灯盏花素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨灯盏花素（erigeron breviscapus）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 SD大鼠45只随机分为假手术组、缺血再灌注组和灯盏花素组。分别检测各组大鼠肝脏缺血60分钟,再灌注120分钟时血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子α（TNF－α）水平,以及肝组织中超氧化物岐化酶（SOD）活性和bcl－2蛋白表达的变化;并观察肝脏病理组织学改变。结果与假手术组比较,缺血再灌注组血清中ALT、AST、TNF－α含量显著增加,肝组织SOD活性显著降低（均P＜0．05）;与缺血再灌注组比较,灯盏花素组血清中ALT、AST、TNF－α含量显著降低（均P＜0．05）,但SOD活性及bcl－2蛋白表达增加（均P＜0．05）。灯盏花素组肝脏炎症反应较缺血再灌注组明显减轻。结论灯盏花素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与其增强SOD活性和上调bcl－2蛋白表达有关。     

舒芬太尼预处理对大鼠肠缺血再灌注肝损伤的影响及阿片受体的介导作用

  目的　探讨舒芬太尼对大鼠肠缺血再灌注肝细胞凋亡、bcl-2、Bax表达的影响及阿片受体的介导作用。方法　成年健康Wistar大鼠72只,体质量200～250 g,雌雄不限,随机分为9组,每组8只：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、舒芬太尼预处理组（SPC组）、δ受体阻断剂组（NTD组）、μ受体阻断剂组（CTOP组）、κ受体阻断剂组（nor-BNI组）、3种阿片受体阻断剂干预组（NTD+SPC组、CTOP+SPC组、nor-BNI+SPC组）。通过夹闭肠系膜上动脉制作肠缺血再灌注损伤（IIRI）模型,实验结束后即刻取肝左叶做标本。用免疫组织化学法检测bcl-2、Bax蛋白表达,末端转移酶标记技术（TUNEL）法检测肝细胞凋亡指数（AI）。结果　与IR组相比,SPC组bcl-2表达升高（0.277±0.014比0.230±0.013）（P＜0.05）、bcl-2／Bax 比值升高（1.375±0.113比0.819±0.102）（P＜0.05）,Bax表达下调（0.202±0.013比0.283±0.025）（P＜0.05）,肝细胞AI降低（6.491±1.191比10.094±1.051）（P＜0.05）。与SPC组比较,NTD+SPC组、nor-BNI+SPC组、CTOP+SPC组bcl-2表达降低（F＝59.698,P＜0.05）,bcl-2／Bax 比值降低（F＝40.349,P＜0.05）,Bax表达升高（F＝53.765,P＜0.05）,肝细胞AI升高（F＝76.728,P＜0.05）。结论　舒芬太尼预处理可抑制大鼠肠缺血再灌注时肝细胞凋亡,δ、κ、μ3种阿片受体介导了舒芬太尼的保护且作用相当。     

甲基泼尼松龙对急性期脊髓损伤bcl-2等凋亡基因的影响

【摘要】目的观察甲基泼尼松龙（methylprednisolone,MP）干预对急性期脊髓损伤凋亡相关基因bcl-2、bax、cytc和caspass-9相对表达量的影响,并探讨该药物促进脊髓功能修复的机制。方法实验动物随机分为假手术组（s组）、单纯损伤组（c组）与MP治疗组（T组）各36只,采用改良Allen’s法制作急性脊髓损伤模型,在损伤后8h、24h、3天、7天、14天和28天随机取各组6只动物处死,实时荧光定量PCR测量标本的ACt值并进行分析。结果T组bcl-2基因ACt值均小于C组,差异有统计学意义（P〈0．05）;bax基因在T组术后3天、14天和28天ACt值大于c组,差异有统计学意义（P〈0．05）,T组8h、24h和7天三个时间点ACt值与C组,差异无统计学意义（P〉O．05）;T组cytc基因ACt值大于c组,差异有统计学意义（P〈0．05）;T组caspass-9基因ACt值大于c组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论甲强龙可以通过bcl-2、cytc及caspass-9的表达起到保护受伤节段脊髓的作用。     

