骨巨细胞瘤中成纤维样基质细胞体外钙化能力的研究

目的：探讨骨巨细胞瘤的组织来源。方法：体外培养。Ｇｏｍｏｒｉ法碱性磷酸酶染色,生化检测细胞培养上清液中的碱性磷酸酶含量。免疫组织化学染色检测骨钙素在成纤维样基质细胞中的表达。使用含Ｂ甘油磷酸钠和ＣａＣｌ２的培养液,观察成纤维样基质细胞体外钙化能力。结果：成纤维样基质细胞中碱性磷酸酶和骨钙素呈阳性表达,在体外具有钙化能力。在细胞培养上清液中有碱性磷酸酶。结论：骨巨细胞瘤中的成纤维样基质细胞具有某些成骨细胞的特点,为进一步探讨其组织来源提供了实验依据。     

骨巨细胞瘤的影像诊断

目的:分析骨巨细胞瘤的X线、CT、MRI征象,并与病理结果对照,总结骨巨细胞瘤的影像表现及特点,提高对骨巨细胞瘤影像学表现的认识。方法:结合文献对7例经手术病理证实的骨巨细胞瘤病例的X线平片、CT、MRI影像学资料进行回顾性分析。结果:主要影像表现为:膨胀性改变,溶骨性破坏及软组织肿块,Jaffe病理分级:骨巨细胞瘤I级2例,I~II级2例,II级1例,II~III级2例。结论:合理应用X线、CT、MRI检查,可提高骨巨细胞瘤诊断准确性,并为临床手术提供重要影像信息。     

橄榄苦苷对破骨细胞的分化以及骨吸收功能的影响

目的 探讨橄榄苦苷(oleuropein)对破骨细胞分化成熟以及骨吸收功能的影响及其可能机制.方法 把不同浓度的橄榄苦苷(12.5、25、50 μmol/L)分别加入由核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)诱导的体外破骨细胞培养体系中,用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resist ant acid phosphatase,TRAP)染色方法观察呈TRAP阳性的多核细胞;RAW264.7细胞也用RANKL诱导,用流式细胞仪分析橄榄苦苷对破骨细胞凋亡的影响;在扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)下观察骨吸收陷窝,并用图像分析软件统计其面积.采用Western blot法检测橄榄苦苷对破骨细胞特异性蛋白组织蛋白酶K(cathepsin K,CTSK)、激活T细胞核因子1(nuclear factor of activated T-cells 1,NFATC1)及相关信号通路蛋白表达的影响.结果 TRAP染色结果显示,橄榄苦苷能显著抑制RANKL诱导的破骨细胞的形成,且呈浓度依赖性(P＜0.05);橄榄苦苷能下调破骨细胞特异性蛋白CTSK的蛋白表达水平(P＜0.05);橄榄苦苷对破骨细胞的凋亡无明显影响(P＞0.05);橄榄苦苷能显著减少骨吸收陷窝的面积(P＜0.05);橄榄苦苷能够下调NFATC1及磷酸化p38(p-p38)的表达(P＜0.05).结论 橄榄苦苷可以抑制由RANKL诱导的破骨细胞分化以及破骨细胞的骨吸收功能,可能和橄榄苦苷能够下调p38/MAPK信号通路有关.     

骨巨细胞瘤体外原代培养及特性

目的观察骨巨细胞瘤体外培养细胞的形态生长特性及DNA倍体含量。方法取手术切取的骨巨细胞瘤新鲜标本8例,以组织培养法进行原代培养,观察细胞形态、生长曲线,FCM分析其倍体含量。结果骨巨细胞瘤原代培养种可见3种细胞;多核巨细胞可以长期培养。FCM分析显示:5例复发及2例原发病例是二倍体或亚二倍体,1例原发病例是非整倍体。结论单核梭形细胞是骨巨细胞瘤的主要肿瘤性成分;FCM无助于骨巨细胞瘤的预后判断。     

Imaging appearances of giant cell tumor of the bone

Giant cell tumor (GCT) of bone is a benign, locally aggressive lytic lesion in the subarticular location occurring in skeletally mature individuals. Acute hemarthrosis from pathological fracture of GCT should be considered in the differential diagnosis for acute swelling of the knee. Here we describe the imaging appearances of GCT on conventional radiography and magnetic resonance imaging (MRI).     

