聚合酶链反应和原位杂交检测畸胎组织巨细胞病毒DNA

聚合酶链反应和原位杂交检测畸胎组织巨细胞病毒ＤＮＡ左丽郭辉玉为进一步探讨巨细胞病毒（ＣＭＶ）与胎儿畸形相关性及其致畸机制，我们采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和原位杂交检测了畸胎组织巨细胞病毒（ＣＭＶ）ＤＮＡ。一、对象和方法１．标本来源：１０例畸胎由贵州省...     

用聚合酶链反应检测宫颈癌组织中人巨细胞病毒DNA相关序列

为建立检测人巨细胞病毒感染的ＰＣＲ方法并探讨ＨＣＭＶ与宫颈癌的关系，从石蜡包埋和活检宫颈癌组织中提取ＤＮＡ，用聚合酶链反应体外扩增ＨＣＭＶＥｃｏＲＩＤ片段上一段长１５２ｂｐ的核酸序列，再用地高辛末端转移标记法标记和扩增片段互补的ＨＣＭＶ寡核苷酸探讨，用该探针证实扩增片段的特异性。     

聚合酶链反应检测新生儿巨细胞病毒

聚合酶链反应检测新生儿巨细胞病毒肇庆市第一医院（５２６０２０）蔡定邦，郭亮，李誉成，张传顺，陈享，陈伟红巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染后引起巨细胞包涵体病（ＣＩＤ），致全身多个器官损害并出现临床症状，使受损器官组织内出现巨细胞包涵体改变，多见于小婴儿。人巨...     

用聚合酶链反应法检测172例孕妇尿中巨细胞病毒－DNA

本文对１７２例孕妇的尿用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ）进行巨细胞病毒－ＤＮＡ检测（ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓＨＣＭＶ－ＤＮＡ），结果显示非正常孕妇（以前有自然流产、死胎、畸胎、不育症等）１２１人尿中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者４３例，阳性率为３５．５％，而５１例正常孕妇中阳性者仅２例，阳性率为３．９％，表明活动性人巨细胞病毒感染是非正常孕妇的重要原因之一。２０例孕妇尿中ＮＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者用干扰素、转移因子等治疗后，１４例转阴。用ＰＣＲ法检测活动性人巨细胞病毒感染是一个比较准确、敏感、快速的方法，并是保证优生优育的重要手段之一。     

用聚合酶链反应法检测172例孕妇尿中巨细胞病毒－DNA

本文对１７２例孕妇的尿用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ）进行巨细胞病毒－ＤＮＡ检测（ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓＨＣＭＶ－ＤＮＡ），结果显示非正常孕妇（以前有自然流产、死胎、畸胎、不育症等）１２１人尿中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者４３例，阳性率为３５．５％，而５１例正常孕妇中阳性者仅２例，阳性率为３．９％，表明活动性人巨细胞病毒感染是非正常孕妇的重要原因之一。２０例孕妇尿中ＮＣＭＶ－ＤＮＡ阳性者用干扰素、转移因子等治疗后，１４例转阴。用ＰＣＲ法检测活动性人巨细胞病毒感染是一个比较准确、敏感、快速的方法，并是保证优生优育的重要手段之一。     

PCR法检测武汉地区幼儿园正常儿童尿中人巨细胞病毒DNA

目的：探讨正常人群中人巨细胞病毒的感染状况。方法：按常规方式提取幼儿园正常儿童的尿标本ＤＮＡ，以特异性ＨＣＭＶ ＤＮＡ引物，用多聚酶链反方法进行检测。结果：在所检测的７２例武汉地区幼儿正常儿童中，查出ＨＣＭＶ ＤＮＡ阳性者３９例，占５４．２％，在小于２岁与大于２岁两个年龄组之间。阳性检出差异有显著性，而２个年龄组间男女之间的检出率无差异。结论：提示在人群中与排毒者密切接触是儿童感染ＨＣＭＶ的重要途     

