非心脏缺血预处理对未成熟心肌和心肌间质保护作用的研究

目的 :研究非心脏缺血预处理对未成熟心肌和心肌间质的保护作用。方法 :建立动物离体心脏 L angendorff灌注模型 ,分为 4组 :1缺血 /再灌注 （I/R,n=6 ） ,离体心灌注 15 min转为工作心 15 min;2心脏缺血预处理组 （IPC,n=6 ） ,离体灌注 15 min转为工作心 15 m in,缺血 5 m in/再灌 5 min各 2次 ;3双下肢缺血预处理组 （DL- IPC,n=6 ） ,反复 3次阻断双下肢血流 5 min/松开 5 m in,建立离体心脏 L angendorff灌注模型 ,灌注 15 min转为工作心 15min;4肾缺血预处理组 （K- IPC,n=6 ） ,反复 3次阻断左肾动脉 5 m in/放开 5 min,建立离体心脏 L angendorff灌注模型 ,灌注 15 min转为工作心 15 min。然后各组全心缺血 45 min,恢复灌注 15 m in改为工作心 30 m in。以左室功能恢复、心肌含水量、血清肌酸激酶 （CK）和乳酸脱氢酶 （L DH）漏出率、心肌组织 ATP和丙二醛 （MDA）含量、超氧化物歧化酶 （SOD）活性、心肌羟脯氨酸 （HP）含量及血清内皮素 （ET）含量作为观察指标。结果 :IPC,DL- IPC及 K-IPC组左室功能恢复优于 I/R组 （P<0 .0 5 ） ,ATP含量、SOD活性、HP含量均优于 I/R组 （P<0 .0 1） ,心肌含水量低于 I/R组 （P<0 .0 5 ） ,MDA含量 ,CK,L DH漏出率及 ET含量均低于 I/R组 （P<0 .0 1）。结论 :非心脏缺血预处理与心脏缺     

不同缺血预处理对未成熟心肌细胞功能的影响

目的比较不同方法的缺血预处理对未成熟心肌细胞功能的影响。方法采用Langendorff离体心脏灌注模型。分为4组:缺血/再灌注(I/R)组,离体心脏灌注15min转为工作心15min后停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min;心脏缺血预处理(MIP)组:离体心脏灌注15min转为工作心15min后反复2次缺血5min/再灌注5min,然后重复I/R组缺血/再灌注方法;肾缺血预处理(RIP)组:反复三次阻断左肾动脉5min,放开5min,切取心脏,重复I/R组方法;双下肢缺血预处理(DLIP)组:反复3次捆扎双下肢5min,松开5min,切取心脏,重复I/R组方法。以血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、心肌组织三磷腺苷(ATP)和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+-ATPase活性及其Ca2+含量、心肌线粒体合成三磷腺苷能力[ATP]m作为观察指标。结果MIP、RIP及DLIP组ATP含量、SOD活性、心肌线粒体Ca2+-ATPase活性、[ATP]m均高于I/R组(P<0.01),MDA含量、CK、LDH漏出率、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+含量均低于I/R组(P<0.01)。结论肾缺血预处理、双下肢缺血预处理与心脏缺血预处理有同等的心肌细胞保护作用。     

双下肢缺血预处理对未成熟心肌保护作用的研究

目的 研究双下肢缺血预处理对未成熟心肌保护作用,探讨未成熟心肌保护方法。方法 采用经典心脏缺血预处理和双下肢缺血预处理动物Langendorff灌注模型分为3组：缺血／再灌（I／R,n=6）,建立模型,灌注15min转为工作心15min,心脏缺血预处理组（IPC,n=60,建立模型,灌注15min转为工作心15min,反复2次缺血5min,再灌5min;双下肢缺血预处理组（DL－IPC,n=6）,反复2次阻断双下肢血流5min,松开5min,建立模型,灌注15min转为工作心15min;然后各组全心停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min。以左室功能恢复、心肌含水量、血清肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、心肌组织ATP和丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性作为观察指标,结果 IPC和DL－IPC组在左室功能恢复优于I／R组（P＜0.050,在ATP含量、SOD活性均优于I／R组（P＜0.010,在心肌含水量低于I／R组（P＜0.05）,在MDA含量、CK、LDH漏出率方面均低于I／R组（P＜0.01）。结论 双下肢缺血预处理与心脏缺血预处理对未成熟心肌具有同等的心肌保护作用。     

