血浆中氟伐他汀测定方法的研究及其应用

 目的建立血浆中氟伐他汀钠的含量测定方法,并用此法研究氟伐他汀钠在Beagle犬体内的药动学。方法血浆样品, 加同体积KH2PO4缓冲液(pH 2),乙醚提取,采用Diamonsil^TM C₁₈(4,6 mm×200 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-10 mmol·L^-1 KH₂PO₄ (用H₃PO₄调pH2)(75:25)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,荧光检测(λ_ex=305 nm,λ_em=390 nm)。所得数据用3P87药动学程序处理,求出有关的药动学参数。结果氟伐他汀在20.16～5 040.0μg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低检测限为5.04 μg·L^-1(S/N=3)。高、中、低3个质控样品的平均方法回收率为93.30％～102.9％,提取回收率大于90％,日内、日间精密度的 RSD均小于5％。结论本法简便、灵敏、重现性好,可用于氟伐他汀钠的血药浓度分析及药动学研究。     

人血浆中霉酚酸浓度测定方法研究及药物监测应用

 目的建立用高效液相色谱快速测定人血浆中霉酚酸浓度的方法,对我院肾移植病人霉酚酸血药浓度进行监测。方法血浆样品加20μLH₃PO₄酸化,乙醚提取,萘啶酸为内标,采用Kromasil 100-5C₈(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.05 mol·L^-1 KH₂PO₄(用磷酸调pH2.8)(12∶38∶50)为流动相,流速0.5 mL·min^-1,柱温25℃,检测波长254 nm。结果霉酚酸在0.191～24.45 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.191 mg·L^-1(S/N=10)。高、中、低3个质控样品的平均方法学回收率为89.7%～101.5%,提取回收率大于85%,日内、日间精密度的RSD均小于10%。监测肾移植患者环孢霉素或他克莫司的谷浓度同时,测定其MPA血药浓度,82.3%的患者MPA浓度小于2 mg·L^-1,低于有效治疗谷浓度。结论本法简便、灵敏、重现性好,可用于肾移植病人服用霉酚酸酯后霉酚酸血药浓度监测和霉酚酸酯药动学研究。     

普罗布考的HPLC分析及其在Beagle犬体内的药动学初探

 目的建立血浆中普罗布考浓度的HPLC分析方法,并用此法研究普罗布考在Beagle犬体内的药动学。方法 选择胺碘酮为内标,血浆经异辛烷-异丙醇(8:2)提取,采用Nova-Pak C₁₈(150 mm×3.9 am,4μm)色谱柱,以乙腈-水-10％正丁胺(94:6:0.01)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1;在紫外241 nm处检测。所得数据用3P87药动学程序处理,求出有关的药动学参数。结果 普罗布考在0.05～10.0μg·mL^-1内线性关系良好(r=0.999 7),最低检测浓度为0.01μg·mL^-1(S/N≥3)。平均方法回收率为97.8％～103.3％,日内、日间精密度的RSD均小于5％。结论 本方法简便、准确灵敏、重现性好,可用于普罗布考的血药浓度分析及药动学研究。     

反相高效液相色谱法测定血浆中文拉法辛浓度

 目的：建立高效液相色谱法检测人血浆中文拉法辛浓度。方法：血浆样品经石油醚-乙醚（2∶1）提取后，有机相再用50 mmol·L^-1盐酸反萃取并浓缩进样。色谱柱为氰基柱（250×4.6 mm，5 μm），乙腈-0.1 mol·L^-1NH₄H₂PO₄ (25∶75) 为流动相，UV检测波长229 nm。结果：文拉法辛血浆最低检测浓度10 μg·L^-1，线性范围25～800 μg·L^-1，萃取回收率75.5%～79.3%，加样回收率97.4%～101.2%, 日内RSD 4.87%～6.39%，日间RSD 7.55%～10.80%。结论：该法准确可靠，已用于临床患者文拉法辛血药浓度测定。     

