黄芪总提取物对心肌细胞的保护作用及对c-myc基因表达的影响

目的 观察黄芪总提取物在病毒性心肌炎体外细胞培养模型中的药效作用，以及对细胞凋亡调控基因c-myc表达的影响。方法 柯萨奇病毒感染乳鼠原代心肌细胞后于不同时间加入黄芪总提取物和俄病毒，逐日观察心肌细胞搏动次数、细胞病变，MTT染色比较各组间活细胞数的变化，病毒繁殖抑制实验比较TCID50的差别以验证黄芪总提取物的抗病毒活性。实验以盐酸胍作为阳性对照药。应用流式细胞计量术、DNA Ladder分析凋亡发生情况，RT—PCR测定c-myc表达变化。结果TEA在体外实验中能有效抑制CVB3引起的细胞病变（P〈0．01），加药组比病毒对照组TCID50降低两个以上对数值，其药效优于同等浓度的抗病毒对照药物。流式细胞仪检测显示加药组凋亡细胞数目明显减少，RT—PCR结果提示黄芪总提取物能下调凋亡早期基因c—myc的表达。结论黄芪总提取物对体外培养的心肌细胞具有保护作用，其机理可能与下调凋亡调控基因c—myc表达有关。     

黄芪多糖体外抗病毒性心肌炎试验研究

目的：研究黄芪多糖（APS）对柯萨奇B3病毒（CVB3）所致的VERO和大鼠原代心肌细胞病变抑制作用、病毒繁殖抑制反应，并测定其对大鼠原代心肌细胞培养上清液中心肌酶（LDH、CK—MB）活性的影响。方法：在VERO细胞、大鼠原代心肌细胞中加入不同稀释度黄芪多糖后，感染柯萨奇B3病毒，观察细胞病变，MTT染色比较各组间活细胞数的变化，病毒繁殖抑制实验比较半数组织感染量（TCID50）的差别；紫外分光光度法测定心肌细胞培养上清液LDH和CK—MB活性。结果：黄芪多糖在VERO和心肌细胞实验中可有效抑制柯萨奇B3病毒引起的细胞病变（P〈0.01）及病毒的繁殖，对心肌细胞释放心肌酶也有一定的抑制作用（P〈0．05）。结论：黄芪多糖对柯萨奇B3病毒感染的VERO和心肌细胞具有保护作用。在一定浓度下可降低心肌酶的释放。其作用机制尚需做进一步实验来探讨。     

氧化苦参碱体外抗病毒性心肌炎试验研究

目的：研究氧化苦参碱对柯萨奇B3病毒（CVB3）所致的VERO和大鼠原代心肌细胞病变抑制作用、病毒繁殖抑制反应，并测定其对大鼠原代心肌细胞培养上清液中心肌酶（LDH、CK—MB）活性的影响。方法：在VERO细胞、大鼠原代心肌细胞中加入不同稀释度氧化苦参碱后，感染CVB3病毒，观察细胞病变，MTT染色比较各组问活细胞数的变化，病毒繁殖抑制实验比较半数组织感染量（TCID50）的差别；紫外分光光度法测定心肌细胞培养上清液LDH和CK—MB活性。结果：氧化苦参碱在VERO和心肌细胞实验中可有效抑制CVB3病毒引起的细胞病变（P〈0．01）及病毒的繁殖，对心肌细胞释放心肌酶也有一定的抑制作用（P〈0．05）。结论：氧化苦参碱对CVB3病毒感染的VERO和心肌细胞具有保护作朋。在一定浓度下可降低心肌酶的释放。其作用机制尚需做进一步实验来探讨。     

