视网膜母细胞瘤抑制基因分子生物学研究进展

视网膜母细胞瘤（ＲＢ）由于仅发生在婴幼儿，又有遗传与非遗传二种形式，一直被认为是研究肿瘤遗传学及肿瘤发病机理的理想模式。有关肿瘤发生的“二次突变论”、“隐形调节基因假说”及“抗癌基因理论”都是在研究ＲＢ的基础上建立并完善的。目前Ｒｂ基因研究是当今国际上肿瘤学、细胞生物学及分子生物学的前沿课题，因为Ｒｂ基因除参与ＲＢ肿瘤的形成外，在正常细胞周期的调控及多种不同组织学来源的恶性肿瘤发生发展中也起重要作     

人眼视网膜母细胞瘤细胞凋亡的研究

目的 观察人视网膜母细胞（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ,ＲＢ）标本中细胞凋亡,探讨细胞凋亡在ＲＢ发生发展及消退中的作用。方法 用ＴＵＮＥＬ方法光镜和电镜观察人ＲＢ摘除眼球标本中是否存在细胞凋亡。结果 １５例人ＲＢ分化型和未分化型标本中有９例发现少量凋亡细胞,自发退化型ＲＢ中未发现凋亡细胞。每例中均见成片出现的坏死细胞。结论 视网膜母细胞瘤细胞死亡通过坏死与凋亡２种途径。细胞凋亡是ＲＢ自发退化的机制     

视网膜母细胞瘤的研究进展

视网膜母细胞瘤(RB)是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤,严重影响患儿的视力,甚至可危及生命.随着生物学技术的提高,RB的研究已取得一些突破.目前的研究主要集中于阐明其病因及发病机制,最终目的是用于指导临床预防、检测和治疗.基因治疗RB是近年来新型的治疗方法,为RB的治疗及预后的改善带来了契机,有望成为继手术、化学治疗、放射治疗之后一种全新的治疗模式.就RB肿瘤细胞的组织来源、Rb基因突变的检测、RB遗传易感性的研究及基因治疗实验研究的发展方向等进行系统综述.     

人视网膜母细胞瘤的细胞凋亡

目的 观察凋亡是否为视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞死亡的主要方式。方法 应用光镜（１６例）、电镜（４例）及ＴＵＮＥＬ标记（１２例）对ＲＢ进行观察研究。结果 光镜下凋亡细胞大多位于退化区。电镜下可见不同凋亡阶段的ＲＢ细胞,占瘤细胞死亡的４２％。ＴＵＮＥＬ标记阳性细胞大多位于肿瘤退化区。凋亡指数（ＡＩ）在未分化型和放疗后的ＲＢ中明显增高（Ｐ〈０．０５）,与视神经受累与否及临床分期无关（Ｐ〉０．０５）。结论 凋亡可能是导致ＲＢ细胞死亡的主要形式,诱导调亡可作为促使ＲＢ退化的一种手段。     

单眼散发性视网膜母细胞瘤Rb基因缺失的研究

对12例单眼散发性视网膜母细胞瘤患者进行了Rb基因存在状态的检测,其中3例Rb基因剂量低于正常对照、2例有异常大小DNA片段出现、2例DNA片段部分缺失,并且1例体细胞Rb基因有扩增改变,这种改变为首次报导。     

视网膜母细胞瘤的免疫学研究进展

视网膜母细胞瘤(Rb)的免疫学研究已表明Rb瘤细胞上存在肿瘤相关的特异性抗原,Rb的发生可能与免疫遗传有一定关系;Rb患者存在特异性的抗肿瘤细胞免疫和体液免疫,但大多数病人的非特异性细胞免疫和体液免疫功能低下,抗肿瘤免疫被抑制。视网膜母细胞瘤(Rb)是婴幼儿最常见的眼内恶性肿瘤,其病因,发病机理及病变转归的机制至今仍不甚清楚。近年来的临床观察和实验室研究提示免疫因素可能在Rb的发生发展中起着一定作用,抗肿瘤免疫已成为Rb研究的重要课题。本文就Rb的肿瘤抗原,免疫遗传学、机体对Rb的免疫应答、宿主的免疫功能状态等方面的研究进展综述如下。     

视网膜母细胞瘤基因治疗实验研究进展

基因治疗是视网膜母细胞瘤的新型治疗方法,本文就视网膜母细胞瘤自杀基因治疗、抑癌基因治疗、抗血管生成基因治疗和促凋亡基因治疗四种策略,从其理论基础和相关的实验研究进展方面进行综述.视网膜母细胞瘤的基因治疗显现出较好的应用前景,但目前尚有一些制约因素.     

