卵母细胞玻璃化冷冻损伤相关因素及进展

卵母细胞玻璃化冷冻损伤的机制及影响因素的研究是近年来关于生殖能力贮存的研究热点。近年来随着细胞生物学及分子生物学的迅速发展,对卵母细胞冷冻损伤的影响因素研究取得了巨大进展。综述冷冻保护剂、卵母细胞特点及发育阶段、降温速率、卵母细胞的外围结构、冷冻方法等因素对卵母细胞冷冻损伤的影响机制及降低卵母细胞冷冻损伤的最近进展。     

慢速冷冻中糖浓度对卵母细胞纺锤体和染色体构型的影响

卵母细胞冷冻是目前人类体外受精（IVF）和生殖科学的前沿技术，人卵母细胞对冷冻有特异的敏感性，与是否实施慢速冷冻法还是玻璃化冷冻法无关。在实施慢速冷冻过程中，细胞内冰晶的形成、冷冻保护剂的毒性、渗透压、pH值、活性氧等因素均可以破坏卵母细胞的发育潜能。由于目前尚不能解决卵母细胞的安全性问题，所以研究旨在比较运用两种不同糖浓度的非渗透性冷冻保护剂进行慢速冷冻对MⅡ期卵的纺锤体形态及染色体构型的影响。     

卵子玻璃化冷冻保存生育力的研究进展

随着人类辅助生殖技术的发展,卵子冷冻技术已经成为人们关注的课题,在拓宽目前辅助生殖技术服务的范围和保存女性生育能力方面有重要的价值.近年来玻璃化冷冻被认为是深低温保藏卵母细胞很有前途的选择.玻璃化冷冻卵母细胞冻融后存活率、受精率、卵裂率及移植妊娠活婴率较前有所提高,但迄今为止,人们仍缺少标准的玻璃化冷冻方案,对保护剂和载体的选择及冷冻程序等仍未达成共识.该文就玻璃化冷冻人类卵母细胞意义、卵子玻璃化冷冻的应用现状及冷冻保护剂、低温冷冻复苏对卵子的潜在危害及应用前景等研究作以综述.     

玻璃化冷冻技术的研究进展

玻璃化冷冻技术是一种快速冷冻细胞或组织的方法,随着辅助生殖技术的发展而受到广泛关注.该项技术具有冷冻速度快、冻融损伤小,操作简单等优点,能够提高冷冻复苏后的存活率和妊娠成功率.玻璃化冷冻技术在临床应用中主要受到冷冻保护剂的类型和浓度、冷冻温度、冷冻速度及冷冻承载工具等一系列因素的影响.由于冷冻对象的不同,所实施的具体方法也不尽相同.该技术目前尚未成熟,如何优化人卵母细胞、胚胎及卵巢组织的玻璃化冷冻方案仍需要进行深入的研究.     

冷冻保存对卵母细胞影响的研究进展

随着辅助生殖技术的发展,人卵母细胞的冷冻技术受到了广泛关注并被广泛应用.但与早期胚胎的冷冻保存相比,卵母细胞的冷冻保存具有复苏后成活率低、受精率低、胚胎发育潜力差、妊娠率低、流产率高等特点.冷冻和解冻过程以及冷冻保护剂等均会对卵母细胞造成一系列形态学、细胞学以及生理、生化方面的影响.如:冷冻保护剂、冻融过程等可对卵母细胞的纺锤体、细胞骨架、细胞内钙离子、蛋白质组、细胞代谢以及卵母细胞的活性和发育潜力造成不同程度的影响.研究卵母细胞特殊的生物学特性以及冷冻对其造成的影响,有助于改进卵母细胞的冷冻方法,提高成功率.     

卵母细胞冷冻保存的研究进展

卵母细胞冷冻保存技术越来越多地应用于人类辅助生殖,但冷冻保存效率和冷冻损伤仍然制约其在临床上的普遍应用.冷冻保存会引起皮质颗粒的提前释放,透明带硬化;还会影响纺锤体和染色体的形态及超微结构.最终降低卵母细胞的发育能力.因此,需进一步研究卵母细胞冷冻损伤的机制,改进冷冻保护剂和冷冻方法.     