雷公藤配伍金钱草抗肺癌增效作用的组成配比及其量效关系

目的考察雷公藤(LGT)配伍金钱草(JQC)体外抗人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增效作用的组成配比及其量效关系。方法将LGT与JQC按照不同质量配比(1/4、1/2、1/1、2/1、4/1)混合后,分别用水和75%乙醇回流提取,制备LGT/JQC饮片不同质量配比的提取物;采用体外MTT法检测LGT-JQC不同配比配伍提取物(200μg/ml)对人A549细胞增殖抑制的影响,确定LGT-JQC配伍增效作用的最佳组成配比;进一步采用体外MTT法检测最佳组成配比的提取物对人A549细胞增殖抑制作用的量效关系,计算其半数抑制浓度(IC50)。结果 LGT-JQC在质量配比2/1~4/1配伍的醇提物(200μg/ml)具有抑制NSCLC A549细胞增殖的增效作用(P0.05),且配比在2/1时增效作用最强(与配比4/1组比较,P0.01),而LGT-JQC配伍的水提物(200μg/ml)在既定配比下均无增效作用(P0.05);LGT-JQC配比在2/1(最佳配比)的醇提物,在浓度为50~400μg/ml范围内对A549细胞的增殖抑制呈现出良好的剂量依赖性关系,其IC50值为249.40μg/ml。结论 LGT-JQC配伍的醇提物对体外人小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制具有协同增效作用,二者组成配比应在2/1~4/1,尤以在2/1作用为佳;LGT-JQC配比为2/1的醇提物,在浓度为50~400μg/m L对A549细胞的增殖抑制具有良好的量效关系。     

青蒿素抗柯萨奇B组病毒感染的实验观察

目的 探讨青蒿素体外抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用。方法 以CVB3感染HeLa细胞为实验模型，采用微量细胞病变抑制法、半定量RT-PCR实验和间接免疫荧光实验的方法，观察分析青蒿素对CVB3的直接灭活、阻断吸附和抑制复制的作用，以及青蒿素对CVB3在感染细胞内核酸复制和蛋白表达的影响。结果 青蒿素不同程度地阻断病毒吸附和抑制病毒复制，明显抑制CVB3核酸复制与蛋白表达，未发现有直接灭活病毒的作用。结论 青蒿素类药物具有体外抗CVB3的作用，其抗病毒机制是通过阻断病毒吸附和抑制病毒复制来完成的。     

黄芪提取物对病毒性心肌炎细胞模型的治疗作用

目的本文旨在研究黄芪提取物(Astragalus extract,AE)对CVB3病毒诱导的病毒性心肌炎细胞模型的保护作用,为进一步研究提供理论依据。方法利用CVB3病毒和原代心肌细胞建立病毒性心肌炎细胞模型并使用AE对模型进行干预,心肌细胞活性、培养基中LDH、CK-MB水平被检测以对AE的干预效果进行评价。通过检测AE对病毒增殖的抑制作用,细胞内凋亡相关基因Fas、心肌功能相关基因C-Myc和TNF-α转录水平的变化对AE的作用机制进行研究。结果与病毒组比较,AE能够显著的抑制由CVB3诱导的心肌细胞活性减弱和降低培养基中心肌酶水平(P0.01);AE能够显著的抑制CVB3病毒的增殖,与模型对照组比较,AE对CVB3诱导的Fas、C-Myc和TNF-α基因转录水平的增加有显著的抑制作用(P0.01)。结论AE对CVB3病毒诱导的病毒性心肌炎细胞模型具有一定的保护作用,这种保护作用与抑制病毒增殖及影响Fas、C-Myc和TNF-α基因表达水平有关。     

维生素C、E 对柯萨奇B3病毒感染的心肌细胞的保护作用

目的探讨抗氧化剂维生素C、E在治疗病毒性心肌炎过程中的重要作用。方法体外培养乳鼠心肌细胞，分别在感染柯萨奇B3病毒前后加入一定浓度的维生素C、E及其合剂，待病毒对照组细胞病变达 时，以MTT法测定细胞存活率，应用全自动生化分析仪测定细胞上清液中的心肌酶活性。结果实验组的细胞存活率明显高于病毒对照组，心肌酶活性明显低于病毒对照组。结论维生素C、E对病毒感染的心肌细胞具有一定的保护作用，联合使用的效果明显优于单独使用。     

