HPLC法测定沪地龙中次黄嘌呤

沪地龙是钜蚓科通俗环毛蚓P heretim a vu l-garis Chen、威廉环毛蚓P. gu illelm i M ichaelsen或栉盲环毛蚓P. p ectin if era M ichaelsen的干燥体。夏季捕捉,及时剖开腹部,除去内脏及泥砂,洗净,晒干或低温干燥。地龙具有清热定惊、通络、平喘、利尿的功能,用于高热神昏、惊痫抽搐、关节痹痛、肢体麻木、半身不遂、肺热喘咳、尿少水肿及高血压[1]。地龙分为广地龙与沪地龙,过去主要使用广地龙,而近年来上海也养殖地龙,但对沪地龙的研究较少,据报道次黄嘌呤是地龙扩张支气管成分,从地龙中分离出的次黄嘌呤有抗组胺、降血压等作用[1]。…     

高效液相色谱法测定炒土鳖虫中尿嘧啶和尿苷含量

目的:建立炒土鳖虫中有效成分尿嘧啶和尿苷的高效液相色谱测定方法.方法:采用Agilent ZORBAX NH2(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(95:5)作为流动相,流速为1.0 mL/min,温度40℃,紫外检测器,检测波长为205 nm.结果:高效液相色谱法(HPLC)检测炒土鳖虫尿嘧啶和尿苷在0...     

心血管病患者血中次黄嘌呤,黄嘌呤和尿酸含量的测定

本文用高效液相色谱法测定了正常人及心绞痛和高血压病患者血中次黄嘌呤，黄嘌呤和尿酸的含量，并进行了ｔ检验分析。结果表明，心绞痛和高血压病患者血中尿酸的含量与正常人无明显差异，而心绞痛和高血压患者血中次黄嘌呤和黄嘌呤的含量明显高于正常人，Ｐ〈０．０５。因此我们认为测定血中次黄嘌呤和黄嘌呤和尿酸的含量具有一定的临床意义。     

HPLC法测定蕲蛇中核苷类成分的研究

[目的]探讨高效液相色谱法（HPLC）法测定蕲蛇药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤和尿苷的分析方法。[方法]采用HPLC法,色谱条件为Dionex C18（3μm,150 mm×4.6 mm）,以0.05 mol.L-1磷酸氢二钾水溶液为流动相;检测波长为254 nm;流速为0.8 mL.min-1。[结果]尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤和尿苷分别在0.0088～0.220μg、0.0352～0.880μg、0.0344～0.860μg、0.0176～0.440μg范围内具有良好线性关系;平均加样回收率分别为99.0%、98.6%、100.4%、103.0%;RSD分别为2.69%、2.25%、2.90%、2.88%。[结论]HPLC法可以测定蕲蛇药材中尿嘧啶、黄嘌呤、次黄嘌呤和尿苷含量,从而控制蕲蛇药材品质。     

土鳖虫超微粉体中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量测定

目的建立HPLC同时测定土鳖虫超微粉体中核苷类成分尿嘧啶、次黄嘌呤含量的方法。方法色谱柱为Hypersil C18 BDS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.05 mol/L磷酸氢二铵水溶液,检测波长为254 nm,流速为0.4 mL/min,柱温为25℃。结果尿嘧啶、次黄嘌呤分别在0.044～0.22μg、0.042～0.21μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为95.93%、97.32%,RSD分别为2.9%、3.0%。结论建立的方法简单、重复性好、准确可靠,可用于土鳖虫中尿嘧啶、次黄嘌呤的含量测定。     

HPLC法测定库拉索芦荟中芦荟苷的含量

目的: 建立用反相高效液相色谱测定库拉索芦荟中芦荟苷含量的方法.方法: 采用高效液相色谱法,以ZORBAX-C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)为色谱柱,流动相为甲醇-1 g/L水-磷酸缓冲液(45∶55∶0.5),检测波长为356 nm,流速1.0 mL/min,柱温25℃.结果: 芦荟苷在0.596～11.9 mg范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.9996(P<0.05),芦荟苷平均加样回收率为97.8%,RSD为1.02%(n＝6).结论: 试验结果表明,本方法可靠性高,准确性和重现性好,适用于库拉索芦荟中芦荟苷的含量测定.     