G-CSF对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的 通过观察粒细胞集落刺激因子（G-CSF）对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨其对脊髓损伤的保护机制.方法 32只Wistar大鼠采用改良的Alien＇s装置在T11水平制成大鼠脊髓损伤模型,随机分成2组：对照组和G-CSF治疗组.在术前及术后各时间点对大鼠进行Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）评分评价大鼠后肢神经功能恢复情况;用免疫荧光法检测脊髓损伤后各时间点Bcl-2、Bax蛋白表达;Tunel法检测凋亡细胞数量.结果 大鼠脊髓损伤后3d,在脊髓损伤部位可见大量的TUNEL阳性细胞,7d时达到高峰,此后表达量逐渐下降,21d时仍可见少量阳性细胞;损伤后3d时即出现大量Bcl-2和Bax阳性细胞,伤后7d时达高峰,21d时仍有少量表达.与对照组相比,治疗组3、7和14d时Bcl-2蛋白表达增高及Bax蛋白表达减少有统计学意义（P〈0.01）;治疗组3、7、14（P〈0.01）和21d（P〈0.05）时凋亡细胞数减少有统计学意义;BBB评分显示大鼠神经功能恢复显著优于对照组.结论 G-CSF可以减少大鼠脊髓损伤后的神经细胞凋亡,从而发挥神经保护作用;作用可能是通过上调Bcl-2和下调Bax蛋白的表达实现.     

小干扰RNA靶向MIF对胃癌细胞SGC 7901增殖和凋亡的影响#br#

目的探讨靶向巨噬细胞移动抑制因子（MIF）的小干扰RNA（siRNA）对胃癌细胞SGC 7901增殖和凋亡的影响。 方法取对数生长期的SGC 7901细胞,采用脂质体法分别转染靶向人MIF的siRNA（siMIF组）或阴性对照序列（NC组）,48 h后采用Western blotting检测MIF蛋白的表达情况,MTT法观察转染后24、48、72 h的细胞增殖情况,流式细胞仪检测转染后72 h的细胞凋亡率,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl 2和Bax的表达变化。 结果siMIF组转染48 h后的MIF相对表达量为0321±0104,低于NC组的1078±0212,差异有统计学意义（P＜005）。siMIF组转染48～72 h后的细胞增殖率低于NC组,差异有统计学意义（P＜005）。转染MIF siRNA 72 h后,siMIF组的细胞凋亡率为（235±36）％,高于NC组的（47±17）％,差异有统计学意义（P＜005）。siMIF组Bcl 2的相对表达量为0663±0209,低于NC组的1129±0178,而Bax相对表达量为0981±0225,高于NC组的0587±0254,以上差异均有统计学意义（P＜005）。 结论siRNA靶向沉默MIF能够降低SGC 7901细胞中MIF蛋白表达,抑制SGC 7901细胞的增殖并促进凋亡,在胃癌的靶向治疗中有一定前景。     

小干扰RNA靶向MIF对胃癌细胞SGC 7901增殖和凋亡的影响#br#

目的探讨靶向巨噬细胞移动抑制因子（MIF）的小干扰RNA（siRNA）对胃癌细胞SGC 7901增殖和凋亡的影响。 方法取对数生长期的SGC 7901细胞，采用脂质体法分别转染靶向人MIF的siRNA（siMIF组）或阴性对照序列（NC组），48 h后采用Western blotting检测MIF蛋白的表达情况，MTT法观察转染后24、48、72 h的细胞增殖情况，流式细胞仪检测转染后72 h的细胞凋亡率，Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl 2和Bax的表达变化。 结果siMIF组转染48 h后的MIF相对表达量为0321±0104，低于NC组的1078±0212，差异有统计学意义（P＜005）。siMIF组转染48～72 h后的细胞增殖率低于NC组，差异有统计学意义（P＜005）。转染MIF siRNA 72 h后，siMIF组的细胞凋亡率为（235±36）％，高于NC组的（47±17）％，差异有统计学意义（P＜005）。siMIF组Bcl 2的相对表达量为0663±0209，低于NC组的1129±0178，而Bax相对表达量为0981±0225，高于NC组的0587±0254，以上差异均有统计学意义（P＜005）。 结论siRNA靶向沉默MIF能够降低SGC 7901细胞中MIF蛋白表达，抑制SGC 7901细胞的增殖并促进凋亡，在胃癌的靶向治疗中有一定前景。     