不规则骨骨巨细胞瘤影像诊断探讨

目的探讨不规则骨骨巨细胞瘤影像表现及鉴别诊断。方法回顾性分析经手术病理证实的17例不规则骨骨巨细胞瘤的CT、MRI表现。结果CT主要表现为膨胀性病变、溶骨性骨质破坏和软组织肿块。MRI检查病变在T1WI呈等或低信号,T2WI为低到高不均匀信号,病变边缘比较清楚。结论CT结合MRI扫描对不规则骨骨巨细胞瘤的诊断和鉴别诊断具有明显的价值并为临床手术提供可靠的资料。     

人骨巨细胞瘤细胞DNA含量的研究

将体外培养的人骨巨细胞瘤第四代和第五代瘤细胞,进行~3H—TdR放射自显影术和Feulgen反应,先计算出银粒标记细胞(S,G_2)的增殖比率,再用显微分光光度法测定未被标记的细胞(G_0和G_1期)的DNA含量。结果,第四代单核瘤细胞DNA含量为亚四倍体值((?)=87.36,DI=1.83),第五代单核瘤细胞DNA含量为超四倍体值((?)=118.13,DI=2.47).两代瘤细胞DNA含量经统计学处理,有显著差异(P<0.01),证实了骨巨细胞瘤细胞长期传代培养可以恶化。     

手部骨巨细胞瘤的诊断和手术治疗

目的：探讨手部巨细胞瘤患者的临床表现、影像学特点和术后结果。方 法：2000年至2010 年北京积水潭医院手外科共收治并随访手部掌指骨骨巨细胞瘤患者16 例,其中男10 例,女6例; 年龄24～ 65 岁,平均41.3岁。16例中,累及掌骨8例,指骨8例。患者均有受累部位的疼痛、肿胀、活动受限等症状,从出现到就诊时间平均为12 个月(5 ～15个月)。所有病灶的影像学表现均为溶骨性病变,并占据骨干长度一半以上。对病灶进行Campanacci分级,Ⅰ级0 例, Ⅱ级12 例,Ⅲ级4 例。对CampanacciⅢ级的患者行瘤段截除植骨术或系列截指术,对CampanacciⅡ级的患者行肿瘤病灶扩大刮除植骨术。结果：16例患者中12例术前的临床及影像学初步诊断为内生软骨瘤,术后病理证实为骨巨细胞瘤,术后随访时间24～140 个月,平均58.8 个月,其中3例出现复发,所有患者术后疼痛均消失,未出现其他术后并发症。行骨移植的患者骨愈合时间3～5 个月,平均3.3个月。CampanacciⅡ 级共10例有随访结果,3名患者在术后8～16 个月时肿瘤复发,复发后再行瘤段截除术,再次手术后未见复发。CampanacciⅢ级2例患者有随访结果,未见复发。至目前为止,病理报告未见恶性肿瘤诊断,也未见肺转移的病例,同时也未见多灶性或多中心性的报告。除了进行关节融合术的2例患者外其余10例患者关节的主动活动度得以保留。结论：骨巨细胞瘤在手部发生少见,诊断易与内生软骨瘤混淆,手术时广泛的刮除可以有效地控制复发,并提供满意的功能活动。     

长骨骨巨细胞瘤相关复发因素分析

目的：分析长骨骨巨细胞瘤相关复发因素,为其治疗及降低复发率提供参考依据。方法：分析２１例长骨复发性骨巨细胞瘤一般资料、影像学检查资料、首次手术方式、肿瘤所在部位、病理骨折与否、Ｊａｆｆｅ‘ｓ病理分级、Ｃａｍｐａｎｉｃｃｉ’ｓ放射线分级等,总结相关的复发因素。结果：Ｓ一组４１例肿瘤中复发者２１例,２１例中Ｊａｆｆｅ‘ｓ病理诊断与首次比较,１７例无变化,;按Ｃａｍｐａｎｉｃｃｉ’ｓ放射诊断标准,首次１     

骨巨细胞瘤中RunX2表达及对骨质调控的临床研究

目的 探讨核心结合因子(RunX2)表达与骨巨细胞瘤(GCT)临床病理特征之间的关系.方法 选择GCT标本58例,分别按照肿瘤恶性程度、肿瘤病理分级、是否侵犯软组织及是否伴发病理性骨折分组,应用免疫组织化学染色技术分析并比较RunX2在不同组表达水平的差异.结果 RunX2在恶性GCT组织内的表达水平显著高于良性GCT组织(P＜0.05);RunX2的表达随着GCT组织分级的升高而升高(P＜0.05);有软组织侵犯状况的GCT组织内的表达RunX2水平高于无软组织侵犯GCT组织(P＜0.05);而伴发病理性骨折的GCT组RunX2表达量高于无伴发病理性骨折组(P＜0.05).结论 RunX2的表达量与GCT严重程度有关.     

