阿米福汀联合ICE方案治疗老年复发性非霍奇金淋巴瘤疗效观察

目的:评价阿米福汀联合ICE方案治疗老年复发性非霍奇金淋巴瘤(NHL)的临床疗效和不良反应。方法:44例老年复发性NHL患者分为ICE治疗组(21例)及阿米福汀联合ICE治疗组(23例),观察2组临床疗效和不良反应。结果:阿米福汀-ICE组23例共接受92个疗程,10例完全缓解(CR),5例部分缓解(PR),总有效率(0R)65．2％。ICE组21例共接受84个疗程,7例CR,4例PR,OR 52．3％。2组主要治疗相关的不良反应为骨髓抑制,阿米福汀-ICE组重度白细胞减少和血小板减少发生率分别为13．0％和26．1％,明显低于ICE组(28．6％和42．9％),2组比较差异有统计学意义(P<0．05)。结论:阿米福汀联合ICE方案是治疗老年复发性NHL的有效挽救方案,其中阿米福汀能明显改善化疗相关的骨髓抑制而不影响其疗效。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合阿糖胞苷诱导急性髓细胞性白血病细胞凋亡的研究

目的：探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合阿糖胞苷(Ara-C)诱导急性髓细胞性白血病(AML)细胞凋亡的作用。方法：分离39例AML患者的骨髓单个核细胞，每例分为4组进行观察：空白对照组、TRAIL组、Ara-C组、TRAIL加Ara-C组，共同培养12、24和48h。通过MTT比色法测定细胞杀伤率及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：TRAIL和Ara-C可协同降低AML细胞活力，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，其作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强。结论：TRAIL与Ara-C具有协同作用，能高效杀灭肿瘤细胞，可能是一种有临床应用潜能的新型抗白血病的生物制剂。     

阿米福汀在血液系统疾病中的应用

阿米福汀是1995年由美国Bioscience公司开发的、第一个被国际权威机构认可的泛细胞保护剂。目前临床广泛用于预防放化疗的不良反应，却不降低疗效。近年发现，阿米福汀还有其他如双重调节凋亡及类造血细胞因子等作用。现就其在血液系统疾病中的应用作一综述，期望对指导临床应用有所裨益。     

阿米福汀联合TP方案在晚期非小细胞肺癌的应用

目的评价阿米福汀联合多烯紫杉醇＋顺铂（TP）化疗治疗晚期非小细胞肺癌的疗效及副反应。方法 53例晚期非小细胞肺癌患者随机分为治疗组和对照组,治疗组（阿米福汀＋TP）26例,对照组（TP）27例。观察和比较两组化疗疗效及毒副反应。结果有效率：治疗组（38.5%）略高于对照组（33.3%）,Ridit分析p〉0.05。毒副反应：白细胞减少发生率及严重程度对照组高于治疗组,Ridit分析p〈0.05;肾功能异常率及严重程度对照组高于治疗组,Ridit分析p〈0.05;恶心、呕吐反应率及严重程度治疗组高于对照组,Ridit分析p〈0.05。结论阿米福汀联合多烯紫杉醇＋顺铂（TP）化疗治疗晚期非小细胞肺癌不降低化疗疗效,降低白细胞降低及肾功能损害副反应,增加恶心,呕吐副反应。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合柔红霉素诱导急性髓系白血病细胞凋亡的研究

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合柔红霉素(DNR)诱导急性髓系白血病细胞凋亡的作用。方法分离21例急性髓系白血病患者的骨髓或外周血单个核细胞,每例分为4组进行观察：空白对照组、TRAIL组、DNR组、TRAIL DNR组,共同培养6、12、24小时。通过MTr比色法测定细胞杀伤率、DNA电泳及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果TRAIL和柔红霉素可协同降低急性髓系自血病细胞活力,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用随培养时间延长及药物浓度增加而增强。结论TRAIL与柔红霉素具有协同作用,能高效杀灭肿瘤细胞。TRAIL是一种有望应用于临床的新型生物制剂。     