玻璃化冷冻技术的研究进展

玻璃化冷冻技术是一种快速冷冻细胞或组织的方法,随着辅助生殖技术的发展而受到广泛关注。该项技术具有冷冻速度快、冻融损伤小,操作简单等优点,能够提高冷冻复苏后的存活率和妊娠成功率。玻璃化冷冻技术在临床应用中主要受到冷冻保护剂的类型和浓度、冷冻温度、冷冻速度及冷冻承载工具等一系列因素的影响。由于冷冻对象的不同,所实施的具体方法也不尽相同。该技术目前尚未成熟,如何优化人卵母细胞、胚胎及卵巢组织的玻璃化冷冻方案仍需要进行深入的研究。     

玻璃化冷冻卵母细胞及卵巢组织研究进展

玻璃化冷冻技术近年已广泛应用于生殖领域,尤其是在女性生育力的储备方面展示其特有的优势.目前胚胎玻璃化冷冻已较成熟,并应用于临床.首次卵母细胞玻璃化冷冻的成功以及实验动物卵巢组织成功移植并获得分娩给研究带来无限希望,但目前仍处于实验阶段,研究者企图从不同角度解决难题.卵母细胞冷冻后,细胞结构的易损伤性造成的低复苏率.以及对卵巢组织玻璃化冷冻的可行性探索,对生殖领域提出新挑战.由于卵巢组织冻存与卵母细胞的冻存有着密不可分的联系,就两者国内外新进展做综述.     

冷冻保存对卵母细胞影响的研究进展

随着辅助生殖技术的发展,人卵母细胞的冷冻技术受到了广泛关注并被广泛应用。但与早期胚胎的冷冻保存相比,卵母细胞的冷冻保存具有复苏后成活率低、受精率低、胚胎发育潜力差、妊娠率低、流产率高等特点。冷冻和解冻过程以及冷冻保护剂等均会对卵母细胞造成一系列形态学、细胞学以及生理、生化方面的影响。如:冷冻保护剂、冻融过程等可对卵母细胞的纺锤体、细胞骨架、细胞内钙离子、蛋白质组、细胞代谢以及卵母细胞的活性和发育潜力造成不同程度的影响。研究卵母细胞特殊的生物学特性以及冷冻对其造成的影响,有助于改进卵母细胞的冷冻方法,提高成功率。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值.方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射一胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力.根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P＞0.05),但是受精率存在显著性差异(P＜0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P＞0.05),但受精率存在显著性差异(P＜0.05).成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P＜0.05).程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例.获得1例生化妊娠.结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力.玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势.     

卵巢组织玻璃化冷冻的研究进展

冷冻保存胚胎、卵母细胞或者卵巢组织是目前保存女性生殖内分泌功能的可选途径.相比之下,卵巢冷冻的优越性是卵母细胞或胚胎冷冻无可比拟的.传统的冷冻技术已经在临床推广应用,但由于操作过程复杂、医疗仪器昂贵、耗费时间长等,使其在一般的实验室无法推广应用.玻璃化冷冻操作简单、省时省力、且能减小传统慢冻所造成的冰晶组织损伤,注定其必将为人所关注并将渐渐被推广.但迄今为止,玻璃化冷冻尚未形成一个完整的标准体系.综合近几年玻璃化冷冻研究进展,展望其研究前景和目前存在的问题,努力思考如何建立卵巢组织的玻璃化冷冻.     

卵母细胞冷冻保存的研究进展

卵母细胞冷冻保存技术越来越多地应用于人类辅助生殖,但冷冻保存效率和冷冻损伤仍然制约其在临床上的普遍应用。冷冻保存会引起皮质颗粒的提前释放,透明带硬化;还会影响纺锤体和染色体的形态及超微结构,最终降低卵母细胞的发育能力。因此,需进一步研究卵母细胞冷冻损伤的机制,改进冷冻保护剂和冷冻方法。     

脯氨酸作为细胞冷冻保护剂的研究进展

细胞冷冻保存应用广泛, 但冷冻会损伤细胞导致代谢紊乱, 而冷冻保护剂可缓解该过程。脯氨酸是一种渗透性冷冻保护剂, 可快速透过细胞膜进入细胞内, 与细胞内水氢键结合抑制低温下冰晶形成, 同时可与细胞内水结合减少细胞内水流失, 保护细胞内蛋白质的结构和功能, 保护细胞膜。脯氨酸可提高植物、动物及人类体细胞冷冻复苏后存活率。在生殖细胞冷冻中, 研究表明脯氨酸可用于卵母细胞冷冻, 可提高小鼠卵母细胞冷冻后存活率及保护线粒体功能, 但其对于精子的冷冻效果报道尚不一致。脯氨酸冷冻保护剂涉及多种细胞类型且冷冻效果较强, 其未来可能更广泛应用于低温生物学领域。本文总结了脯氨酸作为天然小分子冷冻保护剂的应用研究进展, 希望能够帮助人们更好地了解生殖细胞冻存的低温生物学机制, 为改良生育力冷冻保存技术提供参考。     

