肺炎链球菌几种保存方法的比较

肺炎链球菌是医学微生物实验教学中经常要用到的菌种，该菌营养要求较高且能产生自溶酶，比一般细菌难保存，常用的定期移植保存法保存效果不理想。冷冻真空干燥法虽能保存菌种数年或十年以上，但所需设备昂贵，操作复杂，一般实验室难以配备。为能建立一种操作简便、保存时间较长、勿需特殊设备的肺炎链球菌保存方法，我们就5种简便易行的保存方法进行对比观察，现报告如下。     

一种短期保存幽门螺杆菌的简便方法

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)的感染与慢性胃炎、消化性溃疡等疾病密切相关,在全球尤其在第三世界国家感染率很高.是当今研究的热点之一.Hp是一种难"侍候"的细菌,其培养和保存条件苛刻,容易发生变异甚至死亡.在实验过程中,有时根据进度需要,不能连续培养细菌,需作短暂的保存,如果是一般细菌,此时只需将培养好的平皿直接放置4℃冰箱即可保存,但Hp遇到空气中的氧会变异甚至死亡[1].遇到这种情况,有的实验室将细菌保存在低温环境中,如-20℃以下,但低温冻融对菌体伤害很大,而且操作较繁琐.在实验过程中,我们摸索出一种简单易行的短期保存方法,可以解决这一问题.     

肺炎双球菌肺炎的针灸治疗法浅析

目的 讨论肺炎双球菌肺炎的针灸治疗法.方法 根据诊断进行针灸治疗.结论 肺脏接受来自T2～T4节段的交感神经的支配,根据现代针灸学理论,应当在T2～T4节段及其附近的节段内选用穴位.     

肺炎链球菌抗原试验快速检测阳性血培养瓶肺炎链球菌

目的 探讨肺炎链球菌抗原用于辅助诊断阳性血培养瓶肺炎链球菌的临床意义.方法 采用双盲法检测人工模拟血培养链球菌阳性标本34例人工模拟血培养链球菌阴性标本180例,血培养仪报警后,移出培养瓶用注射器抽取部分血培养液,部分用于革兰染色,部分用于肺炎链球菌抗原试验和标准培养鉴定法试验.结果 34例链球菌阳性标本中,肺炎链球菌24例,肺炎链球菌抗原试验均为阳性,缓症链球菌2例和血链球菌1例,肺炎链球菌抗原试验亦为阳性,7例其它链球菌肺炎链球菌抗原试验阴性.结论 肺炎链球菌抗原试验可应用于阳性血培养瓶肺炎链球菌的快速鉴定.     

淋巴细胞短期保存方法的实验研究

在检测淋巴细胞表面膜蛋白的一些实验中如HLA配型、改良淋巴细胞毒试验测T淋巴细胞亚群［则及白血病免疫学分型等，～般实验要求淋巴细胞存活率在95％以上，如能取血样后立即做实验则符合要在但在实际工作中，因长途运输、标本保留备查、集存标本等不立即做实验时，如何进行短期保存标本，使细胞存活率符合实验要求，本文对此进行实验研究。三材料与方法三．且材料献血员全血；淋巴细胞分离液由中国医科院天津血研所生产，20oC时比重1．077土0．002；细胞保存液：hank’s液，RPMte1640培养液另加10％小牛血清，生理盐水，台盼蓝染液。1…     

介绍一种菌种保存的简易方法

菌种保存有多种方法,有长期的、短期的,教学中所用菌种有葡萄球菌、大肠杆菌、肠道类杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌等。一般微生物教研室多采用普通琼脂斜面保存法。这种方法的优点是使用时引种方便,缺点是定期传代比较麻烦。菌种的传代次数越多,产生变异的几率就越高,下面介绍一种简易的菌种保存方法。     

两种不同方法检测肺炎链球菌的结果对比分析

目的：比较常规痰培养与荧光定量聚合酶链反应（Polymerase chain reaction ,PCR）对肺炎链球菌的检测结果。方法：选择我院检验科2010年9月－2014年9月社区获得性肺炎患者86例,收集患者痰液,分别进行痰培养及PCR ,比较两种方法对肺炎链球菌的检测结果。结果：痰培养方法检测到肺炎链球菌感染例数为4例,检出率为4.7％：荧光定量PCR检测肺炎链球菌感染例数为26例,检出率为30．2％。荧光定量PCR对社区获得性肺炎患者的检出例数显著高于传统痰培养,且差异有统计学意义（P＜0．05）。结论：荧光定量PCR作为检测肺炎链球菌的一种方法,简单有效,值得临床推广应用。     

流感嗜血杆菌菌种保存的一种简便方法

流感嗜血杆菌（Hin）是幼儿脑膜炎、菌血症、脓毒性关节炎、肺炎、气管支气管炎、中耳炎、结膜炎、鼻窦炎和急性会厌炎的主要病原菌。近年来,有关流感嗜血杆菌所致感染的研究也越来越多。而病原学研究必然用到菌种,菌种的保存是这些研究工作中必不可少的一项组成部分。本菌在人工培养时需血液中的X、V因子,抵抗力较弱,在人工培养基上易死亡,菌种不易保存。我们采用脱脂牛奶和脱纤维羊血两种方法保存菌种,存活力较好,证实是一种操作简便而又实用可靠的保存并分离细菌菌种的方法,可供进一步研究之用。     