5-氮胞苷诱导对骨髓间充质千细胞凋亡影响的实验研究

目的：研究5-胞苷（5-azacytidine，5-aza）对体外培养的兔骨髓问充质于细胞（mensenchymal stemcell，MSC）凋亡的影响。方法：体外分离培养兔MSC，用不同浓度5-aza诱导不同时间．观察MSC凋亡情况。结果：正常培养兔MSC有轻度细胞捌亡；5-aza诱导浓度达15μmol／L时凋亡率明显增加（P〈0．01）．当浓度达10μmol／L，诱导时间延长则细胞洲亡率明显增加（P〈0．05），超过15μmol／l。时出现成片细胞死亡。结论：5-aza诱导对体外培养兔骨髓间质干细胞有诱导细胞凋亡作用，其作用程度与诱导时间及浓度有关。     

再生障碍性贫血患者CD8+细胞表面Fas的表达及其临床意义

目的探讨再障患者体内活化的T淋巴细胞数量的增多和功能的异常是否与其凋亡减少有关。方法应用流式细胞术检测特发性再障（n=36）、因苯中毒导致的继发性再障（n=16）、表现为全血细胞减少的骨髓增生异常综合征患者（n=8）和正常对照（n=9）的骨髓及外周血中CD8^＋细胞表面Fas的表达。结果再障患者CD8^＋细胞Fas的表达显著低于正常对照；治疗后病例中的有效组的表达显著高于特发性再障初治组、低于正常对照。骨髓单个核细胞（BMMNC）中CD8^＋细胞表面Fas的表达与外周血单个核细胞（PBMNC）中CD8^＋细胞表面Fas的表达成正相关，且均与外周血中性粒细胞水平成正比。结论再障患者体内异常活化的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）通过Fas／FasL途径介导的自身凋亡减少，导致其数量增多，同时还存在功能亢进。     

生存素反义寡脱氧核苷酸对人胃癌细胞株凋亡的影响

背景：生存素（survivin）是凋亡抑制蛋白（IAP）基因家族成员之一，在多数肿瘤组织中高表达。目的：观察生存素反义寡脱氧核苷酸（ASODN）对人胃癌细胞株凋亡的影响。方法：将体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901分为不同浓度生存素ASODN组、无关寡脱氧核苷酸（N-ODN）组和对照组。以四甲基偶氮唑蓝（MTT）试验检测生存素ASODN对SGC-7901细胞生长的影响；通过形态学观察、DNA电泳和流式细胞仪分析反映细胞凋亡情况；以端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附测定（TRAP-ELISA）方法检测端粒酶活性。结果：生存素ASODN能抑制SGC-7901细胞生长，诱导细胞凋亡，抑制端粒酶活性。凋亡细胞形态学上表现为细胞膜起泡、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成；DNA电泳呈现凋亡特征性阶梯状条带；流式细胞仪分析显示G1期前出现亚二倍体凋亡峰。结论：生存素ASODN能诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡，抑制细胞生长及其端粒酶活性。     

经冠状动脉注射骨髓单个核细胞影响心肌细胞凋亡的实验研究

目的观察经冠状动脉注射方式移植骨髓单个核细胞对心脏功能的改善和心肌细胞凋亡的影响。方法结扎小型猪冠状动脉制备心肌梗死模型，然后经冠状动脉注射骨髓单个核细胞，术后3周用超声心动图以及左心室造影检测心功能．核素心肌显像观察心肌灌注，冠状动脉造影观察侧支循环形成．用TUNEL检测心肌细胞凋亡。结果把骨髓单个核细胞通过冠状动脉注射到猪心肌梗死模型，显示左心室dp／dtmax较对照组增高，心肌灌注显著改善。冠状动脉有侧支循环形成，缺血心肌细胞；较对照组减少了53．6％结论骨髓单个核细胞心肌内移植可改善心脏收缩功能，可能与移植细胞抑制心肌细胞凋亡有关。     

