脂多糖诱导脓毒症大鼠远期脑线粒体损伤的初步研究

目的 初步探讨脓毒症大鼠远期脑线粒体结构和功能损伤。方法 将Wistar大鼠随机分为对照组和脓毒症组,通过腹腔注射革兰阴性菌脂多糖(LPS,10 mg/kg)建立脓毒症大鼠模型并进行生存率实验。脓毒症组大鼠分别在腹腔注射革兰阴性菌LPS后12、24、48和72 h各处死8只,对照组大鼠(n=8)在给予等量生理盐水腹腔注射后处死,取脑组织提取线粒体。通过流式细胞仪检测线粒体膜电位(MMP)及线粒体肿胀度,使用试剂盒检测呼吸链复合物酶(Ⅰ~Ⅴ)活性。通过苏木精-伊红(HE)染色及电镜观察脑组织和线粒体形态学变化。结果 脓毒症组较对照组生存率明显下降(P< 0.01)。脓毒症组MMP和呼吸链复合物酶(Ⅰ~Ⅴ)活性较对照组明显下降(P< 0.05),48 h降至最低,72 h部分恢复;脓毒症组线粒体肿胀度较对照组明显升高(P< 0.05),48 h达到峰值,72 h部分恢复;HE染色可见脑组织结构明显破坏,同时电镜结果观察到线粒体肿胀,少量线粒体出现“空泡样变”。结论 在LPS诱导脓毒症大鼠模型中,脑线粒体结构和功能均受损,损伤高峰可能发生在48 h左右。     

解偶联蛋白2与脂多糖诱导脓毒症大鼠心肌线粒体损伤的关系

目的探讨解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)与脂多糖诱导脓毒症大鼠心肌线粒体损伤的关系。方法通过腹腔注射脂多糖(LPS)建立脓毒症模型。将40只Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠随机分为5组,每组8只:对照组(腹腔注射生理盐水)、脓毒症6 h组(LPS-6 h组)、脓毒症12 h组(LPS-12 h组)、脓毒症24 h组(LPS-24 h组)和脓毒症48 h组(LPS-48 h组)。在相应时间点留取大鼠血清和心脏组织,提取心肌线粒体,通过酶标仪检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和活性氧(ROS)水平,流式细胞仪检测线粒体肿胀度和线粒体膜电位(MMP),采用蛋白质免疫印迹试验(Western blot)测定UCP2蛋白表达水平;电镜观察心肌组织线粒体形态学变化。结果与对照组比较,LPS各组血清CK、CK-MB水平、心肌组织ROS水平和线粒体肿胀度均明显升高(P0.05),峰值在LPS-24 h组;而LPS各组线粒体膜电位明显下降(P0.05),LPS-24 h组降至最低。Western blot检测发现LPS各组心肌组织UCP2的表达水平较对照组明显升高(P0.05),峰值在LPS-24 h组。电镜观察结果发现LPS大鼠心肌线粒体肿胀,线粒体膜部分破碎,有空泡形成,LPS-24 h组病变最严重。LPS大鼠心肌线粒体ROS水平、线粒体肿胀度与UCP2表达量呈正相关(分别r=0.796、0.893,P0.05);LPS大鼠心肌MMP与UCP2表达量呈负相关(r=-0.903,P0.05)。结论在脓毒症大鼠模型中,心肌和心肌线粒体都明显损伤,心肌组织UCP2的表达与线粒体损伤密切相关,推测UCP2可能在脓毒症心肌线粒体损伤中起重要作用。     