酸性复灌液对未成熟心肌内皮素和羟脯氨酸的影响

目的　观察不同pH值HEPES -KH复灌液对未成熟心肌内皮素和羟脯氨酸的影响。方法　采用Langen dorff离体灌注模型 ,分为 3组 ,每组 8只 ,正常对照组 (C) ,仅灌注pH 7 4HEPES -KH液 90min ;缺血 /再灌组 (I/R) ,灌流pH 7 4HEPES -KH液 2 0min后缺血 6 0min ,用pH 7 4HEPES-KH液恢复灌注 30min ;酸性灌注组 (E) ,缺血 6 0min后 ,先用pH 6 8HEPES -KH液灌注 5min ,然后换成pH7 1灌注 5min ,最后恢复pH 7 4灌注 2 0min。以心肌羟脯氨酸 (HP)和血清内皮素 (ET)含量作为观察指标。结果　E组HP含量高于I/R组 (P <0 0 5 ) ,ET含量低于I/R组 (P <0 0 5 )。结论　复灌初期应用梯度酸性复灌液有助于未成熟心肌间质的保护。     

金属硫蛋白表达对未成熟心肌间质保护作用的研究

目的 :探讨诱导金属硫蛋白 (MT)在未成熟心肌中的表达对缺血 再灌注未成熟心肌间质的影响。方法 :采用Langendorff离体灌注模型 ,分为 4组 :对照组 (C ,n =9) ,腹腔注射蒸馏水 0 3mL ,按注射后时间 12h、2 4h和 4 8h取离体心脏 ,灌注KH液 15min转为工作心 15min ,全心停灌注 4 5min ,恢复灌注 15min改为工作心 30min ;E1 2h组 (n =6 )、E2 4h 组 (n =6 )、E4 8h 组 (n =6 )各组分别按腹腔注射 3 6 %ZnSO4 (1 5mL kg)后 12h、2 4h和 4 8h取离体心脏 ,常规建立Langendorff灌注模型 ,方法同C组。以心肌细胞中MT含量、血流动力学指标、心肌组织羟脯氨酸 (HP)含量、内皮素 (ET)含量作为观察指标。结果 :腹腔注射ZnSO4 后 12hMT开始表达 ,2 4h达高峰 ,4 8h仍在高表达水平。MT含量在E2 4h、E4 8h组与C、E1 2h组比较明显增高 ;E2 4h、E4 8h组在心功能恢复方面均优于C组和E1 2h组 (P <0 0 5 ) ,在HP含量优于C组和E1 2h组 (P <0 0 1) ,在ET含量低于C组和E1 2h组 (P <0 0 1)。结论 :腹腔注射ZnSO4 可诱导心肌MT长时间表达 ,MT可减轻未成熟心肌间质的缺血 再灌注损伤。     

热休克蛋白70对未成熟心肌间质保护作用的研究

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)对未成熟心肌间质的影响。方法健康新生长耳大白兔随机分为2组。对照组:腹腔注射生理盐水0.4ml,注射后24h取离体心脏,常规建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注15min转为工作心15min后停灌45min,恢复灌注15min改为工作心30min;观察组:腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素,24h后取离体心脏,方法同对照组。测定心脏舒张功能指标、心肌细胞中HSP70含量、心肌羟脯氨酸(HP)和血清内皮素(ET)含量。结果HSP70含量观察组明显高于对照组;观察组HP含量高于对照组(P<0.05),ET含量低于对照组(P<0.05)。结论HSP70可明显减轻未成熟心肌间质缺血再灌注损伤。     