FTY720对CVB3病毒诱导的病毒性心肌炎模型的治疗作用研究

目的本文旨在研究FTY720对CVB3诱导的病毒性心肌炎细胞和动物模型的治疗作用。方法利用CVB3病毒、乳鼠心肌细胞及小鼠建立病毒性心肌炎细胞和动物模型。通过观察心肌细胞病变情况、动物死亡率及心脏脏器系数、心肌组织HE染色及动物模型外周血清中LDH、CK-MB水平对FTY720的疗效进行评价。通过FTY720抑制病毒增殖实验及心肌细胞凋亡实验研究FTY720抗病毒性心肌炎的作用机制。结果 FTY720能够显著的抑制由CVB3引起的细胞病变(P0.05),显著的降低小鼠外周血中心肌酶LDH和CK-MB的水平及小鼠心脏脏器系数(P0.05),而对小鼠死亡率影响不大(P0.05)。FTY720能够显著的抑制CVB3的增殖和心肌细胞的凋亡(P0.05或P0.01)。结论 FTY720对CVB3诱导的病毒性心肌炎细胞和动物模型均具有一定的保护作用,其作用机制与抑制病毒增殖及心肌细胞凋亡有关。     

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内质网应激及促凋亡信号因子作用

目的:研究黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94及促凋亡信号分子JNK、p-JNK、Caspase 12表达的影响。方法:实验分3组,对照组(正常细胞)、柯萨奇病毒感染组(正常细胞+柯萨奇B3病毒)、黄芪总黄酮组(正常细胞+柯萨奇B3病毒+黄芪总黄酮)。采用免疫组织化学方法检测培养乳鼠心肌细胞α-SMA蛋白,采用Western blotting技术检测各组心肌细胞内质网应激伴侣蛋白GRP78、GRP94、p-JNK、JNK及Caspase 12表达。结果:1与对照组比较,柯萨奇B3病毒感染组心肌细胞GRP78、GRP94表达增多(P0.01),黄芪总黄酮组心肌细胞GRP78、GRP94表达减少(P0.01)。与对照组比较,柯萨奇B3病毒感染组心肌细胞p-JNK及Caspase 12表达增多(P0.01),黄芪总黄酮组心肌细胞p-JNK及Caspase 12表达减少(P0.01)。各组心肌细胞JNK表达无差异(P0.05)。结论:柯萨奇B3病毒可引发心肌细胞内质网应激,并使促凋亡信号分子p-JNK、Caspase 12表达增多,引发心肌细胞凋亡;黄芪总黄酮抑制柯萨奇B3病毒感染心肌细胞内质网应激,并抑制心肌细胞凋亡,该实验结果可能是其对病毒性心肌炎的作用机制之一。     

小儿哮咳喘颗粒对感染流感病毒小鼠保护作用的观察

目的 观察小儿哮咳喘颗粒对感染流感病毒小鼠的影响及体外抑菌和抗病毒作用. 方法 昆明小鼠灌胃不同浓度的小儿哮喘溶液1次/d,连续7 d,末次给药后4 h经鼻滴入流感病毒,观察7 d,记录小鼠死亡率,试验设病毒灵对照和空白对照;常规方法做体外抑菌试验;以Hep-2传代细胞进行传代培养,观察小儿哮咳喘颗粒最大无毒剂量 (TD0)、细胞半数感染量(TCID50)以及不同剂量受试药物对感染病毒细胞的保护作用. 结果 小儿哮咳喘颗粒组感染病毒动物死亡率为100%,阴性对照组死亡率为0.在体外试验显示,小儿哮咳喘颗粒对肺炎双球菌和流感杆菌等多种细菌有明显的抑制作用,对流感病毒和柯萨奇病毒所致的细胞病变均明显减轻. 结论 小儿哮咳喘颗粒具有抑菌和抗病毒作用,对感染流感病毒小鼠有明显的保护作用.     

