脂质体转染bcl-2反义寡核苷酸G3139在HL-60细胞中的动力学模式

目的　应用阳离子脂质体介导或直接转染时 ,建立HL 6 0细胞摄入由 5 FITC标记的bcl 2反义寡核苷酸G3139的动力学模式及观察G 3139在细胞内的分布。方法　流式细胞仪测定细胞内的相对平均荧光强度 ,荧光显微镜观察细胞内的荧光分布。结果　①脂质体介导转染法显著提高HL 6 0细胞对G 3139的摄入 ,当DOSPER/G 3139(μg/μg)为 2 2 / 1时 ,细胞内相对平均荧光强度可达G 3139直接作用时的 40倍 ,而且HL 6 0细胞对G 3139的摄入跟G3139的浓度和作用时间有关。②细胞内的G 3139可向胞外转运 ,在DOSPER介导转染后 ,胞内荧光强度衰减缓慢 ,t1/ 2 约为 4h ,而G 3139直接作用后 ,t1/ 2 约为 0 5h ;③DOSPER介导转染 6h后 ,细胞内荧光物质主要以明亮的点状聚集在细胞核和部分细胞浆的细胞器中 ,而G 3139直接作用时 ,荧光物质则弥漫分布于胞浆中。结论　DOSPER可以增加G 3139的细胞摄入并改变其胞内分布 ,可能是阳离子脂质体增加bcl 2反义寡核苷酸生物活性的重要原因。     

脂质体Geneshuttle20对STAT6反义核酸转染小鼠脾淋巴细胞影响的研究

目的探讨阳离子脂质体Geneshuttle20对STAT6反义核酸在小鼠脾淋巴细胞摄入、分布的影响作用。方法采用阳离子脂质体介导STAT6反义核酸转染小鼠脾淋巴细胞,应用流式细胞仪、荧光显微镜分别观察反义核酸的细胞摄入和胞内分布。结果反义核苷酸与脂质体(W/W)为2∶4时,细胞摄入率可以达到67.7%,较单独加入反义核酸提高转染效率6倍,细胞内平均荧光强度最强,细胞核染色较深。结论Geneshuttle20提高了细胞对反义寡核苷酸的摄取,促使其进入细胞核内发挥作用。     

脂质体介导C-erbB-2反义寡核苷酸转染小鼠乳腺癌TM40D细胞的效率及毒性

目的 探讨阳离子脂质体为载体的反义寡核苷酸（ODNs）转染小鼠乳腺癌TM40D细胞的最佳转染效率及对细胞的毒性作用。方法 分别将有／无脂质体介导的反义ODNs转染小鼠乳腺癌TM40D细胞,应用流式细胞仪观察不同时间的反义ODNs的转染效率,荧光显微镜观察反义ODNs在细胞内的分布,全自动生化分析仪检测转染培养上清液的乳酸脱氢酶（LDH）浓度。结果 无脂质体介导的反义ODNs转染细胞效率随着时间的延长增加,6h达到63．00％。脂质体介导的反义ODNs转染细胞4h时转染效率达到高峰为72．23％。细胞内荧光强度与细胞转染效率相关。无脂质体介导的FAM标记的反义ODNs分布在细胞浆,脂质体介导的反义ODNs在细胞浆及细胞核内均有分布。各组LDH浓度无统计学差异。结论 脂质体介导组反义ODNs转染效率高于无脂质体组,同时转染高峰提前出现。脂质体促进反义ODNs进入细胞核内。短时间内阳离子脂质体及反义ODNS对细胞的毒性不明显。     

Effect of quercetin on cell cycle of HL-60 cells

本文报道了槲皮素对人早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０细胞的增殖和细胞周期的影响．结果表明槲皮素能抑制ＨＬ－６０细胞的增殖，呈剂量依赖关系，当槲皮素作用２４，４８，７２ｈ后，其ＩＣ５０分别为４６．６，２８．７，１４．９μｍｏｌ·Ｌ－１．流式细胞仪分析表明，槲皮素能明显增加ＨＬ－６０的Ｇ２－Ｍ期细胞，而相对减少Ｇ０／Ｇ１细胞之百分比，且呈剂量依赖关系，当去除槲皮素时，该作用是可逆的．结果表明槲皮素对肿瘤细胞的生长抑制作用可能与其对细胞周期的影响有关．     

