胆囊收缩素、胃泌素对胆管癌细胞细胞内钙的调节

目的：探索胆囊收缩素（Cholecystokinin,CCK)、胃泌素（Gastrin)对胆管癌细胞细胞内钙的调控作用。方法：应用内钙测定技术，检测了CCK、Gastrin及其受体拮抗剂对胆管癌细胞株QBC939细胞（简称QB细胞）细胞内钙的影响。结果：CCK-8Sulfated(CCK-8S)、Gastrin-17(G-17)明显促进了QB细胞内钙的释放；CCK-A受体拮抗剂L364，718（L18）明显抑制了CCK-8S对细胞内钙的激活，CCK-B/Gastrin及受体拮抗剂L365，260（L60）抑制了G-17激发的细胞内钙释放。结论：细胞内钙参与了CCK、Gastrin对胆管癌细胞增殖影响的细胞内过程。     

缩胆囊素-A受体基因多态性与焦虑症的相关性

目的探讨焦虑症(AD)与缩胆囊素-A(CCK-A)受体基因多态性的相关性.方法运用PCR技术检测88例AD患者和87例健康对照(NC)组缩胆囊素-A受体基因多态性,并加以对照分析.结果 CCK-A受体基因的3种基因型(A1/A1、A1/A2和A2/A2),在AD组的分布分别为5%、41%和54%,在NC组分别为1%、44%和55%,两组间无显著性差异(P＞0.05);A1和A2等位基因频率,在广泛性焦虑(GAD)组分别为34%、66%,惊恐障碍(PD)组分别为18%和82%,两组间均有显著性差异(P＜0.05);A1/A1、A1/A2、A2/A2基因型分布频率,GAD组分别为5%、59%、36%,PD组分别为6%、24%和70%,两组间均有显著性差异(P＜0.05).结论 CCK-A受体基因多态性与AD之间无显著关联;AD两种亚型间CCK-A受体基因多态性有显著性差异.     

缩胆囊素-A受体基因多态性与焦虑症的相关性

目的探讨焦虑症(AD)与缩胆囊素-A(CCKA)受体基因多态性的相关性。方法运用PCR技术检测88例AD患者和87例健康对照(NC)组缩胆囊素-A受体基因多态性,并加以对照分析。结果CCKA受体基因的3种基因型(A1/A1、A1/A2和A2/A2),在AD组的分布分别为5%、41%和54%,在NC组分别为1%、44%和55%,两组间无显著性差异(P>0.05);A1和A2等位基因频率,在广泛性焦虑(GAD)组分别为34%、66%,惊恐障碍(PD)组分别为18%和82%,两组间均有显著性差异(P<0.05);A1/A1、A1/A2、A2/A2基因型分布频率,GAD组分别为5%、59%、36%,PD组分别为6%、24%和70%,两组间均有显著性差异(P<0.05)。结论CCKA受体基因多态性与AD之间无显著关联;AD两种亚型间CCKA受体基因多态性有显著性差异。     

胰腺腺泡细胞钙振荡及其研究进展

胰腺腺泡细胞在受到兴奋剂刺激后胞内可出现典型的规律性钙振荡。乙酰胆碱(ACh)和缩胆囊素(CCK)是胰腺腺泡细胞的生理兴奋剂,也是研究中最常使用的兴奋剂。不同兴奋剂引起的胰腺腺泡细胞钙振荡各有特点,这可能与它们产生的机制不同有关。这种规律性钙振荡参与腺泡细胞的多种生理学功能,研究胞内钙振荡的产生机制和调控具有重要的生理和病理生理意义。该文主要综述ACh和CCK引起的胰腺腺泡细胞钙振荡的特点、研究方法、产生机制及相关研究进展。     

