义(x2=16.676,P<0.05).二者的蛋白表达呈负相关(r=-0.614,P＜0.01).结论 E-cad和PCNA有望成为舌黏膜癌变的生物标志物之一.     

细胞角蛋白19在4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中的表达

目的:观察CK19在口腔黏膜癌变各个阶段的表达,探寻其与口腔黏膜癌变之间的关系及意义。方法:4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,运用免疫组织化学的方法检测CK19在口腔黏膜癌变过程中各阶段的动态变化,分析CK19与口腔黏膜癌变的关系。结果:在大鼠正常舌黏膜组织中,CK19阳性染色的细胞散在分布于黏膜基底层,基底上层不表达;随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,CK19表达于黏膜基底上层;随着病变程度加重,CK19表达强度增强,阳性率增加,差异具有统计学意义。结论:4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中,CK19蛋白表达水平随病变程度加重显著升高,提示CK19与口腔上皮细胞的癌变有关;CK19的异常表达可作为早期诊断口腔鳞状细胞癌的辅助指标之一。     

Eag1在大鼠口腔舌黏膜癌变过程中的表达

目的:研究4-亚基硝氧喹啉(4NQO)诱发大鼠口腔黏膜癌变过程中各阶段Eag1的蛋白表达,探讨Eag1与OSCC发生发展的关系.方法:利用4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,采用免疫组织化学(SP法)检测各样本Eag1蛋白的表达.结果:随着大鼠舌黏膜异常增生程度的增加,Eag1蛋白表达明显升高.Eag1在大鼠舌黏膜癌中的表达明显高于正常上皮及轻度上皮异常增生组织.结论:Eag1蛋白表达随着上皮异常增生程度的加重而表达增加,Eag1可能会成为口腔黏膜具有恶变潜能的重要指标.     

不同潮气量机械通气对4NQO饲养大鼠的肺损伤研究

目的:探讨不同潮气量机械通气对4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)饮水法饲养的大鼠肺组织的影响.方法:30只4周龄雄性SD大鼠采用4NQO饮水法饲养12周后,随机分为对照组(A组)、常规潮气量组(B组)和肺保护性通气组(C组),每组10只,通气4h处死大鼠.酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定支气管肺泡灌洗液(BALF...     

MMP12/TIMP2 mRNA在大鼠舌黏膜癌变过程中表达的研究

目的 观察基质金属蛋白酶-12（Matrix Metalloproteinase-12,MMP12）及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(Tissue inhibitors of matrix metalloproteinases-2,TIMP2) mRNA在4－亚基硝氧喹啉（4-nitroquinoline-1-oxid, 4NQO）诱发大鼠舌黏膜癌变过程中的动态变化,探讨其在实验性大鼠舌黏膜癌变中的作用。方法 60只雌性SD大鼠随机分为三组,分别给予正常饮水、25ppm（㎎∕L）的4NQO水溶液16周、24周建立大鼠舌黏膜癌变模型。舌部病变组织分成两等分,分别进行组织病理学分析和荧光定量PCR检测。结果 (1)4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中,正常饮水组无组织病理学改变,4NQO诱癌大鼠16周舌黏膜出现上皮中-重度异常增生,诱癌24周后主要病理学变化为舌鳞状细胞癌。(2) 与正常组织相比,MMP12 mRNA表达水平在癌前病变中升高1.51倍、在舌癌中升高4.86倍（P<0.01）,MMP12 mRNA表达随病理程度增加呈现递增趋势;与正常组织相比,TIMP2 mRNA在癌前病变中表达升高2.62倍（P<0.01）,在舌癌中表达升高2.06倍（P<0.05）,TIMP2 mRNA表达随病理程度增加呈现先增加后下降的趋势;舌黏膜癌变过程中MMP12与TIMP2 mRNA表达比例失调。结论 MMP12,TIMP2 mRNA的高表达参与4NQO诱发的大鼠舌黏膜癌变过程,二者表达的比例失调与舌黏膜癌变密切相关。     