显微镜下胚胎超微结构研究

自1955年Afzelius首次报道海胆卵母细胞超微结构,电子显微镜越来越多地用于对卵母细胞和胚胎内各种细胞器的观察.透明带是围绕在卵母细胞和早期胚胎的特殊的胞外基质,具有多种功能;线粒体是活细胞进行有氧呼吸的主要场所,在不同时期的卵母细胞和胚胎中,线粒体的分布和活性不同;细胞连接是细胞之间相互联系的通道,不同时期的胚胎细胞之间连接不同.胚胎的超微结构受到许多因素的影响,高热、冷冻会损伤胚胎的超微结构,培养环境不同,胚胎的超微结构也不相同.     

人类卵母细胞玻璃化冷冻的研究进展

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一，玻璃化冷冻可避免冻融过程中细胞内冰晶的形成，降低细胞损伤，在人类配子、胚胎的冷冻保存中取得了不少进展。近十几年来，玻璃化冷冻技术已成功应用于成熟卵母细胞、未成熟卵母细胞等方面的冷冻保存并取得成功。该技术操作简单、迅速快捷，正逐渐成为人类辅助生殖技术中重要的应用技术之一。本文综述了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞方面的研究进展。     

卵巢组织玻璃化冷冻的研究进展

冷冻保存胚胎、卵母细胞或者卵巢组织是目前保存女性生殖内分泌功能的可选途径。相比之下，卵巢冷冻的优越性是卵母细胞或胚胎冷冻无可比拟的。传统的冷冻技术已经在临床推广应用，但由于操作过程复杂、医疗仪器昂贵、耗费时间长等，使其在一般的实验室无法推广应用。玻璃化冷冻操作简单、省时省力、且能减小传统慢冻所造成的冰晶组织损伤，注定其必将为人所关注并将渐渐被推广。但迄今为止，玻璃化冷冻尚未形成一个完整的标准体系。综合近几年玻璃化冷冻研究进展，展望其研究前景和目前存在的问题，努力思考如何建立卵巢组织的玻璃化冷冻。     

玻璃化冷冻卵母细胞及卵巢组织研究进展

玻璃化冷冻技术近年已广泛应用于生殖领域,尤其是在女性生育力的储备方面展示其特有的优势。目前胚胎玻璃化冷冻已较成熟,并应用于临床。首次卵母细胞玻璃化冷冻的成功以及实验动物卵巢组织成功移植并获得分娩给研究带来无限希望,但目前仍处于实验阶段,研究者企图从不同角度解决难题。卵母细胞冷冻后,细胞结构的易损伤性造成的低复苏率,以及对卵巢组织玻璃化冷冻的可行性探索,对生殖领域提出新挑战。由于卵巢组织冻存与卵母细胞的冻存有着密不可分的联系,就两者国内外新进展做综述。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值。方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射-胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力。根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P>0.05),但是受精率存在显著性差异(P<0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P>0.05),但受精率存在显著性差异(P<0.05)。成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P<0.05)。程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例,获得1例生化妊娠。结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力。玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势。     

采用简化电镜铜网玻璃化冷冻鼠成熟卵母细胞是方便有效的方法

卵母细胞冷冻是辅助生殖技术中非常重要的一部分。由于鼠卵细胞冷冻可以为人类卵母细胞冷冻提供原始数据，故对其研究十分重要。在卵母细胞移入之前传统的电镜铜网玻璃化冷冻的冷冻液需要从电镜网转移到无菌的过滤板上，而此研究的简化电镜铜网玻璃化冷冻则省略了这一步，这样既节省时间同时也方便有效。此研究比较了简化电镜铜网玻璃化冷冻与传统电镜铜网玻璃化冷冻及慢速冷冻、超快速冷冻在对老鼠成熟卵母细胞的复苏率、存活率、受精率和孵化率之间的差异性。     

显微镜下胚胎超微结构研究

自1955年Afzelius首次报道海胆卵母细胞超微结构,电子显微镜越来越多地用于对卵母细胞和胚胎内各种细胞器的观察。透明带是围绕在卵母细胞和早期胚胎的特殊的胞外基质,具有多种功能;线粒体是活细胞进行有氧呼吸的主要场所,在不同时期的卵母细胞和胚胎中,线粒体的分布和活性不同;细胞连接是细胞之间相互联系的通道,不同时期的胚胎细胞之间连接不同。胚胎的超微结构受到许多因素的影响,高热、冷冻会损伤胚胎的超微结构,培养环境不同,胚胎的超微结构也不相同。