宫内缺氧对新生大鼠神经元的影响及当归的保护作用

目的 探讨宫内缺氧对新生大鼠海马神经元的影响及当归注射液的保护作用.方法 孕期14 d的SD大鼠21只,随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.缺氧组孕鼠自孕第14天开始经尾静脉注射生理盐水8 ml/kg,1次/d,连续7 d,后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h,连续3 d(孕期第14,15,16天);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.孕鼠分娩后立即取新生鼠脑组织,常规石蜡切片,经神经元特异性烯醇化酶(Neuron specific enolase,NSE)免疫组织化学染色后行图像分析.结果 缺氧组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的积分光密度(Integrated Optical Density,IOD)值较对照组减少[IOD缺氧组:(4.9±1.1);IOD对照组:(6.2±1.6),P＜0.05];当归组新生鼠海马NSE免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组增加[IOD治疗组:(6.9±2.6), P＜0.05].结论 一定程度的缺氧可刺激海马CA3区神经元变性;当归注射液对宫内缺氧新生大鼠海马CA3区神经元可能具有保护作用.     

当归对宫内缺氧后新生大鼠大脑CA3区神经元及NMDAR1mRNA表达的影响

目的 探讨当归对宫内缺氧后新生大鼠大脑内N-甲基D-天冬氨酸受体亚单位NR1 (NMDAR1 mRNA)表达及神经元的影响.方法 将孕期14d的SD大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.缺氧组孕鼠自孕第14天开始每天1次经尾静脉注射生理盐水8 ml/kg(连续7 d),后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h(连续3 d:孕期第14天、15天、16天);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.三组孕鼠分娩当日取脑组织、多聚甲醛固定,石蜡包埋切片NSE免疫组化、NMDAR1原位杂交神经元DAB显色、400倍拍照、IPP6.0软件图像分析.结果 缺氧组新生鼠NSE阳性细胞表达较对照组减少 (P＜0.05),而NMDAR1 mRNA的表达较对照组增加 (P＜0.05);当归组NSE阳性细胞表达较缺氧组增加 (P＜0.05),而NMDAR1 mRNA的表达较缺氧组减少 (P＜0.05).结论 当归注射液对宫内缺氧新生大鼠脑组织具有保护作用,其作用机制之一可能是与抑制NMDA R1 表达有关.     

当归对宫内缺氧新生大鼠神经干细胞增殖的影响

目的 探讨宫内缺氧对新生大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液的保护作用.方法 将孕期14 d的SD大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.缺氧组孕鼠自孕第14天开始每天一次经尾静脉注射生理盐水8 ml/kg(连续7d),后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h(连续3d孕期第14,15,16天);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.孕鼠分娩后立即取新生鼠大脑组织,常规石蜡切片,经巢蛋白(nestin)免疫组织化学染色后行图像分析.结果 缺氧组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的积分光密度(IOD)值较对照组增加[IOD缺氧组(14 806±4 636.8);IOD对照组(7 387±3191.7),P＜0.05];当归治疗组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组减弱[IOD治疗组(9 859±2 386.4),P＜0.05].结论 一定程度的缺氧可刺激神经干细胞增殖;当归注射液对宫内缺氧新生大鼠神经干细胞可能具有保护作用.     

当归对宫内缺氧后新生大鼠肾脏内血管内皮生长因子表达的影响

目的 研究当归对宫内缺氧后新生大鼠肾脏内血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 将孕期14 d的SD大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组.缺氧组孕鼠自孕第14 天开始每天一次经尾静脉注射生理盐水8 ml/kg(连续7d),后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2 h(连续3 d:孕期第14,15,16天);当归治疗组用250 g/L的当归注射液代替生理盐水,其余处理同缺氧组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.3组孕鼠分娩当日取肾组织、多聚甲醛固定,石蜡包埋切片、VEGF免疫组化、400倍拍照、IPP6.0软件图像分析.结果 缺氧组新生鼠VEGF 阳性细胞的数量和积分光密度值均较对照组增大 (P＜0.05),当归组VEGF 阳性细胞数量和积分光密度值均较缺氧组减小(P＜0.05).结论 一定时间、一定氧浓度的宫内缺氧可刺激新生大鼠肾脏VEGF的表达增加 ;而当归注射液可使VEGF的表达下降.     

