HepG2细胞系载脂蛋白B表达的调控研究

探讨白细胞介素－11（IL－11）及乙醇对人肝肿瘤细胞系（HepG2）载脂蛋白B（apoB）mRNA表达及蛋白分泌的作用。培养HepG2细胞,分组加入不同浓度IL－11进行浓度试验,收集培养液及细胞。用火箭电泳法及Northernblot分别检测培养液中apoB含量及HepG2细胞apoBmRNA的表达。IL－11及乙醇抑制试验按同法分组进行。结果IL－11能抑制HepG2细胞apoB表达与分泌,且呈量效正相关。IL－11能明显抑制乙醇的正向作用。说明IL－11能调节HepG2细胞apoBmRNA表达与分泌,可参与调节机体脂质代谢。     

右美托咪定对脂多糖诱导大鼠外周血中性粒细胞TREM-1mRNA表达的影响

目的：探讨右美托咪定对脂多糖（LPS）诱导大鼠外周血中性粒细胞髓样细胞触发受体‐1（TREM‐1）mRNA表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠40只,取外周血分离培养中性粒细胞,采用随机数字表法,将其随机分为4组（n＝10）,A组：阴性对照;B组：中性粒细胞中加入L PS （终浓度为100μg／L ）;C组：中性粒细胞中加入L PS （终浓度为100μg／L ）加右美托咪定（终浓度为0．5 ng／mL）;D组：中性粒细胞中加入LPS（终浓度为100μg／L）加右美托咪定（终浓度为1．0 ng／mL）。孵育24 h后,收集上清液,采用ELISA法测定TNF‐α、IL‐1β和IL‐6的浓度,采用RT‐PCR法测定TREM‐1 mRNA的表达。结果与A组比较,B组TREM‐1 mRNA表达上调,TNF‐α、IL‐1β和IL‐6的浓度升高,差异有统计学意义（P＜0．05）;与B组比较,C组和D组TREM‐1 mRNA表达下调,TNF‐α、IL‐1β和IL‐6的浓度降低,差异有统计学意义（P＜0．05）;与C组比较,D组 TREM‐1 mRNA表达水平、TNF‐α、IL‐1β和IL‐6的浓度比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论右美托咪定可通过下调 TREM‐1 mRNA表达,抑制L PS诱导大鼠外周血中性粒细胞T N F‐α、IL‐1β和IL‐6的生成及分泌。     

白细胞介素－32对 HepG22．15细胞 HBV表达的影响

目的：探讨白细胞介素－32（IL－32）对HepG22．15细胞HBV表达的影响。方法不同浓度的IL－32（0～0．8μg／mL）蛋白质加入HepG22．15细胞（插入HBV全基因组,持续表达）培养液共培养,48 h后收集培养上清液。用实时荧光定量PCR检测HBV DNA载量,用ELISA检测HBsAg、HBeAg表达水平。结果 IL－32抑制HepG22．15细胞HBV的复制,抑制HBsAg、HBeAg表达,且其抑制呈剂量依赖性增强。结论 IL－32可以抑制HepG22．15细胞HBV的表达,IL－32具有抗HBV的作用。     

小檗碱对小鼠RAW264．7巨噬细胞极化的影响

目的观察小檗碱对脂多糖（LPS）、白细胞介素－4（IL－4）诱导的小鼠RAW264．7细胞极化的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264．7,模型组和给药组分别加入LPS （终浓度100 ng／mL）或IL－4（终浓度10 ng／mL）,给药组用终浓度20μmol／L的小檗碱分别进行干预,同时空白对照组给予等体积磷酸盐缓冲液（PBS）。采用荧光定量聚合酶链反应检测精氨酸酶－1（ Arg－1）、一氧化氮合酶（ iNOS）、细胞因子信号传导抑制蛋白2（ SOCS2）、细胞因子信号传导抑制蛋白3（SOCS3）的mRNA表达水平,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测肿瘤坏死因子－α（TNF－α）及IL－10的分泌量。结果小檗碱对LPS刺激的巨噬细胞TNF－α分泌量的增加以及iNOS、 SOCS3 mRNA表达水平的上升均有显著的下调作用（P＜0．05或P＜0．01）;对IL－4刺激的巨噬细胞IL－10分泌量的增加和Arg－1 mRNA表达水平的上升均有显著下调作用（P＜0．05）,而对SOCS2 mRNA的表达无显著影响（P＞0．05）。结论小檗碱能抑制巨噬细胞向M1型极化,亦能抑制巨噬细胞向M2型极化,提示其可能在维持M1／M2动态平衡中发挥调节作用。     