MMP12和TIMP2mRNA在大鼠舌黏膜癌变过程中的表达

目的 观察基质金属蛋白酶-12(MMP12)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP2) mRNA在4-亚基硝氧喹啉(4NQO)诱发大鼠舌黏膜癌变过程中的动态变化,探讨其在实验性大鼠舌黏膜癌变中的作用.方法 60只雌性SD大鼠随机分为3组,分别给予正常饮水、25 ppm(mg/L)的4NQO水溶液16、24周.舌部病变组织分成两等分,分别进行组织病理学分析和荧光定量PCR检测.结果 (1)4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中,正常饮水组无组织病理学改变,4NQO诱癌大鼠16周舌黏膜出现上皮中-重度异常增生,诱癌24周后主要病理学变化为舌鳞状细胞癌.(2)与正常组织相比,MMP12 mRNA表达水平在癌前病变中升高1.51倍,在舌癌中升高4.86倍(P＜0.01),MMP12 mRNA表达随病理程度增加呈现递增趋势;与正常组织相比,TIMP2 mRNA在癌前病变中表达升高2.62倍(P＜0.01),在舌癌中表达升高2.06倍(P＜0.05),TIMP2 mRNA表达随病理程度增加呈现先增加后下降的趋势;舌黏膜癌变过程中MMP12与TIMP2 mRNA表达比例失调.结论 MMP12、TIMP2 mRNA的高表达参与4NQO诱发的大鼠舌黏膜癌变过程,两者表达的比例失调与舌黏膜癌变密切相关.     

PTP4A1在舌鳞癌组织及TCA8113细胞中的表达及意义

目的：检测PTP4A1基因在舌鳞癌组织及舌鳞癌细胞系TCA8113中的表达,并探讨其表达水平与舌鳞癌临床病理参数的关系。方法：应用免疫组化SP法检测30例舌鳞癌和15例正常舌组织石蜡包埋组织中PTP4A1的表达;对15例新鲜舌鳞癌组织进行real-time PCR,检测PTP4A1在舌鳞癌组织、癌旁组织、正常舌组织的表达,此外对TCA8113细胞中PTP4A1的表达水平也进行了检测。结果：免疫组化结果显示,PTP4A1表达于舌鳞癌组织的细胞质和细胞核,在舌鳞癌组织中呈阳性和强阳性表达,而在正常舌组织中呈阴性和弱阳性表达;PTP4A1在舌鳞癌的阳性表达率为83%,显著高于其在正常舌组织中的表达率33.3%;PTP4A1在舌鳞癌组织和正常舌组织的表达差异有统计学意义（P=0.001<0.05）;而且PTP4A1的表达水平与肿瘤的淋巴转移相关（P=0.014<0.05）,而与病人的性别、年龄、肿瘤的大小、肿瘤的分期分级无明显相关。Real-time PCR实验结果显示舌鳞癌组织及舌鳞癌细胞系TCA8113细胞中的PTP4A1的mRNA表达水平高于其在癌旁和正常舌组织的表达,癌旁组织的表达高于正常舌组织的表达（P=0.000<0.05）。结论：PTP4A1基因mRNA水平和蛋白水平表达在舌鳞癌组织中表达均较癌旁和正常舌组织高,可能在舌鳞癌的发生发展过程中起着一定作用。     

CK19与E－cad在大鼠舌黏膜癌变过程中外周血的表达

目的：研究大鼠舌黏膜癌变过程中外周血的细胞角蛋白19（CK19）和E－钙黏蛋白（E－cad）的表达及相关性。方法90只SPF级SD雄性大鼠,按照随机数字表法分为6组,利用4NQO饮水法诱导75只大鼠（实验组）舌黏膜癌变,15只大鼠（对照组）饮用SPF级动物专用纯净灭菌水,于不同时期分批乙醚麻醉抽取外周血,颈椎脱臼处死取舌体组织做病理诊断,采用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测外周血中CK19和E－cad在大鼠舌黏膜癌变过程中的动态变化,Pearson相关系数及线性回归模型分析E－cad与CK19相关性。结果 E－cad和CK19在正常黏膜、上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中重度上皮异常增生和舌鳞状细胞癌组外周血中浓度分别为（259．92±89．75）、（402．85±93．52）、（412．39±64．08）、（466．25±66．72）、（539．14±108．07） ng／L和（593．45±134．06）、（784．45±108．53）、（848．58±99．68）、（951．94±85．31）、（1004．22±127．65） ng／L。上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中重度上皮异常增生和舌鳞状细胞癌组外周血中E－cad和CK19表达显著高于正常黏膜（ P＜0．05）;E－cad和CK19的表达呈正相关（r＝0．738, P＜0．001）。结论外周血中CK19和E－cad表达上升是大鼠舌黏膜癌变过程中的早期事件。     