10遗传型视网膜母细胞瘤肿瘤Rb基因突变分析

１０例遗传型视网膜母细胞瘤肿瘤组织Ｒｂ基因突变分析张清炯箕田健生曾瑞萍吴中耀遗传性视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ）是由Ｒｂ基因两次突变而失活所致，第一次突变为生殖细胞性突变，第二次突变为体细胞性突变。生殖细胞性突变决定携带者患ＲＢ的...     

Update on pathology of retinoblastoma

Retinoblastoma is caused by mutational inactivation of both alleles of the RB1 gene, which maps to chromosome 13q14 and encodes retinoblastoma protein that acts as a tumor suppressor. Histopathological high-risk features of retinoblastoma are predictive of metastasis or local recurrence. The focus of this update is to emphasize the recent advances in pathology, various molecular key pathways and genome wide approaches for newer potential therapeutic future targets associated with retinoblastoma tumor biology. This review article highlights the new biomarkers expressed by the retinoblastoma tumor for the better survival of patients.     

Rb基因诱导视网膜母细胞瘤移植瘤细胞凋亡的实验研究

目的观察外源性Ｒｂ基因对视网膜母细胞瘤（ＲＢ）细胞凋亡的影响。方法建立裸鼠眼玻璃体腔ＲＢ移植瘤模型及构建Ｒｂ基因的逆转录病毒表达载体Ｐｂａｂｅ－Ｒｂ，用脂质体Ｄｏｓｐｅｒ介导法将Ｒｂ基因导入裸鼠ＲＢ移植瘤，采用流式细胞术（ＦＣＭ），光镜、电镜及ＴＵＮＥＬ细胞凋亡原位末端标记法进行ＲＢ细胞凋亡的检测。结果Ｒｂ基因在ＲＢ移植瘤内表达至少持续７天。ＦＣＭ检测发现在Ｒｂ基因转染后第４天，各实验组治疗眼ＲＢ中均可检测到凋亡细胞峰，凋亡细胞百分率高于对照眼；第２０天，各实验组治疗眼细胞凋亡百分率与对照眼比无差异（Ｐ＞０．０５）。透射电镜下可见到典型的早期凋亡细胞及晚期凋亡小体形成。ＴＵＮＥＬ方法可在荧光显微镜下见到发黄绿色荧光的凋亡细胞，光镜下可见到紫红色的被标记的凋亡细胞。结论Ｒｂ基因可诱导ＲＢ移植瘤细胞凋亡，这可能是Ｒｂ基因体内抗癌的又一作用机制。     

Apoptin基因诱导视网膜母细胞瘤凋亡的研究

目的观察Apoptin基因对人视网膜母细胞瘤细胞株HXO-RB44的促凋亡作用,并探讨其可能的机制。方法用脂质体将Apoptin基因导入HXO-RB44细胞,通过RT-PCR法检测ApoptinmRNA的表达,同时用SABC免疫组织化学法分析Apoptin和p53的表达。采用细胞计数法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果转入Apoptin基因后,HXO-RB44细胞的生长明显受抑制（P〈0.05）。细胞周期分析可见凋亡峰,凋亡率为38.5%。细胞中可见Apoptin阳性表达（P〈0.05）,p53表达差异无统计学意义（P〉0.05）。凋亡细胞在荧光显微镜下形成凋亡小体。结论转入Apoptin基因可显著促进HXO-RB44细胞的凋亡,Apoptin诱导的凋亡不依赖功能性p53的生成。     

国人视网膜母细胞瘤患者RB1基因突变的特性

目的:检测国人RB患者体细胞中RB1基因突变,分析我国RB1基因突变的特性,探讨RB1基因突变的分子生物学机制。方法:应用PCR—SSCP技术筛查28例RB患者及亲属的白细胞基因组DNA,测序分析确定突变。结果:共确定7例RB1基因生殖细胞性突变。结论:本组RB1基因生殖细胞性突变的方式为点突变和小缺失,这些突变改变了RB1基因的遗传信息,致使异常的RB1基因蛋白产生,导致视网膜母细胞瘤的发生。中国RB1基因突变方式主要是以微小突变为主,但复杂突变的比例相对较高。     