脊髓缺血再灌注损伤的发病特点与治疗

目的：通过临床资料分析探讨脊髓缺血再灌注损伤（spinalcordischemia-reperfusioninjury, SCII）的发病特点及治疗。方法回顾性分析2003年1月至2013年9月,我院脊柱外科发生的6例SCII临床资料,年龄56～78（63＆#177;3.5）岁,6例均于术后2h内出现SCII,收集资料并对病史特点、治疗及预后进行客观分析。结果6例脊髓减压术后1～2h脊髓功能呈进行性丧失,发生SCII后立即给予大剂量甲泼尼松龙、脱水、营养神经类药物使用后脊髓功能逐渐恢复,术后14～24天脊髓功能恢复正常。结论脊髓缺血再灌注损伤好发于中老年颈胸段,损伤程度可能与脊髓生理解剖特点、脊髓压迫程度、范围、时间以及围手术期治疗相关。其诊断需要结合病史、临床症状及影像学资料,缺一不可。SCII发生后甲泼尼松龙的治疗是有效的。     

三氧化二砷抑制淋巴瘤细胞株血管内皮生长因子表达的研究

 目的　探讨三氧化二砷（ATO）对人类淋巴瘤细胞株内血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法　应用实时荧光定量聚合酶链（Real-time PCR）技术及酶联免疫吸附（ELISA）法检测ATO作用前后淋巴瘤细胞株Raji及Jurkat内VEGF基因及其蛋白表达量的变化。结果　在ATO诱导淋巴瘤细胞株凋亡过程中,两种细胞未经ATO处理前均高表达VEGF mRNA（Raji加药2 μmol／L 12 h△△Ct值0.75±0.15,Jurkat加药3.5 μmol／L 72 h△△Ct值1.67±0.13）及VEGF蛋白（加药12 h,Raji 198.38±4.37;Jurkat 563.11±3.81）,且Jurkat细胞较Raji细胞的VEGF蛋白的表达量高;经ATO作用24、48、72 h后VEGF的mRNA表达量均较加药前明显减少（加药72 h△△Ct值,Raji：8.95±0.38;Jurkat：9.09±0.16）,差异有统计学意义（t＝3.54,P＜0.01;t＝3.65,P＜0.01）;同时蛋白表达量也较加药前明显减少（加药72 h,Raji：23.55±2.06;Jurkat：57.11±3.88）,差异有统计学意义（t＝2.48,P＜0.05;t＝2.59,P＜0.05）,且两者与药物作用时间明显相关,各时间点之间蛋白表达量差异均有统计学意义（F＝2.47,P＜0.05;F＝2.50,P＜0.05）。结论　ATO通过阻断淋巴瘤细胞生长所需的血管条件,从而抑制淋巴瘤细胞的增殖。     

鞘内注射Quinpirole对骨癌痛大鼠镇痛及脊髓小胶质细胞活化的影响

目的 探讨鞘内注射Quinpirole（QNP）对骨癌痛大鼠镇痛及脊髓小胶质细胞活化的影响。方法 选取健康成年雄性SD大鼠60只通过胫骨骨髓腔内注射Walker256乳腺癌细胞液制备骨癌痛模型。将骨癌痛大鼠随机分为高剂量10μg/kg QNP（QNP-H）、低剂量5μg/kg QNP（QNP-L）及生理盐水（NS）3组,每组20只;QNP采用每日鞘内注射方式,注射体积为10μl。选取20只同周龄大鼠作对照（C）,NS组和C组仅给予等体积生理盐水。分别于治疗前、治疗1、3、5、7d后对各组进行行为学检测,分析以上观察时间点大鼠的机械缩足阈值（MWT）和缩足热潜伏期（WTL）;采用免疫组化法检测脊髓离子钙接头蛋白分子 1（Iba-1）染色以及特异表达补体C3受体（OX-42）和大麻素受体2（CB2）的荧光积分光密度（IOD）;酶联免疫吸附法检测脊髓肿瘤坏死因子（TNF）-α和白介素（IL）-1β水平;Western blotting检测脊髓Toll样受体-4（TLR-4）及受体-2（TLR-2）蛋白表达水平。结果 与C组相比,其余3组各观察时间点的MWT、WTL降低;Iba-1染色程度、OX-42和CB2的IOD、脊髓TNF-α和IL-1β水平、TLR-4和TLR-2水平均升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。在骨癌痛大鼠模型中,QNP-H组、QNP-L组在上述指标与NS组的差异均有统计学意义（P＜0.05）;且QNP-H组均优于QNP-L组（P＜0.05）。结论 鞘内注射QNP对骨癌痛大鼠有较好的镇痛作用,同时可降低脊髓小胶质细胞活化及炎症反应。     

