M3受体激动剂诱导大鼠腮腺细胞内AQP5和脂质筏的核转位

<正>水通道蛋白5(aquaporin,AQP5)存在于唾液腺腺泡细胞内,对调节水分转运速率和维持唾液分泌具有重要作用,AQP5功能失调会导致如增龄性口干、头面部放疗口干症、SS综合征和糖尿病口腔干燥等相关疾病的发生[1]。研究表明,M3毒蕈碱乙酰胆碱受体(M3 muscarinic acetylcholine receptor,M3-m AChR)激动剂西维美林(cevimeline)可以诱导     

水通道蛋白4在大鼠胃内的分布

水通道蛋白 1(Aquaporin 1,AQP1)首次被克隆[1 ] 并证实其对水分子具有高度选择性和通透性 ,这为解析水分子快速透过以脂质双层分子为骨架基础 ,并具有亲脂性的细胞膜提供了结构基础。胃的生理功能之一是对水分的吸收和分泌 ,该过程涉及大量水分子跨膜运动 ,目前对胃粘膜上AQP功能及分布研究不多 ,已有的报道多与AQP1相关 ,而水通道蛋白4 (Aquaporin 4 ,AQP4 )的生物学特点与AQP1有所不同 ,即对汞不敏感。本研究应用免疫组化法检测正常大鼠胃粘膜内AQP4分布情况 ,以推测其在胃内的生理功能。1　材料与方法1 1　实验动物与标本准备 :…     

糖尿病大鼠下颌下腺内水通道蛋白-3和-8的表达变化及意义

目的观察水通道蛋白-3(AQP3)和水通道蛋白-8(AQP8)在糖尿病大鼠下颌下腺内表达变化。方法 SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组和治疗组,每组10只;糖尿病组和治疗组大鼠腹腔注射2%链尿佐菌素(35 mg/kg)复制Ⅱ型糖尿病模型,治疗组予以胰岛素(3u/d)处理;8周后,取下颌下腺,分别进行HE和免疫组织化学染色。结果与对照组比较,糖尿病组下颌下腺腺泡轻度萎缩,细胞排列紊乱,导管数目减少,直径变小。AQP3表达在三组间无明显差异;与对照组比较,糖尿病组AQP8表达下降,治疗组AQP8表达较糖尿病组有所上调。结论糖尿病大鼠下颌下腺内AQP8低表达可能与糖尿病患者口渴的发病机制相关。     

水通道蛋白1在小鼠口腔粘膜表达与分布

目的观察水通道蛋白1(AQP1)在小鼠口腔粘膜的表达与分布,为研究AQP1在口腔水代谢和感觉传递中的作用提供形态学依据。方法制备成年小鼠口腔各部粘膜石蜡切片,进行AQP1免疫组织化学染色。结果 AQP1免疫阳性产物在唇、颊、硬腭、软腭和舌粘膜下层的毛细血管和神经纤维上广泛表达。另外在上述部位的腺泡和腺管周围的肌上皮细胞以及舌的味蕾和丝状乳头上也有AQP1免疫阳性信号。结论 AQP1在口腔广泛分布,可能参与了唾液分泌和口腔感觉传递等生理过程。     

脑组织水通道蛋白的研究动态

20世纪90年代以前，水转运机制一直认为是简单扩散。但水能迅速通过细胞膜的脂质双层，似用简单扩散机制所不能解释，因此提出细胞膜上存在着对水专一的水通道蛋白的假说。Agre等实验表明，红细胞膜上存在对汞敏感的水通道蛋白(AQP)，从此确认了细胞膜上存在转运水的水通道蛋白的理论。AQP所     