液质联用测定血浆中阿奇霉素及其人体药动学和相对生物利用度研究

 目的建立人血浆中阿奇霉素的高效液相色谱-质谱测定方法,用于研究阿奇霉素分散片的人体药动学及相对生物利用度。方法血浆样品中加入内标克拉霉素后,经乙酸乙酯提取,采用高效液相色谱-质谱法,电喷雾电离源选择性正离子峰检测。用建立的方法测定18名健康男性志愿者单剂量口服阿奇霉素分散片实验制剂或参比制剂的体内经时过程,由血药浓度数据获得各自的药动学参数,以双单侧t检验进行生物等效性判定。结果在2.5～800μg·L^-1内呈良好的线性关系,r= 0.999 3,平均回收率为98.1％,日内RSD≤11．3％,日间RSD≤8.6%,单次服用500 mg阿奇霉素分散片实验制剂或参比制剂后的药动学参数AUC_0-120,ρ_max,t_max,t_1/2分别为(5 856.5±1 423.6)和(6 096.8±1 111.0)μg·h·L^-1,(520.1±94.1)和(558.8± 74.0)μg·L^-1,(1.4±0.4)和(1.3±0.2)h,(36.1±10.2)和(36.2±11.7)h。相对生物利用度为(96.3±16.0)%。结论该方法灵敏度高,无杂质干扰,结果准确。测得的实验制剂与参比制剂的主要药动学参数之间无明显差异,两种片剂为生物等效制剂。     

Beagle犬血浆中齐墩果酸浓度的测定

 目的建立测定Beagle犬血浆中齐墩果酸的HPLC-MS测定法,以进行齐墩果酸滴丸的生物利用度和药动学研究。方法采用HPLC-MS,以Hypersil GOLD(2.1 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为20 mmoL·L^-1醋酸铵-乙腈(24∶76),流速0.3 mL·min^-1,检测波长为210 nm。结果Beagle犬血浆内源性物质不干扰样品的测定,血浆中齐墩果酸浓度在3.88～240.00μg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 3);最低检测浓度为3.88μg·L^-1;方法平均回收率大于85%;平均提取回收率大于80%;日内和日间RSD均小于10%。结论所建立的测定方法准确可靠,符合生物样品分析要求。     

HPLC/MS考察大鼠和肝微粒体CYP450活性及硝苯地平代谢研究

 目的建立以硝苯地平为探针药物测定大鼠和犬肝微粒体活性的HPLC/MS。方法采用SHIMADZU VP-ODS(2.0mm×150mm,5μm)色谱柱;柱温为室温;以甲醇-水(55∶45)为流动相,流速:0.2mL·min^-1。选择正离子扫描(SIM)m/z 345。以硝苯地平为探针药物与大鼠或Beagle犬的肝微粒体进行体外孵育,以液相色谱串联质谱法测定硝苯地平的代谢产物氧化硝苯地平。结果在所建立的HPLC/MS条件下,硝苯地平的氧化产物保留时间约为7.15min。杂质峰不干扰测定;氧化硝苯地平最低检测限为3μg·L^-1(S/N=3),线性范围为0.01～10mg·L^-1,回收率及精密度均符合检测要求。结论该HPLC/MS能够准确的检测出在大鼠和Beagle犬肝微粒体中的硝苯地平氧化产物。     

RP-HPLC测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯含量

 目的建立了反相高效液相色谱法同时测定藏木香中土木香内酯和异土木香内酯的方法。方法采用Phenomenex Kromasil C₁₈色谱柱(4.6mm×250mm,5.0μm);流动相为乙腈-0.04%磷酸溶液(50∶50);检测波长:194nm;流速:1.0mL.min^-1。结果异构体土木香内酯和异土木香内酯达到基线分离,含量测定的线性良好,线性范围和相关系数分别为0.07～4.80μg·L^-1(r=0.9998),0.07～4.85μg·L^-1(r=0.9998);回收率分别为97.5%和102.1%;方法精密度良好,RSD分别为1.56%和1.87%(n=5);方法重现性良好,RSD分别为1.67%和0.92%(n=5)。结论所建立的方法简便、快捷、准确,重现性好,可用于藏木香药材及其制剂的质量控制。     

RP-HPLC测定Beagle犬血浆中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的浓度及药动学研究