中药复方冬菊对鼠舌白斑癌变的阻断作用

目的 观察中药复方冬菊对4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导的大鼠舌白斑癌变的阻断作用.方法 Wistar大鼠85只,随机分为癌变模型组(n=35)、中药干预组(n=35)、正常对照组(n=5)和中药对照组(n=10).以4NQO饮水喂养诱导大鼠舌白斑癌变,中药复方冬菊水溶液灌胃干预癌变过程,取9、13、20、24、32周舌背黏膜标本进行组织病理学观察,免疫组化SP法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达.结果中药干预组舌背黏膜异常增生发生率和cyclin D1的阳性表达率明显低于癌变模型组(P＜0.01或P＜0.05).结论中药复方冬菊有确切的抗白斑癌变功效,对细胞周期的阻滞是其抗癌机制基础之一.     

Upregulation of vimentin and aberrant expression of E-cadherin/beta-catenin complex in oral squamous cell carcinomas:correlation with the clinicopathological features and patient outcome

Oral squamous cell carcinoma is a challenging oncology problem.A reliable biomarker for metastasis or high-risk prognosis in oral cancer patients remains undefined.Using quantitative immunohistochemistry,we examined the expression of vimentin,E-cadherin,and beta-catenin in 83 oral squamous cell carcinoma patients,and the relationships between the expression of these markers and specific clinicopathological features were analysed.The high expression of vimentin was observed in 23 of 43(53%) tumours from pati...     

p34cdc2在舌鳞癌中的表达及意义

目的研究舌鳞癌组织中p34cdc2的表达,探讨其表达与舌鳞癌临床病理特征的关系.方法随机收集舌鳞癌(含正常舌组织或癌旁组织)标本60例,采用免疫组织化学S-P法显示p34cdc2蛋白的表达,并结合舌鳞癌的临床病理特征进行分析.结果舌癌组织中可见p34cdc2蛋白表达并显棕色,主要定位于细胞浆中,正常/癌旁上皮组织中少见p34cdc2蛋白表达.p34cdc2在癌组织中存在过表达,与正常组织或癌旁组织中p34cdc2蛋白的表达有显著性差异(P<0.01).结论 p34cdc2蛋白在舌鳞癌中有过表达现象,可反映舌鳞癌细胞分裂增殖能力;过表达的p34cdc2蛋白可作为评价舌鳞癌临床分期和组织分级等临床病理特征的参考指标之一.     

EZH2在舌鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨EZH2蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理的关系?方法:应用免疫组织化学染色法检测EZH2蛋白在52例舌鳞癌组织和12例正常舌组织标本中的表达?结合患者临床病理和随访资料,应用SPSS17.0软件分析EZH2的表达与相关临床病理参数以及患者总生存率之间的关系?结果:EZH2在舌鳞癌组织中呈高表达,与在正常组织中的表达有显著统计学差异(P < 0.001)?EZH2蛋白表达与肿瘤病理学分级(P = 0.033)?颈淋巴结转移(P = 0.036)和局部浸润性(P = 0.012)有关,而与患者的性别?年龄?肿瘤大小?临床分期无关(P > 0.05)?Kaplan-Meier 法分析患者的总体生存情况发现EZH2高表达组患者的总体生存率明显低于EZH2低表达组患者(P = 0.028,Log-rank检验)?结论:EZH2在舌鳞状细胞癌组织中呈高表达,其表达水平与肿瘤病理学分级?颈淋巴结转移?局部浸润性及患者预后有关?     