S100B、AQP4和CX43表达紊乱对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障功能的影响

目的探讨S100B、AQP4和CX43表达紊乱对糖尿病并发抑郁症大鼠海马血脑屏障功能的影响。方法将大鼠分为糖尿病组[高脂乳灌胃2周+尾静脉注射链脲佐菌素(STZ,38 mg/kg)]、抑郁症组(慢性不可预知性应激28 d)、糖尿病并发抑郁症组(联合以上两种方法建立)、对照组。造模结束后,旷场实验和Morris水迷宫实验观察大鼠行为学,ELISA检测血清S100B含量,免疫组化法检测海马血脑屏障AQP4和CX43的表达。结果与对照组比较,糖尿病组和抑郁症组大鼠自主活动次数和空间探索时间显著减少,逃避潜伏期延长(P0.05,P0.01);血清S100B含量明显增多(P0.01);海马血脑屏障功能性蛋白AQP4、CX43积分吸光度明显减少(P0.01)。与糖尿病组比较,糖尿病并发抑郁症组大鼠自主活动次数和空间探索时间减少,逃避潜伏期延长(P0.05,P0.01);血清S100B含量明显增多(P0.05);海马血脑屏障功能性蛋白AQP4、CX43积分吸光度明显减少(P0.05,P0.01)。结论 S100B、AQP4和CX43表达紊乱所致海马血脑屏障功能障碍可能是糖尿病并发抑郁症发生机制之一。     

糖尿病大鼠下颌下腺内水通道蛋白-1和5表达变化及意义

目的:观察水通道蛋白-1(AQP1)和水通道蛋白-5(AQP5)在糖尿病大鼠下颌下腺内表达变化,探讨糖尿病患者口渴症状的发生机制.方法:SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、治疗组.取大鼠下颌下腺,分别进行H-E染色、免疫组织化学显色(SP法)和计算机图像分析.结果:对照组和治疗组的血糖分别与糖尿病组血糖比较,均有差异;与...     

常年变应性鼻炎黏膜中水通道蛋白1的表达及意义

水通道蛋白(aquaporin,AQP)是一组与水转运有关的细胞膜转运蛋白,广泛分布于机体组织细胞,尤其与液体分泌和吸收有关的上皮细胞和内皮细胞中含量丰富,参与水的分泌、吸收及细胞内外水的平衡.本实验通过免疫组化技术检测AQP1蛋白在常年变应性鼻炎鼻黏膜组织的表达及分布,探讨其与常年变应性鼻炎临床病理特征之间的关系.     

AQP5的结构功能及其调节

水通道是一组参与水分转运的跨膜蛋白 ,其中AQP5位于多种器官细胞膜表面 ,其主要功能是参与水转运 ,参与腺体分泌 ,与气道高反应性有关 ,是肺泡上皮细胞分化的标志之一。AQP5的调节分为长时调节和短时调节 ,其中短时调节又有磷酸化机制和穿梭机制。     

水通道蛋白在耳部的研究进展及其临床意义

所谓水通道即存在于哺乳动物和植物细胞上转运水的特异通道。该通道是由一系列具有同源性的内在膜蛋自家族成员所形成，称为水通道蛋白或水蛋白（Aquaporin，AQP）。它们介导着不同类型细胞膜的跨膜水转运。九十年代以前，水转运机制一直被认为是简单扩散，但水能迅速通过细胞膜的脂质双层似用简单扩散机制所不能解释，由此认为哺乳动物的细胞膜上存在特异的转运水的孔道。自从1991年Agre发现AOP1以来，已有11种亚型被发现（AOP0-AOP10），最近Itoh报道在胰腺中发现一种新的亚型，命名为AQP12，所以目前已有12种AQP亚型。     

肺组织水通道蛋白的研究进展

水通道蛋白 (AQP)是一组与水通透有关的细胞膜转运蛋白。分布于肺组织中的水通道蛋白有6种 (AQP1 ,3 ,4 ,5,8,9) ,每种AQP在组织中有其特异的细胞定位。AQP的主要功能是转运水 ,但某些AQP也能转运小分子溶质如尿素和甘油。AQP在膜中以四聚体形式存在 ,每一单体形成一个功能性的水孔道。肺组织中AQP在基因水平上存在动态调节。深入研究AQP在肺组织内的分布、调节及生理和病理状态下的作用 ,有促于对某些肺疾病发病机制的进一步认识。     