UCA1在AML患者骨髓组织单个核细胞中的表达及对AML细胞增殖凋亡调节作用观察

目的 观察长链非编码RNA(long non-coding RNAs,LncRNA)尿路上皮癌胚抗原（urothelial carcinoma associated gene 1, UCA1）在急性髓系白血病（AML）患者骨髓组织单个核细胞中的表达情况及对人AML不同亚型细胞株U937、HL60增殖凋亡的调节作用，并探讨其可能作用机制。方法 (1)30例AML患者、30例缺铁性贫血患者的骨髓标本，采用RT-PCR检测骨髓组织单个核细胞UCA1。(2)将U937及HL60细胞各分为1、2、3组。1、2组分别用UCA1-siRNA（可抑制UCA1表达）和空载siRNA转染，3组为空白对照（不作任何处理）。分别于转染24、48、72 h取各组细胞，MTT法测算细胞增殖活力。转染48 h时采用流式细胞术观察各组细胞凋亡情况。转染48 h时采用WESTERN Blotting法检测各组细胞Wnt、β-连环蛋白（β-catenin）、p-gsk-3?蛋白。结果 AML及缺铁性贫血患者骨髓组织单个核细胞UCA1相对表达量分别为4.96±1.51、1.09±0.93，二者比较，P<0.05。与2...     

辛伐他汀对大鼠平滑肌祖细胞和内皮祖细胞分化的不同影响

目的：观察辛伐他汀对平滑肌祖细胞（SPC）和内皮祖细胞（EPC）分化的影响。方法：采用密度梯度离心法获取大鼠骨髓单个核细胞,将其接种在纤维连接素包被培养板,加入不同浓度辛伐他汀（0．01～10μmol／L）培养8d。采用平滑肌肌动蛋白免疫荧光染色鉴定骨髓源性SPC,激光共聚焦显微镜鉴定FITC—UEA—I和Di I-acLDL双染阳性细胞为正在分化的EPC,并在倒置荧光显微镜下计数。结果：辛伐他汀显著抑制骨髓单个核细胞分化为SPC。0．01μmol／L辛伐他汀组与对照组SPC数量分别为79±5对85±4（P〈0．05）。辛伐他汀显著促进骨髓单个核细胞向EPC分化,其促进作用随辛伐他汀浓度升高而增加,在1．0μmol／L达最大效应。1μmol／L辛伐他汀组与对照组EPC数量分别为87±5对39±4（P〈0．01）。结论：辛伐他汀选择性抑制骨髓单个核细胞向SPC分化,促进其向EPC分化,局部应用有促进损伤血管再内皮化和抑制新生内膜过度增生的可能。     

阿米福汀联合地西他滨及CHG方案治疗高危骨髓增生异常综合征的疗效观察

目的:观察阿米福汀联合地西他滨及CHG方案(阿糖胞苷+羟基喜树碱+重组人粒细胞刺激因子)治疗高危骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效。方法:将42例高危MDS患者随机分为2组,第1组应用小剂量地西他滨及CHG方案治疗(19例),第2组应用阿米福汀联合地西他滨及CHG方案治疗(23例),14 d为1个周期,治疗2个周期后评估疗效,观察不良反应发生情况。结果:阿米福汀联合地西他滨及CHG方案治疗组总有效率与地西他滨及CHG方案组比较差异无统计学意义(78.3%∶78.9%,P0.05)。近期死亡率方面,阿米福汀联合地西他滨及CHG方案治疗组明显低于地西他滨及CHG方案治疗组(0∶15.8%,P0.05);Ⅲ~Ⅳ度白细胞减少和血小板减少发生率方面,阿米福汀联合地西他滨及CHG方案组明显低于地西他滨及CHG方案组(21.7%∶36.8%,69.6%∶89.5%,P0.05);黏膜炎的发生率方面,阿米福汀联合地西他滨及CHG方案组明显低于地西他滨及CHG方案组(17.4%∶42.1%,P0.05)。结论:阿米福汀联合地西他滨及CHG方案治疗中高危MDS安全有效,其近期死亡率降低,Ⅲ~Ⅳ度血液学毒性及黏膜炎等不良反应明显减轻。     