当归对宫内缺氧幼年大鼠海马CA3区神经元与学习能力的影响及机制

目的 探讨宫内缺氧对幼年大鼠海马CA3区神经元与学习能力的影响,以及NMDAR1 mRNA在其新生期的表达与当归的调控作用.方法 健康SD孕鼠30只,随机分为对照组、缺氧组和当归组各10只,于孕14 d开始将缺氧组与当归组孕鼠用三气培养箱制作胎鼠宫内缺氧模型,当归组用250 g/L当归静脉注射干预.3组孕鼠分娩当日每窝随机选取新生鼠2只,取脑、常规石蜡切片;余新生鼠随机选取2只喂养至30 d进行Morris水迷宫测试,测试结束当日,多聚甲醛灌注固定取脑、常规石蜡切片.幼鼠脑组织作NSE mRNA原位杂交、新生鼠脑组织作NMDAR1 mRNA原位杂交.结果 Morris水迷宫实验和NSE mRNA原位杂显示:与对照组(n=20)相比,缺氧组幼鼠(n=20)空间探查测试和对位探查测试时间较缩短、海马CA3区阳性细胞数减少(P＜0.05),当归组(n=20)探查测试时间较缺氧组延长(P＜0.05)、海马CA3区阳性细胞数增多(P＜0.05);NMDAR1 mRNA原位杂交显示:与对照组相比,缺氧组海马CA3区阳性细胞积分光密度值增大,当归组较缺氧组减小(P＜0.05).结论 宫内缺氧可致新生大鼠海马CA3区NMDAR1 mRNA表达增高,从而使幼年大鼠该区神经元减少,学习记忆能力降低,而当归注射液可改善宫内缺氧状态,增加幼年大鼠海马CA3区神经元数量,提高其学习记忆能力.     

不同宫内缺氧时程对胎鼠神经干细胞增殖的影响及当归保护作用

目的 探讨不同宫内缺氧时程对胚胎大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液的保护作用. 方法将孕15 d的SD大鼠随机分为9组:对照组、缺氧3 h组、缺氧6 h组、缺氧9 h组、缺氧12 h组、当归3 h组、当归6 h组、当归9 h组和当归12 h组,每组5只.所有当归组孕鼠经尾静脉注入当归注射液,然后用低张性缺氧模型致胎鼠宫内缺氧;所有缺氧组用生理盐水代替当归注射液,其余同当归组;对照组只注盐水,不缺氧.取胎鼠大脑组织,作Nestin免疫组织化学染色、图像分析.结果 缺氧3 h组、缺氧6 h组和缺氧9 h组阳性细胞较对照组染色增强,数量增多,缺氧12 h组阳性细胞较对照组减少,各缺氧组间比较有统计学差异;除当归12 h组外,其余各当归组阳性细胞较相应缺氧组染色减弱,数量减少;当归12 h组与缺氧12 h组间比较无统计学差异(P＞0.05).结论 一定时程、一定浓度的缺氧可以刺激神经干细胞进入增殖状态,其增殖的强弱与缺氧时程有关,缺氧6 h时达到增殖高峰,缺氧9 h开始降低;长时程缺氧(12 h)会导致神经干细胞减少;当归对一定时程缺氧的胚胎大鼠神经干细胞有一定保护作用,而在缺氧12 h时失去保护作用.     

宫内缺氧对幼年大鼠大脑齿状回颗粒细胞及其记忆功能的影响及当归的干预作用

目的 探讨宫内缺氧对生后幼年大鼠齿状回颗粒细胞及其学习能力的影响和当归的干预.方法 将孕14 d大鼠置于三气培养箱内缺氧,当归组在缺氧前注射当归注射液;缺氧组注射生理盐水;对照组注射生理盐水,但不缺氧;待自然生产,产后30 d各组随机取幼鼠行Morris水迷宫实验,实验后取脑组织,行神经元特异烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色.结果 水迷宫实验各组大鼠在目标象限的搜索时间比较:缺氧组<对照组(P<0.05);缺氧组<当归组(P<0.05);积分光密度(IOD)均数比较:缺氧组<对照组(P<0.05);缺氧组<当归组(P<0.05).结论 宫内缺氧能损伤齿状回颗粒细胞并降低大鼠的记忆能力;当归注射液能减轻宫内缺氧对齿状回颗粒细胞的损伤,增强缺氧大鼠的记忆能力.     