水通道蛋白研究进展

水可以通过简单扩散缓慢通过脂质双层膜,但人们早已发现红细胞和某些上皮细胞在渗透压梯度存在时,其水通透性远超出简单扩散强度。因此提出了由膜蛋白可介导水转运的理论[1,2]。上个世纪80年代末,Agre领导的研究组在红细胞克隆了第一个水通道蛋白(aquaporin,AQP1),证明了该蛋白具有极强的水通透性[3],开创了水跨膜运转研究的新领域。到目前为止,在哺乳动物共发现有11种水通道蛋白,即AQP0-10[4-6]。通过分子生物学和动物模型生理学研究,对水通道家族成员的分子结构、生理学功能和与疾病的关系有了深入的理解。本文拟根据作者在该领域的研…     

糖尿病患者唾液内皮素测定及其临床意义

目前研究所知内皮素 (ET)系最强、而较长效的缩血管活性多肽 ,其主要由血管内皮细胞分泌 ;其分泌形式①持续分泌 ;②调节分泌[1] 。日前研究所见体内多种分泌液可见ET(尿液、乳汁及唾液 ) ,其中唾液内皮素检测被应用于慢性心力衰竭评估[2～ 3 ] 。以往本科临床看到ET在 2型糖尿病者ET水平增高 ,NO低下 ,伴有慢性并发症者更为显著[4～ 2 ] 。鉴于此 ,作者试图非侵入方法检测唾液ET ,以便日后利用唾液ET检测来指导临床观察。材料和方法一、材料 :(一 )糖尿病组 :全组糖尿病 14人 (男 4 ,女 10 )均为住院患者 ,按 1999年WHO诊断标准确认…     

AC-cAMP-PKA信号通路负向调节AQP5表达及其对糖尿病肾病的作用

目的探讨水通道蛋白5(Aquaporin5,AQP5)在糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织中的表达变化及AC-c AMP-PKA通路对AQP5的调控作用。方法采取Real-time PCR和Western Blot法分别检测AQP5、AC及PKA的m RNA和蛋白含量在DN大鼠肾组中的表达变化;采用ELISA检测c AMP含量。结果 AQP5m RNA和蛋白水平在DN大鼠肾组织中显著升高,而AC和PKA m RNA和蛋白含量在DN大鼠肾组中表达显著下降,此外c AMP含量也显著降低。结论 AQP5可能参与DN的发生发展过程,AC-c AMP-PKA通路在肾组织中对AQP5的调节作用呈现负调控。     

水通道蛋白2在梗阻性黄疸大鼠肾脏表达变化的实验研究

目的:明确水通道蛋白2(AQP2)在梗阻性黄疸大鼠肾脏表达变化及其与尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)变化的关系。方法:采用手术结扎胆总管的方法造成实验大鼠梗阻性黄疸模型,于术后3、5、7、10、14 d处死大鼠取血和肾脏标本,检测血浆直接胆红素、尿素氮和肌酐值,光镜下观察肾脏病理形态学,免疫组化方法检测肾脏APQ2表达。结果:实验组3 d时光镜下见肾集合管上皮细胞排列不规则肿胀,5 d时可见细胞水样空泡变性、并且梗阻性黄疸组AQP2表达较对照组明显减少。7 d时见部分细胞脱落、间质有炎性细胞浸润,10和14 d时见局灶上皮细胞坏死、胞浆崩解、间质有大量炎性细胞浸润。水通道蛋白2表达在梗阻5 d后较对照组明显减少(P0.05),随着梗阻时间延长,其表达减少愈加明显。AQP2表达减少的同时,肾形态学损害在光镜下从肾集合管形态学改变得到证实。梗阻性黄疸组术后10 d Cr开始升高,梗阻14 d后BUN开始升高。结论:AQP2的减少表明肾功能发生损害,AQP2减少在前,CR和BUN增加在后,所以AQP2作为肾功能损害的早期检测指标是很有意义的。     

水通道蛋白4的研究进展

长期以来人们认为水的跨膜转运主要通过简单扩散,然而1991年Peter Agre课题组在红细胞膜上发现了一种对水有特异性通透的蛋白分子[1],被定义为水通道蛋白(aquapor-ins,AQPs).迄今为止,已发现200余种水通道蛋白,在哺乳动物中,已克隆和鉴定出13种水通道蛋白(AQP0-AQP12)[2].     