角质细胞生长因子-1在脓毒症大鼠肾脏的表达及意义

目的 探讨角质细胞生长因子-1(keratinocyte growth factor-1,KGF-1)在脓毒症大鼠肾脏的表达及意义.方法 将80只6周龄健康雄性Wistar大鼠随机分成手术组和假手术组(各40只).用盲肠结扎穿刺法制备脓毒症大鼠模型.两组分别在术后3h、6h、12h、24h和36h留取血液及肾脏标本,HE染色光镜观察大鼠肾脏病理学变化,测定血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)浓度及WBC计数,免疫组织化学SABC染色法检测KGF-1蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测KGF-1mRNA的基因相对表达量.结果 与假手术组相比,手术组24h肾损伤最严重,可见肾小管空泡变性,大量中性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞浸润、局部有点状出血、坏死;血Cr、BUN术后3h无明显升高,6h后升高,24h达峰值,36h略有下降,差异有统计学意义(P<0.01).KGF-1蛋白及基因表达6h最强,12h有所下降,24h出现第二次表达高峰,36h又有所下降,均明显高于假手术组(P<0.01).KGF-1mRNA与BUN成正相关(r=0.504,P<0.01),与Cr成正相关(r=0.382,P<0.05).结论 KGF-1在正常大鼠肾脏中即有表达,主要集中在髓质肾小管上皮细胞,皮质肾小管也有分布.脓毒症受损肾脏的KGF-1表达显著增强且与肾脏损伤程度呈正相关,推测KGF-1是影响感染后肾脏损伤修复的重要因素之一.

Abstract：

Objective To investigate the expression and significance of keratinocyte growth factor-1(KGF-1) in the kidneys of septic rats.Methods Eighty male Wistar rats were randomly divided into the sepsis group and sham operation group.Either group was divided into 3-hour,6-hour,12-hour,24-hour and 36-hour subgroups,with 8 rats in each.Sepsis models were established by cecum ligation perforation (CLP).The kidney and blood samples were respectively taken for pathological study.Serum creatinine (Cr) and blood urea nitrogen (BUN) level determination and leukocyte counting were performed.KGF-1 protein was detected by immunohistochemical method and the expression of KGF-1 genes by real time PCR.Results The renal tubules in sepsis group were injured most at 24h after operation,which were infiltrated by considerable neutrophilic granulocytes,leukomonocytes and mononuclear cells,with vacuolar degeneration,focal hemorrhage and necrosis under the light microscopy.Serum Cr and BUN increased from 6h after operation,and reached the peak at 24h after operation in sepsis group,which were significantly different in those of sham operation group (P< 0.01).Compared with sham operation group,the expression of KGF-1 protein and genes of sepsis group increased significantly and reached the peak at 6h after operation.KGF-1mRNA was positively correlated with BUN and Cr (r=0.504,P<0.01;r=0.382,P<0.05).Conclusion KGF-1 was also expressed in normal kidneys,mainly in tubule epithelial cells of renal medulla and also in that of renal cortex.The expression of KGF-1 in sepsis group was obviously higher than that of sham operation group,and was positively correlated with the degree of kidney damage after infection.KGF-1 was speculated to be one of the protective factors affecting the repair of impaired kidneys caused by infection.     

脓毒症线粒体损伤的氧化应激机制及靶向抗氧化剂的研究

线粒体是细胞氧化的重要部位,在脓毒症时氧化应激作为炎症反应最终的结果,可引起线粒体的改变,从而可能导致器官功能损伤。在正常情况下,抗氧化防御系统通过相互作用可以对抗氧化应激,预防对线粒体的损伤。氧化应激在器官功能损伤的过程中起着重要的作用,目前已有研究发现针对线粒体的抗氧化剂靶向治疗可能是脓毒症引起的多器官功能衰竭治疗的一种新策略。该文就氧化应激在脓毒症线粒体损伤机制及靶向抗氧化剂的研究作一综述。     

脓毒症与线粒体功能障碍

脓毒症为各种病原菌侵入机体后引起的全身炎症反应综合征。脓毒症、严重脓毒症、脓毒症休克、多脏器功能衰竭为疾病的进展过程。线粒体被称为“动力工厂”,为各脏器维持正常功能提供能量。脓毒症时免疫异常、多种炎症因子的激活及释放、细胞内信号传递异常及氧化应激等可引起线粒体功能障碍。最近研究提出,线粒体自噬在线粒体功能障碍中也起着一定作用。该文就脓毒症时引起机体线粒体损伤的机制进行综述。     