当归对宫内缺氧后幼年大鼠齿状回胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨宫内缺氧对40 d龄幼年大鼠齿状回胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响及当归的干预作用.方法 配种得孕SD大鼠(39只),至孕14 d,随机分为对照组12只、缺氧组12只、当归组15只.将缺氧组大鼠置于三气培养箱内缺氧,制作宫内缺氧模型,缺氧前1 h经尾静脉注射NS(8 ml/kg),当归组经尾静脉注射当归注射液(8 ml/kg),其余同缺氧组;对照组经尾静脉注射NS,不缺氧;自然生产,产后第40天随机取幼年大鼠脑组织,常规石蜡切片,免疫组织化学染色.结果 缺氧组GFAP阳性染色面积(Area)均数比对照组大,差异有统计学意义(P＜0.05);当归组Area均数比缺氧组小,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 130 ml/L氧浓度的缺氧环境促进了幼年大鼠齿状回GFAP的表达,当归注射液能够减少宫内缺氧后幼年大鼠神经胶质细胞GFAP的表达,对神经系统发挥保护作用.     

三磷酸腺苷二钠氯化镁对宫内窘迫胎鼠肾保护作用的研究

目的探讨三磷酸腺苷二钠氯化镁对宫内窘迫胎鼠肾脏的保护作用。方法将15只成年雌性SD孕鼠随机分为缺氧缺血再灌注组、假手术组和干预组,每组5只。于妊娠第19天以3.5%水合氯醛腹腔注射麻醉,缺氧缺血再灌注组和干预组通过无损伤动脉钳钳夹双侧子宫、卵巢动脉建立缺氧缺血宫内窘迫模型,缺氧20 min后拆除动脉夹以恢复血供,并逐层关腹。假手术组只开关腹,不钳夹子宫、卵巢动脉。干预组缺血前30 min给予三磷酸腺苷二钠氯化镁45 mg/kg腹腔注射,缺氧缺血再灌注组、假手术组于相同时间给予同等体积的0.9%氯化钠注射液腹腔注射。各组均于手术后24 h剖宫取胎,计算胎鼠死亡率。每组随机抽取10只胎鼠取肾组织制备标本,检测组织中丙二醛(MDA)水平,行HE染色高倍镜下观察胎鼠肾组织病理情况。结果缺氧缺血再灌注组胎鼠死亡率明显高于假手术组(P0.05),干预组胎鼠死亡率明显低于缺氧缺血再灌注组(P0.05)。缺氧缺血再灌注组胎鼠肾组织中MDA含量明显高于假手术组(P0.05),干预组胎鼠肾组织中MDA含量明显低于缺氧缺血再灌注组(P0.05)。干预组肾小管上皮细胞水肿样变性明显轻于缺氧缺血再灌注组。结论三磷酸腺苷二钠氯化镁能够减轻宫内窘迫胎鼠肾组织的损伤,对缺氧缺血肾细胞有保护作用。     

艾叶油对小鼠胚胎骨骼发育毒性影响的研究

目的 探讨艾叶油对小鼠胚胎骨骼发育的影响.方法 选用昆明种孕鼠25只,随机分为5组,每组5只,设置阴性对照组(花生油)、艾叶油实验组(高剂量组2 ml/kg、中剂量组1 ml/kg、低剂量组0.5 ml/kg)、阳性对照组(环磷酰胺12.5 mg/kg).实验组和阴性对照组自孕12 d开始灌胃,1次/d,连续5d;阳性对照组于孕13天腹腔注射环磷酰胺(12.5 mg/kg)1次.各组孕鼠均于孕第16天处死后取出1/2数量胎鼠行阿利新蓝和茜素红骨骼双染,对前肢芽进行Neubert评分,观察胎鼠主要骨骼骨化点的发育.结果 在胎鼠肢芽和骨骼发育时,艾叶油高、中、低剂量组与阴性对照组相比无显著性差异(P>0.05).实验组与阳性对照组相比有显著性差异(P<0.05).结论 艾叶油对胎鼠肢芽和骨骼发育无毒性影响.     