视网膜色素变性的分子生物学及基因治疗研究进展

视网膜色素变性（retinitis pigmentosa,RP)是导致视觉损害最常见的遗传性眼病，历来是众医学家的研究焦点，本文对晚近RP的分子生物学和基因治疗前景进行了综述。     

视网膜母细胞瘤患者RB1基因突变筛选

目的：了解视网膜母细胞瘤患RBl基因的突变特点。方法：应用PCR-SSCP技术筛奄RB患白细胞基因组DNA，测序分析确定突变。结果：在RB患10例中，确定双眼RB患1例第8外显子37位核苷酸A-T突变，引起12位谷氨酸变为天门冬酰氨酸(G12A)。其母亲同样为第8外显子36位核苷酸A-T突变，引起12位谷氨酸变为天门冬酰氨酸(G12A)。结论：本组双眼RB患1例为遗传性，其RB1基因突变为微小突变，其母亲为突变基因携带，本研究为遗传咨询提供一些有价值的资料。     

Rb1基因第16内含子内21个碱基缺失1例

目地研究双眼视网膜母细胞瘤患者Rb1基因杂合性突变的分子生物学特性。方法应用PCR—SSCP直接测序技术检测双眼视网膜母细胞瘤患者白细胞DNA中Rb1基因杂合性突变。结果50例证实有Rb1基因杂合性突变的病例中有1例发生于第16内含子中可以用3种定位方法解释、具有相同序列的21个碱基缺失。结论这种极为少见的Rb1基因突变方式可能是由于破坏了正常拼接位点的结构而激活了“隐蔽拼接位点”，导致异常的Rb1基因mRNA产生或由此影响整个拼接过程。     

FasL,pRb在视网膜母细胞瘤中表达的研究

目的 探讨ＦａｓＬ及ｐＲｂ在视网膜母细胞中的表达及意义。方法 用免疫组织ＳＰ方法检测４５例视网膜母细胞瘤及１２例正常视网膜组织中ＦａｓＬ及ｐＲｂ蛋白的表达。结果 网膜母细胞瘤细胞表达ｐＲｂ、比正常组织显著降低。视网膜母细胞瘤和正常组织均高表达ＦａｓＬ。结论ＦａｓＬ的表达是贯穿视网膜细胞铰琢发展过程中的一个重要事件,ｐＲｂ低表达与肿瘤的发生有密切关系。     

Role of genetic testing in retinoblastoma management at a tertiary referral centre

Background: Retinoblastoma (MIM +180 200) is a malignant neoplasm affecting embryonal retina, associated with mutations in the RB1 gene. This paper investigates the results of RB1 testing in retinoblastoma management in a tertiary referral centre. Methods: A retrospective audit of genetic testing for retinoblastoma from 2003 to 2008, to determine epidemiology, rate of mutation detection and spectrum was undertaken. Eligible probands were identified from the department database and hospital records examined. DNA extracted from tumour tissue and/or peripheral blood was analysed. All patients and families underwent genetic counselling. Results: Twenty patients, including one family, were identified. Eight had bilateral tumours, of whom seven presented before 2 years of age, whereas 10 of 12 unilateral cases presented after 2 years of age. Ten patients (50%) were European, four Maori (20%), three Pacific (15%), two Asian (10%), and one of mixed ancestry (5%). Genetic analysis achieved mutation detection on all affected alleles of all the patients, with tumour tissue available for testing in 19 cases. Ten (40%) had germline mutations (eight bilateral and two unilateral), including one mosaic. 75% of affected Maori had germline mutations compared with 40% Europeans. A wide range of mutations was detected with one novel mutation identified in a familial case. Conclusion: Advances in gene testing have enabled a high rate of mutation detection, particularly when tumour tissue is genotyped. Genetic analysis is integral to the management of retinoblastoma patients allowing enhanced follow‐up care, avoidance of unnecessary examinations, family screening, counselling and reproductive planning, with early tumour detection in predisposed individuals.