非可控性炎症、表观遗传和遗传改变在结直肠癌发生和侵袭过程中的作用

结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)的发生和发展是慢性炎症促进关键基因后天突变累积的过程.炎症促进癌症进化各阶段均受表观遗传和遗传改变所驱动.在癌症信号刺激下,腺瘤通过积累遗传变异逐渐发展成腺癌.新一代测序技术为阐明癌症进化过程中的“驱动”变异和融合基因提供了有效途径,为癌症进化提供了分子证据.腺瘤恶性转化过程中最明确的遗传改变是微卫星不稳定和染色体不稳定性显著增加.研究CRC的进化规律,尤其是研究体细胞变异的主要目的是明确这种变异影响了何种信号途径,而信号途径是目前探索早期CRC的有效干预方式和CRC靶向治疗的关键.     

早期综合干预对早产儿发育的影响

为探讨早期综合教育干预对早产儿发育影响的效果,采用早期干预方法,对早产儿干预组(30例儿童)进行综合干预,另设早产儿对照组(30例)和正常对照组(33例)进行比较,监测各组儿童的智能发育情况.结果,通过24个月的综合干预,早产儿干预组各能区发育商(DQ)和总DQ均显著大于早产儿对照组;但低于正常对照组.结论,早期综合干预能促进早产儿的智能发育.     

NRF2基因启动子-617C/A基因多态性对内毒素介导巨噬细胞炎症反应的影响

目的 探讨人核因子E2相关因子(NRF2)基因启动子-617C/A多态性的功能,并观察其对内毒素诱导的巨噬细胞炎症反应的影响.方法 构建分别携带NRF2基因启动子-617C、-617A诱导调控系统的质粒及腺病毒载体.应用构建好的质粒转染HEK293细胞后,以双荧光素酶分别验证NRF2基因启动子-617C/A多态的调控效率;应用构建好的腺病毒载体转染RAW264.7细胞,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测NRF2 mRNA和蛋白表达水平;内毒素刺激巨噬细胞后,应用Western印迹检测NRF2蛋白的表达,ELISA法检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-10的水平.结果 NRF2基因启动子617C组的调控效率显著高于-617A组(0.584±0.016与0.258±0.018,P＜0.05).内毒素刺激RAW264.7细胞后,-617C组NRF2蛋白和基因水平表达均明显高于-617A组(1.123±0.080与0.951±0.057,1.889±0.031与1.647±0.323,均P＜0.05).-617 C组上清IL-6、IL-10、TNF-α水平均低于-617A组,其中IL-6、IL-10的表达差异均有统计学意义(均P＜0.05).-617C组IL-6/IL-10也显著低于-617A组(P＜0.05).结论 NRF2基因启动子-617C/A多态性对NRF2的表达具有显著影响,并对内毒素刺激后巨噬细胞炎症反应的平衡有着重要调控作用.     

抗乙肝病毒治疗对肝细胞癌进化发育过程的阻滞作用

在我国, 乙肝病毒慢性感染是引发肝细胞癌的主要原因。抗病毒措施是乙型肝炎治疗的关键, 抗乙肝病毒治疗可以降低肝细胞肝癌的发生风险, 但具体机制尚不清楚。在慢性炎症致癌的过程中, 乙肝病毒在人体微环境的压力下, 会通过“变异-选择-适应”的方式进化出具有生存和致癌优势的突变体。因此, 抗乙肝病毒治疗阻滞这一进化过程的作用应是其预防肝细胞癌发生的关键, 而目前药物和治疗标准的局限性不能充分发挥抗病毒治疗阻滞进化的作用, 从而引起临床研究上的一些反常现象。从病毒致癌过程中进化发育的特点出发, 提高抗病毒治疗的特异性和合理性可以进一步完善癌症预防措施。     

