白花九里明提取液对急性胃黏膜损伤的预防保护研究

目的:观察白花九里明提取液在吲哚美辛诱发小鼠急性胃黏膜损伤的预防性保护作用。方法:取SD小鼠40只随机均分为4组。正常对照组和模型对照组(给予0.9%Na Cl注射液)灌胃,白花九里明低、高浓度组(分别给予300 mg/ml、600 mg/ml的白花九里明提取液)灌胃,1次/d,共14 d。在末次灌胃30 min后,正常对照组(给予0.9%Na Cl注射液)、模型对照组和白花九里明低、高浓度组(给予0.25%吲哚美辛溶液)灌胃,4 h后检测胃黏膜损伤指数。结果:模型对照组、白花九里明低浓度和高浓度组的胃黏膜损伤指数均明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01),白花九里明高浓度组的胃黏膜损伤指数明显低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.01),白花九里明低浓度组的胃黏膜损伤指数与白花九里明高浓度组、模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:白花九里明达到一定用量时,对吲哚美辛诱发的急性胃黏膜损伤具有一定的预防性保护作用。     

硫酸多糖916对细胞因子和H2O诱导ECV304细胞产生一氧化氮的影响

目的：研究硫酸多糖916（PS916）对TNFα、IL-1β和H2O2诱导ECV304细胞产生一氧化氮（NO）的影响。方法：用Griess试剂测定ECV304细胞产生的NO，用MTT法测定细胞的增殖，用荧光法测定NO合酶的活性。结果：40ng/mlTNFα和40ng/mlIL-1β使ECV304细胞NO产生下降，0.1mmol/L H2O2使NO的产生增加。PS916剂量依赖性增加TNFα、IL-β诱导的ECV304细胞NO的产生，降低H2O2诱导ECV304细胞产生的NO。TNFa和H2O2抑制ECV304细胞的增殖，而IL-1β对ECV304细胞的增殖没有明显影响。PS916剂量依赖性的抑制TNFα和H2O2的作用，增加存活细胞数。在体外，PS916对细胞的NO合酶无明显的影响。结论：PS916在体外实验中对细胞因子和H2O2引起的ECV304细胞损伤有拮抗作用，对细胞表现出明显的保护作用。     

肌肽对ECV304细胞缺氧损伤的保护作用

目的 研究肌肽对缺氧所致人体内皮细胞系ECV304细胞损伤的影响.方法 建立缺氧条件下ECV304细胞损伤模型,用MTT法观察肌肽对缺氧损伤的ECV304细胞活性的影响,测定细胞培养基中乳酸脱氨酶(LDH)活力,并对细胞骨架进行考马斯亮蓝R-250染色观测其细胞结构.结果 浓度为10～20 mmol/L肌肽孵育ECV304细胞6 h后,可以抑制缺氧12 h和24 h引起的ECV304细胞活性下降,同时减少LDH的释放,保持细胞骨架完整.结论 肌肽对缺氧所致的ECV304细胞伤具有保护作用.     