酸性复灌液对家兔未成熟心肌保护作用的研究

目的 :观察不同pH值HEPES KH复灌液对未成熟心肌的影响。方法 :采用Langendorff离体灌注模型 ,分为 3组 :正常对照组 (NC ,n =8) ,仅灌注pH 7 4HEPES KH液 90min ;缺血 再灌 (I R ,n =8) ,灌流 2 0min后缺血 6 0min ,用pH 7 4HEPES KH液恢复灌注 30min ;酸性灌注组 (E ,n =8) ,缺血 6 0min后 ,先用pH 6 8HEPES KH液灌注 5min ,然后换成pH 7 1灌注 5min ,最后恢复pH 7 4灌注 2 0min。以左室功能恢复、心肌含水量、血清肌酸激酶 (CK)和乳酸脱氢酶 (LDH)漏出率、心肌组织ATP和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)活性作为观察指标。结果 :E组在左室功能恢复、ATP含量、SOD活性方面均优于I R组 (P <0 0 5 ) ,在心肌含水量、MDA含量、CK、LDH漏出率方面均低于I R组 (P <0 0 5 )。结论 :pH反常是I R损伤的重要发病机制 ,复灌初期应用梯度酸性复灌液有助于未成熟心肌的保护     

双下肢缺血预处理对未成熟心肌细胞凋亡和相关凋亡蛋白表达的影响

目的　探讨双下肢缺血预处理对未成熟心肌细胞凋亡和 B淋巴细胞瘤 /白血病 2蛋白 (bcl- 2 )、bcl- 2家族 bax蛋白、神经生长因子 fas蛋白表达的影响。方法　采用兔离体心脏灌注 (L angendorff)模型 ,2 4只幼兔随机分为 3组 ,对照组 (C,n=8) :仅灌注重碳酸氢盐缓冲液 (KH) 180 min,然后取标本 ;缺血 /再灌组 (I/ R,n=8) :灌注 2 0 min后 ,停灌 4 5 min,复灌 12 0 min;双下肢缺血预处理组 (DL IP,n=8) ,反复 3次阻断双下肢血流 5 m in/放开 5 min,建立L angendorff模型 ,然后重复 I/ R组缺血 /再灌方法。以凋亡细胞原位标记与半定量分析、琼脂糖凝胶电泳检测 DNA片段梯及 bcl- 2、bax、fas基因蛋白的表达作为检查指标。结果　凋亡细胞原位标记与半定量分析 :DL IP组与 I/ R组比较 ,心肌细胞凋亡率明显减少 ;琼脂糖凝胶电泳检测 DNA片段梯 :DL IP组与 I/ R组比较 ,光密度明显增强 ;DL IP组与 I/ R组比较 ,bcl- 2表达明显增多 ,bax、fas表达明显减少。结论　 DL IP通过影响 bcl- 2、bax、fas基因蛋白的表达减少心肌细胞凋亡。     

下肢缺血预处理调控未成熟心肌细胞凋亡的研究

目的探讨下肢缺血预处理调控未成熟心肌细胞凋亡和对bcl-2、bax、fas表达的影响。方法采用兔离体心脏Langendorff灌注模型,24只幼兔随机分为三组：对照组（c组,n=8）：仅灌注KH液180rain;缺血／再灌组（I／R组,n=8）：心脏灌注20min后,停灌60min,复灌100min;下肢缺血预处理组（LIP组,n=8）,反复3次阻断双下肢血流5min／放开5min,建立Langendorff模型,然后重复I／R组缺血,再灌方法。细胞原位标记与半定量分析细胞凋亡和bcl-2、bax、fas蛋白表达。结果凋亡细胞原位标记与半定量分析：LIP组与I／R组比较,心肌细胞凋亡率明显减少,bcl-2表达明显增多,bax、fas表达明显减少。结论下肢缺血预处理可减少心肌细胞凋亡和调控心肌bcl-2、bax、fas表达。     

参麦注射液对兔心肌缺血再灌注内皮功能的影响

目的 :观察兔心肌缺血再灌注 (I/R)损伤中内皮功能改变 ,参麦注射液 (SMI)对其影响及作用机制。方法 :检测假手术对照组、心肌I/R模型组及心肌I/R加SMI治疗组 ,不同时期血中一氧化氮代谢产物 (NOP)和内皮素 (ET)含量及心肌组织NOP、ET、总超氧化物歧化酶 (T SOD)和丙二醛 (MDA)含量 ,并电镜观察心肌超微结构。结果 :I/R模型组与假手术对照组比较缺血 4 0min、再灌注 4 0min血清NOP明显降低 ,血浆ET显著增高 ;再灌注 4 0min后心肌组织NOP、T SOD明显降低 ,ET、MDA明显增高 ,心肌超微结构发生异常改变。而I/R加SMI治疗组与I/R模型组比较上述改变减轻。结论 :心肌I/R导致血管内皮功能紊乱 ;SMI能够改善I/R时的内皮功能 ,减轻心肌I/R损伤     