脓毒症与线粒体功能障碍研究进展

脓毒症是由感染引起的全身炎症反应综合症，世界范围内大约10%的死亡是由脓毒症引起的。复杂的细胞及生物化学事件的相互作用使得脓毒症的病理生理表现多种多样，这些细胞及生物化学事件包括：炎症因子的释放、微循环和线粒体功能障碍等。由于线粒体作为细胞能量代谢的特殊细胞器，在调控细胞生命活动和死亡中发挥了重要作用，并且不断增加的证据表明线粒体在脓毒症诱导的多器官功能障碍的发病机制中起了十分重要的作用，而后者又是导致脓毒症患者死亡的重要原因，因此，脓毒症与线粒体功能障碍的关系越来越受到关注。     

水通道蛋白2在脓毒症大鼠肾脏的表达及意义

目的 探讨水通道蛋白2(AQP2)在脓毒症大鼠肾脏的表达及对水代谢调节的意义.方法 将6周龄Wistar大鼠64只,随机分为假手术组和手术组各32只,采用盲肠结扎穿孔法(CLP)复制脓毒症模型.每组分为3、6、12和24 h 4个亚组,各8只,分别留取尿液、血液、肾脏标本.观察尿量、尿渗透压和肾功能,HE染色光镜观察肾脏病理变化,采用实时定量PCR方法检测AQP2 mRNA表达,免疫组织化学方法检测AQP2的蛋白表达.结果 手术组大鼠术后3 h尿量减少、尿渗透压增高,6 h后尿量逐渐增多、尿渗透压降低;血肌酐和尿素6 h开始升高,24 h达高峰;随术后时间延长肾脏病理损害加重,主要表现为肾小管上皮细胞之间间隔消失,细胞核消失;肾小球球襻融合,细胞结构不清;间质可见点灶状炎性细胞侵润.AQP2 mRNA的表达在术后3 h增高,12、24 h明显减低;AQP2蛋白表达在术后12 h下降,24 h最低,较假手术组均有显著性差异(P<0.05).结论 AQP2参与脓毒症时肾脏水代谢的调节,AQP2表达下调导致脓毒症尿浓缩功能障碍的主要病理机制之一.     

线粒体融合-分裂在脓毒症发病机制中的作用

脓毒症是感染导致的全身炎症反应综合征,进一步发展可导致感染性休克和多器官功能障碍综合征.脓毒症具有高发病率及病死率,是危重症领域的研究热点.近年来,亚细胞相关研究提示线粒体损害在脓毒症患者(尤其是脓毒症休克患者)的病情发展中起着非常重要的作用.线粒体是细胞内高度动态变化的细胞器,在细胞内不断融合与分裂,形成动态平衡的网状结构.脓毒症时,线粒体融合与分裂失衡,导致细胞内分子、细胞以及器官均发生功能障碍.该文就线粒体融合-分裂改变在脓毒症发病机制中作用的研究进展作一综述.     