中药芪芍五味合剂对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡和坏死的影响

取 2 4 0只 4周龄 Balb/ c雄性小鼠 ,随机等分为 6组 (每组 4 0只 ) ,即 :正常对照组 (A组 )、中药对照组 (B组 )、病毒对照组 (C组 )、中药治疗组 (D组 )、维生素 C治疗组 (E组 )、病毒唑治疗组 (F组 )。 A、B两组每只小鼠均腹腔接种 0 .1ml不含病毒的 Eagle's液 ,C～F组每只小鼠服腔接种 0 .1ml10 7.5TCID/ ml的柯萨奇 B3(CVB3)病毒液。根据分组分别给予不同的药物治疗。结果 :病毒性心肌炎时心肌细胞的凋亡率和坏死率均显著增加。心肌细胞凋亡高峰在CVB感染后 7～ 10天 ,而心肌坏死高峰出现在 CVB3感染后 14天 ,并且与组织形态学观察一致。应用中药黄芪、赤芍治疗后 ,心肌细胞凋亡率和坏死率均显著降低 (P <0 .0 5 ) ,维生素 C和病毒唑均可降低心肌细胞坏死率 ,但对心肌细胞凋亡影响不大。 CVB感染 3～ 7天内 ,各感染组心肌细胞凋亡率和坏死率均与心肌内病毒滴度呈正相关 (r =0 .76、P <0 .0 1,r=0 .5 4、 P <0 .0 5 ) ;而感染 10～ 30天 ,凋亡率及坏死率与病毒含量无相关性。各感染组心肌细胞凋亡率与坏死率均与心肌病理积分呈正相关 (r=0 .5 5、P <0 .0 5 ,r=0 .76、P<0 .0 1)。中药黄芪、赤芍、五味子可明显减轻病毒性心肌炎小鼠的病理损害程度 ,显著降低病毒性心肌炎心肌细胞凋亡率和坏死率 ,对     

柯萨奇病毒B3引致心肌细胞钙超载及细胞凋亡的研究

目的以柯萨奇病毒B3(CVB3)感染体外培养的小鼠心肌细胞,探讨CVB3感染心肌细胞后对心肌细胞周期、心肌细胞凋亡和心肌细胞浆游离钙的影响.方法制备心肌细胞样本,设正常对照组及实验组(CVB3感染心肌细胞),流式细胞仪、钙荧光探针标记分别检测细胞周期、细胞凋亡及心肌细胞浆内游离钙.结果CVB3感染心肌细胞后,可显著抑制心肌细胞的分裂增殖,诱导心肌细胞凋亡;显著增高心肌细胞浆内游离钙浓度和减少细胞外钙含量.结论CVB3感染体外培养的心肌细胞,可能引起心肌细胞凋亡和心肌细胞浆内钙超载,初步实验提示此种变化可能是病毒性心肌炎心脏损伤的重要机制.     

Long-term cardiac gene expression using a coxsackieviral vector

Efficient myocardial gene transfer in the intact adult heart is difficult using conventional transfer vectors. Since coxsackievirus B3 (CVB3) is cardiotropic, it may be possible to exploit its cardiotropic characteristics to design a vector for gene transfer to the intact heart. We generated a recombinant CVB3 cDNA by inserting a green fluorescent protein (GFP) gene immediately upstream from the VP0 capsid protein of CVB3. The infectious virus (rCVB3-GFP) was recovered from the supernatants of the transfected Cos-7 cells, and was grown in HeLa cells to titers of 10(11) pfu/ml. In the rCVB3-GFP infected HeLa cells and neonatal rat cardiac myocytes, GFP protein expression was documented by immunoblot and by fluorescent microscopy. GFP expression was maintained after five passages in HeLa cells. To test in vivo expression of GFP, we infected 8-week-old inbred female Balb/C mice with 10(6) pfu of rCVB3-GFP, intraperitoneally. GFP was present in up to 30% of cardiac myocytes over the 8 weeks post infection (p.i.) and it was co-localized with CVB3 infection. Surprisingly, in spite of detection of GFP up to at least 8 weeks after infection, there was no mortality in the mice. It is possible to express exogenous proteins in the intact heart after an intraperitoneal (i.p.) injection of recombinant coxsackievirus. The duration of expression persisted for at least 8 weeks with little immune response nor mortality. These results demonstrated that the cardiac tropism of CVB3 could be used to design vectors for efficient gene expression in the intact heart.     

白细胞介素2和15基因对柯萨奇病毒VP1 DNA疫苗诱导免疫应答的影响

目的:观察白细胞介素2(IL 2)、白细胞介素15(IL 15)基因对柯萨奇病毒(CVB3)VP1DNA疫苗诱导 免疫应答的影响,以及该疫苗在小鼠受到致死量CVB3攻击时的保护作用。方法:采用雄性4～6周龄Balb/c小 鼠100只,随机分为5组,并分别肌内注射0.9%氯化钠溶液、pcDNA3、pcDNA3 VP1、pcDNA3 VP1加pcDNA3 IL 2和pcDNA3 VP1加pcDNA3 IL 15,每周注射1次,共3次,每次免疫后第6天取血清,用微量中和试验检测 CVB3中和抗体,3次免疫后用800TCID50CVB3感染小鼠,观察小鼠的生存时间和生存率。结果:pcDNA3 VP1、pcDNA3 VP1加pcDNA3 IL 2、pcDNA3 VP1加pcDNA3 IL 15组均诱导小鼠产生了中和抗体,抗体滴度 随免疫次数增加而提高。病毒攻击后,各组的生存率差异无统计学意义,pcDNA3 VP1加pcDNA3 IL 2、pcD NA3 VP1加pcDNA3 IL 15组较其他3组生存时间明显延长。结论:IL 2、IL 15基因对CVB3VP1DNA疫苗诱 导小鼠产生免疫应答和免疫保护有一定的增强作用。     