HPLC法测定鬼针草药材中金丝桃苷的含量

目的建立鬼针草药材中金丝桃苷的含量测定方法。方法采用HPLC法,ODS C18色谱柱(4.6mm×255mm,25μm),流动相为乙腈-3%冰醋酸水溶液(12.5∶87.5),检测波长为363nm,流速为1.0ml/min。结果金丝桃苷在1.773～15.067μg/ml线性关系良好(r=0.9999),平均回收率97.90%,RSD3.15%(n=6),鬼针草药材金丝桃苷的平均含量为0.41mg/g,RSD0.001%(n=3)。结论建立高效液相色谱法测定鬼针草药材中金丝桃苷的含量操作简便,重复性好,可为鬼针草药材质量标准的制定提供分析方法。     

HPLC法测定不同产地党参药材中党参炔苷的含量

目的 测定不同产地党参药材中党参炔苷的含量,比较不同产地、不同规格党参的质量.方法 采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18(250 mm x4.6 mm,5 μm)柱,流动相为乙腈-水(体积比25:75),检测波长为268 nm,进样量20 μL.结果 党参炔苷在0.008 5-0.425 mg/mL(r=...     

HPLC法测定祛痒洗剂中黄芩苷的含量(摘要)

祛痒洗剂由黄芩、蛇床子、地肤子、白鲜皮等中药组成 ,具有解毒祛痒等作用 ,用于治疗阴部瘙痒。本文采用高压液相色谱 (HPLC)法对其黄芩苷进行含量测定 ,现报告如下。方法和结果　①仪器与试药 :高效液相色谱仪 ,日本岛津LC 2 0 10A型 ;甲醇、磷酸为色谱纯 ;其他试剂为分析纯 ;黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所 ) ;祛痒洗剂 (青岛海慈医疗集团 )。②试品溶液的制备 :精密量取本品 1mL ,置 2 5mL量瓶中 ,加甲醇适量 ,溶解 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,取滤液即得。③对照品溶液的制备 :精密称取 60℃减压干燥 4h的黄芩苷对照品 12mg …     

HPLC法测定不同产地肉苁蓉中松果菊苷的含量

目的建立以高效液相色谱法测定不同产地肉苁蓉中松果菊苷含量的方法。方法色谱柱为Hypersil-ODS柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相：A相为1％醋酸溶液,B相为乙腈-甲醇（2：3）;流速1．2mL／min,检测波长334nm,柱温30℃。结果松果菊苷在0．22～2．2μg范围内线性关系良好,r=0．9997,平均加样回收率为96．35％,RSD=2．03％。不同产地肉苁蓉中松果菊苷的含量不同（0．42％～1．52％）。结论此法简便、准确、重现性好,可用于该药材的质量控制。     

广地龙特异性PCR分子鉴定

【目的】筛选出对广地龙具有特异性鉴别意义的PCR引物,建立一种快速、准确鉴别广地龙基原真实性的方法。【方法】收集药典收载的4种地龙原动物以及市场常见地龙混淆品6种,从GenBank数据库中下载有关蚯蚓的12SrRNA基因序列,采用通用引物对10种样本PCR扩增后进行测序,依其序列间差异设计3对非保守区特异性引物,筛选对广地龙具有特异性扩增的引物。【结果】引物12St/12Sf对广地龙产生特异性扩增,当退火温度提升至64℃时,其反应表现出高度特异性,仅广地龙具有良好的单一扩增带,而其他样品在同样的条件下无扩增带。所得特异性引物在15种市售广地龙药材中验证结果良好,与传统形态学鉴定结果基本一致。【结论】引物12St/12Sf可作为广地龙物种鉴定的特异性标记物,可以实现广地龙近缘多个物种快速而又准确的鉴定,且不受实验材料的完整性、加工干燥等因素的影响。     