腺苷、白介素—1及茶碱对哮喘患者外周血单核细胞A2腺苷受体mRNA表达的影响

目的 通过研究腺苷、白介素（IL）－1、茶碱对哮喘患者外周血单个核细胞（PBMCs)表达A2a及A2b腺苷受体（A2aAR及A2bAR)mRNA的影响,探讨A2aAR及A2bAR在哮喘发病中的作用,为临床使用茶碱提供理论依据。方法 11例正常人及哮喘患者PBMCs经Ficoll液分离,分对照组,腺苷组、腺苷＋IL－1组及腺苷＋茶碱4组,体外培养18小时,收集细胞,采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）法和图象分析半定量法检测A2aAR及A2bAR mRNA表达。结果 正常人及哮喘患者各组PBMCs表达A2aARmRNA无明显差异（P＞0．05）。哮喘患者PBMCsA2bAR mRNA表达较正常人增加（P＜0．01）,腺苷、IL－1促进哮喘患者（P＜0．01）。腺苷及IL－1对哮喘患者PBMCsA2bAR mRNA表达的影响与血清TIgE水平呈正相关（P＜0．05）,与FEV1％呈负相关P＜0．05）。结论 PBMCs A2bARmRNA表达的影响与血清TIgE水平呈正相关（P＜0．05）,与FEV1％呈负相关P＜0．05）。结论 哮喘患者PBMCs表达A2bmRNA增加,腺苷及IL－1促进其表达,且与患者机体过敏状态及气道阻塞程度相关,茶碱能抑制A2bAR mRNA表达;腺苷、IL－1及茶碱对PBMCs表达A2aAR mRNA无明显影响。     

高碳酸因素对大鼠活化T淋巴细胞CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路的影响

目的：探讨高碳酸因素对大鼠活化T淋巴细胞CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路的影响。方法采集体重200～250 g的健康Wistar大鼠外周静脉血样，分离T淋巴细胞，培养于含有植物血凝素（ PHA）的无菌16孔培养板中。采用随机数字表法，将其分为3组：对照组常规培养；高碳酸组和缓冲液组于O2－N2－CO2混合气体培养箱中培养，维持培养液PaCO280～100 mmHg；缓冲液组用NaH－CO3缓冲液调节，维持培养液pH值7．2～7．4。分别于给予植物血凝素前和给予植物血凝素细胞培养1、2、4 h（ T0～3）时，随机取4孔，收集细胞和培养液，采用流式细胞仪测定T淋巴细胞坏死率、凋亡率、CD28和CD2阳性率；采用ELISA法测定培养液IL－2、IFN－γ、IL－4和IL－10的浓度。结果3组T细胞T0～3时坏死率和凋亡率比较差异无统计学意义（P＞0．05）。与对照组比较，高碳酸组和缓冲液组T1～3时培养液IL－2和FN－γ的浓度降低，IL－4和IL－10的浓度升高，T2，3时T淋巴细胞CD28和CD2阳性率降低（P＜0．05或P＜0．01）；与高碳酸组比较，缓冲液组T1～3时培养液IL－2和IFN－γ的浓度升高，IL－4和IL－10的浓度降低（ P＜0．05或P＜0．01），各时点T淋巴细胞CD28和CD2阳性率差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论高碳酸因素可能通过抑制CD28／B7和CD2／CD48（LFA－3）信号转导通路，减少T淋巴细胞的活化，这是CO2直接作用和其酸性环境共同完成的。     