灵芝菌丝体多糖通过增强小鼠巨噬细胞功能诱导HL-60细胞凋亡

目的探讨灵芝菌丝体粗总多糖（ＭＧＬＰ１）、总多糖（ＭＧＬＰ２）作用的小鼠腹腔巨噬细胞培养上清对ＨＬ－６０细胞凋亡的影响。方法ＭＧＬＰ１、ＭＧＬＰ２作用于小鼠腹腔巨噬细胞,生物法检测培养上清中ＴＮＦ－α的活性;再将共培养上清（ＭＧＬＰ１－ΜΦ－ＣＭ、ＭＧＬＰ２－ΜΦ－ＣＭ）作用于ＨＬ－６０细胞,ＭＴＴ法检测ＭＧＬＰ１－ΜΦ－ＣＭ、ＭＧＬＰ２－ΜΦ－ＣＭ对ＨＬ－６０细胞增殖的抑制作用;琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞检测法定性定量检测它们对ＨＬ－６０细胞凋亡的诱导作用。结果ＭＧＬＰ１、ＭＧＬＰ２作用于腹腔巨噬细胞后,可以明显增强培养上清中ＴＮＦ－α的活性;其共培养上清可以明显地抑制ＨＬ－６０细胞的增殖并诱导该细胞凋亡（Ｐ＜０．０１）。结论ＭＧＬＰ１、ＭＧＬＰ２可以通过小鼠腹腔巨噬细胞,促进ＴＮＦ－α分泌,诱导ＨＬ－６０细胞凋亡。     

半边旗抗肿瘤有效成分对HL-60细胞DNA拓扑异构酶活性及其细胞周期的影响(英文)

研究半边旗（Ｐｔｅｒｉｓ ｓｅｍｉｐｉｎｎａｔａ 　Ｌ, ＰｓＬ）有效成分５Ｆ,６Ｆ,Ａ对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ拓扑异构酶活性和细胞周期的影响．方法：应用ｐＢＲ３２２质粒ＤＮＡ作为底物测定酶的活性;细胞周期用流式细胞仪测定;应用噻唑蓝（ＭＩＴ）法测定药物对细胞生长的抑制率．结果：５Ｆ,６Ｆ,Ａ均能够抑制ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅰ,Ⅱ的活性,化合物６Ｆ作用细胞２４ ｈ后,可升高 Ｓ期和 Ｇ２／Ｍ期细胞,同时降低Ｇ０／Ｇ１期细胞,低浓度６Ｆ（５７．８和 １１５．６ｎｍｏｌ·Ｌ－１）与金雀异黄素（Ｇｅｎ）合用可增强它对ＨＬ－６０细胞的杀伤作用, ｑ＞１．１５．结论： ５Ｆ, ６Ｆ和 Ａ明显抑制ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ拓扑异构酶的活性;６Ｆ阻断细胞于 Ｇ２／Ｍ期,增强Ｇｅｎ对 ＨＬ－６０细胞的杀伤作用。     

红藻藻蓝蛋白对IL—60细胞生长的抑制作用

本文运用半固体琼脂培养法及ＭＴＴ法研究了红藻藻蓝蛋白（Ｒ－ＰＣ）对ＨＬ－６０细胞生长的影响,结果发现：Ｒ－ＰＣ能够显著抑制细胞的生长,且存在浓度效应和时间效应关系,为进一步探索Ｒ－ＰＣ抑制ＨＬ－６０细胞生长的可能机制,将不同浓度的Ｒ－ＰＣ与ＨＬ－６０细胞相互作用６ｄ后,分别用流式细胞仪检测ＨＬ－６０细胞所处细胞周期中的时相和免疫印渍法测定ＨＬ－６０细胞中Ｂｃｌ－２基因表达产物的变化,实验结果显示：     

