棘球蚴B抗原序列的不均一性

棘球蚴B抗原是一种耐热的160kDa脂蛋白,为棘球蚴囊液的主要抗原。有约90％细粒棘球蚴病人和约40％泡状棘球蚴病人有其抗体,说明这两种棘球蚴均有B抗原。经免疫荧光检测它主要存在于原头节的表皮细胞,也存在于囊液中,表明它是一种分泌性抗原。 最近已从英国羊获得的细粒棘球蚴中分     

检测包虫病患者血清特异IgG4诊断价值的研究

目的 探讨检测患者血清特异IgG4诊断包虫病的效果。方法 采用两种抗原（棘球蚴囊液粗抗原及其抗原B）通过ELISA法检测棘球蚴病病人、非棘球蚴病病人和健康对照血清特异IgG4。结果 粗抗原和抗原B检测棘球蚴患者血清特异IgG4的阳性率分别为94．4％和89．8％;与部分猪囊尾蚴病患者血清出现交叉反应外,与肺吸虫病、旋毛虫病、血吸虫病、肝囊肿等患者的血清以及健康对照血清均未出现交叉反应。结论 检测棘球蚴患者血清特异IgG4敏感性高,特异性强,具有较好的诊断价值。     

检测包虫病患者血清特异IgG4诊断价值的研究

目的探讨检测患者血清特异IgG4诊断包虫病的效果.方法采用两种抗原(棘球蚴囊液粗抗原及其抗原B)通过ELISA法检测棘球蚴病病人、非棘球蚴病病人和健康对照血清特异IgG4.结果粗抗原和抗原B检测棘球蚴患者血清特异IgG4的阳性率分别为94.4%和89.8%;与部分猪囊尾蚴病患者血清出现交叉反应外,与肺吸虫病、旋毛虫病、血吸虫病、肝囊肿等患者的血清以及健康对照血清均未出现交叉反应.结论检测棘球蚴患者血清特异IgG4敏感性高,特异性强,具有较好的诊断价值.     

一种细粒棘球绦虫抗原基因克隆的表达及诊断价值分析

棘球蚴病(CHD)的诊断主要依靠免疫学方法,但由于使用的抗原为棘球蚴囊液粗抗原,因此交叉反应较多。用重组的细粒棘球绦虫抗原作代替抗原是一项重要的改进。本文作者分离了一种编码细粒棘球绦虫抗原的cDNA序列,并对其潜在的诊断价值进行了分析。     

单克隆抗体竞争性ELISA诊断人棘球蚴病的评价

用对流免疫电泳(IEP)及常规ELISA诊断细粒棘球蚴病时,对某些寄生虫可出现交叉反应。本文采用特异性高的棘球蚴抗原5(Ag5)和抗原B(AgB)结合敏感性高的单克隆抗体(McAb)作竞争性ELISA,以改进常规方法,用于人棘球蚴病的诊断。将羊的棘球蚴囊液(SHCF),离心过滤,     

琼脂凝胶双扩散试验诊断棘球蚴病的价值

为了了解琼脂凝胶扩散试验对棘球蚴病的敏感性及其应用于临床的可能性,作者以肝和肺棘球蚴病患者手术时无菌获得的蚴囊液及牡绵羊的蚴囊液为抗原,并经胶乳凝集反应与间接血凝反应用参考阳性与阴性血清检测抗原的活性及特异性。用的抗原液同棘     

单克隆抗体诊断人棘球蚴病

棘球蚴病是由棘球绦虫的幼虫引起的一种人畜共患病,常用中间宿主蚴囊囊液作为抗原进行血清学诊断。目前已纯化两种主要抗原:抗原5及B抗原。抗原5的特异性虽非绝对,可与多房棘球绦虫,猪肉绦虫等有一定交叉反应,但仍不失为诊断细粒棘球蚴病     

检测棘球蚴病患者血清内循环抗原的免疫层析试条的制备和评价

目的 以棘球蚴囊液纯化抗原特异性单克隆抗体为基础建立一种快速、简便诊断棘球蚴病的胶体金免疫层析试条方法,并对其进行评价。方法 纯化棘球蚴囊液抗原,并以此免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,对所制备的单克隆抗体确定其亚类和效价。筛选基于棘球蚴囊液纯化抗原制备的单克隆抗体对,采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记筛选到的单克隆抗体,并将其吸附于交联垫;将另一筛选到的单克隆抗体划线包被于同一硝酸纤维素膜适当位置,制成免疫层析试条。用该试条检测手术确诊的细粒棘球蚴病(87例)、多房棘球蚴病(40例)、囊尾蚴病(25例)、日本血吸虫病(10例)、弓形虫病(5例)、并殖吸虫病(5例)、华支睾吸虫病(5例)患者血清,以及60例健康者血清,以评价其检测的敏感性和特异性。结果 以棘球蚴囊液纯化抗原为免疫源制备单克隆抗体,共筛选了11株能高效分泌效价在1∶25 600～1∶102 400特异抗体的细胞株,抗体亚类为IgG₁或IgG_2a。筛选到的单克隆抗体F₃B₆作为标记抗体,单克隆抗体C_4<...     