人骨巨细胞瘤细胞系GCT-0404的建立和生物学特性

目的:研究骨巨细胞瘤细胞体外培养的生物学特性,并建立人骨巨细胞瘤细胞系. 方法: 采用原代组织块培养法培养骨巨细胞瘤手术标本,对存活细胞进行形态学观察、免疫组织化学染色、细胞周期检查、核型分析、裸鼠移植. 结果: 建立人骨巨细胞瘤细胞系GCT-0404,其形态学表现、免疫组织化学染色均符合骨巨细胞瘤纤维母细胞样基质细胞的特征. 经过近1 a的体外培养,现已传代100次,细胞倍增时间39.7 h,细胞周期测定G1期为67.5%,G2期为8.9%,S期为23.6%. 染色体具有三倍体核型. 裸鼠移植成瘤率100%,无支原体污染. 结论: 人骨巨细胞瘤细胞系GCT-0404可以用于对骨巨细胞瘤的研究.     

异时性多中心骨巨细胞瘤伴腹膜后转移

Giant cell tuenor （GCT）of bone is a benign but locally aggressive tumor that usually involves the epiphysis of long bones.1Rarely,these tumors metastasize to the lung, and these metastases generally have the same benign histological appearance as the primary tumor. Multicentric giant cell tumor （M-GCT） is rarer. We herein report a case of M-GCT involving the left distal radius, with retroperitoneal metastasis, and subsequent lesions in the left proximal and distal femur. The patient and family members were informed that data concerning the case would be submitted for publication, and they consented.     

骨髓间充质干细胞对巨噬细胞分泌炎症因子的影响

目的 探讨骨髓间充质干细胞对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞分泌炎症因子IL-10、TNF-α的影响.方法 体外分离、培养、鉴定骨髓间充质干细胞与巨噬细胞,分PBS、BMSCs、Macrophage、Macrophage+ BMSC、BMSCs+ LPS、Macrophage+ LPS、Macrophage+BMSCs+LPS 7组进行细胞共培养实验.收集不同时间点培养基上清液,ELISA检测其炎症因子IL-10、TNF-α的含量.结果 B(BMSCs)组与E(BMSCs+LPS)组相比,IL-10与TNF-α的含量没有明显变化;F(Macrophage+LPS)组IL-10、TNF-α的含量均高于C组(Macrophage);G(Macrophage+BMSCs+LPS)组与F(Macrophage+LPS)组相比,TNF-α明显降低、IL-10明显升高.结论 BMSCs可以减轻LPS对巨噬细胞分泌炎症因子的刺激作用,减轻炎症反应的程度.     

IL-6反义寡核苷酸对骨吸收的抑制作用

目的 :探讨IL -6反义寡核苷酸在体外对骨吸收的抑制作用及意义。方法 :分离培养新生小鼠颅盖骨 ,并分别用IL -6硫代反义寡核苷酸 (ASON )、无义寡核苷酸 (NSO )、IL -6或ASON与IL -6联合作用颅盖骨 ,未加药组为对照。培养一定时间后 ,测定培养上清液的钙含量 ,将实验组钙含量与对照组钙含量比值作骨吸收指数。结果 :ASON( 5.0m/L)分别作用 12、2 4、48h后 ,颅盖骨骨吸收指数呈时间依赖性降低。作用 48h后 ,ASON使颅盖骨骨吸收指数呈剂量依赖性降低 ;IL -6则使其呈剂量依赖性升高 ;ASON可轻度降低IL -6升高的骨吸收指数 ;ASON( 5μm /L)对有或无IL -6培养的颅盖骨骨吸收抑制率分别为 10 .8%、19.3 % ;NSO对骨吸收指数无影响。结论 :IL -6反义寡核苷酸对体外培养的颅盖骨骨吸收有一定的抑制作用     

壳多糖对骨巨细胞瘤的治疗意义

目的：确定壳多糖（几丁糖）是否可作为骨巨细胞瘤治疗的药物载体。方法：用壳多糖及壳多糖联合阿霉素，顺氨氧铂及甲氨喋呤对骨巨细胞瘤进行体外敏感实验（ＭＴＴ法）。结果：单纯壳多糖对骨巨细胞瘤在体外无抑制作用（抑制率为１．８％），壳多糖联合阿霉素，顺氨氯铂及甲氨蝶呤分别较单独应用相同浓度（血浆峰值浓度）药物的抑制率要高，但无显著差异（Ｐ〉０．０５）。结论：壳多糖可以作为阿霉素，顺氨氯铂及甲蝶呤的良好缓释载     

Quantitative pathological study of aggressiveness of giant cell tumor of bone.

