离心速度及时间对培养细胞透射电镜样品制备的影响

目的:探讨消化离心法中不同的离心条件对培养细胞超微结构的影响,寻找最佳的离心速度及时间.方法:将培养细胞消化后分成不同的离心速度和时间组,电镜下比较各组细胞超微形态的变化.结果:当离心速度低于800 r/min,8min时,无法收集到足够的细胞量.离心速度2 000 r/min,15 min时细胞挤压变形,胞浆出现撕裂等人工假象.离心速度在800～1 500r/rain,8～15min时制样较容易,细胞超微结构保存良好.结论:消化离心法制备培养细胞透射电镜样品,其最佳的离心速度和时间是800～1 500r/min,8～15min.     

快速准确制备大肠杆菌高效感受态细胞中有关OD600值的探讨

目的 探讨在不同转速下大肠杆菌OD600值与时间的关系,为能快速而准确的制备高效感受态细胞提供OD600值的量化标准.方法 在不同转速下每隔一定时间测定大肠杆菌OD600值.结果 总结了不同转速下OD600值在0.3～0.4所需时间段,并且用此时间段培养的细菌制备的感受态细胞的转化效率可高达(6.45±0.05)×107转化子/μgDNA.结论 用此法制备的感受态细胞完全可以满足大部分在质粒中进行的常规克隆的需要.     

小鼠脑组织制样过程中不同染色时间对结果的影响

目的比较在透射电镜(TEM)制样过程中不同染色时间对小鼠脑组织超微结构观察效果的影响。方法选取3只健康KM小鼠,进行脑组织灌注固定,切取每只小鼠2个海马区样品做常规制样,每个样品制备2个超薄切片,醋酸铀和柠檬酸铅双染色法染色,醋酸铀染色时间分为10 min(A组)、30 min(B组)、50 min(C组),柠檬酸铅染色时间分为2 min(A1、B1、C1)、5 min(A2、B2、C2)、10 min(A3、B3、C3)、20 min(A4、B4、C4),选择放大倍数为5 000和25 000,采用透射电镜观察。结果放大5 000倍时,可观察到B2、B3样品着色最佳,图像反差明显,观察效果最好;放大25 000倍时,各组样品观察效果一样。结论染色时间对小鼠脑组织制样的透射电镜观察效果有明显的影响,铀染30 min后铅染5～10 min效果最佳。     

制备条件对白蛋白纳米粒表征的影响

目的 通过进行白蛋白纳米载体制备工艺的研究,考察固化温度、固化时间、搅拌速度对纳米粒制备的影响,确定白蛋白纳米粒制备的优化条件.方法 在其他制备条件固定的情况下,分别采用不同的固化温度、固化时间、搅拌速度.比较不同条件下制备的纳米粒的形态和粒径.结果 ①搅拌速度2 000 r/min时的粒径分布范围明显小于500、1 000、1 500和2 500 r/min时的范围;②固化温度120℃时的粒径分布范围明显小于60、80和100℃时的范围;③固化时间时粒径分布的影响较小.结论 白蛋白纳米粒制备的优化条件为:搅拌速度2000 r/min、固化温度120℃、固化时间20min.     

乳糖诱导对幽门螺杆菌UreB、HpaA和大肠杆菌LTKA63、LTB重组蛋白表达的影响

目的:探讨乳糖诱导幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(ureB)、黏附因子(hpaA)和大肠杆菌肠毒素B亚单位(ltB)、A亚单位突变体63(ltKA63)重组基因表达的效果及最佳表达条件.方法:采用BIO-RAD凝胶图象分析系统测定表达的目的重组蛋白产量.采用SDS-PAGE检测不同乳糖浓度、诱导时间和温度对不同生长阶段工程菌重组蛋白表达量的影响,并与异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)比较.结果:乳糖较IPTG更为有效地诱导rHpaA、rUreB、rLTB、rLTKA63的表达.37℃诱导的目的重组蛋白表达量明显高于28℃.rHpaA表达的最佳条件为起始菌液OD600值0.8、50 g/L乳糖,诱导4 h;rUreB和rLTB均为起始菌液OD600值1.2、100 g/L乳糖,诱导5 h;rLTKA63为起始菌液OD600值0.8、100 g/L乳糖,诱导4 h.结论:乳糖较IPTG更有效地诱导上述重组基因表达目的蛋白,且无毒和廉价,为幽门螺杆菌基因工程疫苗工业化生产奠定了有利的基础.     