穿孔素在慢性心肌损伤中的表达及其意义

目的：探讨穿孔素在阿萨奇病毒B组3型（CVB3m)至T－2毒素染毒小鼠心肌损伤中的表达及其意义,方法：实验组BALB／C小鼠1．0mg/kg体重T－2毒素隔日灌胃,3周后腹腔接种0．1ml内含1000TCID50的CVB3m病毒液,对照组生理盐水灌胃,腹腔接种0．1ml 1640营养液,观察心肌病理改变,同时用RTPCR技术对心肌组织中CVB3m RNA和穿孔素mRNA表达进行检测,结果：CVB3m感染T－2毒素染毒小鼠心肌出现慢性损伤,可见纤维结缔组织增生和坏死灶癜痕修复。心肌组织中持续表达CVB34m RNA和穿孔素mRNA。结论CVB3m RNA和穿孔素mRNA的持续表达可能是CVB3m致T－2毒素染毒小鼠心肌慢性损伤的机制之一。     

病毒性心肌炎小鼠心肌与骨骼肌细胞线粒体损伤及其相关性

目的探讨病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌与骨骼肌细胞线粒体损伤（线粒体膜磷脂脱失和线粒体DNA3867缺失）程度及二者的相关性。方法50只BALB/c小鼠随机分为2组,实验组（40只）腹腔注射内含柯萨奇B3病毒（Coxsackievirus B3,CVB3,TCID50=108）的Eagle液制备VMC小鼠模型,另10只为对照组。分别于病毒感染后3、11和24 d行心肌和骨骼肌细胞线粒体膜磷脂脱失程度和mtDNA3867缺失率的测定,并用Spearman法对其进行相关分析。结果实验组小鼠在病毒感染后3 d,可见心肌和骨骼肌细胞mtDNA3867缺失率显著高于对照组（P<0.05）,而线粒体膜磷脂脱失程度与对照组相比无显著性差异;病毒感染后11 d,心肌和骨骼肌细胞mtDNA3867缺失性损伤达高峰（P<0.05）,线粒体膜磷脂脱失程度亦显著高于对照组（P<0.05）;病毒感染后24 d,心肌和骨骼肌细胞线粒体膜磷脂脱失和mtDNA3867缺失程度与感染后11 d组比较无显著性差异,但与对照组和病毒感染后3 d组比较,仍有显著性差异（P<0.05）。线粒体的上述损伤性改变在心肌和骨骼肌细胞呈一致性同步变化,且具有良好相关性（P<0.05）。结论CVB3可显著损伤心肌和骨骼肌线粒体DNA和膜磷脂,两者损伤具有相关性,提示骨骼肌有望成为反映心肌细胞线粒体损伤的外周细胞“窗口”。     

肌球蛋白致自身免疫性心肌疾病的实验研究

目的　探索在没有病毒感染的情况下 ,自身免疫机制在心肌炎和心肌病发病中的作用。方法　 (1)猪心肌肌球蛋白致BALB/C鼠自身免疫性心肌疾病模型的复制 :实验组 (n =32 )于实验的第 0 ,7和 30天 3次注射肌球蛋白 ,对照组 (n =2 0 )与实验组同样的时间注射弗氏完全佐剂 ,于初次免疫后的第 15 ,2 1和 12 0天分别留取血清和心肌标本。 (2 )病毒性心肌炎模型的复制 :病毒接种组 (n =2 2 )给予 10 3 TCID50 / 0 1mlCVB3 溶液腹腔注射 ,对照组 (n =10 )给予Vero细胞冻融液 0 1ml腹腔注射 ,接种时间及采样时间同肌球蛋白免疫组。 (3)抗体检测 :ELISA法检测小鼠血清抗肌球蛋白抗体。结果　病理结果显示 ,肌球蛋白致心肌炎小鼠急性期 (15和 2 1d)以心肌纤维变性坏死和淋巴细胞浸润较明显 ,间质病变较轻 ,内膜和心瓣膜无明显改变 ;慢性期 (12 0d)仅见心肌纤维化 ,急慢性期均可检测到高滴度的抗肌球蛋白抗体 (P <0 0 0 1) ,对照组为正常心肌 ,抗体滴度低。病毒接种组慢性期亦显示成纤维细胞增生。结论　心肌肌球蛋白可以作为自身抗原刺激机体产生自身免疫反应 ,在没有病毒感染的情况下 ,单一的自身免疫机制即可导致心肌炎向心肌病的转化。     