生长激素对宫内发育迟缓大鼠生长板的影响

目的:了解生长激素对IUGR大鼠生长板形态结构的影响.方法:用限食法制作IUGR大鼠模型后,在各组仔鼠达到3周龄时,随机分成3组,每组10只,对照组,GH IUGR组和IUGR组.给GH IUGR组大鼠注射GH2周后,各组大鼠均被处死,用骨组织计量学方法检测生长激素对IUGR大鼠生长板形态结构的影响.结果:IUGR组大鼠的生长板纵列细胞数、肥大带细胞数均明显小于对照组(P＜0.01).经2周的GH治疗后,GH I-UGR组大鼠生长板厚度明显大于IUGR组和对照组(P＜0.01),增殖带细胞数明显大于IUGR组和对照组(P＜0.001),肥大带细胞数明显大于IUGR组(P＜0.01),初级骨小梁宽度明显大于IUGR组和对照组(P＜0.01),初级骨小梁密度3组之间无明显差别.结论:在两周的时间里,GH促进胫骨生长板细胞分裂、增殖、成熟,而无促进骨骺愈合的趋势.     

前列腺特异性抗原启动子调控促凋亡基因caspase-7载体的构建及其对前列腺癌细胞的特异性杀伤作用

目的：构建前列腺特异性抗原启动子(PSAP)调控的促凋亡基因caspase—7表达载体并观察其对前列腺癌细胞的促凋亡作用．方法：提取基因组DNA，通过PCR法获得前列腺特异性抗原启动子(PSAP)基因，利用基因重组方法以PDAP替换掉pCDNA3真核表达载体中的pCMV启动子，构建PSAP-pCDNA3载体．测序正确后，将PSAP分别替换绿色荧光蛋白载体pIRES2—EGFP和克隆入带有效应型caspase-7基因的绿色荧光蛋白载体pIRES2—EGFP—Csp7中的pCMV启动子片段，分别获得由PSAP启动子调控的绿色荧光蛋白载体和带有效应型Caspase—7基因的真核表达载体PSAP—pIRES2—EGFP—Csp7．利用脂质体转染法将该载体分别转染至PC—3m(前列腺癌)、Hep2(喉癌)及MC3T3(正常成纤维)细胞中，通过荧光显微镜观察转染细胞绿色荧光蛋白表达及细胞形态变化，免疫组化检测细胞中效应型Caspase—7蛋白的表达状况，细胞计数观察转染不同表达载体后各类细胞生长变化．结果：经酶切鉴定及测序结果证实所构建载体正确．转染PSAP—pIRES2—EGFP—Csp7载体后，①在PC—3m细胞中可观察到绿色荧光蛋白的表达，并可检测到效应型Caspase—7蛋白表达，而在Hep2及MC3T3细胞中未观测到绿色荧光，②荧光显微镜下可见前列腺癌PC—3m细胞生长受到抑制并出现凋亡细胞形态，细胞计数证实转染的PC—3m细胞生长受到抑制，而其余细胞生长未受影响．②电镜观察结果显示转染PSAP—pIRES2—EGFP-Csp7后的PC-3m细胞出现典型的凋亡细胞形态．结论：前列腺特异性抗原启动子(PSAP)可在前列腺癌细胞中特异性调控其下游Caspase—7基因的表达，并发挥其促凋亡作用，从而特异性地诱导前列腺癌细胞发生凋亡，而对正常细胞及非前列腺起源细胞不产生影响．     

“阴虚癌瘤相关”假说的提出及其意义

从中医阴阳理论入手,在总结中医对恶性肿瘤病因病机认识、临床治疗经验的基础上,结合现代医学肿瘤病因、病理机制的研究成果,对恶性肿瘤的起因进行研究,提出机体"阴虚"是恶性肿瘤发病主要起因的"阴虚癌瘤相关"假说,并认为滋阴可有效地预防恶性肿瘤的发生和发展.     

红景天素对实验性老年性痴呆大鼠防治作用的研究

目的观察中药红景天素(Rhodosin)对实验性AD大鼠的防治作用.方法连续6周腹腔内注射D-半乳糖,双侧海马内注射Aβ1-40造成AD大鼠模型.以Y-型迷宫、一次性被动回避实验检测大鼠的学习记忆行为,测定大脑皮层脂褐素含量以及海马线粒体膜流动性、SOD活性、MDA含量,电镜观察海马超微结构.结果红景天素可显著改善痴呆大鼠的学习记忆障碍,明显降低痴呆组大鼠海马SOD活性、MDA含量及皮层脂褐素的含量,阻抑海马神经元的变性及凋亡.结论红景天素可能通过影响自由基水平对老年性痴呆大鼠有一定的防治作用.     