STAT3对大鼠重症急性胰腺炎血清体外作用AT-ⅡSP-C的影响

目的探讨信号转导-转录活化因子3（Stat3）信号通路在大鼠重症急性胰腺炎血清体外作用于肺泡Ⅱ型上皮细胞（AT-Ⅱ）的影响。方法原代培养肺泡Ⅱ型上皮细胞分成：①对照组：加入不含大鼠胰腺炎血清的DMEM培养液的正常AT-Ⅱ;②SAP组：加入含大鼠胰腺炎血清的DMEM培养液的正常AT-Ⅱ;③SAP＋AG490组：用AG490预处理细胞,加入含大鼠胰腺炎血清的DMEM培养液的正常AT-Ⅱ。EMSA法测STAT3活化状态;RT-PCR检测mRNA水平;流式细胞技术检测AT-ⅡSP-C表达。结果与对照组比,SAP组STAT3活性增强,STAT3 mRNA表达增强（P〈0．05）,SP-C蛋白表达下降（P〈0．01）;与SAP组比,SAP＋AG490组STAT3活性减弱,STAT3 mRNA表达减弱（P〈0．01）,SP-C蛋白表达下降（P〈0．01）。结论JAK激酶／转录信号传导和激活因子3（Stat3）信号传导通路参与重症急性胰腺炎中AT-Ⅱ的损伤的病理生理过程。     

IL －1β对大鼠海马神经元细胞骨架蛋白α－tubulin和F－actin表达的影响

目的：探讨白细胞介素－1β（ IL－1β）对海马神经元细胞骨架蛋白α－tubulin、F－actin 表达的影响。方法清洁级健康成年Wistar 大鼠,雌性大鼠50只及雄性大鼠3只,体重200～250 g,进行原代海马神经元培养;实验分为8组。对照组：以生理盐水处理12 h;实验组：以0．01、0．1、1、10、20、50、100 ng／mL IL－1β处理12 h,应用蛋白免疫印迹法检测IL－1β对海马神经元细胞骨架α－tubulin、F－actin表达的变化。结果在IL－1β处理浓度为0．01 ng／mL时α－tubulin 及F－actin 表达较对照组高,0．1 ng／mL 较0．01 ng／mL 的蛋白表达水平更高。IL－1β在0．1、1 ng／mL时细胞骨架蛋白的表达与对照组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。随着IL－1β浓度的升高,细胞骨架蛋白的表达下降,20、50、100 ng／mL处理组与对照组比较差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论低浓度（0．01、0．1、1 ng／mL）的IL－1β使细胞骨架蛋白α－tubulin 及F－actin 的表达增加;高浓度（1、10、20、50、100 ng／mL） IL－1β使细胞骨架蛋白α－tubulin及F－actin 的表达减少。     

抑制HO－1表达对GLU和AGEs刺激下THP－1细胞氧化应激的影响研究

目的：探讨抑制血红素加氧酶1（HO－1）表达对高糖（GLU）和糖基化终产物（AGEs）刺激下人单核细胞株（THP－1）氧化应激的影响。方法将THP－1细胞分为三组培养,包括对照组、GLU ＋AGEs 组（含15 mmol／L的GLU和100 g／mL的AGEs的培养液）、 ZnPP（锌原卟啉）＋GLU＋AGEs组（先予20 mol／L ZnPP预处理30 min后再以15 mmol／L的GLU和100 g／mL的AGEs刺激）,检测各组肿瘤坏死因子α（ TNF－α）、丙二醛（MDA）和细胞活性氧（ ROS）水平以及HO－1 mRNA和蛋白表达。结果 GLU＋AGEs组ROS、MDA和TNF－α水平分别为（101．28±8．67） MFI、（3．17±0．58） nmol／mL和（40．28±10．67） pg／mL,明显高于对照组（P＜0．05）;ZnPP＋GLU＋AGEs组ROS、MDA和TNF－α水平分别为（122．47±9．11）MFI、（3．84±0．78）nmol／mL和（132．27±11．09） pg／mL,明显高于GLU ＋AGEs 组和对照组（P ＜0．05）;GLU＋AGEs组和ZnPP＋GLU＋AGEs组HO－1 mRNA表达量明显高于对照组（P＜0．05）,其中ZnPP＋GLU＋AGEs组HO－1 mRNA表达量低于GLU＋AGEs组（P＜0．05）;GLU＋AGEs组和ZnPP＋GLU＋AGEs组HO－1蛋白表达量明显高于对照组（ P＜0．05）,其中ZnPP ＋GLU＋AGEs组 HO－1蛋白表达量低于GLU＋AGEs组（ P＜0．05）。结论高糖和AGEs可引起THP－1细胞氧化损伤和HO－1表达增高,而抑制HO－1表达可进一步加剧高糖和AGEs引起的细胞氧化损伤。     