细粒棘球蚴细胞系细胞代谢抗原检测

体外培养细粒棘球蚴细胞并培育成传代细胞系,将有可能不受限制地提供寄生虫抗原,并用于诊断、免疫预防研究［１,２］。本实验对人源细粒棘球蚴细胞系（１３Ｇ－５）进行特异表达功能检测。１　材料与方法１．１　材料　检测样品为人源细粒棘球蚴１３Ｇ－５细胞系第１６代细胞的细胞代谢产物。检测用细粒棘球蚴病人血清、羊抗细粒棘球蚴囊液ＩｇＧ、ＨＲＰ—兔抗羊包囊液ＩｇＧ等均由卫生部包虫病基地李雄副研究员提供并协助检测。１．１　方法　双体抗夹心ＥＬＩＳＡ法。采用两种不同的第一抗体进行包被,具体为：１．２．１　细粒棘球蚴…     

细粒棘球蚴病患者血清特异性IgG亚型抗体的检测

目的用细粒棘球蚴囊液抗原检测甘肃省环县地区细粒棘球蚴病患者血清中特异性Ig G及其亚型抗体。方法采集甘肃省环县地区经B超确诊的37例细粒棘球蚴病患者和29例健康人血清,ELISA法检测血清中抗棘球蚴囊液抗原的特异性Ig G抗体及其亚型Ig G1、Ig G2和Ig G4。应用Med Calc软件,以B超检测结果为金标准,根据ELISA结果绘制受试者工作特征(ROC)曲线,通过曲线下面积的配对z检验,比较这4种抗体的诊断性能差异,确定最佳诊断阈值。用卡方检验分析并比较棘球蚴囊液抗原用于检测4种抗体的灵敏性和特异性。结果用囊液抗原检测Ig G、Ig G1、Ig G2和Ig G4抗体的ROC曲线下面积分别为0.722、0.919、0.712和0.835,其中Ig G1的曲线下面积显著大于Ig G和Ig G2的面积(P0.05)。棘球蚴囊液抗原检测这4种抗体的灵敏性分别为54.1%、91.9%、67.6%和75.7%,其中Ig G1的灵敏性高于Ig G、Ig G2和Ig G4(P0.05);特异性分别为89.7%、82.8%、72.4%和89.7%,Ig G1的特异性与Ig G、Ig G2和Ig G4相比,差异无统计学意义(P0.05)。检测Ig G4抗体在CEⅠ-Ⅲ型病例中的灵敏性高于CEⅣ-Ⅴ型病例(P0.05)。结论棘球蚴囊液抗原检测血清中Ig G1抗体的灵敏性优于其他3种抗体,但特异性与其他3种抗体间差异无统计学意义。     

采用分子筛层析法分离纯化细粒棘球蚴囊液粗抗原

目的分离纯化细粒棘球蚴囊液抗原,去除其中的非特异性反应蛋白,探索优化囊液抗原制备方法。方法采用超滤法浓缩羊肝细粒棘球蚴囊液制备成粗抗原,并采用免疫印迹实验对囊液抗原进行分析,发现非特异性反应的主要蛋白条带。随后采用Superdex凝胶柱通过分子筛层析法对囊液抗原进行纯化。用44份细粒棘球蚴病患者、17份健康人和10份囊尾蚴患者血清进行酶联免疫实验,评估纯化后囊液抗原的检测能力。结果免疫印迹实验发现,非特异性反应的主要条带的相对分子质量(M_r)约为55 000,纯化后去除了该非特异性反应蛋白。纯化后的囊液抗原ELISA检测灵敏度为93.2%(41/44),特异性为94.1%(16/17),约登指数为0.87,与囊尾蚴病交叉反应性为30%(3/10)。未纯化前的灵敏度为90.9%(40/44),特异性为88.2%(15/17),约登指数0.79,与囊尾蚴病交叉反应性为60%(6/10)。纯化前后ELISA检测的灵敏度存在显著性差异。结论本研究采用分子筛层析法对羊源细粒棘球蚴的囊液抗原进行纯化,去除了引起非特异性反应的主要蛋白(M_r 55 000),为后续进行囊液抗原标准化、提高检测能力提供了依据。     