不同变异位点的HIV-1 vpr重组真核表达载体对转染细胞凋亡作用的观察祆

目的 观察不同的人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的vpr基因变异株致宿主细胞凋亡作用的区别,及其可能的机制.方法 14个带有不同变异位点的中国感染者HIV-1 vpr基因片断,其PCR产物纯化后经Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切,以pcDNA3.1(+)真核表达质粒连接转化实验,将重组质粒用脂质体瞬时转染至HeLa细胞,G418筛选后收获细胞.RT-PCR检测目的 基因mRNA水平的表达,荧光染色在显微镜下观察Hoeschst凋亡细胞并计算凋亡率,DNA琼脂糖电泳观察各转染细胞凋亡条带,膜联蛋白V-FITC流式细胞检测各株细胞凋亡率,并比较各株细胞的半胱酸蛋白水解酶3活性差别.结果 14个vpr基因片段转染HeLa细胞后,发现有第70、85、86或94位变异的vpr转染细胞Hoeschst染色凋亡率和半胱酸蛋白水解酶3活性检测(分别为0.1225,0.1675,0.1975,0.1575和11.356,8.021,14.6875,10.521)较无这些变异的保守序列vpr转染细胞(0.355和182.4875)为低,DNA琼脂糖电泳法和膜联蛋白细胞凋亡检测也提示同样的规律;第1～7号重组质粒(均为vprAE亚型)的致细胞凋亡能力也明显小于第8～14号重组质粒(vpr B,AB,C和C/BC亚型).结论 首次观察到有第70、85、86或94位变异的HIV-1 vpr序列,其致HeLa细胞凋亡的能力低于无这些位点变异的保守序列,AE亚型诱导宿主细胞凋亡能力低于其他亚型,其机制之一与半胱酸蛋白水解酶3途径激活降低有关.     

对一例多囊卵巢综合征患者在体外受精周期中卵泡发育迟缓并停滞的研究

多囊卵巢综合征(PCOS)是女性常见的内分泌紊乱性疾病。PCOS的不孕症患者在进行药物超促排卵的过程中,可能会出现卵巢过度刺激综合征(OHSS)或卵巢反应不良如卵泡发育迟缓甚至停滞发育的情况。因此,为提高PCOS患者使用辅助生殖技术中进行妊娠的成功率,医生在为其制定合理的药物超促排卵方案时,既要注意预防OHSS的发生,又要获得数量理想,质量高的卵泡。本文报道了1例PCOS患者在使用长方案进行药物超促排卵的过程中,出现卵泡发育迟缓并停滞的现象,针对这种情况医生为其肌肉注射HCG针10000u,并在注射药物24小时后取卵,并进行常规体外培植受精,并最终获得可用胚胎的过程。     

Immuno-ricin A chain specific for gastric cancer: internalization and its significance]

Biotinylated ricin A chain (RTA) was introduced to antigastric cancer monoclonal antibody MGb2 with chemical conjugating technique to form an immuno-ricin A chain conjugate (I-RTA) specific for gastric cancer. Its internalization in human gastric cancer cell line SGC-7901 was followed by double dynamic EM labelling procedure using streptavidin-gold and sheep anti-mouse IgG-gold probes. The effects of verapamil on I-RTA internalization routings were also observed. The results demonstrated that the main entry modality of I-RTA was non-coated microinvagination, followed by coated pits and interioration of microvilli. The internalized I-RTA was found to be quickly transported to multivesicular bodies and finally to lysosomes, where it was degraded, whilst in the non-membranous structures I-RTA was only occasionally encountered. Ultrastructurally, verapamil displayed its effects by making the internalized I-RTA stay longer in tubulovesicular structures and be delivered in a less amount and more slowly into lysosomes. Furthermore, I-RTA was increased in the non-membranous structures, and the in vitro killing effect was significantly enhanced. The present data revealed the basic cell biology process of I-RTA-cell interaction, which will provide not only an important clue to improving I-RTA targeting therapy efficiency, but also a new way for further screening targeting potentiators.     