胆囊结石中胆固醇含量与胆囊动力、缩胆囊素及其受体间关系的研究

目的分析胆囊结石中胆固醇的含量与胆囊动力、CCK及其受体间的关系。方法收集来我院进行治疗的93例胆囊结石患者分为三组(n=31):胆色素结石组(A组)、混合性结石组(B组)和胆固醇结石组(C组)。选取健康研究对象30例作为正常对照组(D组)。结果 A、B、C组间的胆固醇含量差异有统计学意义(P<0.05);C组、B组患者的FV、RVmin及EVmax与其他的组别间差异有统计学意义(P<0.05);脂餐后CCK的浓度、CCK-AR含量及活性在各组别中的差异有统计学意义(P<0.05);胆囊结石中胆固醇的含量明显正相关于脂餐后CCK浓度,负相关于EVmax%、胆囊壁中CCK-AR活性、含量(P<0.05);胆囊壁CCK-AR含量、活性明显负相关于脂餐后血浆CCK浓度、明显正相关于EVmax%(P<0.05)。结论胆固醇通过对CCK造成影响而使机体的胆囊动力减弱,从而对于形成胆固醇结石起到了促进作用。     

胆囊收缩素A受体拮抗剂在胰腺再生模型中的作用

目的研究胆囊收缩素(CCK)在实验性胰腺再生模型中的作用。方法将24只大鼠,随机分成3组,Wistar大鼠分为假手术(A)组、手术加使用CCK-RA受体完全拮抗剂(B)组和手术但不使用CCK-RA受体完全拮抗剂(C)组,测定5 d后,它们环胆管下端部分湿重以及放免法血清CCK的浓度。结果A组环胆管下端部分湿重为(86.98±3.51)mg,B组为(92.46±6.67)mg,C组为(210.72±7.39)mg,3组比较差异有显著性(F=772.9,P<0.01),其中A,C组差异无显著性(t=1.762,P>0.05);A组中血清CCK的水平为(28.22±2.45)pg/ml,B组为(53.62±4.49)pg/ml,C组为(62.85±4.33)pg/ml,3组比较差异有显著性(F=171.8,P<0.01)。结论内源性CCK是胰腺再生的基本要素之一,胰腺部分切除可以促进其分泌,这些作用可以被CCK-RA遏制,有关分子机制有待进一步阐明。     

辣椒对人体空腹胆囊容积和试餐引起的胆囊收缩的影响

使用超声成像仪研究辣椒对健康成人空腹胆囊容积和试餐引起的胆囊收缩的影响。结果表明，吞服１０％的辣椒煎液１０ｍｌ，１ｈ可见胆囊收缩，胆囊容积明显减小，而不明显影响试餐引起的胆囊收缩。     

双歧杆菌粘附素对脂多糖和H2O2调节肠上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的研究双歧杆菌分泌型粘附素对脂多糖(LPS)和H2O2体外调节肠上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法用3H-TdR掺入法、流式细胞仪和荧光染色等方法观察肠上皮细胞增殖和凋亡的情况。结果100 μg/L LPS对细胞增殖和凋亡均有促进作用,200 μmol/L H2O2可抑制肠上皮细胞增殖,促进凋亡。丫啶橙荧光染色见细胞核染色质致密浓染或裂解成碎片。预先经双歧杆菌分泌型粘附素处理后,LPS组细胞增殖和凋亡率均显著下降,H2O2组细胞凋亡明显减少。结论在体外,双歧杆菌分泌型粘附素能抑制LPS和H2O2对肠上皮细胞的损害作用,维持肠上皮细胞增殖与凋亡的平衡。     

脂多糖诱导的肺动脉平滑肌细胞胆囊收缩素受体基因表达的变化

内毒素休克(endotoxicshock ,ES)是临床常见的危重病症,肺脏是ES时最易受损的靶器官之一。本室系列研究发现内、外源性八肽胆囊收缩素(cholecystokininoctapeptide ,CCK 8)有明显抗ES的作用,可逆转ES早期的肺动脉压升高;进一步研究发现,CCK 8对ES动物的保护作用与CCK 8逆转脂多     