 目的建立Beagle犬血浆中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(SBGC)的RP-HPLC含量测定方法,研究Bea-gle犬灌胃何首乌二苯乙烯苷有效部位后体内药动学。方法色谱条件:Agilent Zorbax Extend-C₁₈色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-水(15:85);检测波长:320nm;柱温:30℃;流速:1.0mL·min^-1。Beagle犬灌胃何首乌二苯乙烯苷有效部位后定时取血,测定血浆药物浓度,采用DAS软件计算药动学参数。结果SBGC在0.2064～8.256mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9994);Beagle犬灌胃何首乌二苯乙烯苷有效部位1.0,1.5,2.0g·kg^-1后符合二室开放式模型,t_1/2α分别为0.20,0.10和0.14h;t_1/2β分别为0.56,0.60和0.64h;V/F分别为0.08,0.15和0.08L·kg^-1;CL/F分别为0.11,0.20和0.16L·h^-1。结论该法快速、简便、准确,可满足药动学研究需要。     

高效液相色谱法测定西酞普兰血药浓度

 目的建立高效液相色谱法测定西酞普兰血药浓度。方法采用液-液萃取法,用正己烷-异戊醇(98:2)提取血浆中西酞普兰,选用普萘洛尔为内标。色谱柱为NucleodurCN(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-30mmol·L^-1KH₂PO₄缓冲液(0.1%三乙胺,pH5.0)(40:60),激发波长:236nm,发射波长:306nm,流速:1.3ml·min^-1,柱温:室温。结果本法线性范围在1-75μg·L^-1(r=0.9996)。平均方法回收率为(96.8±5.0)%(n=15),日内RSD≤8.6%,日间RSD≤9.6%。结论本法简单、快速、准确,可用于临床血药浓度监测及人体药动学研究。     

HPLC-MS/ESI同时测定人血浆中氯唑沙宗及其代谢物的浓度

 目的建立高效液相色谱质谱联用测定人血浆中氯唑沙宗及其代谢物6-羟基氯唑沙宗的方法。方法采用Thermo C₁₈色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),Phenomenex C₁₈保护柱,柱温40℃,流动相:乙腈-30 mmol·L^-1醋酸铵溶液(34∶66),流速:1mL·min^-1,进入MS检测器的分流比3∶1。质谱采用电喷雾电离源负离子模式(ESI-),选择性监测质荷比(m/z)168.3,170.2(氯唑沙宗),444.7(内标),184.4,186.2(6-羟基氯唑沙宗)的准分子离子峰。血浆样品孵化后,经叔丁基甲醚提取,内标法定量。结果氯唑沙宗及6-羟基氯唑沙宗分别在25～10 000,10～3 000μg·L^-1内线性关系良好(r≥0.999 8);最低检测质量浓度分别为2.5和2μg·L^-1;两个化合物的方法回收率在90%～110%之间;日间和日内RSD均小于15%。结论该方法灵敏度高,快速,简便,可用于氯唑沙宗药动学及药物相互作用的研究。     

HPLC测定血浆中黄豆苷元浓度及其人体药动学研究

 目的建立HPLC测定人血浆中黄豆苷元浓度的方法,进行其人体药动学研究。方法以氟康唑为内标,血浆样品经预处理后,选用HypersilODS₂色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-水(49∶51)为流动相,流速1.0mL·min^-1,室温260nm处测定。结果黄豆苷元血浓度线性范围为5～640μg·L^-1,最低定量浓度为5μg·L^-1;相对回收率为89.53%～110.35%,绝对回收率为61.24%～85.04%,日内、日间变异系数均<12%。黄豆苷元药动学参数t_1/2为(3.863±0.983)h,ρ_max(192.261±115.077)μg·L^-1,t_max(0.900±0.409)h,AUC_0～12(490.839±162.855)μg·h·L^-1,AUC_0～∞(535.279±163.190)μg·h·L^-1。结论本法分离效果良好,灵敏度高,重现性好,回收率高,日内、日间误差小,适用于黄豆苷元人体药动学及生物利用度研究。     