胸部CT在鉴别诊断支原体肺炎与链球菌肺炎中的应用研究

目的 探究胸部CT在支原体肺炎与链球菌肺炎鉴别诊断中的应用价值.方法 回顾性分析2016年5月至2018年5月在我院治疗的120例单一病原体感染的肺炎患者,按病原菌感染类型分为对照组(支原体肺炎,60例)与观察组(链球菌肺炎,60例),入院时2组均进行胸部CT检查与实验室病原菌检测,比较2组临床特点及胸部CT表现、肺叶...     

单纯或混合细菌感染肺炎支原体肺炎临床对照分析

目的了解单纯及混合其他细菌感染的肺炎支原体肺炎患儿临床表现差异。方法选择52例单纯肺炎支原体肺炎及31例混合细菌感染的肺炎支原体肺炎患儿临床资料,对其临床表现进行对比分析。结果混合感染组平均热程、住院天数长于单纯感染组(均P<0.05);两组患儿白细胞计数及中性粒细胞计数值差异有统计学意义(均P<0.05),CRP值差异无统计学意义(P>0.05);混合感染组患儿肺不张发生率增高(P<0.05),胸膜炎发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论两组患儿临床表现存在一定差异,混合细菌感染是肺炎支原体肺炎病情迁延、难愈的因素之一。     

呼吸道感染患儿肺炎支原体和衣原体感染状况研究

目的　探讨儿童呼吸道感染者肺炎支原体 (Mp)、肺炎衣原体 (Cp)的感染情况。方法　Mp检测采用培养法 ,Cp检测采用直接免疫荧光法 ,对 2 0 8例呼吸道感染患儿进行了检测 ,并以同期体检的 35例正常儿童作为对照。从感染率、感染年龄、感染部位进行了分析。结果　观察组总感染率、Mp、Cp单项感染率均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;>3岁组Mp、Mp +Cp及总感染显著高于≤ 3岁组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,Cp感染率和各病原感染部位两组均无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论　儿童呼吸道感染者有相当高的Mp和Cp感染率 ,Mp感染和Mp +Cp混合感染以 >3岁儿童为主 ,值得临床医师重视。     

肺炎支原体感染并发传染性单核细胞增多症5例临床分析

目的 :探讨小儿肺炎支原体 (MP)感染并发传染性单核细胞增多症 (传单 )的临床特征。方法 :对ELISA方法检测EB病毒 (EBV)、巨细胞病毒 (CMV)、疱疹病毒 (HHV)等IgM和PCR检测EBV -DNA均阴性 ,而MP -IgM和PCR检测MP -DNA均阳性的 5例传单患儿病历资料进行回顾性分析。结果 :5例均有发热、淋巴结肿大、咽峡炎、肝肿大 ,脾肿大 2例 ,咳嗽5例 ,鼻塞、眼睑浮肿 2例 ,腮腺肿大、皮疹 1例 ,肺部炎症、心肌损害 2例。 4例仅用阿奇霉素 ,1例仅用红霉素治疗 2周痊愈。结论 :MP感染可并发传染性单核细胞增多症 ,临床特征主要为不规则发热、淋巴结肿大、咽峡炎、肝脾肿大 ,阿奇霉素及红霉素治疗效果好。     

A surveillance study on penicillin-resistant streptococcus pneumoniae in China

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅｓＴｏｆｉｎｄｏｕｔｗｈｅｔｈｅｒｔｈｅｒｅａｒｅａｌｓｏｐｅｎｉｃｉｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉａｅａｎｄｔｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｒａｔｅｉｎＣｈｉｎａＭｅｔｈｏｄｓＡｓｕｒｖｅｉｌａｎｃ...     

双抗体夹心ELISA检测肺炎支原体抗原方法的建立及临床应用

目的　建立检测肺炎支原体抗原的双抗体夹心ELISA ,探讨其临床应用的可行性。方法　采用不同株Mp单抗 ,用双抗体夹心ELISA法检测Mp抗原 ,优化该方法检测Mp抗原的最佳实验条件。对Mp标准株及 14 7份临床标本进行测定 ,观察双抗体夹心ELISA方法的敏感度和特异度 ,以及该方法与聚合酶链反应 (PCR)检测法的符合率。结果　包被单抗量为 2 0 μg·ml-1,酶标记单抗 1∶2 0 0稀释时 ,阳性对照与阴性对照吸光度之比 (P/N值 )最大 ;检测Mp抗原敏感度达 2 μg·ml-1,和其它支原体没有交叉反应。 14 7份临床标本PCR检测阳性率为 13 .6% (2 0 /14 7) ;双抗体夹心ELISA法检测阳性率为 12 .2 % (18/14 7) ,两者符合率达 95 .9%。结论　建立的双抗体夹心ELISA法检测Mp抗原具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点。     

A novel LEN-derived β-lactamase from Klebsiela pneumoniae

β-lactam antibacterial agents are the most commonly used antibiotics in clinic. The production of β-lactamases is the important mechanism for resistance to β-lactam antibiotics in Gram-negative bacteria. As a result of the generous use of β-lactam antibiotics, mutations of β-lactamases gene in bacteria are frequently developed to oppose against attack from antibiotics, novel β-lactamases were found one after another, among them SHV-28, CTX-M-11 and CTX-M-22 β-lactamases were first found by Chinese researchers.     