盆腔细粒棘球蚴病的诊断及治疗

目的 探讨盆腔细粒棘球蚴病的诊治方法.方法 对1980年1月至2009年1月收治的16例盆腔棘球蚴病病例的资料进行分析.结果 16例患者均有疫区犬、羊接触史,以下腹部包块为主要临床表现.用棘球蚴病囊液抗原(EgCF)、头节抗原(EgP)、囊液半纯化抗原B(EgB)、泡球蚴抗原(Em 2)等4项免疫试验检查4例,3例阳性.超声波和CT诊断符合率分别为35.7%和55.6%.采用内囊摘除术或外囊完整摘除术为主的手术治疗.16例中8例术前诊断明确.2例术前外伤破裂、1例术中囊液外溢共3例出现过敏性休克,经手术、抗过敏、抗感染治疗后治愈.4例术后复发.结论 流行病学、免疫学、CT及超声波检查是诊断盆腔棘球蚴病的主要方法.膀胱部分切除或内囊摘除术是治疗的主要手段.     

组合抗原在人类包虫病与囊虫病快速鉴别诊断中的应用

为研究包虫病与囊虫病之间的鉴别方法,通过纯化羊肝细粒棘球蚴囊液抗原（EgB)、泡球蚴组织抗原（Em2)、猪囊虫囊液抗原（Tsc2)后,分别检测包虫病、囊虫病,其它寄生虫病及正常对照观察组的血清,结果发现它们对相应寄生虫病的敏感性都在91%以上,对除绦虫病以外寄生虫病患及正常健康对照组都有较好的特异性,但它们各自对细粒棘球蚴病,泡状棘球蚴病和囊虫病的诊断都有程度不同的交叉反应,然而将上述抗原进行组合后再对同一标本进行检测,表明EgB单项阳性可以诊断细粒棘球蚴病,Em2单项阳性及Em2 EgB阳性可以基本诊断泡状棘球蚴病,Tsc2单项阳性可以诊断囊虫病患,Em2 EgB Tsc2同时阳性则考虑囊虫病可能性为大,乘下极少数的患Tsc2 Em2同时阳性则需根据临床表现考虑对囊虫病和泡状棘球蚴病进行临床鉴别诊断。     

SPA-ELISA评价三种不同纯度牛源细粒棘球蚴囊液抗原在包虫病免疫诊断中的价值

本文采用SPA-ELISA法评价了三种不同纯度牛源细粒棘球蚴囊液抗原在包虫病免疫诊断中的价值,用三种抗原检测了41例包虫病患者血清中特异IgG抗体的水平,它们的阳性率分别为:牛源细粒棘球蚴液粗抗原86.0％,半饱和硫酸铵法纯化抗原91.4％,氯化镁—磷钨酸法纯化抗原92.3％,两种纯化抗原与粗抗原的阳性检出率相比,经统计学处理具有显著差异,认为西北地区牦牛体内寄生的细粒棘球蚴囊液抗原不乏抗原活性;氯化镁—磷钨酸法和半饱和硫酸铵法是两种简便易行,纯化效果理想的抗原纯化方法,宜于在基层推广应用。     

用单克隆抗体夹心ELISA法检测棘球蚴病患者血清内CAg

棘球蚴病人体内存在循环抗原(Circulating anti-gen,CAg)和循环免疫复合物(Circulating immunocom-plex,CIC)已被证实,它们和棘球蚴的生活状态有密切关系。检测CAg和CIC对于棘球蚴病的临床早期诊断、疗效考核、判断愈后及流行病学调查均具有重要意义。我们于1990年建立了一株杂交瘤细胞株13F5,持续分泌抗棘球蚴囊液重复抗原表位的单克隆抗体,以此为基础,作者建立了单克隆抗体夹心ELISA,用于棘球蚴病人血清内CAg的检测,初步结     

同种和异种抗原在细粒棘球蚴病和泡状棘球蚴病的免疫荧光诊断中的比较价值

在间接免疫荧光技术(IFA)诊断寄生虫病试验中,细粒棘球蚴抗原的来源日益紧缺,而从实验动物啮齿类——泡状棘球蚴模型获取泡状棘球蚴抗原较方便。故本文作者用IFA以细粒棘球蚴和泡状棘球蚴的原头蚴抗原分别对同种和异种抗血清作比较研究,以探索同种抗原在改善泡状棘球蚴病的免疫诊断质量及其在血清流行病学调查中应用的可能性。所使用的泡状棘球蚴抗原材料取自实验性感染长爪沙鼠腹腔中的泡状棘球蚴,用胃蛋白酶溶液消化45分钟,从混悬液中可得到活的原头蚴。细粒棘球蚴抗原取自自然感染动物马的肝包虫囊液,经离心和洗涤后,获得     