依达拉奉对骨髓间充质干细胞诱导分化后神经元样细胞生长状态的影响

目的探讨依达拉奉对骨髓间充质干细胞（MSCs）诱导分化后神经元样细胞生长状态的影响。方法MSCs由正常成年人骨髓经密度梯度离心加贴壁培养法获得，取第（4～6）代MSCs以1Mm二巯基乙醇（BME）预诱导24h后，用丁羟基茴醚（BHA）、二甲基亚砜（DMSO）和不同浓度依达拉奉诱导分化，采用免疫细胞化学法鉴定神经细胞特异性抗原标记神经元特异性烯醇化酶（NSE）和微管相关蛋白-2（MAP-2）的表达。唑盐比色实验（MTT）法检测诱导前和诱导后0，5h、6h、24h、3d细胞生长情况。结果成功分离培齐人MSCs，诱导分化后大部分MSCs变成神经元样细胞并表达NSE和MAP-2。依达拉奉组诱导后的细胞生长能力较好。结论依达拉奉能使诱导后的细胞保持较好的生长状态．减少凋亡细胞数量。     

三氧化二砷在急性早幼粒细胞白血病中的抗血管新生作用

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）的抗血管新生作用。方法 用ELASA法检测As2O3治疗前后急性早幼粒细胞白血病（APL）骨髓单个核细胞培养上清液中血管内皮细胞生长因子（VEGF）含量的改变;流式细胞术检测As2O3治疗前后NB4细胞、脐静脉内皮细胞（HUVEC）凋亡及bcl-2表达的改变。结果 （1）APL患者骨髓单个核细胞VEGF的分泌量大于对照组。完全缓解时VEGF降为正常;（2）As2O3以时间-剂量依赖性方式抑制HUVEC和NB4细胞的增殖,促进其凋亡,抑制bcl-2蛋白表达;加入VEGF可部分纠正上述改变。结论 APL中VEGF的分泌增加,抑制血管新生是As2O3的抗白血病作用机制之一。     

辛伐他汀对平滑肌祖细胞分化、增殖、迁移及黏附能力的影响

目的：观察辛伐他汀对骨髓源性平滑肌祖细胞（SPC ）分化及增殖的影响,筛选新一代包被洗脱支架药物。方法：采用密度梯度离心法从大鼠骨髓获取单个核细胞,接种于纤维连接素包被的培养板,培养8d后,以平滑肌肌动蛋白（α-SM A ）免疫荧光染色鉴定骨髓源性SPC ,并在倒置荧光显微镜下计数。收集培养8d单个核细胞、贴壁细胞,分别加入不同浓度辛伐他汀（0.01-10μmol/L ）培养8d、24h。分别采用氚标记胸苷（3 H-TdR）摄入法、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验观察SPC的分化、增殖、迁移和黏附能力。结果：与对照组（无辛伐他汀干预）相比,0.01μmol/L辛伐他汀显著抑制骨髓单个核细胞向SPC分化[（85±4）个比（79±5）个]、增殖[（4070±184）个比（3833±126）个]、迁移[（44±3）个比（39±3）个]和黏附[（59±5）个比（52±4）个], P均＜0.05,且随辛伐他汀浓度增加S PC数量显著减少（ P＜0.01）。结论：辛伐他汀可抑制骨髓源性平滑肌祖细胞分化、增殖、迁移及黏附能力。     

重组人生长激素对内毒素致肝细胞凋亡效应的抑制作用

目的观察内毒素（LPS）对肝细胞的直接作用及重组人生长激素（rhGH）的干预效果。方法内毒素诱导肝细胞损害,HepG2细胞传代培养24h后,换用含内毒素（20μg/ml）和/或rhGH、肝细胞生长因子（HGF）的新鲜培养液继续培养16h,观察药物对LPS作用的干预效果。结果HepG2细胞经LPS作用16h,透射电镜观察既有形态正常的细胞,同时也出现典型的凋亡细胞表现为胞浆浓缩核凝聚成块状,凋亡小体形成,细胞器（包括线粒体）结构基本正常;TUNEL标记后胞核呈棕褐色染色,而对照细胞无阳性染色信号,证实LPS作用16h后HepG2细胞已发生凋亡。将rhGH与LPS同时加入培养液中共同作用16h,rhGH可明显减少HepG2细胞经LPS诱导的细胞凋亡数量对照组为（99±0.8）%,rhHG处理组为（36±5.6）%,P＜0.001。结论重组人生长激素可以抑制LPS致肝细胞凋亡作用。     