持续去甲肾上腺素输注对早期脓毒症大鼠肾脏的保护作用及其机制研究

目的探讨持续去甲肾上腺素输注对早期脓毒症大鼠肾脏是否存在保护作用及其可能机制。方法30只SPF级健康雄性SD大鼠采用随机数字表法随机分为5组（6只／组）。对照组：腹腔注射生理盐水,并开始持续输注生理盐水1ml／h。脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）组和低剂量、中剂量和高剂量去甲肾上腺素组：腹腔注射LPS10mg／kg,LPS组持续输注生理盐水1ml／h,低、中、高剂量组分别持续输注0．06、0．30、0．60μg／（kg·min）去甲肾上腺素溶液1ml／h,均持续输注24h处死大鼠。检测2、6h大鼠血清炎症因子肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α、白细胞介素（interleukin,IL）-1β、IL-6及IL-10水平,24h大鼠血清C-反应蛋白（CRP）、肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）水平,膜电位和氧化应激相关指标,电镜观察肾脏线粒体肿胀程度,显微镜观察肾脏病理变化。结果与对照组比较,2hLPS组TNF—α浓度为（2203．3±1028．7）pg／ml、IL-1β（2214．5±457．0）pg／ml、IL-6（7784．7±248．2）pg／ml及IL-10（1076．1±368．4）pg／ml,均明显升高（P〈0．05）;24hCRP（0．35±0．24）mg／L,Cr（30．8±11．5）μmol／L,BUN（7．7±1．8）mmol／L,一氧化氮（1057．4±172．9）μmol／gprot,均明显升高（P〈0．01）,肾脏线粒体膜电位0．0464±0．0185,明显下降（P〈0．01）。与LPS组比较,2h低剂量组TNF-d浓度为（506．8±301．7）pg／ml、IL-1β（415．6±178．0）pg／ml及IL-α（381．7±171．0）pg／ml,均明显下降（P〈0．05）,24hBUN下降为（5．2±1．4）mmol／L（P〈0．05）,线粒体膜电位上升为0．3474±0．1526（P〈0．05）;2h中剂量组TNF-α浓度为（323．9±227．9）pg／ml、IL-1β（700．0±246．2）pg／ml,IL-10（282．6±134．4）pg／ml,均明显下降（P〈0．05）,24hCRP下降为（0．17±0．08）mg／L（P〈0．05）,线粒体膜电位上升为0．3775±0．1437（P〈0．05）;高剂量组2hTNF-α浓度为（378．7±89．8）pg／ml、IL-1β（945．7±264．4）pg／ml,明显下降（P〈0．05）,24hCRP（0．19±0．12）mr／L、Cr（23．2±3．4）μmol/L均明显下降（P〈0．05）。电镜观察显示LPS组线粒体包膜模糊及基质空泡化、凝固,显微镜观察显示LPS组肾组织间隙水肿,单核-巨噬细胞浸润,肾小球皱缩,肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性等,中剂量组病理损伤明显减轻。结论持续去甲肾上腺素输注对早期脓毒症大鼠肾脏有一定的保护作用,其机制与降低炎症因子风暴的水平、减轻氧化应激损害、改善线粒体功能相关。     

脓毒症与线粒体呼吸链酶复合物Ⅴ研究进展

脓毒症是一种复杂的病理生理功能紊乱性疾病,是由病原微生物感染机体导致的全身性炎性反应,是ICU重症患者的主要死因之一.脓毒症患者发病过程中存在线粒体功能失调以及氧化磷酸化功能受损.线粒体呼吸链酶复合物Ⅴ是线粒体氧化磷酸化的关键酶,在脓毒症前期主要促进ATP合成且酶活性降低;在脓毒症后期即局部缺血的条件下,主要发挥水解功能且活性上调.该文就脓毒症患者复合物Ⅴ活性变化、变化机制以及治疗的研究进展进行阐述.     