老年高血压患者阿托伐他汀治疗后血清CRP及内皮舒张功能变化及其临床意义

目的：探讨阿托伐他汀在高血压患者中的抗炎作用。方法：将78例老年高血压患者随机分为对照组和阿托伐他汀组（治疗组）。两组均常规治疗,在此基础上治疗组每晚睡前服用阿托伐他汀10mg,共8周。检测两组治疗前后血清c反应蛋白（cItP）、血压、血脂和血管内皮依赖性舒张功能变化。结果：两组降压效果差异无统计学意义;对照组治疗后血脂、血清CRP和内皮依赖性舒张功能无明显变化,而治疗组血脂、血清CRP明显降低,血管内皮依赖性舒张功能明显改善（P〈0．01）。结论：阿托伐他汀除具有降脂作用外,还具有减轻血管炎性反应、改善内皮功能的作用。     

视网膜母细胞瘤中NY-SAR-35基因的表达及临床意义

目的检测癌-睾丸抗原NY—SAR-35基因在视网膜母细胞瘤（RB）中的表达,探讨其作为RB特异性免疫治疗靶抗原的可能性。方法利用逆转录-聚合酶链反应方法,检测NY-SAR-35基因在15例RB组织、12例非肿瘤病变视网膜和22例其他正常眼部组织（眼睑皮肤12例、眼肌5例、结膜5例）中的表达,随机抽取RT—PCR阳性产物直接进行DNA测序,并将其表达结果与临床相关指标（性别、年龄、病理分型、肿瘤大小、临床分期）进行统计学分析,以探讨这一类肿瘤抗原的临床意义。结果在15例RB组织中,NY—SAR-35基因的表达率为60％（95％CI：35．2％-84．8％）;在非肿瘤病变视网膜组织和其他正常组织中,无一例表达NY-SAR-35基因;g-表达与临床相关指标（性别、年龄、病理分型、肿瘤大小、临床分期）无关（P〉0．05）。结论NY-SAR-35基因可特异性地表达于RB中,可能成为RB特异性免疫治疗的靶抗原,具有进一步研究开发的前景。     

定量C-反应蛋白测定的临床意义

目的 :探讨C -反应蛋白 (CRP)在各种炎症的急性期或组织损伤时浓度的变化。方法 :使用OrionDiag nostica公司的QuikreadCRP定量分析仪对234例各种炎症及50例正常人的血清进行测定。结果 :在炎症的急性期CRP的浓度明显高于正常对照组 (P<0.05)。结论:CRP测定可用于各种炎症患者支持诊断、监测病情和指导治疗     

非小细胞肺癌组织p16基因缺失及突变的临床意义

目的 探讨人类非小细胞肺癌组织中ｐ＾１６基因缺失及突变情况及其与临床病理的关系。方法 应用控制模板ＤＮＡ量的银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术检测４０例非小细胞肺癌手术切除标本中ｐ＾１６基因第２外显子。结果 ４０例中有１３例发生纯合缺失,３例发生突变,缺失及突变率为４０％,其缺失及突变率与肺癌的临床病理分期有密切关系（Ｐ〈０．０５）。结论 ｐ＾１６基因的缺失及突变可能在非小细胞肺癌的发生、发展及转移中起重要     