Clinical behavior of giant cell tumor of bone (GCT) may vary remarkably from latent to very aggressive. Quantitative pathological methods were used to evaluate the aggressiveness of GCT. Fifteen cytometric parameters were measured and computed on routine sections of 40 GCTs which had been treated with curettage. The surgery factor (with or without additional procedures like bone cement packing or freezing after the curettage) was also taken into account and computed. Nineteen of the 40 GCTs were cured and 21 recurred. While no single one from the 15 parameters measured showed significant differences between the cured and recurrent groups according to the Mann-Whitney's U test or Student's t test, a 4-variable function was established with a stepwise discriminant analysis which could correctly identify 70.8% of the predicted cases as cured or recurrent (jackknife procedure). The function also suggested that in addition to the surgery factor, which no doubt had close relation with the prognosis, the most important risk factor in histological parameters was SA40, i.e. the percent of cells with nucleus larger than 40 square microns. Single cells extracted from paraffin-embedded blocks of 38 GCTs were analyzed by DNA-image cytometry. The 2c deviation index (2cDI) showed wide heterogeneity ranging from those consistent with benign tumors to those with apparent malignant ones, which may account for its diversity in clinical behaviour. Sixteen of the 38 cases had been treated with curettage, 8 of them were cured and followed up for at least 3 years and the remaining 8 recurred. The significant difference of 2cDI between the two groups suggested that these DNA parameters are useful in evaluating the aggressiveness of GCT for the selection of an adequate treatment. Quantitative approaches appeared to be more objective and more sensitive in evaluating the aggressiveness and predicting the prognosis of GCT than the subjective grading system used before.

     

骨巨细胞瘤病灶内手术治疗的临床分析

目的 研究病理Ⅰ、Ⅱ级,X线表现为Campanacci Ⅱ、Ⅲ期的邻膝关节骨巨细胞瘤病灶内的手术治疗.方法 采用病灶内肿瘤刮除、液氮冷冻灭活、取自体髂骨同时用/不用异体骨植骨术的骨巨细胞瘤71例(A组),采用病灶内肿瘤刮除、瘤腔灭活、骨水泥填充术的方法治疗骨巨细胞瘤45例(B组).对两组的疗效进行回顾性分析.结果 A、B两组间肢体远期功能评分、局部复发率(5.6%vs4.4%)及术后并发症发生率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 两种方法均是治疗邻膝关节骨巨细胞瘤的有效方法.     

四肢复发性骨巨细胞瘤再次手术方式选择

目的 探讨四肢复发性骨巨细胞瘤再次手术方式选择对骨巨细胞瘤的疗效影响.方法 回顾性分析2000～2008年该院收治26例四肢复发性骨巨细胞瘤患者,总结不同手术方式的治疗效果.本组中2例为股骨颈骨巨细胞瘤,行肿瘤瘤段切除人工半髋关节置换.腓骨上端4例行肿瘤瘤段切除术.桡骨远端4例和股骨下端6例行肿瘤瘤段切除术,行自体或者异体移植.股骨下端2例、胫骨上端6例、肱骨近端1例肿瘤瘤段切除人工关节置换.全部病例均随访时间2～10年,平均4.5年.无远处转移或死亡病例.结果 对四肢复发性骨巨细胞瘤的肿瘤瘤段切除和功能重建手术,可有效控制局部复发和防止肺部转移,同时又可以保存一定的关节功能.结论 肱骨上端、股骨下端、胫骨上端复发性骨巨细胞瘤可选人工关节置换;股骨上端复发性骨巨细胞瘤可选人工半髋关节、全髋关节置换;桡骨近端、腓骨小头、尺骨远端复发性骨巨细胞瘤可选肿瘤瘤段切除;桡骨下段复发性骨巨细胞瘤可选腓骨上段移植术;已恶变或者局部广泛浸润无法彻底切除的病例可选截肢术.     

葛根素对体外破骨细胞性骨吸收的影响

目的研究葛根素对体外破骨细胞性骨吸收的影响.方法分离破骨细胞,与牛骨磨片共培养,分别加入10-8、10-7、10-6 mol/L的葛根素,以17β-雌二醇10-8 mol/L为阳性对照药,利用相差倒置显微镜观察破骨细胞吸收牛骨磨片的情况.于培养3、5、7 d计数各组骨吸收陷窝数目的变化,并进行显微摄片和图像分析.结果与正常对照组相比,葛根素10-8、10-7、10-6 mol/L及17β-雌二醇10-8 mol/L能使体外培养破骨细胞性骨吸收数目和吸收陷窝面积呈剂量依赖性减少.结论葛根素在体外能直接抑制破骨细胞性骨吸收.