参环毛蚓不同部位细胞原代培养及鉴定

目的:筛选出参环毛蚓体内细胞培养的最佳部位,为建立参环毛蚓细胞原代培养方法提供实验基础。方法:分别提取参环毛蚓的皮、肠道、嗉囊、前列腺细胞进行培养,观察其细胞生长。结果:参环毛蚓的表皮和肠道细胞经培养后,细胞均有生长,并发现肠道细胞生长良好,5~6天后基本达到融合,细胞呈多边鹅卵石样,透明度及折光性强。另发现参环毛蚓的嗉囊、前列腺等部位的细胞没有增长迹象。结合形态学鉴定,原代培养及传代的细胞98%以上为肠上皮细胞。结论:参环毛蚓的肠道是建立细胞系的首选材料,采用此方法分离培养的肠上皮细胞数量多,均一性生长佳,可重复性强。     

高效液相色谱法测定蒙药冬葵果中咖啡酸的含量

目的建立冬葵果药材中咖啡酸的含量测定方法。方法RP-HPLC法:采用翡纳米科技kromasil ODS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-1%冰醋酸水溶液(18∶82)等度洗脱;流速:1.0 mL/min,检测波长:330 nm;柱温:30℃。结果咖啡酸在0.027 52~0.344 0μg范围内线性关系良好。平均回收率为98.85%,RSD为2.29%(n=6),符合定量分析要求。结论结果表明,所建立的方法简便、准确,适用于冬葵果中咖啡酸的含量测定。     

HPLC-小粒径色谱柱法测定红景天提取物中红景天苷、酪醇和络赛维

目的 建立应用小粒径色谱柱快速测定红景天（蔷薇红景天）提取物中红景天苷、酪醇和络赛维的HPLC方法。方法 色谱柱为HALO C₁₈（150 mm×4.6 mm,2.7 μm）;流动相为乙腈（A）-0.1%甲酸水溶液（B）,梯度洗脱：0～5 min,7%～15% A;5～8 min,15%～18% A;8～20 min,18%～30% A;20～25 min,30%～40% A;25～30 min,40%～55% A;体积流量0.6 mL/min;柱温30 ℃;检测波长280 nm;进样量5 μL。结果 红景天苷、酪醇、络赛维15 min内达到分离,峰形尖锐对称,线性范围分别为0.41～106.00、0.42～108.00、0.38～98.00 μg/mL,平均加样回收率分别为99.29%、98.82%、98.33%。采用所建立的方法测定不同来源红景天提取物的多种成分,结果表明单一采用红景天苷作为质量控制指标,9批样品的差异度较小（RSD＝7.95%）,如果将酪醇或络赛维引入质量评价体系,则红景天提取物各批次间就存在较大的差异（酪醇,RSD＝24.42%;络赛维,RSD＝50.55%）;但是,同一单位提供的样品间的差异度较小。结论 建立的HPLC-小粒径色谱柱法高效、准确,经济,精密度好,灵敏度高,可用于红景天提取物中的红景天苷、酪醇和络赛维的同时快速测定;引入多成分的测定方法,可以评价不同厂家提取物质量的差异,并筛选出导致质量差异的成分,为提取物的工艺优化提供参考。     

HPLC法同时测定制首乌无糖颗粒中大黄素、大黄素甲醚的含量

目的：建立制首乌无糖颗粒中大黄素、大黄素甲醚的含量测定方法。方法采用Agilent 5TC-C18(150×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸(80：20),流速1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温25℃。结果大黄素和大黄素甲醚分别在0.08~0.8μg (r1=0.9998)、0.04~0.4μg (r2=0.9997)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为100.04%、99.58%,RSD分别为0.77%,0.71%。3批样品中大黄素的含量分别为0.159 mg/g、0.161 mg/g、0.170 mg/g,大黄素甲醚的含量分别为0.055 mg/g、0.064 mg/g、0.072 mg/g。结论本方法准确、专属性好、重复性好,可作为制首乌无糖颗粒质量控制方法之一。     

HPLC法同时测定南大青叶中5种有效成分的含量

目的 建立同时测定南大青叶中5种有效成分的高效液相色谱(HPLC)法.方法 采用ZORBAXExtend-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长为225 nm,柱温为30℃.结果 2,4(1H,3H)-喹唑二酮、4(3H)-喹唑酮、2-甲基-4(3H)-喹唑啉酮、色胺酮、靛玉红进样量分别在10.86～217.2、16.21～324.2、11.34～ 226.8、29.85～597.0、160.5～3 210 ng范围内线性关系良好,加样回收率为98.5％ ～ 100.9％,方法学考察结果良好.结论 建立的HPLC法简便快速、重复性好、结果准确可靠,可作为南大青叶药材质量标准控制的方法.     