青海省果洛州人与动物棘球蚴病调查

目的通过对青海省果洛州人群与动物棘球蚴病的调查与分析,了解当地棘球蚴病在人群和动物中的流行与分布状况。方法应用B超对人群进行患病率调查;囊液抗原间接血凝试验(IHA)法筛查人群棘球蚴抗体的阳性率;并分别用重组Em18(rEm18)、重组抗原B(rAgB)和Eg囊液抗原(EgcF),对随机选取的B超检查和IHA检测阳性者进行ELISA试验,与B超诊断结果进行符合率比较,评价泡型棘球蚴病(AE)、囊型棘球蚴病(CE)的分布情况;应用ELISA检测家犬和藏狐粪抗原阳性率;现场检查牛、羊胸腹腔,确定牛、羊感染率。结果人群调查:①B超检查2826人,总患病率为9.45%。血清IHA法检查1113人,阳性率25.79%。女性人群的患病率和血清阳性率均显著高于男性;②血清囊液抗原IHA检测阳性者(108)与ELISA法检测EgcF,阳性符合率为66.94%;3种重组抗原检测,ELISA法与IHA法阳性符合率为75.00%。③B超法诊断棘球蚴病(88人)与ELISA法检测,符合率EgcF为94.32%,rAgB为68.18%,rEm18为5l-4%。EgcF阳性率符合率为69.44%;3种抗原检测与IHA检测总体阳性符合率为75.00%。61例CE患者中,血清ELISA法检测,EgcF阳性率为96.72%,rAgB为68.85%,rEm18为33.33%;26例AE患者中,EgcF和rEm18阳性率均为92.31%,rAgB为65.39%。动物调查:①高原鼠兔棘球蚴感染率21.74%。经cytb基因分析,证实有多房棘球绦虫(E.multilocularis)和石渠棘球绦虫(E.shiquicus)感染。绵羊棘球蚴感染率82.61%,牦牛棘球蚴感染率78.52%。②野犬、藏狐、猞猁均有不同程度的棘球绦虫感染。结论青海省果洛州人群与动物中存在棘球蚴病的高度流行。E.shiquicus种的幼虫和成虫分别在高原鼠兔和藏狐体内寄生已得到证实,提示果洛州为3种棘球蚴的混合流行区。     

五种免疫学方法诊断棘球蚴病的评价

本文介绍了在肯尼亚对手术确诊的90例棘球蚴病病人用不同方法进行诊断以及三种方法结合使用的试验结果,并对年龄、性别,感染阶段以及蚴囊情况进行了分析。以粗制的人棘球蚴囊液(HHCF)作抗原。HHCF是从确诊病人的肝脏、肠系膜、腹部的蚴囊收集的。囊液用醋酸盐缓冲液进行透析并冻干。浓度为每1,000ml巴比妥缓冲液含10Og。高度免疫的兔血清是以PBS中加HHCF抗原0.5mg与等量福氏     

绵羊牦牛棘球蚴囊液及囊壁抗原的SDS—PAGE分析

本文应用十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对绵羊、耗牛棘球蚴囊液及绵羊棘球蚴囊壁可溶性粗抗原的蛋白组分进行了分析。使用10％凝胶,采用垂直板型电泳、考马斯亮兰R—250染色进行SDS-PAGE的结果表明,绵羊及耗牛棘球蚴囊液分别含有16及11种蛋白组分,分子量范围分别为270～16.5KD及280～17KD;主带均为8条。绵羊棘球蚴囊壁可溶性粗抗原共显示17条蛋白带,分子量范围245～17KD,主带8条。本项研究为进一步分析分离特异性抗原奠定了基础。     

棘球蚴囊液、头节和囊壁抗原的多肽图谱初步研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶卧式平板二维电泳和银染色法对棘球蚴囊液、头节和囊壁抗原进行了初步分析,以期对抗原的进一步纯化有所裨益。 抗原样品液取自羊肝的细粒棘球蚴。囊液抗原由吸出的囊液经离心、透析后,用聚乙二醇10000浓缩而成。将包囊内壁用生理盐水清洗三次,收集清洗液,经离心清洗出头节,再经冻融、超声粉碎、离心、透