当归注射液对大鼠心肌缺血再灌注时心律失常的保护作用

本文以大鼠心肌缺血再灌注为模型,研究当归注射液对再灌性心律失常的保护作用。结果表明,当归注射液腹腔注射(0.6g 生药/kg)能使室性早搏发生率和心律失常总发生率明显减少,与生理盐水对照组比较,差异显著(P<0.05),而与异搏定组比较则差异不显著。提示当归注射液对大鼠心肌缺血再灌注的心律失常具有保护作用。     

大剂量岷当归配伍川芎对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的:通过观察大剂量岷当归配伍川芎对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能评分、脑梗死体积及脑组织中ICAM-l、COX-2基因表达的影响,研究不同剂量岷当归配伍川芎对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及机制。方法:将60只雄性Wistar大鼠60只,随机分为6组,即假手术组、模型组、尼莫地平组、岷当归高剂量+川芎组、岷当归中剂量+川芎组、岷当归低剂量+川芎组,每组各10只。模型采用大脑中动脉缺血模型。在造模前12小时、30分钟各给药1次,缺血后12、24、36、48小时各给药1次。缺血再灌注48小时将大鼠处死,留取标本。对各组大鼠进行行为学评估,采用TTC染色法检测各组大鼠脑梗死体积,免疫组化及RT-PCR检测ICAM-l、COX-2m RNA的相对表达。结果:神经功能评分、梗死面积比率岷当归+川芎治疗组与尼莫地平组均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。ICAM、COX-2m RNA表达模型组与假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05),各治疗组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);岷当归高剂量+川芎组与岷当归中剂量+川芎组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:高、中剂量组岷当归与川芎配伍可以抑制脑缺血再灌注损伤过程的炎症反应,改善神经缺损症状,在一定程度上缩小缺血再灌注损伤后大鼠脑组织梗死体积,降低炎症因子在脑缺血再灌注损伤中的表达,从而减轻脑细胞的损伤。     

穴位注射颈夹脊穴治疗后循环系统短暂性脑缺血发作及对患者脑血流的影响木

目的观察穴位注射颈夹脊穴对后循环系统短暂性脑缺血患者的治疗作用及对脑血流的影响。方法将患者按人院顺序分为两组,治疗组应用当归注射液穴位注射颈夹脊穴,而对照组应用阿司匹林和丹红注射液治疗,两组治疗前、治疗1个月、3个月后应用TCD检测双侧大脑中动脉、大脑后动脉和椎一基动脉的平均血流速度。结果治疗前及治疗1个月后,治疗组和对照组平均血流速度均有所提高,但两者之间差异无统计学意义（P＞0．05）,治疗3个月后两者之间平均血流速度差异有统计学意义,治疗组平均血流速度大于对照组（P＜0．05）。结论穴位注射颈夹脊穴治疗短暂性脑缺血发作有效,且能增加短暂性脑缺血患者的脑血流量,疗效持续。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠受损神经元细胞外信号调节蛋白激酶的影响

目的:探索电针对脑缺血再灌注大鼠大脑受损神经元的保护作用及其细胞外信号转导机制。方法:随机将24只SD大鼠均分为假手术组、模型组、电针组和电针+PD98059组,采用改良Longa线栓法复制局灶性大脑中动脉缺血再灌注模型。电针组取"百会"大椎"穴,选用疏密波,频率80～100Hz,电流强度1～3mA,电压1～3V,持续电刺激60min。电针+PD98059组于腰椎间隙注入丝裂原活化蛋白激酶1的抑制剂PD980592.78mg/kg,并电针。依据Julio氏神经行为学评分法对各组大鼠进行评分,采用免疫组织化学染色法观察电针及PD98059阻滞状态下电针对模型大鼠右侧病灶处颞叶大脑皮层锥体细胞层细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)蛋白表达的影响。结果:电针能改善模型大鼠的神经行为学分值(P<0.01),上调脑缺血再灌注大鼠受损神经元ERK的蛋白表达(P<0.01),其作用可被PD98059阻断(P<0.01)。结论:电针可减轻脑缺血再灌注大鼠大脑神经元的损伤,促进损伤修复,这一作用可能与其影响缺血再灌注后ERK信号通路的变化有关。     