缺氧缺血对新生大鼠及小鼠脑细胞线粒体膜电势的影响

目的了解缺氧缺血(HI)对新生大鼠及新生小鼠脑细胞线粒体膜电势(ΔΨm)的影响。方法7日龄SD大鼠和C57小鼠各160只,分为正常对照组和HIBD后0、1、3、4、8、12h和24h组(各组n=20,其中10只测定海马、大脑皮质、丘脑部位的ΔΨm值),HIBD动物予以右颈总动脉分离结扎再置8%O2低氧舱处理,以流式细胞仪测定ΔΨm,比较同一动物HI损伤侧(右侧,即A侧)与损伤对侧(B侧)之间ΔΨm的比值(即A、BΔΨm比值)变化。结果HI损伤后新生SD大鼠及C57小鼠脑细胞ΔΨm均呈现“降低恢复再降低再恢复再降低”的改变,新生SD大鼠A、B侧ΔΨm比值在HI后0、4、24h出现3次降低,分别为(0.80±0.17)、(0.70±0.22)、(0.71±0.13),新生C57小鼠的该比值在HI后0、24h出现2次降低,分别为(0.84±0.26)、(0.86±0.13);新生SD大鼠改变最明显的部位是大脑皮质区,其HI后0、4、24h的比值为(0.69±0.07)、(0.73±0.11)、(0.65±0.20),新生C57小鼠改变最明显的部位是海马回,其HI后0、4、24h的比值为(0.71±0.16)、(0.71±0.21)、(0.76±0.20);新生SD大鼠和C57小鼠丘脑区的ΔΨm比值变化相对最轻。结论HI导致的脑细胞线粒体功能降低有短时间恢复的可能,两种动物的ΔΨm改变有不同的时间规律和易损部位,提示针对不同部位的HIBD实验研究采用不同方法制备动物模型的可行性。     

缺氧缺血对新生大鼠及小鼠脑细胞线粒体膜电势的影响

目的 了解缺氧缺血(HI)对新生大鼠及新生小鼠脑细胞线粒体膜电势(△ψm)的影响.方法 7日龄SD大鼠和C57小鼠各160只,分为正常对照组和HIBD后0、l、3、4、8、12 h和24h组(各组n=20,其中10只测定海马、大脑皮质、丘脑部位的△ψm值),HIBD动物予以右颈总动脉分离结扎再置8%02低氧舱处理,以流式细胞仪测定△ψm,比较同一动物HI损伤侧(右侧,即A侧)与损伤对侧(B侧)之间△ψm的比值(即A、B△ψm比值)变化.结果 HI损伤后新生SD大鼠及C57小鼠脑细胞△ψm均呈现"降低-恢复-再降低-再恢复-再降低"的改变,新生SD大鼠A、B侧△ψm比值在HI后0、4、24h出现3次降低,分别为(0.80±0.17)、(0.70±0.22)、(0.71±0.13),新生C57小鼠的该比值在HI后0、24h出现2次降低,分别为(0.84±0.26)、(0.86±0.13);新生SD大鼠改变最明显的部位是大脑皮质区,其HI后0、4、24h的比值为(0.69±0.07)、(0.73±0.11)、(0.65±0.20),新生C57小鼠改变最明显的部位是海马回,其HI后0、4、24 h的比值为(0.71±0.16)、(0.71±0.21)、(0.76±0.20);新生SD大鼠和C57小鼠丘脑区的△ψm比值变化相对最轻.结论 HI导致的脑细胞线粒体功能降低有短时间恢复的可能,两种动物的△ψm改变有不同的时间规律和易损部位,提示针对不同部位的HIBD实验研究采用不同方法制备动物模型的可行性.     

高氧对新生鼠肾组织损伤的病理改变

目的 动态观察高氧肺损伤的新生大鼠肾组织的病理变化,探讨高氧是否导致肾损伤.方法 采用高氧致新生鼠肺损伤的模型,将足月新生鼠分别在(80±5)％氧气(60只)和正常空气(60只)中持续暴露,第1、3、7、14、21天各处死12只,用HE染色观察肾组织形态学改变并进行病理组织学评分.结果 与空气组比较,高氧组肾脏呈轻度改变,第3、7天主要为肾小管空泡变性,水肿,扩张;在14、21天可见肾间质血管扩张、充血,偶见肾小管出血、坏死,肾小管再生,未见肾纤维化.病理变化评分示:两组暴露后1d、3d差异无统计学意义,而7d、14d、21d病理改变评分差异有统计学意义(P＜0.05).结论 吸入高氧的新生鼠可产生肾脏轻度病理改变,高氧肺损伤的同时可对肾脏产生一定损害.     