大鼠胎血与骨髓间充质干细胞分化能力的体外研究

目的：比较大鼠胎血和骨髓中间充质干细胞（MSC）体外培养过程中的生长特性及体外诱导两者向神经元样细胞分化的异同。方法：采用标准Ficoll-hypague技术分离大鼠胎血骨髓的单个核细胞（MNC），收获MSC传代培养，流式细胞仪检测细胞的免疫表型。β-巯基乙醇、二甲基亚砜、叔丁基对羟基茴香醚诱导MSC向神经元分化，免疫细胞化学法检测其特异性标志巢蛋白（Nestin）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶原纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果：2种MSC细胞形态、免疫表型无明显差异。定向诱导后，2种细胞均表达Nestin、NSE，但GFAP阴性。结论：大鼠胎血和骨髓MSC的细胞形态、生物学特性无明显差别；两者诱导分化为神经元碰细胞的能力无显著差异。胎血应是MSC的又一来源。     

川芎嗪对小鼠实验性结肠炎P-选择素表达的影响

背景：溃疡性结肠炎（UC）的病因和发病机制尚不十分清楚，运用新的检测技术和药物干预对深入研究其病因和发病机制有重要意义。目的：通过检测小鼠实验性结肠炎中P-选择素的变化，探索川芎嗪用于治疗UC的可能性及其作用机制。方法：健康昆明小鼠40只随机分为5组（每组8只）：正常对照组、模型组和低浓度、中浓度、高浓度川芎嗪培养给药组（分别予川芎嗪0．5mg／ml、1mg／ml和2mg／ml）。除正常对照组外，其余小鼠均以恶唑酮灌肠造模。恶唑酮灌肠后第3天提取外周血单个核细胞（PBMC）；并处死小鼠，提取脾脏单个核细胞（SMC）和肠黏膜固有层单个核细胞（LPMC）进行培养给药，采用荧光定量聚合酶联反应（PCR）检测P．选择素表达量。结果：P-选择素在SMC、LPMC和PBMC中的表达量均表现为模型组、低浓度和高浓度川芎嗪组较正常对照组显著增高（P〈0．01）；在SMC和LPMC中，中浓度和高浓度川芎嗪组均较模型组显著降低（P〈0．05）。结论：P-选择素在恶唑酮诱导的小鼠实验性结肠炎中表达增强．川芎嗪具有抑制P-选择素表达的作用。     

不同的脂肪酸对人血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 了解游离脂肪酸（FFAs）对体外培养的人脐静脉内皮细胞（human umbilical veinen dothelialcells，HUVEC）凋亡及生长周期的影响。方法 用不同种类，不同浓度的FFAs培养人血管内皮细胞（VEC），然后应用流式细胞术（FCM）对培养的人VEC生长周期及细胞凋亡进行分析。结果 饱和脂肪酸（SFA）（C16：0，C18：0，C24：0），使培养的人VEC生长受到抑制，随浓度升高细胞凋亡率升高；不饱和脂肪酸（USFA）（C18：1，C18：2），当低浓度时，VEC凋亡率较低（P〉0．05，P〉0．01），而当达400或600μmol／L时凋亡率升高（P〈0．05，P〈0．01）。结论 SFA对培养的人VEC具有抑制增殖及诱导凋亡的作用。低浓度USFA对VEC凋亡及生长周期的影响不大，但高浓度时，其诱导凋亡的作用增强。     

LPS、IL-23对脓毒症患者PBMCs产生IFN-γ的作用

目的应用脓毒症患者外周血单个核细胞与LPS及IL-23共培养诱导干扰素-γ表达,探讨脓毒症单个核细胞免疫状态的改变。方法选取35例脓毒症患者作为脓毒症组,31例全身炎症反应综合征(SIRS)患者为SIRS组,17例健康对照者为对照组,取外周血浆分离单个核细胞(PBMCs),分别与LPS、IL-23及LPS+IL-23共同培养,72h后用ELISA法检测培养上清中IFN-γ的水平。结果 LPS、IL-23及LPS+IL-23与PBMCs细胞共同培养后,正常组可诱导PBMCs产生大量IFN-γ,脓毒症组和SIRS组与正常组相比IFN-γ的产生明显减少(p均0.05)。结论脓毒症患者单个核细胞IFN-γ释放能力明显下降,表明脓毒症患者免疫状态受到抑制。