白花九里明对脂肪肝干预及肝脏结构和功能保护的研究

目的 探讨壮药白花九里明对高脂诱导脂肪肝的干预保护作用.方法 选取KM小鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组、白花九里明低浓度组、白花九里明中浓度组和白花九里明高浓度组,每组10只.各组小鼠每天灌胃2次:正常对照组给予0.9％氯化钠溶液,其他组给予1.0138 g/mL猪油;正常对照组和模型对照组给予0.9％氯化钠溶液,辛伐他汀组给予0.3 mg/mL辛伐他汀,白花九里明低浓度组、中浓度组、高浓度组分别给予0.2、0.4、0.8 g/mL白花九里明提取液;灌胃量均按小鼠体质量计算(10 mL/kg),连续5周.末次灌胃后12 h摘除眼球取血分离血清,检测各种血清甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)、谷丙转氨酶(ALT)含量.分离肝右叶制备肝组织切片.结果 模型对照组TG明显高于其他各组(P<0.05),白花九里明低浓度组、中浓度组TG明显高于正常对照组(P<0.05),白花九里明高浓度组TG明显低于低浓度组(P<0.05),白花九里明高浓度组、辛伐他汀组、正常对照组TG组间两两比较差异无统计学意义;模型对照组、辛伐他汀组、正常对照组TP组间两两比较差异无统计学意义,白花九里明低浓度组、中浓度组、高浓度组TP明显高于辛伐他汀组(P<0.05),白花九里明低浓度组TP与正常对照组比较,差异无统计学意义,白花九里明中浓度组、高浓度组TP明显高于正常对照组(P<0.05),白花九里明中浓度组、高浓度组TP组间比较差异无统计学意义;模型对照组ALT明显高于正常对照组(P<0.05),辛伐他汀组ALT与正常对照组比较差异无统计学意义,但明显低于模型对照组(P<0.05),白花九里明低浓度组、中浓度组、高浓度组ALT组间两两比较差异无统计学意义,但明显低于正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组(P<0.05).正常对照组肝细胞形态结构清晰正常,肝索排列规则,肝血窦清晰,中央静脉管内仅见少许血细胞;模型对照组肝细胞数量明显减少、体积及胞核明显增大,肝细胞内出现大小不一的脂肪空泡且一些融合成大空泡呈现脂肪变性,肝索明显紊乱,肝血窦少而小,中央静脉管明显充血;辛伐他汀组、白花九里明低浓度组肝细胞数量无明显减少、体积及胞核稍增大,肝细胞内脂肪空泡呈现脂肪变性程度明显小于模型对照组,肝索排列紊乱,肝血窦明显可见,中央静脉管未见充血;白花九里明中浓度组、高浓度组肝细胞数量、体积和胞核与正常对照组比较无明显差别,肝细胞内无明显的脂肪空泡,肝索排列较规则,肝血窦清晰,中央静脉管不充血;白花九里明中浓度组的结构形态比低浓度组更接近正常对照组;白花九里明高浓度组结构形态与正常对照组相似.结论 高脂摄食可导致高脂血症和肝细胞脂肪变性,危害肝组织结构和功能.白花九里明具有降血脂、促进蛋白合成、干预性维护肝组织结构和功能的作用,高浓度白花九里明干预脂肪肝形成的护肝效果优于辛伐他汀.     

壮药白花九里明提取液对小鼠心电图的影响

目的探讨壮药白花九里明提取液对小鼠心电图的影响。方法取40只小鼠,随机均分为4组。正常对照组(给予0.9%NaCl注射液),普萘洛尔组(给予0.40 mg·ml-1普萘洛尔),白花九里明低剂量组和高剂量组(分别给予200、400mg·ml-1白花九里明提取液)每天灌胃1次,7d后用心电图机检测各组小鼠的心率、P波、QRS波、PQ间期。结果白花九里明低浓度组的心率与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),白花九里明高浓度组的心率明显慢于正常对照组和白花九里明低浓度组。白花九里明低浓度组和高浓度组的P波时限与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),P波振幅明显小于正常对照组(P<0.05),白花九里明低浓度组的QRS波振幅明显小于正常对照组(P<0.05),白花九里明低浓度组和高浓度组的P波时限、QRS波时限、PQ间期与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论白花九里明具有减慢心率、降低P波和QRS波振幅的作用。     

白花九里明提取液对血糖及糖耐量试验的影响

目的探讨白花九里明对小鼠血糖浓度及糖耐量试验的影响。方法取KM小鼠60只,按血糖浓度随机分为6组。正常对照组(给予0.9%Na Cl注射液),糖耐量对照组(给予0.9%Na Cl注射液),二甲双胍组(给予盐酸二甲双胍20 mg/ml),白花九里明高、中、低浓度组(分别给予1.0、0.5、0.25 g/ml的白花九里明提取液),每天灌胃1次(灌胃量按鼠重10 ml/kg计算)共15 d。末次灌胃后30 min检测各组小鼠血糖浓度紧接着进行糖耐量试验,除正常对照组小鼠给予0.9%Na Cl注射液灌胃外,其余各组小鼠给予葡萄糖注射液0.25 g/ml灌胃(灌胃量按鼠重10 ml/kg计算),检测30 min、60 min的血糖浓度。结果糖耐量试验对照组、白花九里明低浓度组的血糖浓度与正常对照组比较无统计学意义(P>0.05),二甲双胍组的血糖浓度明显低于正常对照组(P<0.05),白花九里明中浓度组和高浓度组的血糖浓度明显高于正常对照组和白花九里明低浓度组(P<0.05),白花九里明中浓度组与高浓度组的血糖浓度比较无统计学意义(P>0.05)。糖耐量试验30 min:糖耐量试验对照组的血糖浓度明显高于正常对照组(P<0.05),除正常对照组外,其余各组血糖浓度均明显高于糖耐量试验前(P<0.05或0.01)。糖耐量试验60 min:各组血糖浓度与糖耐量试验前比较均无统计学意义(P>0.05)。结论白花九里明用量高达一定浓度时可升高血糖,但不影响机体的糖耐量。     