富浆法制备浓缩血小板影响因素分析

目的:探讨手工制备浓缩血小板的影响因素,确保为临床提供高质量的血小板。方法:随机选择献血者新鲜全血,规格分别为200 ml和400 ml,要求在采血后6 h,无乳糜、无凝块、无溶血等;离心条件分别为2 000 r/min、时间7 min、温度22℃、降速7 r/min,和1 630 r/min、时间7 min、温度22℃、降速7 r/min;分离方法为分浆夹式和悬挂式,检测上文不同规格全血、不同离心条件及不同分离方法对血小板回收数量的影响。结果:利用400 ml全血制备的浓缩血小板,平均每袋计数优于200 ml全血;离心条件为速度2 000 r/min、时间7 min、温度22℃、降速7 r/min时所获得的血小板数量相对较高;分浆夹式分离获得的血小板数量显著高于悬挂式分离法(P<0.05),且分浆夹式分离获得血小板混入的红细胞、白细胞数量明显低于悬挂式分离法。结论:不同规格全血、不同离心条件及不同分离方法对血小板回收均有影响。     

离心过滤法提取外切体的实验研究

目的:利用外切体的物理特性,用基于孔径分离的生物膜离心过滤法制备外切体,以降低其研究及应用的技术门槛. 方法:以树突状细胞的培养上清作为外切体的来源,分别用传统的超高速密度梯度离心法和生物膜离心过滤法制备外切体,再利用透射电镜进行两者之间形态学鉴定,聚丙烯酰胺凝胶电泳进行蛋白质成分的鉴定. 结果:两种方法的提取物在超微结构及形态方面非常相像,其蛋白质谱几乎一致. 结论:基于生物膜分离技术的离心过滤法可制备出外切体.     

急性低压缺氧时大鼠肝脏超微结构的改变

急性低压缺氧是否会造成机体超微结构的损伤,国内报道较少, 尤其是对肝细胞超微结构的损伤报道甚少。为提供急性低 压缺氧造成肝细胞超微结构损伤的实验依据,本文作者利用透射电镜在低压舱模拟急性低压 缺氧条件下,观察了大鼠在5 000、7 000、10 000、12 000 m高度肝细胞超微结构的改 变,现报道如下。 　　1　材料与方法　①动　物：选择健康Wistar大白鼠50只,体重220～250 g,雌雄各半(由吉林大学提供)。②分　组：将实验用50只大鼠随机分为5组,每组10只,分别为空白对照组、5 000 m组 、7 000 m组、10 000 m组及12 000 m组。③实验方法：a.模拟急性低压缺氧环境：将两低压缺氧组大鼠分别放入DY-2型低压舱 内,以30 m/s速度上升至5 000、7 000、10 000 m及12 000 m,分别停留5 min,然后 以 30 m/s速度下降至地面,将缺氧组及空白对照组大鼠快速断头处死。b.样品制备：各组动物 处死后快速取出肝组织放入2.5%戊二醛溶液中,经PBS(pH7.5)液浸洗后,用1%锇酸固定 后,双蒸水漂洗,梯度丙酮脱水,Epon812包埋,制成超薄切片,用2%醋酸双氧铀-柠檬酸 铅双重染色,用JEM-1200EX透射电镜进行观察,加速电压为80 kV,放大倍数为6 000倍。     

酶联免疫分析法检测乙型肝炎表面抗原常见影响因素分析

目的 分析酶联免疫分析法检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）常见影响因素。方法 回顾性分析汝阳县中医院2019年10月至2021年5月接收的慢性乙型肝炎患者44例血清样本作为研究对象。抽取患者肘静脉血5 mL,离心处理后留下血清,将44份血清平均分成四等份,计为A、B、C、D,使用酶联免疫分析法检测HBsAg。比较不同时间HBsAg阳性血清样本滴度OD值、不同温度HBsAg阳性血清样本滴度OD值、不同洗扳HBsAg阳性血清样本滴度OD值和三种不同酶标记抗体加入量HBsAg阳性血清样本滴度OD值。结果 不同时间点5 min、10 min、15 min、20 min、25 min、30 min、35 min、40 min平均OD值比较差异有统计学意义（P<0.05）。其中40 min平均OD值（0.71±0.02）最高,5 min平均OD值（0.41±0.02）最低。37℃下HBsAg阳性血清样本滴度OD值高于12℃（P<0.05）。自来水HBsAg阳性血清样本OD值高于试剂盒洗液（P<0.05）。40μL、50μL、60μL酶标记抗体加入量的OD值比较差异有统计学意义（P...     

不同处理方法对红细胞超微结构的影响

目的探讨不同方法处理红细胞对其超微形态结构的影响与差异。方法取临床遗传性球形红细胞增多症患者血液,采用自然凝固、抗凝、培养基稀释等不同方法处理,离心沉淀,常规透射电镜包埋、超薄切片及观察分析。结果自然凝固组大量红细胞表现为非典型双凹圆盘状,电子密度不均;抗凝组大量红细胞表现为典型双凹圆盘状;培养基组大量红细胞表现为非典型双凹圆盘状,电子密度不均。结论不同处理方法导致红细胞超微结构的形态和电子密度有明显差异,肝素抗凝并戊二醛固定后离心的方法可能是红细胞透射电镜标本制作最好的选择。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …