早期分泌性抗原靶6、脂阿拉伯甘露聚糖诊断结核性脑膜炎的价值

目的探讨早期分泌性抗原靶6(Esat6)、脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)检测在结核性脑膜炎诊断中的应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验(Elisa法)检测结核性脑膜炎患者(结脑组,20例)、非结核性脑膜炎患者(非结脑组,20例)和对照组(以头痛为主诉者,20例)脑脊液及血清中Esat6和LAM含量,并进行比较。结果结脑组患者脑脊液、血清中的Esat6及LAM含量均明显高于非结脑组和对照组(均P<0.05);非结脑组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结核性脑膜炎患者脑脊液及血清中Esat6与LAM水平存在显著相关性(r=0.961,r=0.894,均P<0.05)。结论脑脊液、血清中Esat6和LAM检测可作为结核性脑膜炎的辅助诊断指标。更多还原     

抗人甘露聚糖结合凝集素单抗的制备、鉴定及应用

目的　制备抗人甘露聚糖结合凝集素单克隆抗体及建立应用方法。方法　用亲和层析法自人血清中提取甘露聚糖结合凝集素 (MBL) ,免疫Balb/c小鼠 ,通过细胞融合的方法 ,得到 3株稳定分泌抗人MBL单克隆抗体 (mAb)的杂交瘤细胞株。建立检测MBL的ELISA。结果　本组mAb识别相对分子质量 (Mr)为 310 0 0的MBL分子 ,与MBL作用后可明显抑制MBL 甘露聚糖复合物的抗补体效应。用ELISA检测 186例健康人血清中MBL水平为 2 6 9± 1 5 8mg/L。结论　成功地获得了抗MBL的mAb并用于建立ELISA。     

PCR—ELISA测定结核分枝杆菌DNA临床应用评价

目的　评价聚合酶链反应 酶联免疫吸附试验 (PCR ELISA)测定结核分枝杆菌DNA临床应用价值。方法　用PCR ELISA测定 436例肺结核、172例非结核病人痰标本中的结核分枝杆菌DNA ,并结合临床诊断和痰菌检查对实验结果进行分析。结果　 436例活动性肺结核病人本法最终阳性 341例 ,阳性率 78.2 1% ,其中痰菌阳性病人本法阳性率为 97.0 7% ,痰菌阴性病人阳性率为 5 5 .33 % (10 9/ 197) ;而 172例对照患者只有 3例假阳性 ,假阳性率 1.74%。结论　本法测定痰液结核分枝杆菌DNA对肺结核的诊断具有很高的敏感性和特异性 ,尤其对痰菌阴性的活动性肺结核病人具有重要辅助诊断价值     

胸水中脂阿拉伯甘露聚糖抗原检测对结核性胸膜炎的诊断价值

目的探讨胸水中的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原对结核性胸膜炎的诊断价值,以获取一种诊断结核性胸膜炎的辅助指标。方法收集胸水标本共96例,其中结核性胸膜炎46例,非结核性胸膜炎50例,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胸水中的LAM抗原。结果结核性胸膜炎胸水中LAM抗原阳性率为54%,非结核性胸膜炎胸水中LAM抗原阳性率为22%,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸水中LAM抗原检测可作为结核性胸膜炎诊断的一项新指标。     

尿脂阿拉伯甘露聚糖检测在HIV阴性活动性结核病诊断中的应用及效果

目的 探讨最新检测方法尿脂阿拉伯甘露聚糖（LAM）检测（化学发光法）对HIV阴性活动性结核的诊断价值。方法 连续性纳入2022年10月至2022年12月在北京胸科医院结核病科就诊的疑似结核病患者113例,其中,28例疑似但确诊为非结核病患者作为非TB组（对照组）,85例确诊结核病患者作为TB组（病例组）。在治疗前收集尿液样本进行LAM抗原检测,并收集临床痰液进行抗酸染色涂片法、MGIT960痰培养法和GeneXpert法检测的实验室资料。以临床诊断为参考标准,评价4种方法对检测活动性结核病的诊断效能。结果 以临床综合诊断为标准,痰Gene Xpert诊断结核病的灵敏度最高,并且诊断结果与临床诊断结果一致性最高（Kappa>0.4）,其次为MGIT960培养;而尿LAM的灵敏度较低,漏诊率较高,并且临床诊断的一致性较低（Kappa<0.4）,临床应用价值较低。以LAM检测为基础,与其他检测方法并联试验的诊断结果显示,LAM检测与痰Gene Xpert联合的敏感度最高,并且较单独使用有较大提升,而且诊断结果与临床结果有较高的一致性（Kappa>0.70）,具有临床应用价值...     

甘露聚糖特异的IgG、IgM类抗体的测定及意义

目的：探讨人血清中甘露聚糖特异的IgG、IgM类抗体（M－IgG、M－IgM)在生理和病理状况下的变化和意义。方法：建立ELISA检测不同年龄正常人群和SLE、肾脏疾病、肿瘤患者血清中的M－IgG、M－IgM水平。结果：老年组M-IgG水平显著高于少儿组，P＜0．01。老年组M－IgM水平显著低于少儿组、中青年组，P＜0．001。各疾病组与正常对照组相比M－IgG、M－IgM显著降低（P＜0．001）。结论：检测M－IgG、M－IgM抗体可作为监测非特异免疫功能的一项指标。     

PCR-ELISA测定结核分枝杆菌DNA临床应用评价

目的评价聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验(PCR-ELISA)测定结核分枝杆菌DNA临床应用价值.方法用PCR-ELISA测定436例肺结核、172例非结核病人痰标本中的结核分枝杆菌DNA,并结合临床诊断和痰菌检查对实验结果进行分析.结果 436例活动性肺结核病人本法最终阳性341例,阳性率78.21%,其中痰菌阳性病人本法阳性率为97.07%,痰菌阴性病人阳性率为55.33%(109/197);而172例对照患者只有3例假阳性,假阳性率1.74%.结论本法测定痰液结核分枝杆菌DNA对肺结核的诊断具有很高的敏感性和特异性,尤其对痰菌阴性的活动性肺结核病人具有重要辅助诊断价值.     

酶联免疫斑点试验快速诊断结核分枝杆菌感染的临床应用价值

目的探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测结核分枝杆菌特异抗原T淋巴细胞的频率，在快速诊断结核病中的临床应用价值。方法利用ELISPOT检测对结核菌特异抗原刺激反应，分泌γ干扰素的效应T淋巴细胞数量方法，测定30名健康体检者，24例丙肝患者，65例非结核呼吸道疾病患者和112例结核病患者外周血单个核细胞中结核菌抗原特异的T淋巴细胞的频率。结果112例结核病患者中，107例结核病患者结核抗原特异ELISPOT阳性，提示方法敏感度为95．5％，30名健康对照中，2名健康体检者阳性，其他健康体检者阴性，24例丙肝患者和65例非结核呼吸道疾病患者均为阴性，方法的特异度为93．3％。结论ELISPOT是较灵敏和特异的快速检测结核菌感染的方法，可用于结核病的快速诊断。     

甘露聚糖结合凝集素的抗菌活性研究

甘露聚糖结合凝集素(mannan-binding lectin,MBL)是哺乳动物肝脏分泌的一种钙离子依赖型(C型)血清凝集素[1],是天然免疫中的主要成分之一。MBL通过多个活性部位与碳水化合物结合,在MBL相关丝氨酸蛋白酶(MBL-associatedserine protease,MASP)参与下,通过非抗体依赖的补体激活途径激活补体系统,发挥抗感染作用[2,3]。     

ELISA检测乙肝病毒核心抗原的方法建立及应用

目的采用酶联免疫吸附试验(EL ISA),建立乙肝病毒核心抗原(HB cA g)的定性检测方法,用于临床标本HB cA g的检测。方法用ELS IA法检测临床血样标本乙肝表面抗原(HB sA g)阳性208例,阴性健康对照30例,与HBV DNA结果进行比较。结果208例HB sA g阳性样本,HB cA g与HBV DNA共同阳性率为58.7%,HB cA g阳性率为74.0%,HBV DNA阳性率为64.4%,二者结果显著相关。结论EL ISA法可用于临床标本HB cA g的检测。     

探讨ELISA法检测血清结核杆菌抗原对肺结核病的诊断价值

目的探讨检测结核杆菌抗原对肺结核病的诊断价值。方法应用酶联免疫吸附试验检测血清中的结核杆菌分泌蛋白desA抗原。结果 139例活动性肺结核患者血清结核抗原的阳性检出率为84.1%;64例非结核性肺部疾病组结核抗原阳性率7.81%,29例健康对照者均为阴性。特异性为92.19%。结论检测血清中结核杆菌分泌蛋白desA抗原对诊断肺结核病有较高的应用价值。     

一种新型结核分枝杆菌感染快速检测方法的应用

目的探讨酶联免疫斑点试验（ELISPOT）快速诊断结核病的价值。方法选取15例确诊为活动性肺结核的患者和100例入境人员的外周抗凝全血标本,采用ELISPOT检测试剂盒（TSPOT-TB）测定结核杆菌特异抗原刺激反应的效应T淋巴细胞数量。结果TSPOT-TB检测结核病的敏感性为93．3％,特异性为100．0％,阳性预测值为100．0％,阴性预测值为81．8％。采用该方法检测的结核潜伏感染率与病例来源呈密切相关,而与年龄和性别无相关性。结论TSPOT-TB的敏感性和特异性均较高,可用于结核感染的快速检测,但无法判断结核的活动性或潜伏感染。     

一种新型结核分枝杆菌感染快速检测方法的应用

目的探讨酶联免疫斑点试验(ELISPOT)快速诊断结核病的价值。方法选取15例确诊为活动性肺结核的患者和100例入境人员的外周抗凝全血标本,采用ELISPOT检测试剂盒(T SPOT-TB)测定结核杆菌特异抗原刺激反应的效应T淋巴细胞数量。结果TSPOT-TB检测结核病的敏感性为93.3%,特异性为100.0%,阳性预测值为100.0%,阴性预测值为81.8%。采用该方法检测的结核潜伏感染率与病例来源呈密切相关,而与年龄和性别无相关性。结论TSPOT-TB的敏感性和特异性均较高,可用于结核感染的快速检测,但无法判断结核的活动性或潜伏感染。     

血管性血友病因子前肽双抗体夹心法检测及临床应用

目的建立血浆血管性假血友病因子前肽(vWFpp)的测定方法,并检测152例健康体检者及36例冠心病患者和38例同龄正常对照组的血浆vWFpp水平。方法采用酶联免疫吸附分析(ELISA)双抗体夹心法对152例体检者和36例冠心病患者血浆vWFpp进行测定。结果152例体检者vWFpp水平为496.44±167.24μg/L。50～60岁年龄组vWFpp显著高于40岁以下年龄组(P<0.01)。男女间vWFpp水平差异无统计学意义(P>0.05)。男51～60岁年龄组与16～20,21～30,31～40岁的3个年龄组vWFpp水平差异都具有显著的统计学意义(P<0.05);152份体检者血浆样品vWFpp水平与年龄的相关性分析显示,vWFpp水平与年龄呈显著的正相关关系(r=0.444,P=0.000)。冠心病组vWFpp水平为1051.6±331.9μg/L,与同年龄段对照组vWFpp水平485.2±119.4μg/L比较具有显著性差异(P<0.001)。结论该法测定血浆vWFpp具有特异、快速、灵敏的优点,具有良好的临床应用前景。     

与α-烯醇化酶相关的抗内皮细胞抗体ELISA的建立及临床初步应用

目的建立与α-烯醇化酶（ENOI）相关的抗内皮细胞抗体（AECA）的酶联免疫吸附试验（ELISA）,并探讨ENOI-AECA与自身免疫性疾病的关系。方法人工合成获得人ENOI基因编码序列并克隆该片段构建pUC57-ENOI重组质粒,再将重组质粒亚克隆入原核表达载体pET28（a）,回收酶切产物并经T4DNA连接酶连接,获得的重组表达质粒pET28（a）-ENOI,在大肠埃希菌BL21（DE3）中诱导表达蛋白,Ni NTA亲和层析纯化重组ENOI蛋白。以纯化的重组蛋白为包被抗原,并对ELISA反应条件进行优化,初步建立检测ENOI-AECAELISA并作分析性能评价。用建立的方法分别检测健康人及系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）患者血清中的ENOI-AECA。结果获得了相对分子质量为47 000的高纯度人ENOI重组蛋白。ELISA抗原最佳包被浓度为5μg/mL,血清最佳稀释倍数为1∶50。以免疫印迹法为参照,所建方法的敏感性和特异性分别为76.0%和90.2%。SLE和RA患者血清中ENOI-AECA的阳性率分别为23.1%和57.1%;RA组ENOI-AECA阳性率与健康对照组比较,差异有统计学意义（P=0.000）。结论以人ENOI重组蛋白为抗原建立的检测ENOI-AECA的ELISA有较高的敏感性和特异性,可用于ENOI-AECA的检测。ENOI-AECA阳性提示患者可能患有自身免疫性血管炎。     