用聚合酶链反应技术检测泌尿系疾病患者尿中疱疹病毒DNA

为探讨泌尿系疾病与疱疹病毒感染的关系，我们用ＰＣＲ及限制性内切酶酶切技术检测了尿中疱疹病毒的ＤＮＡ。９９例泌尿系疾病患者中，５８例检出ＣＭＶ；对照组５２例中，８例检出ＣＭＶ，两组检出率间有显著性差异，但不同病种ＣＭＶ检出率之间差异无显著性。患者组和对照组尿中均未检出ＥＢ病毒（ＥＢＶ），Ⅰ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶⅠ）和Ⅱ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶⅡ）。３５例患者同时作了血清抗“Ｏ”检测，１６例急性肾炎，８例慢性肾炎和９例肾病综合征中，抗“Ｏ”阳性率分别为５００％、１２５０％和１１１１％，相应的ＣＭＶ阳性率则分别为６２５０％、６２５０％和５５５６％。     

聚合酶链反应检测银屑病患者皮损中人巨细胞病毒

目的：为了进一步了解人巨细胞病毒（HCMV）与银屑病人发病关系。方法：用针对HCMV染色体上编码蛋白基因的引物进行PCR扩增。对48例银屑病患者皮损中人巨细胞病毒进行检测。结果：48例患者，5例（10．4％）PCR检测阳性，其扩增产物可被限制性内切酶Sau3A切为105bp和185bp二个不同大小的片段，证实扩增产物为预期片段。阳性对照B36也扩出290bp的DNA带，阴性对照均未扩增出。结论：HCMV感染在银屑病发病中有一定的作用。     

巢式PCR检测儿童血液病细小病毒B19感染的研究

目的 了解儿童血液病人细小病毒Ｂ１９（ＨＰＶＢ１９）感染的史及其关系。方法 应用巢式聚合酶链反应检测９０例儿童血液病患者「其中再生障碍性盆血（ＡＡ）４０例,特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）２４例,急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）１８例,难治性贫血（ＲＡ）８例」血清或骨 ＨＰＶ Ｂ１９－ＤＮＡ,并以３０例健康儿童为对照组。结果 病例组ＨＰＶ Ｂ１９－ＤＮＡ的总阳性检出率为２８．９％（２６／９０）,其中Ａ     

新型隐球菌聚合酶链反应的检测方法

目的：从基因角度为新型隐球菌性脑膜炎的快速诊断提供一种新方法．方法：应用聚合酶链反应技术检测和鉴定脑脊液中的新型隐球菌特异性基因．结果：对引物的特异性试验证明具有较高的特异；对引物的敏感性试验可扩增出１０个菌细胞；用墨汁复染、分离培养、ＰＣＲ技术，对１５例脑膜炎患者的脑脊液同时进行检测，结果分别为：６６．６％、８６．６％、９３．３％．结论：以新型隐球菌特异性基因片段进行体外扩增，对新型隐球菌性脑膜炎的早期诊断具有重要的临床意义．     

Detection of hepatitis B viral DNA in liver with polymerase chain reaction

The sensitivity of PCR was determined for detection of HBV DNA in paraffin-embed-ded liver tissue with different methods for sample preparation.Of 8 cases of HBeAg-positiveHBV infection,HBV DNA was detected in 6 by extracting DNA from both frozen and dewaxedsamples,but in none by direct reaction.Of 12 cases subjected to Southern blot hybridization,HBV DNA was detected in 7 by this technique,in 10 by PCR with both methods of DNA extrac-tion and in 3 by direct PCR.The results showed that PCR was sensitive and was comparablewith blot hybridization in detecting intrahepatic HBV DNA.In comparison between differentmethods of sample preparation,the viral detection rate from the dewaxed samples was near thatfrom the frozen ones,while by the direct reaction HBV DNA could be detected only in a fewsamples with high level of infection.     