羧基肽酶E (CPE)在人乳腺腺癌中的表达和功能

 【摘要】目的 观察乳腺腺癌中羧基肽酶E(carboxypeptidase E,CPE)介导的神经内分泌肽加工和表达。方法 使用RT PCR、免疫组化、ELISA和Western blot等方法,比较CPE和生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,GHRH)基因和蛋白质水平在42例乳腺癌和21例癌旁正常组织中的表达。结果 乳腺癌组织中的CPE基因表达水平为1 024±237,而癌旁正常组织中CPE基因表达水平为805±83 (P<0.01)。与乳腺癌旁正常组织比较,癌组织中CPE蛋白质显示了较高的表达 (P<0.01)。乳腺癌组织中的GHRH基因表达水平为1 522±457,而癌旁正常组织中为1 067±437,差异有统计学意义(P<0.01)。与乳腺癌旁正常组织比较,癌组织中GHRH蛋白表达被上调 (P<0.01)。结论 癌组织中CPE和GHRH高表达提示癌细胞中存在较强的由CPE酶介导的神经内分肽转录后加工能力。     

超临界流体萃取-HPLC法测定何首乌中大黄酸、大黄素及大黄素甲醚的含量

采用超临界流体萃取法９ＳＦＥ）提取中药何首乌中的蒽醌类成分,并用ＲＰ－ＨＰＬＣ法进行分离测定。在ＳＦＥ中,通过对萃取条件的考察,确定萃取压力为４２ＭＰａ,温度７０℃,改性剂量０．４ｍＬ,静态萃取时间５ｍｉｎ及动态萃取体积５ｍＬ。ＲＰ－ＨＰＬＣ中,以Ｃ８为固定相,甲醇－０．２％磷酸溶液（７０：３０）,为流动相,检测波长４３７ｎｍ。本法准确可靠,何首乌中各成分的平均回收率分别为大黄酸９９．１％（ＲＳＤ     

狭叶五味子中化合物扁枝杉香豆素和 (-)-表儿茶酸体外抗乙型肝炎病毒活性研究

目的 研究从狭叶五味子 Schisandra lancifolia 中分离化合物扁枝杉香豆素 (phyllocoumarin) 和 (-)-表儿茶酸［(-)-epicatechin］的体外抗乙型肝炎病毒 (HBV) 活性。方法 为了筛选和确认扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸体外抗 HBV 活性,以 HepG2.2.15 细胞为体外研究 HBV 模型,分别用 RPMI 1640 完全培养基稀释不同质量浓度的药物作用于细胞,培养 3 d 后收集上清,采用 MTT 法检测药物对 HepG2.2.15 细胞的生长影响和 ELISA 法检测培养上清中 HBsAg 和 HBeAg 的水平,评价扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸对 HBsAg 和 HBeAg 的影响。结果 扁枝杉香豆素和(-)-表儿茶酸具有一定的体外抗 HBV 活性,其细胞毒性非常小,CC₅₀ 均大于 200 μg/mL。扁枝杉香豆素具有较强的抑制 HBsAg 和 HBeAg 分泌作用。阳性对照药物阿德福韦酯也抑制 HBV HBsAg 和 HBeAg 分泌,但在相同质量浓度 (1.6 μg/mL) 下其抑制作用较扁枝杉香豆素弱。结论 狭叶五味子中化合物扁枝杉香豆素和 (-)-表儿茶酸具有一定体外抑制 HBV HBsAg 和 HBeAg 分泌的作用,从而起到抗 HBV 作用。     

注射用丹参粉针剂-中间体-药材HPLC指纹图谱及其相关性研究

目的 建立丹参药材、注射用丹参中间体及粉针剂的指纹图谱.方法 HPLC法,大连依利特Hypersil BDS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1％磷酸,7∶93(0→5 min),12∶88(5→7 min),12∶ 88(7→20 min),17∶ 83(20→22 min),1...