异丙酚、咪唑安定、依托咪酯及同芬太尼复合后对大鼠心肌细胞钙离子移动的影响

的　观察麻醉诱导峰浓度的异丙酚、咪唑安定、依托咪酯及同芬太尼复合后,对心肌细胞钙离子移动的影响,研究其对心肌收缩力的作用。方法　用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色急性分离的大鼠心肌细胞,在激光共聚焦显微镜下动态观察用药前和使用异丙酚(50μmol/L)、咪唑安定(3μmol/L)、依托咪酯(3μmol/L)及复合芬太尼(20ng/ml)后,KCl诱发的细胞内钙离子荧光强度的变化。结果　异丙酚明显抑制钙离子跨膜内流,细胞内钙荧光强度峰值较对照组下降15.3%(P<0.05),而咪唑安定、依托咪酯虽减慢钙的内流,但最终细胞内钙荧光强度与对照组无统计学差异(P>0.05)。复合芬太尼后,各组细胞内钙荧光强度升高的速度和峰值较单独使用该静脉麻醉药无统计学差异(P>0.05)。结论　复合使用芬太尼不会加重异丙酚、咪唑安定、依托咪酯对心肌细胞钙内流的抑制作用     

缺血(氧)鼠心肌肌质网和线粒体内钙离子变化的研究

用液体闪烁计数法测定离体再灌注鼠心肌肌质网(SR)和线粒体(Mit)内~(45)Ca~(2+)放射性强度(cpm),比较能量制剂ATP-氯化镁,活性氧自由基清除剂SOD和钙阻滞剂Verapamil对离体缺血(氧)再灌注鼠心肌细胞SR和Mit钙离子浓度的影响。结果表明,ATP-氯化镁,SOD和Verapamil组SR内~(45)Ca~(2+)的cpm均高于对照组cpm(P<0.01或P<0.05),而Mit内均低于对照组cpm(P<0.01)。此3种药物均能增高离体大鼠心肌细胞内SR~(45)Ca~(2+)和降低Mit~(45)Ca~(2+)积聚,从而保护心肌细胞缺血再灌注损伤。     

安定对胎鼠脑细胞内钙的影响

目的研究安定在中枢神经系统的钙拮抗作用.方法采用钙敏感的荧光探针Fura-2技术测定细胞内钙及变化.结果在不同外钙(0 mmol/L,0.01 mmol/L,0.10 mmol/L,1.00mmol/L,1.30 mmol/L)条件下,细胞内钙离子浓度(简写[Ca2+]i)分别为(41±6)mmol/L,(59±6.85)mmol/L,(85±2)mmol/L,(104±8)mmol/L,(126±5)mmol/.安定0.4 mmol/L对细胞内钙没有显著影响.但安定(0.1 mmol/L～1.0 mmol/L)能浓度依赖性地抑制高钾及L-谷氨酸诱发的[Ca2+]i增高的作用(外钙1.3 mmol/L).其50%抑制率(IC50)分别为0.649 mmol/L(95%可信度为0.224 mmol/L～2.152 mmo[/L)及0.440 mmol/L(95%可信度为0.305 mmol/L～0.635 mmol/L).结论安定通过阻滞电压依从性钙通道及受体操纵性钙通道,在中枢神经系统具有较强的钙拮抗作用.     

匹那地尔对大鼠心肌细胞内钙及舒缩功能的影响

目的探讨匹那地尔对高钾停搏液处理后大鼠离体心肌细胞内游离钙与舒缩功能的影响。方法SD大鼠心室肌细胞酶解分离静息1~2 h后随机分为对照组,高钾停搏液组,匹那地尔强化组,格列苯脲拮抗组。四组细胞均在24℃下保存2 h,此后对细胞进行复氧、复灌20 m in并测定细胞收缩、[Ca2 ]i瞬态、肌浆网内贮钙释放功能。结果匹那地尔使心肌细胞在缺血再灌注中收缩功能,[Ca2 ]i瞬态,肌浆网内贮钙释放能力明显优于高钾停搏液组(P<0.01〉及细胞内钙释放后的钙峰回落时间明显短于高钾停搏液组(P<0.01〉。结论匹那地尔通过维持良好的肌浆网和细胞膜Na /Ca2 交换体功能来调节钙瞬态变化,减少细胞内钙超载从而改善心肌细胞缺血后收缩功能,同时避免了高钾停搏液的负面效应。     