反相高效液相色谱法测定人血浆和尿中丹皮酚浓度

 目的建立测定血浆、尿样本中丹皮酚含量的反相高效液相色谱法。方法血浆样品经沉淀蛋白,尿样经稀释后,以乙腈-0.1%磷酸pH3.5(55∶45)为流动相,经Diamonsil C₁₈柱分离,进行色谱分析。结果本方法丹皮酚的血浆浓度在20～1000μg·L^-1,尿中浓度在20～800μg·L^-1内线性关系良好,方法回收率在81.0%～85.0%之间,日内、日间RSD均小于11.0%。结论本方法简便、快速、灵敏度高,可用于丹皮酚的药动学研究。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中氟伐他汀浓度及其药动学研究应用

 目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中氟伐他汀的浓度,以用于药动学研究。方法采用体积分数0.2%磷酸乙腈溶液沉淀100μL血浆样品蛋白,高速离心后上清液直接进样分析。分析柱Kromasil C₁₈色谱柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相0.02mol·L^-1磷酸二氢钾溶液-乙腈(53∶47);流速1.2mL·min^-1;检测器荧光检测器(激发波长305nm,发射波长390nm)。以外标法定量,进行方法学确证试验,并用于20名健康志愿者单剂量po40mg氟伐他汀胶囊(来适可)的药动学研究。结果本方法专属性强,内源性杂质和代谢物不干扰氟伐他汀的出峰。在2～600μg·L^-1内线性良好,相关系数r=0.999999(n=6)。定量限为2μg·L^-1。高、中、低质控样品的日内、日间RSD均小于10%,方法学回收率为95.0%～100.9%,平均提取回收率为111.4%。药-时曲线提示,氟伐他汀在中国人体内处置过程存在较大的个体差异。ρ_max,t_max,t_1/2和AUC_0～t值分别为(491.4±211.4)μg·L^-1,(0.6±0.2)h,(1.1±0.3)h和(540.2±226.5)μg·h·L^-1。结论本测定方法稳定、操作简便、快速、准确、灵敏,可用于氟伐他汀药动学的研究。中国人群中的ρ_max,AUC_0-t显著高于白人,而且还具有吸收更快、末端相消除更快的特点。     

人血浆中普罗帕酮对映体浓度的立体选择性HPLC测定法

 目的：建立血浆中普罗帕酮对映体浓度的立体选择性高效液相色谱测定法。方法：血浆标本经碱化以正己烷 异戊醇(99:1)提取、吹干后与GITC柱前衍生化，形成非对映体。以乙晴-水-冰醋酸(60∶40∶0.01)为流动相，经C₁₈ODS柱分离后在紫外λ208nm处检测。结果：对映体曲线范围25μg·L^-1～800μg·L^-1；最低检出限<20μg·L^-1；批内、批间平均RSD均<6%；平均回收率：102.2%；临床大多数常用药物对本法无干扰。结论：本法为普罗帕酮临床药动 药效学研究提供了一种简便、可行的检测方法。     

人血浆中溴吡斯的明浓度的RP-HPLC测定法

 目的建立RP-HPLC测定血浆中溴吡斯的明浓度的方法。方法采用Sep-Pak柱固相萃取法提取溴吡斯的明;Waters2690系列高效液相色谱仪测定。色谱柱Nucleosil 100-5 CN柱(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温:室温;检测波长:269 nm;流动相为乙腈-水(0.1%三乙胺水溶液加1 mol·L^-1HAc调节pH3.2)梯度洗脱;外标法定量。结果溴吡斯的明血药浓度的线性范围为2.0～50.0μg·L^-1;最低检测浓度2.0μg·L^-1;方法回收率为96.89%～111.51%;日内及日间精密度分别为2.79%～7.00%和2.33%～5.51%。结论本法灵敏、准确,可用于溴吡斯的明人体药动学研究。     

RP-HPLC测定人血浆中卡托普利浓度及其药动学

 目的建立测定人血浆中卡托普利的反相高效液相色谱法,研究其在人体内的药动学规律及特点。方法采用美国Waters公司高效液相色谱仪。色谱柱Hypersil柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水-冰醋酸(45∶55∶0.2),流速1.0mL·min^-1;检测波长:257nm。结果卡托普利血药浓度线性范围为6.25～800μg·L^-1,最低检出浓度为6.25μg·L^-1;方法回收率为105.8%;日内、日间RSD分别为4.40%～7.88%和2.87%～9.34%。结论本法灵敏、准确,可用于卡托普利临床药动学研究。