聚合酶链反应检测宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒感染

目的 :探讨宫颈糜烂患者单纯疱疹病毒 (HSV)感染情况。方法 :用聚合酶链反应检测宫颈糜烂患者和正常对照组单纯疱疹病毒感染情况。结果 :10 2例宫颈糜烂患者中 ,HSV- 1和 HSV- 2阳性率分别是 4 .9%和 30 .4 % ,正常对照组中 ,HSV- 1和 HSV- 2阳性率分别为 2 .7%和 12 .0 %。结论 :HSV感染与宫颈糜烂关系密切 ,且以 HSV- 2感染为主。     

聚合酶链反应-微孔板杂交技术检测人乳头瘤病毒

目的　建立HPV诊断及分型技术。方法　用HPV通用型引物和型特异性探针作PCR 微孔板杂交检测法(PCR ELISA)。结果　特异性探针只与HPV阳性标本显色 ,A值为 0 32 7± 0 0 2 9;阴性标本均不显色 ,A值为 0 0 0 3± 0 0 0 1,与性传播性疾病相关的病原微生物 (淋球菌、解脲支原体、沙眼衣原体、人巨细胞病毒、单纯疱疹病毒 )均不显色。该法能检出 3 6个HeLa细胞含HPV 18型 144个拷贝 ,A值 0 2 37～ 0 2 0 6 ;空白对照A值为 0 0 0 5～ 0 0 15。结论　PCR ELISA方法快速、敏感、特异且可用自动化酶标仪多量标本检测 ,适合临床实验使用。     

应用PCR和RT-PCR检测猪内源性逆转录病毒及其意义

目的 观察猪内源性逆转录病毒（Porcine endogenous retrovirus,PERV)在中国实验小型猪的感染情况。方法 针对PREV gag区的序列，选用特异性引物，采用PCR方法检测猪肝脏、皮肤前病毒序列；以及RT－PCR方法检测血清中PERV－RNA序列。结果 该法在猪肝脏组织中可检测出PERV前病毒序列；此外，在猪血清标本亦检测出病毒序列，而其它2份HBV、HCV阳性血清及2份其它动物血清（大鼠、兔）检测结果均为阴性，说明该方法特异性较高。结论 中国实验小型猪均携带该病毒，并可以释放到血清中；采用该法具有特异、简便的特点，为进一步研究PERV感染及生物安全性奠定了基础。     

Detection of toxigenic Clostridium difficile by polymerase chain reaction

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｏｘｉｇｅｎｉｃＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｄｉｆｆｉｃｉｌｅｂｙｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＣｈｅｎＣｕｎｌｏｎｇ（陈村龙）；ＺｈｏｕＤｉａｎｙｕａｎ（周殿元）；ＰａｎＬｉｎｇｊｉａ（潘令嘉）；ＷａｎｇＪｉｄｅ（...     

多聚酶链反应检测艰难梭菌产毒株

以艰难梭菌A毒素基因非重复片段中的两个寡核苷酸链作引物,扩增306bp,用多聚酶链反应技术扩增31株细菌,结果19株艰难梭菌产毒株均扩增出单一特异的电泳带,而8株艰难梭菌无毒株、2株索氏梭菌和2株大肠杆菌均无特异带出现。将艰难梭菌产毒株的模板DNA从50ng稀释至0.5ng后再进行多聚酶链反应,结果仍可见特异扩增带。说明多聚酶链反应检测艰难梭菌产毒株较之细菌分离培养、细胞毒索测定方法具有快速、简便、特异、敏感的优点,可望用于临床标本的直接检测。     

Detection and Identification of Enteroviruses RNA by Using Polymerase Chain Reaction

Theenteroviruses(EV)areamongthemostcommonandimportantviralpathogensofhumansll'2].Atleast70serotypeswhichinfecthumanshavebeenidentified,includingthepolioviruses(PV),coxsackievirusesgroupAandB(CVAandCVB),andechoviruses(EchoV).Sinceitsinceptionmorethan40yearsago,EVisolationincellculturehasbeenthemainstayofenteroviraldiagnosis.ReportedmeanisolationtimeforEVfromcerebrospinalfluid(CSF)rangedfrom3.7to8.2days.However,asmanyas25%to35%oftheEVserotypes,particularlytheCVAgroup,donotgrowincellcu…