P2Y6受体在慢性癫痫发作大鼠海马组织中的表达及对Ca~(2+)的影响

目的:建立慢性癫痫发作SD大鼠模型并检测海马组织P2Y6受体表达改变,研究P2Y6受体-Ca2+信号通路改变。方法:采用氯化锂和匹罗卡品腹腔注射建立SD大鼠慢性癫痫发作模型(EPI组)并检测其脑电图,以腹腔注射生理盐水SD大鼠为对照(CON组)。采用免疫组织化学、RT-PCR和Western blot检测EPI组和CON组SD大鼠海马组织P2Y6受体mRNA和蛋白质表达并比较其差异。采用Fura-2/AM检测EPI组和CON组SD大鼠新鲜海马组织细胞内Ca2+浓度并对比其差异。结果:CON组正常SD大鼠脑电图波形主要以α波为主,并伴有低幅度的β波及少量的δ波,几乎未捕捉到棘波发放;EPI组SD大鼠的脑电图出现较为规律的棘波发放,其频率多集中于28Hz,波幅不高于200μV。EPI组慢性癫痫发作SD大鼠海马组织P2Y6受体表达、mRNA、蛋白质和细胞内Ca2+显著高于CON组正常SD大鼠(均P<0.05)。结论:P2Y6受体在慢性癫痫发作大鼠海马组织表达显著升高,激活下游信号传导通路导致细胞内Ca2+水平升高,可能在慢性癫痫发作的发病机制中具有重要作用。     

舟山眼镜蛇毒蕈碱样多肽的分离及其对M胆碱受体的激动效应

目的 从舟山眼镜蛇Naja atra蛇毒中分离毒蕈碱样多肽,探讨其与M胆碱受体的关系.方法 应用分子筛凝胶Sephadex G-50、Sephadex G-100、离子交换凝胶CM-Sepharose F.F.分离纯化目的组分;SDS-PAGE鉴定目的蛋白的纯度并测定其相对分子质量;放射受体分析法测定该物质与大鼠脑组织M胆碱受体的亲和力;选用离体豚鼠回肠纵行肌观察其对M胆碱受体的效应.结果 从舟山眼镜蛇蛇毒中获得一种与大鼠脑组织M胆碱受体具有高亲和力的多肽(Ki为10.12 nmol/L),其相对分子质量约14 kD.该多肽可引起离体豚鼠回肠纵行肌收缩,此效应可被阿托品阻断.结论 舟山眼镜蛇蛇毒中获得与M胆碱受体具有高亲和力的多肽,该多肽对M胆碱受体具有激动效应.     

Lead Can Inhibit NMDA-,K~ -,QA/KA-Induced Increases in Intracellular Free Ca~(2 ) in Cultured Rat Hippocampal Neurons

Objective To examine the effects of Pb2 on N-methyl-D-aspartate (NMDA)-, K - and quisqualate(QA)/kainite(KA)-induced increases in intracellular free calcium concentration ([Ca2 ],) in cultured fetal rat hippocampal neurons in order to explain the cognitive and learning deficits produced by this heavy metal. Methods Laser scanning confocal microscopy was used. Results The results clearly demonstrated that adding Pb2 before or after NMDA/glycine stimulation selectively inhibited the stimulated increases in [Ca2 ], in a concentration-dependent manner. In contrast, Pb2 treatment did not markedly affect increases in [Ca2 ], induced by an admixture of QA and KA. The minimal inhibitory effect of Pb2 occurred at 1μmol/L, and more than seventy percent abolition of the NMDA-stimulated increase in [Ca2 ], was observed at 100 μmol/L Pb2 . Evaluation of Pb2 -induced increase in [Ca2 ], response to elevating extracellular concentrations of NMDA, glycine or calcium revealed that Pb2 was a noncompetitive antagon     