亚低温对脓毒症大鼠肝肺组织的保护作用

目的 测定亚低温（MHT）情况下脓毒症大鼠肝组织能量代谢和肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达的变化, 并结合肝细胞和肺组织超微结构的改变，初步探讨MHT能否减轻脓毒症大鼠组织损伤的程度。方法 24只Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组) 、内毒素组(LPS组) 和MHT组 ,应用高效液相色谱法及生化法分别测定各组肝组织腺嘌呤核苷酸及乳酸水平，应用RT PCR方法分别测定各组肺组织TNF α mRNA表达变化，并在透射电镜下观察肝细胞、肺组织超微结构的变化。结果 LPS组大鼠肝组织（湿重）腺苷酸水平为ATP (4.093±0.424) μmol·g-1,ADP （1.331±0.136）μmol·g-1 ,AMP （1.331±0.312)μmol·g-1；MHT组大鼠肝组织（湿重）腺苷酸水平为ATP（.519±0.028）μmol·g-1,ADP(1.483±0.108)μmol·g-1,AMP(1.544±0.301)μmol·g-1；LPS组和MHT组均较NC组腺苷酸水平ATP (4.990±0.455)μmol·g-1, ADP(1.632±0.181)μmol·g-1,AMP (1.737±0.407)μmol·g-1降低, 尤以LPS组明显。MHT组肝组织腺苷酸水平较LPS组明显升高；MHT组肝乳酸含量为每克蛋白(1.424±0.213)mmol，明显低于LPS组的每克蛋白（1.676±0.267）mmol（P<0.05）,而与NC组差异无统计学意义［vs 每克蛋白（1.379±0.314） mmol,P>0.05］。LPS组大鼠肺组织TNF-α mRNA 1、2和3 h表达分别为（1.029±0.055）、（1.132±0.068）和（1.107±0.044）；MHT组大鼠肺组织相应时点TNF-α mRNA表达分别为（0.835±0.041）、（1.056±0.037）和（1.056±0.032），均较NC组肺组织相应各时点TNF-α mRNA 表达(0.625±0.009，0.631±0.007，0.612±0.011)明显增加（P<0.05）,尤以LPS组明显。MHT组肺组织TNF-α mRNA较LPS组表达明显减少（P<0.05）。透射电镜下可见MHT组肝细胞及肺组织超微结构损伤明显轻于LPS组。结论 可减缓脓毒症大鼠肝组织能量的消耗，减轻肝组织损伤，还可减少脓毒症大鼠肺组织TNF-α mRNA的表达，减轻肺组织炎性损伤，MHT可作为防治脓毒症的一种新方法。     

谷氨酰胺影响脓毒症大鼠脑内PDGF及其受体表达的研究

目的：该研究旨在探讨脓毒症幼年大鼠大脑血小板衍生生长因子-B（PDGFB）及其受体(PDGFR-β)表达的变化及谷氨酰胺（Gln）干预的影响,探讨PDGF-B在幼年期脓毒症时脑损伤发病机制中的作用及Gln对脑损伤的可能保护机制。方法：120只10日龄Wistar大鼠随机分为对照组、内毒素组（LPS）和谷氨酰胺组（Gln）。腹腔注射内毒素（LPS,5 mg/kg)制备幼年大鼠脓毒症动物模型。Gln组为腹腔注射LPS前1 h腹腔注射Gln (1.346 g/kg)。各组大鼠又分为5个亚组（n=8）,分别于注射后2、6、12、24及72 h处死,采用免疫组织化学方法及免疫印迹法检测大脑皮层PDGF-B及PDGFR-β的表达。结果：（1）免疫组织化学方法结果显示注射LPS后 72 h Gln组大脑皮层神经元PDGF-B和 PDGFR-β表达明显高于对照组和LPS组。（2）免疫印迹方法结果显示,LPS组和Gln组于注射LPS后第2 h、6 h和12 h 的PDGF-B表达均低于对照组（P＜0.05）。而Gln组12 h和72 h 的PDGF-B表达明显高于LPS组（P＜0.05）。与对照组比较,LPS组大脑组织PDGFR-β表达在2 h和6 h增加,而在72 h表达下降（P＜0.05）。Gln组则与对照组于各时间点比较,差异均无统计学意义。结论：Gln在注射LPS后能上调大脑PDGF-B和PDGFR-β的表达,提示Gln对幼年期脓毒症脑损伤的保护机制可能与其促进大脑PDGF-B和PDGFR-β的表达有关。［中国当代儿科杂志,2010,12(12)：967-971］     

