防龋疫苗的研究进展

防龋疫苗的研究进展李富明综述罗宗莲岳松龄审校对ＳＩｇＡ抗体产生机理的研究，为防龋疫苗的研制提供了新的思路和理论基础。随着不同剂型、佐剂和免疫途径的进一步研究，粘膜免疫系统的抗体产生也出现了新的看法［１］。但是，疫苗的更新，总是向着增加疫苗的免疫效果的...     

基因重组乳链球菌防龋疫苗主动免疫防龋研究：Ⅲ.静脉 …

利用ＥＬＩＳＡ法观察了携带有变形链球菌表面蛋白基因的重组乳链球菌ＨＬ１０７经静脉内注射免疫孕兔后诱导机体免疫应答情况。结果表明，免疫１周后，血清和乳清中特异性ＩｇＧ型抗体明显升高，并持续数周。提示重组乳链球菌ＨＬ０７具有变形链球菌表面蛋白抗原ＰＡｃ的免疫原性，能激发机体的系统免疫应答。     

重组亚单位和合成肽防龋疫苗的免疫效能

目的：比较重组亚单位rPAc防龋疫苗和合成肽疫苗诱导小鼠特异性体液免疫和黏膜免疫水平。方法：以rPAc疫苗和合成肽疫苗分别滴鼻免疫小鼠,2、4周后加强免疫,分别收集0、2、4、6、8、10、12周的血清和唾液,用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测血清和唾液中特异性抗体的水平。结果：以rPAc防龋疫苗免疫小鼠可产生较合成肽疫苗免疫小鼠更显著的黏膜免疫反应,两组比较差异有显著性（P〈0．05）。结论：重组亚单位rPAc防龋疫苗相对于合成肽疫苗具有更明显的黏膜免疫效果。     

基因重组乳链球菌防龋疫苗的研究：Ⅴ.重组乳链球菌中RN…

对参与蛋白质生物合成的转录产物ＲＮＡ进行异硫氰酸胍提取，氯化铯超速离心纯化以及ＲＮＡ点印迹杂交，测定重组乳链球菌中特定的ＲＮＡ，分析影响重组基因表达的因素。紫外分光法测定获得高浓度，纯度ＲＮＡ。以切口平移生物素标记ＤＮＡ探针并进行ＤＮＡ－ＲＮＡ点印迹杂交，光基因核酸系统检测结果提示，乳链球菌ＨＬ１０７，ＨＬ４５均含有与变形链球菌相同的特定ＰＡｃ－ｍＲＮＡ靶序列及密度扫描影像。     

基因工程重组防龋疫苗的研究进展

防龋疫苗的研究经历了三个阶段，目前国外仍将变链菌细胞表面蛋白抗原Ⅰ／Ⅱ和葡糖基转移酶蛋白抗原基因工程重组疫苗作为研究的重点。本文对基因重组防龋疫苗的研究近况进行了综述。     

基因工程重组防龋疫苗的研究进展

防龋疫苗的研究经历了三个阶段,目前国外仍将变链菌细胞表面蛋白抗原Ⅰ/Ⅱ和葡糖基转移酶蛋白抗原基因工程重组疫苗作为研究的重点。本文对基因重组防龋疫苗的研究近况进行了综述。     

变形链球菌主动免疫防龋机理

变形链球菌是重要的致龋菌，采用免疫手段进行龋病的预防是目前龋病学研究的核心问题之一，本文着重就主动免疫防龋中局部粘膜免疫系统与全身免疫系统之间的相互关系及其免疫抗原接受方式，淋巴细胞迁移通道，归巢定位及抗体产生机制等问题作了一综述。     

嵌合体防龋疫苗的研究进展

嵌合体防龋疫苗是将变链球菌的毒力因子葡糖基转移酶和表面蛋白,或分别与霍乱毒素亚单位相嵌合,依据嵌合方式不同,分化学嵌合,基因工程嵌合,直接嵌合基因免疫,对不同方式嵌合的防龋疫苗的研究,有助于比较疫苗的有效性,为免疫防龋提供理论依据。     

基因重组鼠伤害沙门氏菌防龋疫苗的研究：Ⅰ.变形链球菌pac基因上游区 …

目的;对变形链球菌表面蛋白ｐａｃ基因上游区进行序列测定和分析。方法;通过应用ＰＣＲ测序试剂盒和ＤＮＡ自动测序仪ＡＢＩ３１０对变形链球菌表面蛋白ｐａｃ基因上游区进行序列测定。结果：测定了ｐａｃ基因上游区内的５１７个碱基序列。     