氧驱动雾化吸入对缓解甲状腺癌术后咽喉部损伤效果评价

目的：观察氧驱动雾化吸入对改善全身麻醉气管插管甲状腺癌患者术后咽喉部急性损伤的疗效。方法将2012年1月至2014年3月江苏省肿瘤医院头颈外科140例拟行气管插管全身麻醉的甲状腺癌患者随机分为 A 组（n ＝60,予以术前24h ～术后72 h 内行雾化吸入）、B 组（n ＝60,仅术后72 h 内行雾化吸入）和 C 组（n ＝20,不予雾化吸入）。观察各组患者术后咽喉部症状以评价疗效。结果A 组术后痰阻及咽痛症状显著少于 B、C 组（P ＜0．05）,黏膜反应差异也有统计学意义（P ＜0．05）,咽干、声嘶症状差异不明显（P ＞0．05）。结论甲状腺癌手术前进行氧驱动雾化吸入能更有效减轻患者术后的咽喉部损伤症状。     

异隐丹参酮对胃癌细胞增殖、周期和凋亡的影响

目的 探讨异隐丹参酮（ICTS）对胃癌BGC-823和SGC-7901细胞增殖、周期、凋亡的影响及可能机制。方法 体外培养胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901,采用0、5、10、20 μmol／L ICTS处理24、48、72 h后, CCK-8法检测细胞的增殖抑制率;确定ICTS抑制BGC-823和SGC-7901细胞的最佳浓度和最佳作用时间后,流式细胞术检测其细胞周期和凋亡率。Western blotting检测ICTS处理后胃癌细胞中Cyclin D1、Bcl-2、p53、p21蛋白的表达。结果 0、5、10、20 μmol／L ICTS处理BGC-823细胞24 h的增殖抑制率分别为（0.789±0.048）％、（16.74±1.55）％、（33.58±2.26）％、（54.62±2.61）％,差异具有统计学意义（P＜0.05）;0、5、10、20 μmol／L ICTS 处理SGC-7901细胞24 h的增殖抑制率分别为（-0.184±0.023）％、（12.76±1.73）％、（32.95±2.47）％、（53.80±2.65）％,差异具有统计学意义（P＜0.05）。20 μmol／L ICTS 处理BGC-823细胞24、48、72 h的增殖抑制率分别为（54.62±2.61）％、（55.08±2.35）％、（59.72±2.53）％,差异无统计学意义（P＞0.05）;20 μmol／L ICTS 处理SGC-7901细胞24、48、72 h的增殖抑制率分别为（53.80±2.65）％、（55.76±2.47）％、（61.83±2.82）％,差异无统计学意义（P＞0.05）。20 μmol／L ICTS处理BGC-823、SGC-7901细胞24 h后G0／G1期细胞比例为（78.34±7.13）％和（79.57±7.34）％,均高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。ICTS处理组BGC-823、SGC-7901凋亡率分别为（24.78±3.42）％和（28.76±4.21）％,均高于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。20 μmol／L ICTS处理BGC-823、SGC-7901细胞24 h后Cyclin D1和Bcl-2蛋白表达量均显著低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;p53和p21蛋白表达量显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 ICTS通过增加p53、p21表达,降低Cyclin D1和Bcl-2表达,进而抑制细胞增殖,增加细胞G0／G1阻滞和凋亡,发挥抗胃癌的作用。     