The efficacy of extracorporeal membrane oxygenation (ECMO) in newborns with septic shock

The efficacy of extracorporeal membrane oxygenation (ECMO) for patients with septic shock has not yet been documented with certainty. Seven septic newborns who were resistant to conventional therapy were managed by ECMO in our hospital, and five (71.4%) survived. Veno-arterial ECMO thus was very beneficial in supporting cardiorespiratory insufficiency due to septic shock. Ultrafiltration or hemodialysis carried out on a bypass route in the ECMO circuit was also beneficial in controlling the fluid and electrolytic imbalance often encountered in septic newborns. On the other hand, despite activated clotting times being maintained at relatively low levels compared to non-septic cases, major hemorrhagic complications occurred in more than one-half of the cases and became the main cause of death in two. Some modifications will therefore be necessary in ECMO practice for septic newborns. Correspondence to: M. Nagaya     

Experimental models of human neuroblastoma in infancy SD rats

目的 建立人神经母细胞瘤SD幼鼠模型,探讨其作为人神经母细胞瘤非免疫缺陷动物模型用于实验研究的可行性.方法 体外培养人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,取对数生长期瘤细胞,开腹接种于幼年SD大鼠左侧肾上腺区肾筋膜内,接种(1～3)×107/ml的单细胞悬液0.2 ml.定期B超监测肿瘤大小,绘制肿瘤生长曲线,并用免疫组织化学方法检测神经母细胞瘤特异性标志物NSE表达.结果 35只SD大鼠中,荷瘤成功35只,总荷瘤率为100％.其中全身转移有明显恶病质的SD大鼠3只,其余32只为接种局部肿瘤生长.肿瘤生长曲线提示在种瘤后9d左右为肿瘤生长高峰期,种瘤17d左右肿瘤开始缩小.该实验肿瘤生长监测组有2只荷瘤鼠在B超监测1个月左右发生消退,其余荷瘤鼠均在种瘤3个月后消退.所取肿瘤组织免疫组织化学NSE表达均为阳性.结论 成功建立人神经母细胞瘤SD幼鼠模型,该模型荷瘤率高,为研究瘤细胞在非免疫缺陷的正常免疫机体内生长的生物学特性打下良好的基础,为局部瘤体的物理治疗提供经济实用的短期实验动物模型.     

美金胺对新生大鼠重复用药的毒理学实验研究

目的通过对新生大鼠进行美金胺的重复用药毒理学实验,从病理学角度探讨重复大剂量应用美金胺对新生大鼠各主要脏器可能造成的毒性影响。方法选用7日龄SD新生大鼠80只,随机分为高、中、低剂量组和对照组,连续14d分别经腹腔注射不同剂量美金胺或注射用水,每组2／3大鼠于停药后即予断头处死,余1／3大鼠于停药恢复1周后断头处死,分别对各主要脏器进行镜下病理检查。结果连续用药14d后,高、中剂量组大鼠的脑、肝组织见部分细胞变性,。肾组织有灶性钙化。低剂量组各脏器无明显病理改变。停药恢复7d后,可见肝脏有灶性坏死,。肾脏有灶性钙化,余脏器病变恢复正常。结论连续大剂量应用美金胺不会引起新生大鼠脑、肝、。肾的不可逆病理改变,美金胺对新生大鼠是安全的。