阳离子脂质体增加bcl—2反义寡脱氧核苷酸G3139在HL—60细胞中的摄取及活性

目的:探讨阳离于脂质体DOSPER对bcl-2反义寡脱氧核苷酸G3139在HL-60细胞中的摄取和活性的影响。方法:流式细胞仪测定细胞结合的平均荧光强度和Bcl-2蛋白阳性细胞的百分数;荧光显微镜观察细胞内FTTC荧光素标记G3139的分布;RT-RCR测定bcl-2 mRNA的表达。结果:①DOSPER增加细胞对G3139的摄取,当DOSPER/G3139(μg:μg)为2:1时,细胞对G3139的摄取在2h左右达到高峰,为G3139直接作用时的20倍,细胞核和细胞浆中的G3139为明亮的点状聚集;而G3139直接作用时,G3139则弥漫分布于细胞浆中;②细胞内的G3139可向胞外转运。DOSPER介导转染G3139 4h后,细胞内的G3139符合方程C(t)=68.2e~(-0.60t) 31.8e~(-0.02t)(初值为100％),t_(1/2)约为1.1h,而G3139直接作用后,细胞内的G3139符合方程C(t)=64.8e~(-2.27t) 35.2e~(-0.04t),t_(1/2)约为18min;③在DOSPER介导转染下,G3139在浓度1μmol·L~(-1)时,特异性减少bcl-2 mRNA的表达,同时使Bcl-2蛋白阳性率从97％±4％下降到70.6％±2.1％。结论:DOSPER增加细胞对G3139的摄取和改变G3139在细胞内的分布可能是其增强G3139活性的重要机制。     

TGF-β_1对HL-60细胞株凋亡基因表达的影响

以ＴＧＦ－β１在体外作用于人急性早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０细胞,通过免疫细胞化学染色等实验方法,观察ＴＧＦ－β１对ＨＬ－６０细胞株凋亡基因表达的影响。结果发现１μｇ／Ｌ的ＴＧＦ－β１体外作用２４ｈ后ＨＬ－６０细胞中Ｂｃｌ－２、Ｃ－ｍｙｃ基因的灰度值由２７．８０±３．１７和２０．８０±４．３７下调至３０．５６±２．５７和２３．４２±４．４５;作用７２ｈ后则分别下调至３５．０１±１．３４和３４．６１±１．６１。结果说明ＴＧＦ－β１对人急性早幼粒白血病细胞株的凋亡基因有显著下调作用,这种作用随时间的延长更加明显。     

乌苯美司对白血病细胞生长及 P388 淋巴结转移的抑制作用

目的：观察乌苯美司对白血病细胞生长及淋巴结转移的抑制作用。方法：将ＨＬ－６０，Ｋ５６２，ＭＴ－１，ＭＴ－２，ＭＯＬＴ－４和Ｒａｊｉ白血病细胞分别与乌苯美司培育，计数存活细胞，测定ＭＴ－１和ＭＴ－２的［３Ｈ］ＴｄＲ参入量及Ｐ３８８细胞淋巴结转移。结果：乌苯美司４５００ｍｇ／Ｌ使ＨＬ－６０，ＭＴ－１，ＭＴ－２和Ｒａｊｉ细胞存活数明显减少（Ｐ＜０．０１），０．１，１，１０，１００和１０００ｍｇ／Ｌ可明显抑制ＭＴ－１，ＭＴ－２细胞摄入［３Ｈ］ＴｄＲ（Ｐ＜０．０１）；小鼠每天ｉｐ乌苯美司１，３，１０，３０μｇ／鼠×１１ｄ，转移至淋巴结的Ｐ３８８细胞数明显减少。结论：乌苯美司能抑制人白血病细胞生长及ＭＴ－１，ＭＴ－２细胞的ＤＮＡ合成，有效抑制Ｐ３８８细胞的淋巴结转移。     

花粉生物活性肽的免疫刺激作用

目的：黑麦花粉中提取的生物活性肽（ＢＰ）及合成类似活性肽对小鼠、人和ＨＬ－６０细胞的作用。方法：用ＭＴＴ法测定ＢＰ与ＨＬ－６０细胞共培养７２ｈ时ＨＬ－６０细胞的增殖反应，间接免疫荧光测定ＢＰ激活人淋马细胞产生ＣＤ２５阳笥细胞百分率，与ＢＰ共培养的上清液中可溶性白介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的含量用ＥＬＩＳＡ测定。结果：结果：ＢＰ与ＨＬ－６０细胞共培养７２ｈ时ＨＬ－６０细胞的增殖反应，ＭＴＴ测定ＯＤ     