肾上腺素受体激动剂对新生大鼠心肌细胞胞质型磷脂酶A2的活化作用

目的探讨肾上腺素受体(adrenergic receptor,AR)激动剂对培养的新生大鼠心肌细胞胞质型磷脂酶A2(cy-tosolic phospholipase A2,cPLA2)的磷酸化效应及机制。方法分别用β-AR激动剂异丙肾上腺素(10μmol/L)和α1-AR激动剂苯肾上腺素(10μmol/L)处理培养的新生大鼠心肌细胞,Western blot法检测cPLA2及丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)磷酸化水平随时间变化的效应曲线。结果α1-AR激活引起心肌细胞内cPLA2磷酸化水平显著增高,此效应可能由p38MAPK及ERK1/2的磷酸化介导;β-AR激活可引起p38MAPK及ERK1/2的磷酸化,但不伴有cPLA2的磷酸化。结论实验结果揭示了心肌细胞中α1-AR激动在调控cPLA2活性方面的重要作用。     

高糖对大鼠心肌细胞NMDA受体表达、胞内钙和超氧自由基水平的影响

目的 探讨高浓度葡萄糖对心肌细胞促离子型谷氨酸受体亚型NMDA受体（NMDAR）表达、胞内钙水平以及活性氧自由基产生的影响.方法 分离新生（1～3天）大鼠心室肌细胞,心肌细胞与不同浓度葡萄糖（对照组葡萄糖浓度5mmol/L,高糖组葡萄糖浓度33mmol/L）共孵育24 ～ 72h后,用Western blot法检测心室肌细胞NMDAR1和NMDAR2B亚单位的表达水平,活细胞工作站检测胞内Ca2＋水平,流式细胞术检测细胞内活性氧自由基（ROS）含量.结果 与对照组细胞相比,高浓度葡萄糖使心肌细胞的NMDAR2B的表达水平明显上调（P＜0.05）,而NMDAR1的表达则降低.经高糖处理的心肌细胞在收缩时胞内钙水平高于对照细胞,高糖处理使心肌细胞的ROS水平升高,而用MK-801选择性阻断NMDAR可明显降低由高糖所致的胞内ROS增高（与高糖组对比,P ＜0.05）.结论 高浓度葡萄糖可上调乳鼠心肌细胞NMDAR2B及下调NMDAR1的表达,并增加细胞内Ca2＋水平及ROS的生成,而阻断NMDAR可抑制ROS的生成.提示NMDAR可能参与糖尿病性心肌损害。     

急性胰腺炎大鼠细胞钙镁ATP酶活性的变化

目的 观察大鼠急性胰腺炎（AP）时胰、肝、肾组织细胞钙镁ATP酶（Ca^2 -Mg^2 ATP酶）活性的变化，阐述AP时细胞钙超载与Ca^2 -Mg^2 ATP酶活性变化的关系。方法 经胰胆管逆行注射4％牛黄脱氧胆酸钠，进行大鼠AP造模，以中药清胰汤作为治疗组对照，于2h取AP大鼠的胰、肾、肝行酶组织化学染色及HE染色，观察Ca^2 -Mg^2 ATP酶的活性变化。结果 AP时大鼠各脏器Ca^2 -Mg^2 ATP酶活性明显下降，不同脏器细胞Ca^2 -Mg^2 ATP酶的活性随病程的发展而呈规律性的变化。清胰汤治疗组Ca^2 -Mg^2 ATP酶活性明显高于造模组。结论 AP时细胞Ca^2 -Mg^2 ATP酶活性明显下降，细胞内钙超载与Ca^2 -Mg^2 ATP酶的活性变化有关，可通过提高细胞能量和增加Ca^2 -Mg^2 ATP酶活性减轻AP的症状，为临床AP的治疗提供理论基础。