溃疡性结肠炎患者肠粘膜固有层淋巴细胞表达IL—6的研究

目的：研究溃疡性结肠炎（UC）粘膜固有层单核细胞（LPMC）白细胞介素－6（IL－6）的表达和分泌,以及与疾病活动性的关系。方法：用ELISA法测定32例UC患者及40例正常对照者血清和细胞培养液中IL－6的浓度,用逆转录聚合酶链反应法测定IL－6 mRNA的表达,结果：UC患者血清中IL－6的浓度无明显升高,但外周血单核细胞（PBMC）在PMA和抗CD3的刺激下表达IL－6 mRNA及分泌IL－6的水平明显增加。UC病变部位的LPMC表达大量的IL－6 mRNA并自发分泌大量的IL－6蛋白,而且IL－6浓度与患者外周血清中的C－反应蛋白水平,血沉均呈显著正相关（γ＝0．69,γ＝0．61,P均＜0．01）。在LPMC培养液中加入IL－17后LPMC分泌IL－6明显增加,加入抗IL－17的单克隆抗体后,IL－6的分泌则显著被抑制,结论：UC患者病变部位的LPMC表达和分泌IL－6明显增加,并且与疾病的活性呈正相关,IL－7在调节LPMC产生IL－6过程中发挥重要作用。     

青蒿素对人皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用及相关机制初探

目的：探讨青蒿素对人皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用及相关机制。方法：进行人瘢痕疙瘩成纤维细胞的原代分离、培养和传代。不同浓度青蒿素分别预处理人瘢痕疙瘩成纤维细胞,每隔24 h用CCK?8法测定细胞增殖情况,连续测定5 d,观察药物处理的最佳浓度。后续实验分为空白组、青蒿素组、青蒿素+IL?6组、青蒿素+AG490组,流式细胞术检测各组早期细胞凋亡率,real?time PCR法检测各组基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）2、MMP9、STAT3 mRNA的表达水平,Western blot法检测各组MMP2、MMP9、STAT3、p?STAT3蛋白的表达水平。结果：根据CCK?8实验结果选择150 μg/mL青蒿素作用48 h的细胞为后续实验干预浓度和时间。流式细胞术结果显示,青蒿素组、青蒿素+IL?6组、青蒿素+AG490组早期凋亡细胞百分比明显高于空白组,青蒿素+IL?6组的早期凋亡细胞百分比低于青蒿素组和青蒿素+AG490组（P < 0.01）。real?time PCR检测结果显示,与空白组比较,青蒿素组、青蒿素+IL?6组、青蒿素+AG490组中MMP2、MMP9 mRNA的表达均显著降低（P < 0.01）;MMP2、MMP9 mRNA在青蒿素组、青蒿素+AG490组的表达较青蒿素+IL?6组显著降低（P < 0.01）。Western blot检测结果显示,与空白组比较,青蒿素组、青蒿素+IL?6组、青蒿素+AG490组中STAT3、p?STAT3、MMP2、MMP9蛋白的表达均明显降低（P < 0.01）,p?STAT3、MMP2、MMP9蛋白在青蒿素组、青蒿素+AG490组中的表达低于在青蒿素+IL?6组中的表达（P < 0.01）。结论：青蒿素对瘢痕疙瘩起抑制作用,其机制可能通过抑制p?STAT3的过度激活来抑制MMP2、MMP9的表达。     