变形链球菌表面蛋白PAc防龋疫苗研究的进展

龋病是一种最常见的细菌性口腔疾病 ,免疫治疗是防治龋病的有效途径之一。基因工程疫苗和核酸疫苗因具备诸多优点而成为具有强大潜力的免疫防龋疫苗。变形链球菌是主要致龋菌 ,其细胞表面分子量为 185ｋＤ的表面蛋白抗原 (ＰＡｃ)介导了该菌对牙面的非蔗糖依赖性粘附 ,是变链菌的主要致龋毒力因子。ＰＡｃ是一种重要的候选疫苗抗原 ,具良好免疫原性 ,其全分子或部分片段进行主动或被动免疫均可有效控制变链菌在牙面的粘附 ,降低患龋率。ＰＡｃ的氨基酸序列和编码基因ｐａｃ的核苷酸序列已基本清楚 ,为ＰＡｃ基因工程疫苗和核酸疫苗的制备提…     

表兄链球菌致龋性与免疫防龋的研究进展

表兄链球菌是变异链球菌群中的一种重要致龋菌,检出率逐渐提高。与变异链球菌相比较,表兄链球菌的产酸性和耐酸性更强,与高度龋活性的关系更为密切,日益引起学者们的重视。下面就该菌的致龋性及其与免疫防龋相关的研究进展作一综述,以期对龋病病因学和免疫防龋的深入研究提供参考。     

免疫防龋DNA疫苗动物实验研究进展

[摘要] 龋病是以变形链球菌为主要致龋菌引起的口腔感染性疾病。有效地诱导机体产生针对变形链球菌的系统免疫和粘膜免疫,阻止细菌在牙面的粘附与聚集以及细菌在口腔内定植,是防止致龋菌感染的有效手段。应用于免疫防龋研究主要有主动免疫防龋和被动免疫防龋。本文主要论述主动免疫防龋疫苗中的防龋DNA疫苗的优缺点、研究进展及未来的发展前景。     

Future control of dental disease by immunization: vaccines and oral health

The current status of vaccines against dental caries indicates that the present preparations are effective in animals and should be used in clinical trials to determine their effectiveness as an alternative to present methods of control. It is concluded that caries vaccination is a potentially valuable addition to fluoridation and dietary restriction. In regard to periodontal diseases, it is concluded that the present status of the microbial aspects of the disease are not sufficiently clear to allow vaccines, either mono-species or multi-species to be made. It must also be remembered that we do not yet know whether the immune response is damaging or protective in these diseases. Finally, a hypothesis is advanced to suggest that the IgG and IgA systems may synergize and thus protect against plaque bacteria.     

Immunogenicity and persistence of a targeted anti-caries DNA vaccine

We have previously reported that a targeted anti-caries DNA vaccine, pGJA-P, induced accelerated and increased antibody responses compared with a non-targeted anti-caries DNA vaccine. Recently, pGJA-P/VAX, a new targeted anti-caries DNA vaccine for human trials, was constructed by replacing the pCI vector used in the construction of pGJA-P with pVAX1, the only vector authorized by the US Food and Drug Administration in clinical trials. Here, we report on our exploration of the kinetics of the antibody responses generated following pGJA-P/VAX immunization and the persistence of pGJA-P/VAX at both the inoculation site and the draining lymph nodes. Intranasal vaccination of mice with pGJA-P/VAX induced strong antibody responses that lasted for more than 6 months. Furthermore, pGJA-P/VAX could still be detected at both the inoculation site and the draining cervical lymph nodes 6 months after immunization. Thus, the persistent immune responses are likely due to the DNA depot in the host, which acts as a booster immunization.     

Biology of periodontal regeneration: a review and a hypothesis for future researches

Since the end of the seventies several studies have been carried out about the possibility of regeneration of periodontal osseous defects. The results of such researches supported by histological tests allowed to establish which surgical techniques could yield periodontal regeneration in a predictable way. In spite of a quite large diffusion of these sugical techniques in the treatment of periodontal osseous defects, some biological aspects of periodontal regeneration are still unknown. The most important among them is the origin and the differentiation pathway of the synthetic cells that shall provide for the reconstruction of the deep periodontium. Particularly, the phenotypic pattern and the origin of cementoblasts are not clear. Our researches focused on pericytes, a mesenchyma-derived cell population with remarkable differentiation capacities which have a microvascular location. We considered the hypothesis that pericytes could play an important role in regeneration of the alveolar bone, of the cementum and of the periodontal ligament. Should pericytes be actually the precursors of osteoblatsts, fibroblasts and cementoblasts involved in periodontal regeneration, new therapies, such as cultivated cells reimplantation or the targeted use of growth factors could be feasible. Future researches shall verify these observations.     