A single tube modified allele-specific-PCR for rapid detection of erythromycin-resistant Mycoplasma pneumoniae in Beijing

Background  Mycoplasma pneumoniae (M. pneumoniae) is one of the common pathogens causing atypical pneumonia. In recent years, resistance to macrolides has become more common, especially in China. Previous studies have confirmed that the mutation at position 2063 in domain V of the 23S rRNA is the most prevalent, followed by the mutation at position 2064. Reported molecular detection methods for the identification of these mutations include direct sequencing, restriction fragment length polymorphism analysis, real-time polymerase chain reaction (PCR) with high-resolution melt analysis, and nested PCR-linked with capillary electrophoresis, etc. The most commonly used method for monitoring resistance-conferring mutations in M. pneumoniae is direct DNA sequencing of PCR or nested PCR products. However, these methods are time-consuming, labor-intensive or need expensive equipments. Therefore the development of rapid and sensitive methods is very important for monitoring the resistance globally.

Methods  In this study, we reported a fast and cost-effective method for detecting 2063 and/or 2064 macrolide resistant mutations from specimens using a modified allele-specific PCR analysis, and all results were compared with the sequencing data. We also analyzed the clinical courses of these samples to confirm the modified allele-specific PCR results.

Results  Among 97 M. pneumoniae specimens, 88 were found to possess mutations by this method, and all modified allele-specific PCR analysis results were consistent with the sequencing data. The data of the clinical courses of these 97 cases showed that they suffered from severe pneumonia. Erythromycin showed better efficacy on cases from which no macrolide resistance mutation was found on their specimens. However, in some cases from which mutations were detected, erythromycin monotherapy had poor efficacy, and on these patients severe symptoms improved only when azithromycin was added to the treatment.

Conclusions  The drug-resistant M. pneumoniae is very common in Beijing, China. Our modified allele-specific PCR analysis can identify erythromycin resistant mutations more rapidly from specimens than any other method currently available. Erythromycin is still effective for treating patients infected with the mutation negative M. pneumoniae, but this treatment fails to work on mutant organisms. This method can facilitate clinicians in selecting appropriate therapy within short timescales.

     

32例新生儿肺炎克雷伯菌败血症临床分析

目的 探讨新生儿克雷伯菌败血症药敏情况,为临床合理治疗提供依据. 方法 对2000年至2006年经治的新生儿败血症中,培养结果为肺炎克雷伯菌的做药敏试验. 结果 肺炎克雷伯菌对亚胺培南、帕尼培南敏感率达100%,对庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、氧氟沙星的敏感率为75-84.38%,对青霉素类、头孢菌素类均不敏感. 结论 因肺炎克雷伯菌有部分为产超广谱β-内酰胺酶菌株,耐药性强,对常用的抗生素不敏感,应根据药敏试验结果应用抗生素,以提高临床治愈率.     

肺炎支原体种特异性单克隆抗体杂交瘤制备及鉴定

目的　制备抗肺炎支原体种特异性单克隆抗体。方法　以纯化的肺炎支原体膜蛋白抗原 (相对分子质量为43× 10 3)加福氏免疫佐剂免疫 8周龄雌性BALB c小鼠 ,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2 0 Ag14融合 ,以酶标记免疫吸附测定法 (ELISA)筛选和鉴定所制备的单克隆抗体。结果　共筛出 3株分泌抗肺炎支原体种特异单克隆抗体杂交瘤 ,经免疫鉴定其分泌的免疫球蛋白类型为IgG1、IgG2a及IgM ,与肺炎支原体有很强的亲和力 ,与种属相近的其它 6株支原体没有交叉反应。结论　本次筛选制备的单克隆抗体杂交瘤能分泌高浓度的肺炎支原体单克隆抗体 ,并且有很强的种特异性。     

肺炎支原体感染的三种检测方法的比较

目的探讨肺炎患儿肺炎支原体(MP)感染的实验室检测方法.方法采用培养-增强套式PCR法、支原体培养和微量板凝集试验(MAG)检测67例肺炎患儿MP的感染.结果培养-增强套式PCR法检测的阳性率明显高于培养法(P＜0.001)和单份血清检测(P＜0.01).双份血清MAG的检出率和培养-增强套式PCR法比较差异无显著性(P＞0.05).结论培养-增强套式PCR法是检测MP感染的简便有效的方法.