Identification of autoantibodies with the corresponding antigen for repetitive coxsackievirus infection-induced cardiomyopathy.

BACKGROUND: The hypothesis that viral myocarditis causes an autoimmune response and subsequent dilated cardiomyopathy is controversial. To further investigate the autoimmune mechanism of cardiac dilatation and dysfunction after repeated episodes of viral myocarditis, the cardiac autoantigens induced by repetitive coxsackievirus B3 (CVB3) infection were examined. METHODS AND RESULTS: Male inbred A/J mice were inoculated intraperitoneally with CVB3 at 3 and 40 weeks of age. At 8 weeks after the second inoculation, the mortality of the repetitive CVB3 group was significantly increased compared with that of the control group, and was associated with a significant reduction in fractional shortening and marked left ventricular dilatation without inflammatory cell infiltration. The cardiac antigens in the repetitive CVB3 infection were identified by 2-dimensional electrophoresis and subsequent liquid chromatography/tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) using the serum at 2 weeks after the second inoculation. LC-MS/MS and immunohistochemistry demonstrated alpha-cardiac actin and heat shock protein 60 (HSP60) as cardiac near-surface antigens induced by the repetitive CVB3 infection. Immunoelectron microscopy disclosed the selective localization of anti-IgM antibody on the membrane of the myocytes in the repetitive CVB3 group. CONCLUSIONS: IgM antibodies against alpha-cardiac actin and HSP60, which were induced by repetitive CVB3 infection, may play an important role in the pathophysiology of the subsequent cardiac dysfunction and dilatation.     

Role of Fas/FasL pathway in the activation of infiltrating cells in murine acute myocarditis caused by Coxsackievirus B3

OBJECTIVES: This study was designed to investigate the roles of Fas/FasL pathway in myocardial damage in murine acute myocarditis caused by Coxsackie virus B3 (CVB3). BACKGROUND: Cardiac myocyte apoptosis rarely occurs in murine acute myocarditis caused by CVB3. Fas/FasL belong to the tumor necrosis factor receptor/ligand superfamily of costimulatory molecules and are known to play a critical role in the induction of apoptosis, as well as in the cytotoxicty mediated by T-cells and natural killer cells. METHODS: We first analyzed the expression of Fas on cardiac myocytes in vivo and in vitro. Second, we examined the development of myocardial damage, in C3H/He mice treated with an anti-FasL monoclonal antibody (mAb), and in C3H/He-lpr/lpr mice and C3H/He-gld/gld mice infected with CVB3. Third, to investigate the effects of anti-FasL mAb treatment on the activation of the infiltrating cells, we examined the expression of interferon (IFN)-gamma and interleukin (IL)-2 as activation markers in the heart of mice by semiquantitative polymerase chain reaction. RESULTS: Fas was markedly induced on cardiac myocytes with acute myocarditis. Myocardial inflammation was decreased in mice treated with anti-Fas L mAb, C3H/He-lpr/lpr mice and C3H/He-gld/gld mice. Anti-FasL mAb-treatment also decreased the expression of IFN-gamma, IL-2, inducible nitric oxide synthase and CVB3 genomes in myocardial tissue. CONCLUSIONS: Our findings strongly suggested that the Fas/FasL pathway played a critical role in the development of massive myocardial necrosis through activation of infiltrating cells, and raise the possibility of immunotherapy by blocking the Fas/FasL pathway to prevent myocardial damage and improve the prognosis of patients with viral myocarditis.