防龋疫苗研究的现状和思考

龋病仍是人类最常见的口腔疾病之一,严重威胁着人群的口腔健康.全国第三次口腔健康流行病学调查显示,我国5岁儿童乳牙患龋率为66.0%,龋均为3.50;12岁儿童恒牙患龋率为28.9%,龋均为0.54;35～44岁中年人群患龋率为88.1%,龋均(平均龋、失、补指数)为4.51;65～74岁老年人群患龋率为98.4%,龋均(平均龋、失、补指数)为14.65.目前有关龋病的病因学研究中较公认的是四联因素理论,从理论上讲,控制致龋微生物即能达到预防龋病的目的.     

融合防龋DNA疫苗pGLUA-P的构建及其细胞表达研究

目的 将变形链球菌（Streptococcus mutans)表面蛋白PAc编码A区和P区（A－P）的序列克隆到真核载体pGLU中，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗，并检测其在原核细胞和真核细胞中的表达。方法 将pCIA-P质粒中A－P片段序列与pGLU质粒连接，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P。将pGLUA-P转化大肠杆菌BL21（DE3），以SDS－PAGE电泳鉴定目的蛋白GLUA－P的表达。通过脂质体将pGLUA-P转染大鼠原代肌母细胞，以免疫组织化学检测GLUA－P的表达。结果 GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P经酶切分析证实携带GLU和A－P片段。pGLUA-P转化的大肠杆菌BL21（DE3）经IPTG诱导能够表达完整的融合蛋白。pGLUA-P转染的大鼠原代肌母细胞中可检测到融合蛋白的表达。结论 成功地构建了融合防龋DNA疫苗pGLUA-P，所携带的基因序列正确，能够在原核和真核细胞中表达正确的融合蛋白。     

靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P免疫兔的实验研究

目的　体外检测靶向融合防龋DNA疫苗pGJA P的免疫反应性 ;与非靶向融合防龋DNA疫苗 pGLUA P进行比较 ,评价其增强疫苗免疫效能的能力。 方法　将 pGJA P转染CHO细胞 ,蛋白质免疫印迹实验检测重组蛋白抗体免疫反应性。分 5组免疫兔 :pGJA P经肌肉注射组 (A组 ) ;pGJA P经鼻黏膜免疫组 (B组 ) ;pGLUA P经肌肉注射 (C组 ) ;pGLUA P经鼻黏膜免疫组 (D组 )和pCI载体经股四头肌注射组 (E组 )。酶联免疫吸附实验检测血清及唾液中的特异性抗体。用收集的血清进行葡糖基转移酶 (GTF)合成水不溶性葡聚糖抑制实验。结果　pGJA P表达的重组蛋白可以与抗GTF抗体反应。A组血清特异性IgG抗体水平远高于C组 (P <0 0 1) ;B组唾液特异性IgA抗体水平显著高于D组 (P <0 0 1) ;A组同样诱导了高水平的唾液特异性IgA抗体。A组的免疫血清抑制GTF活性的能力最强。结论　pGJA P具备GTF的免疫反应性 ;并较pGLUA P有更强的诱导系统和黏膜免疫反应及抑制GTF的能力。     

减毒鼠伤寒沙门氏菌防龋疫苗免疫定菌鼠的实验研究

目的：本研究通过建立定菌鼠模型，采用携带变形链球菌PAc A区片段的减毒鼠伤寒沙门氏菌S.typhimurium SL3261(pET-17b/A)防龋疫苗，经不同途径免疫定菌大鼠，观察其在大鼠肠道定居的能力和诱发的特异性免疫应答反应。方法：采用携带变形链球菌表面蛋白基因片段的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌S.typhimurium SL3261(pET-17b/A)，通过口服、皮下、粘膜下等途径免疫50只定菌SD大白鼠，以酶联免疫吸队鼠血清及唾液中抗PAc-IgG、SIgA水平进行测定。采集不同时间大鼠粪便样本，观察减毒鼠伤寒沙门氏菌在肠道的定居情况，并进行质粒抽提鉴定。结果：口服活菌苗组免疫后血清PAc-IgG及唾液SIgA水平皆明显高于免疫前（P＜0.01)。各组免疫水平比较，口服活菌苗组免疫水平也明显高于其它4组（P＜0.01)。其大鼠粪便中存在大量氨苄抗性的沙门氏菌，即沙门氏菌SL3261（pET-17b/A)。结论：用基因重组减毒鼠伤寒沙门氏菌免疫定菌大鼠，能刺激其产生免疫反应。重组减毒鼠伤寒沙门氏菌S.typhimurium SL3261(pET-17b/A)可在大鼠肠道较持久的寄生，并能较稳定地携带质粒。