STAT3蛋白激活与乳腺浸润性导管癌上皮间质转化的相关性研究

目的探讨磷酸化信号传导与转录激活因子3（pSTAT3）与乳腺浸润性导管癌上皮间质转化的关系。方法应用免疫组化方法检测70例乳腺浸润性导管癌组织中pSTAT3、E—cadherin和Vimentin的表达,分析pSTAT3蛋白激活与E-cadherin和Vimentin表达的关系。结果pSTAT3、Vimentin及E—eadherin在乳腺浸润性导管癌组织中阳性表达率分别为44／70（62．9％）、40／70（57．1％）和70／70（100．0％）。pSTAT3表达与Vimentin表达呈正相关,与E—cadherin表达呈负相关（均P〈0．05）。Vimentin表达与浸润性导管癌组织分级、淋巴结转移有关（均P〈0．05）,而E—cadherin的表达与淋巴结转移有关（P〈0．05）。pSTAT3、E—cadherin、Vimentin的表达与年龄、肿瘤大小及ER、PR、CerbB-2的表达无关（P〉0．05）。结论STAT3的磷酸化与E—cadherin与Vimentin表达关系密切,STAT3可能通过调节E—cadherin与vimentin的表达诱导EMT的发生。     

Rho／Rock 信号通路在 TGF －β1刺激大鼠颈内动脉平滑肌细胞表型转化中的作用及可能机制

目的：探讨Rho／Rock信号通路在TGF－β1刺激大鼠颈内动脉平滑肌细胞（ ISMC）表型转化中的作用及可能机制。方法 ISMC随机分为两组：空白对照组和TGF－β1刺激组,以不同浓度（1、5、10、20、50 ng／mL） TGF－β1刺激细胞24 h,用荧光实时定量PCR法检测转凝蛋白（ SM22α）和骨桥蛋白（ OPN） mRNA的表达;再以上述得出的最佳TGF－β1浓度刺激细胞,在不同时间（6、12、24、48 h）收集细胞,采用同样方法检测SM22α、OPN mRNA的表达水平;经无血清DMEM高糖培养基静止培养24 h后,随机分为以下各组：空白对照组、TGF－β1（10 ng／mL）刺激组及TGF－β1（10 ng／mL）＋法舒地尔（Fasudil）（10、30、50μmol／L）组,分别采用FQ－RT－PCR法检测SM22α、OPN、RhoA、Rock－1 mRNA的表达;Western blot法检测SM22α、OPN蛋白表达水平;根据实验结果用透射电镜观察各组细胞超微结构的相应变化。结果10 ng／mL TGF－β1刺激大鼠ISMCs 24 h达顶峰。 TGF－β1＋Fasudil组SM22αmRNA和蛋白表达水平较TGF－β1刺激组高（P＜0．01）,且在Fasudil浓度为30μmol／L时达到高峰,随后下降;TGF－β1＋Fasudil组OPN mRNA表达水平较TGF－β1刺激组低,呈浓度依赖性,至30μmol／L达最低（ P＜0．05）,后又呈上升趋势。 Western blot结果显示TGF－β1＋Fasudil组的OPN蛋白表达水平较TGF－β1刺激组低,至Fasudil浓度为30μmol／L达最低（ P＜0．05）。同时FQ－RT－PCR结果显示TGF－β1刺激组的RhoA和Rock－1 mRNA表达水平较空白对照组高（P＜0．01）,在Fasudil浓度为30μmol／L时TGF－β1＋Fasudil组的RhoA和Rock－1mRNA表达水平较TGF－β1刺激组低（ P＜0．05）。电镜下观察各组细胞显示,空白对照组（×20000） ISMC高尔基体肥大,线粒体及粗面内质网正常,10 ng／mL TGF－β1刺激后细胞内线粒体增多,在上述基础上加入30μmol／L Fasudil后电镜下观察细胞又回到正常成熟结构状态。结论10 ng／mL TGF－β1刺激大鼠ISMC 24 h可成功刺激其表型转化,且该过程可能通过Rho／Rock信号通路实现;Rho／Rock信号通路抑制剂Fasudil可增加TGF－β1刺激的SM22α的表达,下调OPN的表达水平,抑制大鼠ISMCs表型转化。     