一种新二萜类化合物的体外抗肿瘤研究

目的研究一种新二萜类化合物凤厥内酯Ａ（Ｆ－Ａ）的抗肿瘤活性。方法采用体外培养的人癌细胞株——早幼粒细胞白血病ＨＬ－６０和红白细胞白血病Ｋ５６２作对象，观察Ｆ－Ａ对其抑瘤活性、诱导分化、细胞周期的影响。结果Ｆ－Ａ对ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞２４ｈ的半数抑制浓度ＩＣ５０分别为７．６ｍｇｇ－１和９．１ｍｇｇ－１，在４ｍｇＬ－１时即明显抑制ＨＬ－６０细胞的对数生长；对３Ｈ－ＴｄＲ参入作用在培养４８ｈ后有一定抑制作用；透视电镜显示肿瘤细胞有损伤表现；细胞周期分析显示Ｇ２＋Ｍ期细胞增多；ＮＢＴ还原反应试验阴性。结论Ｆ－Ａ明显抑制ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞生长，抗肿瘤活性强，对细胞周期的影响提示Ｍ期阻滞，研究初步提示Ｆ－Ａ不具细胞诱导分化作用。     

乌苯美司对白血病细胞生长及P388淋巴结转移的抑制作用

目的：观察乌苯美司对白血病细胞生长及淋巴结转移的抑制作用。方法：将ＨＬ－６０，Ｋ５６２，ＭＴ－１，ＭＴ－２，ＭＯＬＴ－４和Ｒａｊｉ白血病细胞分别与乌苯美司培育，计数存活细胞，测定ＭＴ－１和ＭＴ－２的［＾３Ｈ］ＴｄＲ参入量及Ｐ３８８细胞淋巴结转移。结果：乌苯美司４５００ｍｇ／Ｌ使ＨＬ－６０，ＭＴ－１，ＭＴ－２和Ｒａｊｉ细胞存活数明显减少（Ｐ〈０．０１），０．１，１，１０，１００和１０００ｍｇ／Ｌ可明     

Quercetin down-regulated bcl-2 gene expression in human leukemia HL-60 cells

目的：研究槲皮素对人白血病ＨＬ６０细胞ｂｃｌ２基因表达的影响．方法：采用免疫组织化学技术和ＲＮＡ点杂交观察基因表达．结果：Ｑｕｅ１５－６０μｍｏｌ·Ｌ－１处理ＨＬ６０细胞４８ｈ使ｂｃｌ２蛋白由对照组的９４％表达下调到４５％－８４％，并能明显下调ＨＬ６０细胞ｂｃｌ２ｍＲＮＡ表达．结论：Ｑｕｅ诱导ＨＬ６０细胞凋亡，其诱导凋亡的分子机制与下调ｂｃｌ２基因表达有关．     

pEGFP-CI-G3BP转染Hela细胞及其在细胞中的表达

目的:了解G3BP蛋白在细胞中的表达及定位。方法:利用脂质体lipofectamine2000将提取的质粒pEGFP-CI-G3BP转染进入Hela细胞,培养24h后荧光倒置显微镜观察绿色荧光的表达情况及其在细胞中的定位。结果:pEGFP-CI-G3BP质粒被成功转入Hela细胞内,转染后绿色荧光可高效表达,分布在细胞胞浆中。结论:脂质体法是一种高效的转染pEGFP-CI-G3BP的方法,表达的G3BP蛋白定位于细胞的胞浆部分。     

白细胞介素2活化骨髓单个核细胞抗肿瘤活性的体外观察

采用３Ｈ－ＴｄＲ前标记释放法和半固定培养等方法，观察了白细胞介素２活化骨髓的单个核细胞对白血病细胞珠Ｋ５６２细胞和ＨＬ－６０细胞的抗肿瘤活性。活化的最佳条件是细胞浓度１×１０６、白细胞介素－２浓度１０００ｕ／ｍｌ、效靶比例１００：１。骨髓经白细胞介素激活后，其造血祖细胞的活性均不受影响。活化２４小时即可产生杀伤作用，７２小时左右杀伤作用最强。活化培养７２小时后，免疫表型发生明显变化，２４小时后即有肿瘤坏死因子及白细胞介素６的生成，７２～９６小时生成更多，活化培养２４小时骨髓细胞中均有大颗粒淋巴细胞生成，与Ｋ５６２细胞与ＨＬ－６０细胞作用２４小时后活化骨髓细胞和ＨＬ－６０细胞密切接触，Ｋ５６２细胞和ＨＬ－６０细胞呈凋亡形态特征     