猪、熊胆粉主要成分对ECV304细胞缺氧损伤保护作用的比较

目的　比较猪胆粉与熊胆粉中胆酸类主要成分对细胞缺氧损伤保护作用的差别 ,为猪胆粉替代熊胆粉用于中风病治疗提供实验依据。方法　培养的ECV30 4细胞 ,用连二亚硫酸钠造成缺氧损伤 ,并分别以MTT比色法、LDH漏出率和台盼蓝染色法进行检测 .比较猪胆粉与熊胆粉中胆酸类主要成分对细胞缺氧损伤保护作用的差别。结果　应用连二亚硫酸钠造成ECV30 4细胞明显损伤 ,而猪去氧胆酸、牛磺熊去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸钠均使ECV30 4细胞的缺氧损伤明显减轻 ,与对照组间有显著差异 ,但三组间没有明显差别。结论　猪去氧胆酸对ECV30 4细胞缺氧损伤具有与牛磺熊去氧胆酸相类似的保护效应 ,提示猪胆粉可替代价格昂贵的熊胆粉用于中风病的治疗。     

壮药白花九里明对高血压大鼠模型的心血管功能保护作用的实验研究

目的 探讨白花九里明对高血压大鼠模型的心血管功能保护作用.方法 将SD大鼠48只随机均分为正常对照组和高血压模型组、替米沙坦组及白花九里明低、中、高浓度组,每组8只大鼠,每天灌胃一次,灌胃量按大鼠体重10 mL/kg计算,连续7天;同时,正常对照组给予0.9％氯化钠注射液,其余各组给予5 mg/mL地塞米松注射液,每天...     

白花九里明与滇桂艾纳香的薄层色谱对比研究

[目的]探讨白花九里明与滇桂艾纳香二者化学成分的异同。[方法]采用薄层色谱法对白花九里明与滇桂艾纳香进行薄层色谱的比较研究。[结果]白花九里明与滇桂艾纳香的薄层色谱在相应的位置上显相同颜色的斑点。[结论]白花九里明与滇桂艾纳香可能含有相似的成分。     

低浓度葡萄糖诱导ECV304细胞损伤机制的初探

目的 探讨低浓度葡萄糖对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞损伤的可能机制.方法 以人脐静脉内皮细胞株ECV304为细胞模型,用低浓度葡萄糖刺激ECV304细胞,流式细胞仪测定12h内不同时间点细胞ROS产量,之后用低浓度葡萄糖及NADPH氧化酶抑制剂apocynin联合刺激ECV304细胞12 h,用流式细胞仪测定ROS产量,MTT法测定细胞活力,光泽精化学发光法测定NADPH氧化酶活性.结果 低浓度葡萄糖能够显著增加ECV304细胞ROS产量,ROS产量具有时间依赖性和葡萄糖浓度依赖性,低糖能增加NADPH氧化酶的活性.用NADPH氧化酶抑制剂apocynin预处理细胞,能使2.8mmol/L组活性氧产量降低44%,细胞活力提高32%,0mmol/L组活性氧产量降低60%.结论 低糖可以显著增高ECV304细胞氧化应激水平而参与内皮细胞损伤,其部分机制可能与NADPH氧化酶激活有关.     

白花九里明提取液对小鼠出血时间、凝血时间和血小板数量的影响

目的 观察白花九里明对小鼠出血时间(BT)、凝血时间(CT)和血小板数量(Plt)的影响.方法 取40只小鼠,随机均分为正常对照组、酚磺乙胺组、白花九里明低剂量组和高剂量组.正常对照组给予生理盐水,酚磺乙胺组给予酚磺乙胺40 mg/mL,白花九里明低剂量组和高剂量组分别给予白花九里明提取液150和300 mg/mL灌胃;均按小鼠的体重计算灌胃量0.01 mL/(g·d).分别检测各组小鼠给药前的BT、CT,用药10 d后的BT、CT和Plt.结果 酚磺乙胺组、白花九里明低剂量组和高剂量组的BT和CT都明显小于给药前及正常对照组(P<0.05,P<0.01),Plt明显高于正常对照组(P<0.05,P<0.01);白花九里明高剂量组的BT明显小于酚磺乙胺组(P<0.05);BT和CT随着白花九里明用量增加而缩短,BT缩短率、CT缩短率、Plt均随着白花九里明剂量增加而增加(P<0.05,P<0.01).结论 白花九里明能缩短BT和CT,提高BT缩短率、CT缩短率和Plt,这些效应存在一定的量效关系;白花九里明高剂量的止血效果优于酚磺乙胺.     