阻断细胞信号传导子和转录激活子6基因表达对人结肠癌细胞凋亡的影响

目的 探讨细胞信号传导子和转录激活子6（STAT）信号传导通路与结肠癌细胞凋亡的关系。方法构建4个STAT6特异的shRNA质粒载体，应用阳离子脂质体瞬时转染人结肠癌细胞HT-29，以阻断Stat6信号通路；分别用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测STAT6 mRNA表达和运用流式细胞术检测磷酸化STAT6蛋白（pSTAT6）表达来筛选有效的小发夹RNA（shRNA）；运用流式细胞术分析细胞凋亡变化；RT-PCR和Western印迹观察Bcl-2和Bax基因表达。结果成功构建并筛选出两个STAT6特异的shRNA质粒载体；STAT6基因沉默的结肠癌细胞中凋亡细胞明显增加，空白对照组细胞早期凋亡率为0．4％，pshRNA-STAT6-1组和pshRNA-STAT6-4组分别为13．0％和8．8％（P〈0．05）；Stat6信号通路被阻断的结肠癌细胞中Bcl-2基因表达明显减少，而Bax蛋白基因表达明显增多（P〈0．01）。结论Stat6信号传导通路能抑制结肠癌细胞凋亡，可能是通过调节Bcl-2和Bax基因的表达发挥作用。     

乌司他丁对婴幼儿体外循环炎性反应的影响

目的 研究乌司他汀（Ulinastatin)对婴幼儿体外循环炎性反应的影响及其肺保护作用。方法 选择45例先天性心脏病患儿，随机分为3组，对照组（A组），B组UTI 1万UI／kg，C组UTI 2万UI／kg。分别于麻醉诱导后（T1），开放主动脉后5min(T2），CPB结束后2h(T3),6h(T4)，和24h(T5）各时点采集血样，检测血浆肿瘤坏死因子－α（TNF－α），白细胞介素－6（IL－6），白细胞介素－8（IL－8）和白细胞介素－10（IL－10）；分别于术后2h和6h记录气道平均压，吸入氧浓度和动脉血气，计算肺泡氧合指数（OI）。结果 血浆IL－6的水平在体外循环中及术后各时点C组较A组明显降低（P＜0．05），IL－10的浓度体外循环中及术后各时点C组较A组显著升高（P＜0．05），TNF－α的浓度体外循环中C组低于A组（P＜0．05），IL－8的水平3组各时点均无明显差异（P＞0．05），OIC组与A组相比差异显著（P＜0．05）。结论 UTI2万UI／kg可抑制IL－6的释放，对TNF－α有一定的抑制作用，使IL－10的释放明显上调。UTI通过上调IL－10的抗炎作用和对炎性介质不同程度的抑制，可减轻体外循环后的炎性反应，保护肺功能。     

地塞米松对肝癌细胞聚集18F－FDG 能力的影响

目的：探讨地塞米松对肝癌细胞聚集18 F－FDG能力的影响。方法根据地塞米松浓度将肝癌细胞 HepG2和正常肝细胞 L02分为0、10－8、10－7、10－6、10－5、10－4 mol／L 浓度处理组，每组均各设平行孔，对各组HepG2细胞和 L02细胞预处理2、4、6、8、12、24 h，然后向各组加入1μCi 18 F －FDG 孵育1 h，应用计数仪检测各组细胞的放射性计数。结果对 HepG2细胞，当地塞米松浓度为10－8、10－7 mol／L 时，放射性计数减小（P ＜0．05），当地塞米松浓度为10－5、10－4 mol／L 时，放射性计数增高（P ＜0．05）。对 L02细胞，当地塞米松浓度为10－8、10－7、10－6 mol ／L 时，放射性计数减小（P ＜0．05），当地塞米松浓度为10－4 mol／L 时，放射性计数增高（P ＜0．05）。每组HepG2细胞18 F －FDG 放射性计数均高于 L02细胞（P ＜0．05），且经地塞米松处理后，两种细胞放射性计数差值增大（P ＜0．05）。结论地塞米松对肝脏细胞聚集18 F －FDG 存在双向调节作用，适量浓度可以扩大肝癌细胞与正常肝细胞摄取18 F －FDG 的差异。     