十四酰佛波乙酸酯抑制三尖杉酯碱诱导的人白血病HL—60细胞凋亡

目的：研究十四酰佛波乙酸酯（ＴＡ）预处理后，三尖杉酯碱（Ｈａｒ）和喜树碱（Ｃａｍ）诱导人白血病ＨＬ－６０细胞凋亡的变化。方法：染色质凝集观察，流式细胞术，ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳和点杂交。结果：ＴＡ２００ｎｍｏｌ·Ｌ＾－１预处理ＨＬ－６０细胞６ｈ，明显抑制Ｈａｒ０．１ｍｇ·Ｌ＾－１作用３ｈ诱导的细胞凋亡，但只部分抑制Ｃａｍ０．２ｍｇ·Ｌ＾－作用３ｈ诱导的细胞凋亡。ＴＡ预处理ＨＬ－６０细胞明显降低ｃ－ｍ     

种抗全反式维甲酸分化的HL—60亚系的特性

克隆了一株抗全反式维甲酸（ＲＡ）分化诱导作用的人早幼粒白血病理细胞ＨＬ－６０的亚系ＨＬ－６０／ＲＡ；其抗分化特性不同于肿瘤细胞对一般细胞毒抗癌药的抗药性，可不依赖ＲＡ而传代培养，抗性稳定至少１８月之久，ＨＬ－６０／ＲＡ的抗分化具有定向特异性：对粒系分化诱导剂具有交叉抗性，而对单核－巨噬细胞系分化诱导剂仍然敏感，说明ＨＬ－６０粒系分化与单核－巨噬细胞系分化具有不同的调控机制，ＨＬ－６０／ＲＡ的克隆为     

TLC—荧光分光光度法测定尿中氧氟沙星的排出速率

本文报道了用ＴＬＣ－荧光分光光度法测定２名健康受试者尿中氧氟沙星的排出速率。薄层板为硅胶Ｇ板，展开剂为苯－甲醇－甲酸（１．６７：５：３．３３）。尿样经薄层层析后，收集氧氟沙星的斑点，用乙酸－乙醇－水（９：３：１０）洗脱，于λｅｘ＝２９４ｎｍ、λｅｍ＝４９５ｎｍ处测定其荧光强度，在２０￣８００ｕｇ／ｍｌ浓度范围内呈线性，回归方程为Ｆ＝０．１３＋０．５５Ｃ，最低检出限为１０ｕｇ／ｍｌ。该法灵敏、重现性     

三氧化二砷诱导人宫颈癌细胞凋亡及bcl-2高表达对其影响

采用脂染素（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）介导的ＤＮＡ 转染,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹, ＭＴＴ和克隆形成实验,流式细胞术和细胞凋亡原位检测法探讨Ａｓ２Ｏ３ 对人宫颈癌ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞的生物学效应和ｂｃｌ－２ 高表达对这一效应的影响． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 处理的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞,存活率和克隆形成能力明显降低,细胞周期的Ｇ１ 期前有低于２ 倍体的凋亡峰,细胞被阻滞在Ｇ２／Ｍ 期,有细胞凋亡时出现的ＤＮＡ 断裂． 而Ａｓ２Ｏ３ 处理的ｂｃｌ－２ 高表达的ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞存活率和克隆形成能力增加,凋亡率减少,Ｇ２／Ｍ 期阻滞程度显著降低． 结果表明,Ａｓ２Ｏ３ 可诱导ＳｉＨａ 和ＨｅＬａ 细胞凋亡,Ｇ２／Ｍ 期阻滞可能是其诱导凋亡的原因之一;ｂｃｌ－２ 高表达可能通过减轻Ｇ２／Ｍ 期阻滞的程度而部分阻止Ａｓ２Ｏ３ 诱导的细胞凋亡．