葡萄糖酸镁对离体大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡和Fas及FasL的影响

目的观察葡萄糖酸镁对离体大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡和Fas/FasL水平是否存在影响及其可能机制。方法48只雄性SD大鼠随机分为3组:对照组,缺血再灌注组(I/R组),葡萄糖酸镁组。实验1:每组取8只大鼠,对照组用改良的K-H液持续灌注110 min;I/R组用改良的K-H液灌流20 min后,停灌30 min,再灌注60 min;葡萄糖酸镁组改良的K-H液中加入葡萄糖酸镁2.4 mmol/L,余同I/R组。检测心肌灌流液中肌酸激酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH)含量,心肌组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)含量。实验2:取每组其余8只大鼠,实验过程类似实验1,不同点是其再灌注时间改为120 min。实验结束检测心肌Fas和FasL蛋白表达及心肌细胞凋亡指数。观察实验1、2再灌注20min内心律失常发生情况。结果与I/R组比较,葡萄糖酸镁组心律失常发生率显著下降(P<0.01);再灌流出液中CK、LDH含量明显降低(P<0.01);心肌组织T-SOD活性显著升高(P<0.01),MDA含量、Fas/FasL蛋白表达及细胞凋亡指数明显降低(P<0.01)。结论葡萄糖酸镁可清除氧自由基,干预Fas/FasL的表达从而减少心肌细胞凋亡。     

金属硫蛋白对离体心脏心肌间质的保护作用

目的 探讨金属硫蛋白(MT)对离体心脏心肌间质的影响。方法 Wistar大鼠16只,分为2组:对照组(C,n=8),腹腔注射蒸馏水0.5ml 24h后取离体心脏行离体灌注(Langendorff模型),测定心功能,然后灌注HTK心脏保护液,4C保存3h后再行Langendorff灌注25min;实验组(E,n=8)腹腔注射3.6％硫酸锌(1.5 ml/kg)24 h后取离体心脏,处理方法同C组。以心肌细胞中MT含量、血流动力学指标、心肌组织羟脯氨酸(HP)含量、内皮素(ET)含量和心肌超微结构等作为观察指标。结果MT含量E组与C组比较明显增高;E组心功能恢复方面优于C组(P<0.05),HP含量优于C组(P<0.01),ET含量低于C组(P<0.01),心肌超微结构损伤较C组明显减轻。结论MT对供心心肌间质具有保护作用。     

Effect of a novel cardioprotective agent, JTV-519, on metabolism, contraction and relaxation in the ischemia-reperfused rabbit heart

The effect of a novel cardioprotective agent, JTV-519 on myocardial metabolism and contraction during ischemia and reperfusion was investigated by means of phosphorus 31-nuclear magnetic resonance (31P-NMR) in Langendorff rabbit hearts. Normothermic, 20-min, global ischemia was followed by 30-min of postischemic reperfusion and JTV-519 was administered from 40 min prior to the global ischemia. Adenosine triphosphate (ATP), creatine phosphate (PCr), inorganic phosphate (Pi), intracellular pH (pHi), left ventricular developed pressure (LVDP), left ventricular end-diastolic pressure (LVEDP) and coronary flow were measured. Fourteen hearts were divided into 2 experimental groups of 7: Group I were controls and Group II were perfused with JTV-519 (10(-6) mol/L). During ischemia, Group II showed a significant (p<0.01) inhibition of the increase in Pi and LVEDP and the decrease in ATP and pHi, compared with Group I. After postischemic reperfusion, Group II also showed a significant (p<0.01) improvement in ATP and pHi as compared with Group I. There were no differences in LVDP or coronary flow during ischemia and reperfusion between the 2 groups. In conclusion, JTV-519 had a significant beneficial effect on myocardial energy metabolism and relaxation during both myocardial ischemia and reperfusion.