白花九里明提取液对肺损伤小鼠肺组织超氧化物歧化酶、丙二醛表达的影响

目的探讨白花九里明提取液对肺损伤小鼠肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛表达的影响。方法将60只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、氨溴索组以及白花九里明低、中、高浓度组,各10只。正常对照组和模型对照组给予生理盐水灌胃,氨溴索组给予盐酸氨溴索溶液灌胃,白花九里明低、中、高浓度组分别给予150 mg/mL、300 mg/mL、600 mg/mL的白花九里明提取液灌胃。在灌胃30 min后,正常对照组给予生理盐水腹腔注射,其余组给予0.2%四氯化碳腹腔注射。灌胃每天1次,腹腔注射隔天1次,共30 d。末次灌胃30 min后取肺组织制成肺悬液,检测肺悬液SOD活性、MDA含量。结果模型对照组的SOD活性低于其他5组(均P<0.05),但其他组间两两比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。模型对照组的丙二醛含量高于其他5组,白花九里明低浓度组、中浓度组的丙二醛含量均高于正常对照组(均P<0.05),而其他组间两两比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论白花九里明可提高肺组织细胞的SOD活性、抵抗自由基对肺组织的攻击,具有保护肺组织的作用。     

白花九里明提取液对小鼠血压、心率和血清一氧化氮、内皮素－1浓度的影响

目的：观察白花九里明提取液对小鼠血压、心率以及血清一氧化氮（ NO）、内皮素－1（ ET－1）浓度的影响,初步分析白花九里明对心血管系统影响及其机制。方法取50只小鼠,随机均分为5组,正常对照组给予0．85％NaCl注射液,美托洛尔组给予0．3 mg／mL美托洛尔溶液,替米沙坦组给予0．5 mg／mL替米沙坦溶液,白花九里明低浓度组和高浓度组分别给予150 mg／mL和300 mg／mL白花九里明提取液,灌胃每天1次,共14 d。末次灌胃20 min测量小鼠血压和心率后,摘除眼球取血,检测血清NO、ET－1浓度。结果白花九里明低浓度组的收缩压、舒张压、心率和血清NO、ET－1浓度与正常对照组比较差异无统计学意义（ P＞0．05）。白花九里明高浓度组的收缩压和舒张压均明显低于正常对照组和白花九里明低浓度组（P＜0．05,P＜0．01）,但与替米沙坦组差异无统计学意义（P＞0．05）;白花九里明低浓度组、替米沙坦组的心率与正常对照组差异无统计学意义（P＞0．05）,美托洛尔组的心率明显低于正常对照组（P＜0．01）,白花九里明高浓度组的心率明显低于替米沙坦组（P＜0．01）而与正常对照组和美托洛尔组差异无统计学意义（ P＞0．05）。血清NO浓度：仅有白花九里明高浓度组明显高于正常对照组（P＜0．05）,其余组间比较差异无统计学意义（P＞0．05）;血清ET－1浓度：仅有白花九里明高浓度组和替米沙坦组明显低于正常对照组（P＜0．05,P＜0．01）,其余组间比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论白花九里明达到一定用量能降低动脉血压,但对心率没有明显影响,其降压作用可通过减少心搏出量和降低外周阻力来实现。     

hnRNP-E2 RNA诱骗对人脐静脉内皮细胞ECV304表型的影响

目的观察hnRNP-E2 RNA诱骗技术是否对人脐静脉内皮细胞ECV304表型有影响。方法用脂质体2000介导hnRNP-E2 RNA decoy野生序列pGhnRNP-C/EBPa-W质粒(简称PGW)和突变序列pGhnRNP-C/EBPa-M质粒(简称PGM)进入32Dp210细胞,随后在规定时间测定三类细胞的生长曲线、生长周期、凋亡。结果三类细胞的表型没有明显的改变(P0.05),hnPNP-E2 RNA对ECV304细胞表型没有影响。结论 RNA decoy技术对于正常的细胞表型无明显影响,这也许可以提示这类技术在用于肿瘤基因治疗中对正常细胞相对是比较安全的。     

姜黄素抑制ECV304细胞增殖及对基质金属蛋白酶2表达的影响

目的:探讨姜黄素对人脐静脉内皮细胞(ECV304)的作用以及对ECV304表达的基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响。方法:采用MTT法,台盼蓝染色法测定姜黄素对ECV304的量效关系和时效关系,Giemsa染色观察姜黄素对ECV304的抑制作用;通过RT-PCR检测姜黄素作用ECV304后MMP-2 mRNA表达,明胶酶谱法检测MMP-2的活性,免疫组化检测细胞MMP-2表达。结果:姜黄素对ECV304的抑制作用呈浓度依赖性和时间依赖性,Giemsa染色显示浓度为8μg/mL和10μg/mL的姜黄素可诱导ECV304凋亡,凋亡率分别是21.6%和34.7%;在10μg/mL姜黄素作用24 h下,MMP-2的mRNA显著减少,其分解明胶的活性也显著降低,免疫组化显示与阴性对照组相比内皮细胞MMP-2表达减少。结论:姜黄素能够抑制血管内皮细胞的生长、降低血管内皮细胞MMP-2的表达。     