水通道蛋白-3的研究进展

1 AQPs的概述及分类人体70%是由水组成的,但是自由水跨膜转运的机制一直不是很清楚。直到1988年美国科学家Agre在红细胞膜上发现了一种能特异性转运水的蛋白质(aquaporin1,AQP1),并于1991年完成了对其cDNA的克隆[1];Agre本人也由于其杰出的贡献被授予2003年诺贝尔化学奖。目前,     

水通道蛋白5基因对小鼠树突状细胞功能影响的研究

目的 探讨水通道蛋白5(AQP5)基因的表达对小鼠骨髓来源的树突状细胞(bonemarrow-derived dendritic cells,BMDC)分化成熟的影响.方法 分离培养AQP5基因敲除(AQP5-/-)的小鼠及野生型小鼠的BMDC,采用LPS诱导其成熟,采用FACS检测DC表型和内吞作用的变化,采用3H-TdR掺入法检测其对异种淋巴细胞的刺激能力.结果 与野生型小鼠相比,AQP5基因敲除后DC表面共刺激分子CD40、CD80、CD86的表达下降;其内吞能力下降;野生型小鼠来源的DC在与颗粒性蛋白质接触30 min后仍可继续上升,而AQP5-/- 来源的DC在相互作用30 min后内吞能力达到高峰;野生型小鼠来源的DC对异种淋巴细胞的刺激能力远大于AQP5-/-小鼠.结论 AQP5介导的跨膜水转运对于DC功能的正常发挥具有重要意义.其具体信号途径有待进一步研究.     

大鼠慢性脑缺血上调脑AQP9表达

目的检测慢性脑缺血后水通道蛋白9(AQP9)的表达及其影响。方法将大鼠随机分为对照组和慢性脑缺血1、3和6月组,每组各20只。用双侧颈总动脉结扎法(2-vo法)建立大鼠慢性脑缺血模型,水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,干湿重法检测脑含水量,HE染色观察脑组织缺血后形态学,吸光度法检测脑组织乳酸含量,免疫荧光和免疫印迹测定AQP9的表达。结果与对照组相比,慢性脑缺血组大鼠的学习记忆明显下降(P0.05),脑含水量无明显变化,慢性脑缺血各组的脑乳酸含量较对照组上调(P0.05);慢性脑缺血组脑组织胶质细胞增生,神经元凋亡坏死;与对照组相比,慢性脑缺血各组AQP9的表达上调(P0.05)。结论慢性脑缺血后脑组织中AQP9表达上调,可能与缺血后能量底物的转运有关。     

养阴清热活血中药对大鼠离体灌流颌下腺唾液分泌的作用

目的:中草药能通过增加唾液的分泌而缓解口腔干燥症状。本试验研究临床常用养阴清热中药促唾液分泌功能。方法:成年wistar大鼠用苯巴比妥钠麻醉后,外科分离颌下腺,转移至37℃恒温浴槽。使用蠕动泵(Cole-Palmer)进行灌流。氯化氨甲酰胆碱(CCh)对照灌流后,用缓冲液洗脱,后单独用含中药的缓冲液灌流及中药与CCh联合灌流,观察中药对颌下腺唾液分泌的影响。结果:养阴清热活血中药单独灌流,大多不能或仅能促进唾液少量分泌,而其灌流时加入CCh,则能明显促进唾液的分泌(唾液分泌曲线呈持续升高平台)。只有丹参在在不加入CCh的情况下也能促进唾液分泌。结论:养阴清热中药对离体颌下腺具有促分泌作用。中药促唾液分泌实验研究将为中药治疗口干症状及相关疾病的临床应用提供理论依据。