LDH5在舌鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨LDH5蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的表达特点,及其与临床病理和患者生存预后的关系?方法:应用免疫组织化学染色法检测LDH5蛋白在63例舌癌组织标本和16例正常舌黏膜组织标本中的表达?结合患者临床病理资料和随访资料,应用SPSS17.0软件分析LDH5的表达与相关临床病理参数(Fisher精确概率法)以及患者总生存率之间的关系(Kaplan-Meier法)?结果:LDH5在部分舌鳞癌组织中呈高表达(33/63,52.38%),与其在正常舌黏膜组织的表达水平相比有显著统计学差异(P < 0.01)?LDH5蛋白表达水平与肿瘤大小?颈淋巴结转移?临床分期具有相关性(P < 0.05),而与患者的性别?年龄?病理分级?局部浸润等无相关性(P > 0.05)?Kaplan-Meier 法分析患者总体生存情况结果显示:LDH5高表达组患者的总体生存率明显低于LDH5低表达组患者(P = 0.006,Log-rank检验)?结论:LDH5在部分舌鳞状细胞癌组织中呈异常高表达,其表达水平与肿瘤的病理学特征及患者预后具有相关性?     

血管抑素下调人舌鳞癌细胞血管内皮生长因子的表达

目的探讨血管抑素（angiostatin,AS）对人舌鳞癌细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响。方法将Tca8113人舌鳞癌细胞移植到18只裸鼠皮下,用随机数字表法将裸鼠分成3组（每组6只）。PBS组：注射PBS;AS（250ng）组：注射250ng纯化AS;AS（30μg）组：注射30μg纯化As,腹腔注射,2次／d,同时测量肿瘤的大小,2次／周。21d后处死小鼠,将取出的每个肿瘤2等分,一半用免疫组织化学检测VEGF及其两个受体（VEGFR1、VEGFR2）和CD34,用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡;另一半用半定量RT-PCR检测VEGF、VEGFRl和VEG-FR2的mRNA表达。结果AS（250ng）组和AS（30μg）组中,细胞凋亡指数（AI）明显增加（P〈0．05）;而肿瘤体积、微血管密度（MVD,用CD34抗体标记并用来评价肿瘤血管生成）及VEGF、VEGFR1和VEGFR2在蛋白质和mRNA的水平表达,都有明显降低（P〈0．05）,且AS（30μg）组更为显著。结论AS下调人舌鳞癌细胞VEGF的表达且呈剂量依赖性。     

DNM T1、PDCD4在舌鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨DNA甲基转移酶1（DNMT1）、程序性细胞死亡因子4（PDCD4）在舌鳞状细胞癌（TSCC）组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学 Elivision 二步法检测40例 TSCC 组织及其相对应的癌旁非肿瘤组织中 DNM T1、PDCD4蛋白表达水平,并分析两者蛋白表达与临床病理参数的关系。结果在 TSCC 组织中 DNM T1蛋白呈高表达,而 PDCD4蛋白呈低表达甚至不表达;两者在癌旁非肿瘤组织中的表达则与之相反。两者的表达呈明显的负相关（r ＝－0．452,P ＜0．05）。 DN‐M T1蛋白表达与组织分化类型、有无淋巴结转移及 TNM 临床分期相关（P＜0．05）,与性别、年龄无关;而 PDCD4蛋白的表达则只与区域淋巴结有无转移和 TNM 分期有关,与性别、年龄及组织病理分化程度无关。结论提示 DNM T1、PDCD4蛋白异常表达与 TSCC 的发生、发展密切相关,DNM T1可能通过负向调节 PDCD4的蛋白表达使抑癌基因沉默或消失而致肿瘤发生。     

顺铂对人舌癌细胞的抑制作用和对端粒酶活性的影响

目的 研究化疗药物顺铂对人舌癌Tca8113细胞的抑制作用和对端粒酶活性的影响及其抗癌机制、并初步探讨端粒酶作为化疗敏感性指标的可行性。方法 应用顺铂处理的人舌癌Tca8113细胞为用药组，相同条件培养但不用药的细胞为对照组。MTT法研究细胞的生长和增殖情况，双层琼脂培养法研究细胞的克隆形成率，透射电镜观察细胞的超微结构，应用流式细胞术检测细胞周期，TRAP-PCR—ELISA法检测人舌癌Tca8113细胞端粒酶活性。结果 顺铂对人舌癌Tca8113细胞有明显的抑制作用，且呈浓度依赖性；能明显改变细胞大体形态和超微结构；抑制端粒酶活性且有一定的时间依赖性；细胞周期改变不明显。结论 顺铂可以明显抑制Tca8113细胞的增殖活性及其转移复发倾向、还可作用于线粒体，抑制端粒酶活性，对细胞周期的改变不明显。