当归补血汤对局灶性脑缺血再灌注损伤后大鼠神经功能影响

目的:探讨当归补血汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:雄性SD大鼠36只随机分为正常组、模型组、治疗组各12只。模型组和治疗组采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉栓塞缺血再灌注模型。治疗组术后连续15天以0.36g/mL浓度当归补血汤3.6g/kg灌胃,每日2次(早、晚各1次)。治疗10天后进行各组大鼠神经行为学测试,用Nissl染色法观察大鼠海马CA1区神经元的形态和数量。结果:与模型组比较,治疗组神经功能评分增高,海马CA1区神经元数量增加(P0.05)。结论:当归补血汤可改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,减少大鼠海马CA1区神经元的死亡,对海马CA1区神经元具有保护作用。     

当归注射液对慢性阻塞性肺疾病伴肺动脉高压患者近期疗效观察

目的：观察当归注射液对慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）伴肺功能高压患者血流动力学、血管收缩肽，肺功能和动脉血气的影响。方法：将６０例ＣＯＰＤ伴肺动脉高压患者随机分成治疗组和对照组。每组３０例，分别静脉滴注２５％当归注射液和５％葡萄糖注射液，１８０天为１个疗程，观察用药前后血流动力学、血浆内皮素－１（ＥＴ－１），血管紧张素Ⅱ（ＡＴ－Ⅱ），内源性洋地黄物质（ＥＤＦ），肺和动脉血气的变化。结果：静脉滴注２５     

当归和硝苯吡啶合用对慢性阻塞性肺疾病伴肺动脉高压近期疗效观察

将40例慢性阻塞性肺疾病伴肺动脉高压缓解期患者随机分成4组,即当归组,硝苯吡啶组,当归和硝苯吡啶联用组和空白组,每组10例,7天为1个疗程。对比观察各组患者用药前后血流动力学、肺功能和动脉血气变化。结果表明,联合用药组患者平均肺动脉压降低(P<0.01),心排血量增加(P<0.01),动脉血氧分压升高(P<0.05),而且疗效明显优于单用一种药和不用药组,克服了硝苯吡啶对患者动脉血氧分压的不良影响。     

白扁豆多糖抗神经细胞缺氧性坏死与凋亡

目的:探讨白扁豆多糖(WHBP,white hyacinth bean polysaccharide)抗胚鼠大脑皮层神经细胞缺氧性坏死及凋亡的作用。方法:实验分正常对照组,凋亡阳性组,白扁豆多糖0.5g/L、3.5g/L、8.0g/L组;采用无血清体外培养SD胚大鼠大脑皮层神经细胞;应用MTT法、Trypan blue拒染法、Annexin V-FITC/PI流式细胞术等方法观察白扁豆多糖的合适使用剂量和缺氧性神经细胞坏死及凋亡保护作用。结果:①常氧条件下白扁豆多糖2.0g/L～6.0g/L促进神经细胞相对增殖率达28.85%～15.38%,与正常对照组比较P<0.01;而缺氧条件下白扁豆多糖2.5g/L～3.5g/L与正常对照组比较P>0.05,但与凋亡阳性组比较白扁豆多糖0.5g/L～6.0g/L相对增殖率均高(P<0.01)。②Annexin V-FITC/PI染色流式细胞测定表明,白扁豆多糖0.5g/L、3.5g/L、8.0g/L组的坏死率分别为9.45±5.28%、8.39±3.44%、9.85±2.90%,与凋亡阳性组(10.01±2.94%)及正常对照组(5.38±1.46%)比较P>0.05;而早期凋亡率分别为19.83±2.50%(P<0.05)、9.34±2.47%(P<0.01)、23.35±5.14%,与凋亡阳性组(28.72±2.74%)比较差异显著,而与正常对照组(4.54±0.34%)比较除3.5g/L组外,其余两组均P<0.01。结论:白扁豆多糖具有促进神经细胞生长,阻断缺氧引起的神经细胞生长抑制,以及显著地抗神经细胞缺氧性凋亡功效。