环氧乙烷消毒麻醉机对 COPD吸入麻醉患者气道炎症反应的影响

目的：观察不同麻醉机消毒方法对手术合并COPD吸入性麻醉患者气道炎症反应的影响。方法：选取吸入全麻下行择期腹部手术且合并有慢性阻塞性肺病（ COPD）的患者80例,随机分为A、B组,各40例,两组患者均行气管插管并行机械通气,术中行双腔导管左侧支气管内插管,A组患者使用术前经环氧乙烷浸泡消毒的麻醉机,B组患者使用术前采用2％戊二醛溶液浸泡消毒的麻醉机,测定两组插管后即时（ T0）及插管后2h（ T1）、4h（ T2）血清、肺泡灌洗液（ BALF）中的肿瘤坏死因子－α（ TNF－α）、白介素－1β（ IL－1β）、白介素－2（ IL－2）、白介素－6（ IL－6）、白介素－8（ IL－8）浓度。结果：两组血清细胞因子浓度随插管时间延长而升高,但各时间点血清细胞因子浓度比较无统计学差异（ P＞0．05）;A组T0、T1、T2时IL－2浓度均显著低于B组（P＜0．05）;A组T1、T2时TNF－α浓度显著低于B组,T2时IL－8浓度显著低于B组（P＜0．05）。结论：使用环氧乙烷对麻醉机进行消毒,对COPD吸入性麻醉患者气道炎症反应影响小,消毒效果优于2％戊二醛溶液,可起到一定的气道保护作用。     

siRNA—ID-1对人肝癌细胞HepG2中ERK信号通路的影响

目的观察siRNA-ID-1转染入肝癌细胞HepG2细胞后对肝癌细胞系HepG2细胞增殖的影响及其对ERK1／2通路的作用。方法实验分为4组,即空白对照组、转染试剂组、转染对照组及转染siRNA—ID-1组。阳离子脂质体法介导si-ID-1转染肝癌细胞后,唑蓝比色法（MTT）观察HepG2细胞增殖情况。分别用反转录聚合酶链式反应法（RT－PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测转染后p-ERK1／2、ERK1／2mRNA与蛋白表达的情况。结果转染siRNA-ID-1的HepG2细胞增殖速度明显减慢（P〈0．01）。转染后ERK1／2及p-ERK1／2mRNA表达降低（P〈0．01）;p-ERK1／2蛋白的表达较空白对照组明显降低（P〈0．05）．ERK1／2蛋白表达空白变化不明显。结论sirNA-ID－l转染HepG2细胞后可明显抑制细胞的增殖,使得ERK1／2基因表达活性下降,提示ID-1有可能通过ERK1／2信号转导通路介导,促进肝细胞癌HepG2细胞的增殖。     

参归补血汤提取工艺的优化及对IDA小鼠贫血的改善作用和JAK2/STAT3信号通路的影响

目的 优化当归、熟地黄、白芍、人参等4味药材(参归补血汤方)最佳水提取工艺,研究其对小鼠缺铁性贫血的改善作用.方法 采用L9(34)正交实验设计法进行参归补血汤水提取工艺优化,采用双指标综合评分法确定最优水提工艺;通过建立小鼠缺铁性贫血模型,观察小鼠的生存状态,酶联免疫法检测血液中Hepcidin含量及缺铁性贫血相关指标;建立IL6诱导HepG2细胞模型,检测参归补血汤给药前后Hepcidin mRNA及JAK2/STAT3通路蛋白表达情况.结果 以双指标综合评分法确定了参归补血汤的最佳水提取工艺为25倍量水,提取1 h,提取2次;动物实验表明,处方组小鼠生存状态明显改善,体质量明显增长,Hb、Si、TIBC及sTfr显著升高,Hepcidin及Fep显著下调;细胞实验表明,参归补血汤可显著下调HepG2细胞Hepcidin mRNA及其相关通路JAK2/STAT3蛋白的表达.结论 通过双指标综合评分优化的参归补血汤提取工艺稳定可靠,适合工业化生产,为临床应用和新药的研发提供参考.参归补血汤可显著改善缺铁性贫血症状并有效调控Hepcidin及其相关通路JAK2/STAT3蛋白表达.