亚硒酸钠对H2O2氧化损伤PC12细胞的保护性作用

目的 研究亚硒酸钠对H2O2损伤PC12细胞的保护性作用.方法 培养PC12细胞,加入亚硒酸钠,使其终浓度为0、0.5、1、5、8、10、20、50和150μg/mL,测定PC12细胞活力,选择不影响PC12细胞生长活性的亚硒酸钠浓度作为干预浓度,然后将细胞分为:正常对照组、损伤(+H2O2)组和亚硒酸钠保护组(+Na2SeO3+H2O2)组,采用甲基四唑蓝比色法(MTT)和流式细胞仪检测研究亚硒酸钠对H2O2氧化损伤PC12细胞的影响.结果 ①0.5μg/mL的亚硒酸钠对PC12细胞无抑制(P＞0.05),随着浓度增大对PC12细胞的抑制率也增加(P＜0.05).②0.5μg/mL亚硒酸钠可以增强PC12细胞的抗H2O2氧化损伤的能力,提高细胞的生存率(P＜0.05).③经H2O2处理后,加入亚硒酸钠保护的细胞早期和晚期凋亡率较损伤组细胞有明显下降(P＜0.05).结论 0.5μg/mL的亚硒酸钠对PC12细胞具有抗H2O2氧化损伤的保护性作用.     

姜黄素对H_2O_2诱导人黑素细胞氧化应激损伤的预保护作用

目的:探讨姜黄素激活Nrf2对人黑素细胞免受H_2O_2诱导氧化应激损伤的预保护作用。方法:利用不同浓度的H_2O_2(50、100、200μmol/L)处理人黑素细胞24h,MTT检测细胞活性,筛选H_2O_2体外诱导人黑素细胞氧化应激的最适浓度;进一步使用10μmol/L的姜黄素预处理细胞2h后,使用最适浓度H_2O_2刺激24h。MTT检测细胞活性,DCFH-DA流式检测细胞内活性氧(ROS)含量,Real-time PCR测定Nrf2、Ho-1、Sod1、Cat的mRNA表达水平,Western blot检测Nrf2蛋白表达。结果:100μmol/L的H_2O_2处理人黑素细胞24h后细胞活性显著降低,10μmol/L的姜黄素预处理2h后,人黑素细胞活性显著增强,流式检测结果显示细胞内ROS含量显著降低,Western blot检测结果显示Nrf2蛋白表达增加,Real-time PCR结果提示Nrf2、Ho-1、Sod1、Cat的mRNA表达水平显著增强。结论:姜黄素保护人黑素细胞免受H_2O_2诱导氧化应激损伤的过程中激活了Nrf2信号通路,提示Nrf2是白癜风氧化应激致病机制中的关键分子,为临床治疗白癜风提供了一种思路。     

藏药八味沉香散对H_2O_2所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用

目的探讨八味沉香散对过氧化氢（H2O2）所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法 SD乳鼠心肌细胞原代培养,H2O2诱导心肌细胞氧化应激损伤,用不同剂量藏药八味沉香散处理24 h后,测定培养液中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、过氧化氢酶（CAT）的含量;同时检测培养液中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性。结果八味沉香散可明显减轻H2O2所致乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK和CAT的释放量,同时能够升高SOD、GSH-Px活性,降低MDA活性。结论八味沉香散对H2O2所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤有明显保护作用。     

茶多酚对 H2O2 诱导 PC12 细胞损伤的保护作用

目的 研究茶多酚 (tea polyphenols, TP) 对H2O2 所致大鼠嗜铬细胞 PC12 细胞损伤的保护作用。 方法PC12细胞用 TP 及H2O2 处理,MTT 法观察细胞活力,乳酸脱氢酶 (LDH) 法检测细胞膜通透性及完整性,流式细胞术测定细胞周期分布,BrdU 免疫荧光法检测细胞周期相S期 DNA 合成。 结果 500 μmol/L H2O2作用 PC12 细胞 2 h,细胞出现明显损伤,细胞活力下降,培养上清液中 LDH 量增加,DNA 合成减少;5、10、20 μmol/L TP 预处理可有效提高细胞存活率,减少 LDH 渗漏,提高S期 DNA 合成。 结论 TP 对H2O2所致的 PC12 细胞损伤有保护作用。