血清中TIGAR的ELISA建立及初步临床试验

目的建立肿瘤蛋白53（TP53）诱导的糖酵解和凋亡的调控子（TIGAR）的定量酶联免疫吸附试验（ELISA）,并探讨血清中TIGAR定量测定在肿瘤患者诊断中的临床应用。方法构建TIGAR原核表达载体并诱导蛋白表达,纯化蛋白后免疫家兔获得多克隆抗体,以此兔抗TIGAR多克隆抗体为包被抗体,以生物素-辣根过氧化物酶标记链霉亲和素（SA-HRP）检测系统,建立TIGAR定量检测的双抗体夹心ELISA。测定40例肿瘤患者及40名对照者的血清TIGAR含量,并探讨其与肿瘤的关系。结果建立的TIGAR定量ELISA拟合曲线的相关系数（r）=0.99,肿瘤患者血清TIGAR含量高于对照组,差异有统计学意义（S=954.5,P〈0.01）。结论本研究成功建立了TIGAR定量ELISA,血清TIGAR含量测定对某些肿瘤的研究和临床检测可能有一定价值。     

夹心酶联免疫吸附试验检测人表皮生长因子的方法建立及其应用研究

目的:建立临床适用的表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)酶联免疫检测方法,探讨EGF在临床常见肿瘤患者血清中的含量变化规律。方法:采用EGF单抗包被酶标板,兔抗EGF多抗为二抗,以辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG作为酶标抗体建立夹心法ELISA检测临床常见肿瘤患者及健康体检人群的血清EGF含量。结果:建立的EGF酶联免疫吸附法最小检测限达15.6ng/L,批内精密度为8.7%,批间精密度为11.6%,平均回收率为94.7%,符合临床检测要求。血清EGF含量在31名正常人为(1.305±0.382)ng/mL,24名乳腺癌病人术前值为(0.729±0.347)ng/mL,术后为(0.711±0.332)ng/mL,17名结直肠癌病人术前为(0.678±0.311)ng/mL,术后为(0.658±0.298)ng/mL,19名胃癌病人术前为(0.598±0.224)ng/mL,术后为(0.614±0.257)ng/mL。各肿瘤组患者血清EGF水平较健康对照组明显降低(P<0.01)。结论:建立了适用于临床检测的EGF酶联免疫检测方法,肿瘤患者血清中EGF含量较健康对照组明显下降,该检...     

对比研究ELISPOT与QFT—GIT对于结核病诊断的应用价值

目的比较ELISPOT和Quanti—FERON—TBGoldIn-Tube（QFT-GIT）试剂盒,探讨ELISPOT方法在活动性肺结核诊断中的意义。方法应用ELISPOT和Quanti-FERON—TBGoldIn-Tube（QFT-GIT）对105份活动性结核患者（A组）和60份非结核呼吸系统疾病对照组（B组）进行检测。结果ELISPOT与QFT—GIT方法的敏感度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为85．71％、86．67％、91．84％及77．61％和83．81％、76．67％、86．27％及73．02％,且两种方法差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论应于ESAT-6／CFP-10融合蛋白技术的ELISPOT检测方法能够诊断活动性肺结核,并对结核感染诊断提供一定的依据。     

表皮生长因子ELISA检测方法的建立及其在肿瘤临床的初步应用

目的建立表皮生长因子(EGF)酶联免疫检测方法,探讨其在临床常见肿瘤患者血清中含量的变化规律。方法采用EGF单克隆抗体包被酶标板、兔抗EGF多抗为二抗,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG作为酶标抗体,建立夹心法ELISA,检测临床常见肿瘤患者及健康体检人群的血清EGF含量。结果建立的EGF酶联免疫吸附法最小检测限为15.6ng/L,批内精密度8.7%,批间精密度11.6%,平均回收率94.7%,符合临床检测要求。血清EGF含量在31名正常人为(1.305±0.382)ng/ml;24例乳腺癌患者术前为(0.729±0.347)ng/ml,术后为(0.711±0.332)ng/ml;17例结直肠癌患者术前为(0.678±0.311)ng/ml,术后为(0.658±0.298)ng/ml;19例胃癌患者术前为(0.598±0.224)ng/ml,术后为(0.614±0.257)ng/ml。各肿瘤组患者血清EGF水平较健康对照组明显降低(P<0.01)。结论建立了适用于临床检测EGF的ELISA法,肿瘤患者血清中EGF含量较健康对照组明显下降,为进一步探讨肿瘤的发病机制提供了有效手段。