PSA水平测定对前列腺增生和前列腺癌的临床应用价值

目的探讨血清前列腺特异抗原(PSA)水平在诊断良性前列腺增生(BPH)和前列腺癌(PC)中的临床意义.方法采用放射免疫法测定68例BPH和22例PC患者游离前列腺特异抗原(FPSA)、总前列腺特异抗原(TPSA),计算FPSA/TPSA比值,并测定BPH患者的实际前列腺体积(PV).结果BPH患者FPSA值为(1.63±1.08)μg/L,TPSA值为(12.38±8.26)μg/L,FPSA/TPSA比值为0.25±0.13;PV为(14.0±1.08)cm3,PV每增加1mm3,TPSA平均增加0.17μg/L,而FPSA平均增加0.03μg/L;BPH患者年龄、PV分别与FPSA、TPSA水平呈正相关关系(均P＜0.05),而与FPSA/TPSA比值无相关性(P＞0.05);患者年龄与PV无相关性(P＞0.05).PC患者FPSA值为(6.05±1.46)μg/L,TPSA值为(37.44±11.58)μg/L,FPSA/TPSA比值为0.14±0.11,与BPH患者比较,FPSA、TPSA值均明显上升(均P＜0.05),而FPSA/TPSA比值明显下降(P＜0.01).结论BPH患者血清PSA水平随年龄、PV的增加而上升;PC患者血清PSA水平升高且较BPH患者更为明显,而FPSA/TPSA比值明显下降,当其＜0.15时诊断为PC的准确率达77%;测定PSA水平对指导BPH和PC的诊断和治疗、判断PC患者的预后具有重要的临床意义.     

微波局部热疗治疗肿瘤研究进展及临床意义

热疗应用于治疗肿瘤已经有100多年的时间,微波局部热疗通过产生内热的形式在局部杀死肿瘤细胞,相当于微创手术的效果,疗效肯定,副反应轻微,越来越成为治疗肿瘤的有效手段之一,值得近一步推广和研究。     

miR-142-3p在陕北地区结直肠癌患者中的表达及临床意义

目的 观察微小microRNA 142-3p在陕北地区结直肠癌患者中的表达及临床意义。方法 通过组织原位杂交,检测结直肠癌患者组织中miR-142-3p的表达。结果 miR-142-3p主要定位于细胞的胞浆,在癌组织和癌旁组织中miR-142-3p的表达存在差异。结论 miR-142-3p在陕北地区结直肠癌组织与癌旁组织中呈差异表达,有望成为结直肠癌诊断和治疗的潜在靶点。     

转谷氨酰胺酶3(TGM3)促进肝细胞肝癌(HCC)增殖侵袭的潜在机制及其临床意义

 目的 研究转谷氨酰胺酶3 （transglutaminase 3，TGM3）在肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）发生、发展过程中的作用及其预测HCC预后的临床价值。方法 收集复旦大学附属中山医院HCC患者标本和临床资料进行分析，用qRT-PCR和Western blot方法检测28例HCC患者癌和癌旁TGM3表达差异，利用组织芯片染色结果及临床随访资料对92例HCC患者行Kaplan-Meier及Cox回归分析，探究TGM3不同表达水平对患者预后的影响。shRNA下调HCC细胞系Huh7和97H的TGM3表达水平，利用CCK-8法、克隆形成实验、Transwell小室实验、裸鼠皮下成瘤实验分析干扰后细胞增殖、迁移、侵袭及皮下成瘤能力的变化，Western blot检测PI3K/AKT、MAPK/EPK、NF-κB信号通路、上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）及凋亡相关蛋白的变化。结果 TGM3在HCC中高表达，Kaplan-Meier生存分析表明TGM3高表达组的中位复发时间和中位生存期均较低表达组显著缩短（15.00个月vs.49.25个月，P<0.05；38.63个月vs.未达到；P<0.05）；多因素Cox回归分析发现TGM3表达水平是HCC患者术后复发和死亡的独立预后因素（HR=2.31，P=0.029；HR=2.78，P=0.009）。体内外实验表明TGM3表达下调可以抑制HCC细胞的增殖、侵袭及皮下成瘤能力。TGM3下调使AKT、ERK、p65蛋白磷酸化水平降低，cleaved caspase 3水平增高，EMT相关指标E-钙黏素表达增加，N-钙黏素、纤维连接蛋白及波形蛋白表达下降。结论 TGM3可能通过影响多条信号通路和EMT过程促进HCC的增殖和侵袭，并可作为HCC患者潜在的预后指标及治疗靶点。