磁性纳米铁联合多柔比星对Raji细胞的影响

 目的　观察干扰素α（IFN-α）对恶性造血细胞系主要组织相容性复合体（MHC）Ⅰ类链相关蛋白A（MICA）表达的影响。方法　反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肿瘤细胞MICA mRNA的表达,免疫组织化学法检测MICA蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测人类外周血自然杀伤（NK）细胞对肿瘤细胞的杀伤。结果　人类慢性髓系白血病细胞K562 MICA表达阳性,人类伯基特淋巴瘤细胞Raji MICA表达阴性。Raji和K562细胞分别在1000 U／ml IFN-α诱导24 h（t＝17.016,P＜0.05）和48 h（t＝5.616,P＜0.05）时MICA mRNA开始表达上调。72 h Raji细胞和K562细胞分别在500 U／ml（t＝6.622,P＜0.05）和1000 U／ml（t＝9.071,P＜0.05）诱导条件下MICA mRNA表达开始上调。IFN-α对MICA mRNA表达的上调作用呈一定时间和剂量依赖关系,且蛋白与mRNA表达水平一致。1000 U／ml IFN-α诱导72 h后,Raji细胞（t＝20.016,P＜0.05）和K562细胞（t＝7.969,P＜0.05）对NK细胞杀伤的敏感性明显上调,抗MICA抗体封闭MICA后,NK细胞对Raji细胞杀伤率恢复至诱导前水平（t＝0.393,P＞0.05）,而K562细胞则低于诱导前水平（t＝9.841,P＜0.05）。结论　IFN-α上调了恶性造血细胞中MICA 基因的转录表达,继而增强了NK细胞对其识别与杀伤。     

肺外科中肺缺血-再灌注损伤特点的实验研究

背景与目的肺血管阻断术是局部晚期中央型肺癌外科治疗中常采用的方法,包括单纯肺动脉阻断和单侧肺循环阻断。然而,肺血管的阻断与再通必然会导致肺的缺血-再灌注损伤。本研究通过建立兔左侧肺血管的阻断及再开放动物模型,探讨肺外科中肺缺血-再灌注损伤的特点,为临床肺血管阻断术提供实验基础。方法114只健康新西兰兔,随机分成3组:Ⅰ组为对照组(n=42);Ⅱ组为单纯左侧肺动脉阻断组(n=36);Ⅲ组为左侧肺循环阻断组(n=36)。术中监测动物血流动力学指标;分别于开胸时(Ⅰ组)、缺血1h和再灌注1h、2h、4h、6h、24h检测左肺静脉动脉血氧分压;检测肺组织中MDA含量;取肺组织作病理学观察;并测定手术侧肺湿/干重比。结果各组动物术中血流动力学指标平稳;在缺血1h和再灌注1h、2h、4h、6h,Ⅰ组与Ⅱ、Ⅲ组相比,血氧分压、肺湿/干重比及肺组织中MDA含量的差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),Ⅲ组与Ⅱ组相比,均无统计学差异(P>0.05);再灌注24h后,三组相比,无统计学差异(P>0.05);在相同的时间点,Ⅱ、Ⅲ组呈现相似的肺损伤病理改变,且较为明显的肺损伤出现在再灌注4h,再灌注6h肺损伤均呈恢复趋势,再灌注24h肺损伤大致恢复正常。结论肺外科中,单侧肺循环阻断与单纯肺动脉阻断1h后再开放所致肺缺血-再灌注损伤改变相似,且均是可逆的,1h的阻断时限对于患侧肺是安全的。     

右美托咪定对妇科腔镜手术CO2气腹肠损伤的影响

目的:探讨右美托咪定（DEX）对妇科腹腔镜手术CO2气腹过程中肠损伤的影响。方法:选取拟在全麻下行腹腔镜下子宫肌瘤剔除术的多发子宫肌瘤患者40例,按随机数字表法分为实验组和对照组,每组各20例,对照组常规行静脉麻醉诱导和维持;实验组常规麻醉诱导前给予DEX负荷剂量0.5 μg/kg（10 min内输注完毕）,常规行静脉麻醉诱导,DEX改为维持剂量0.2 μg/(kg·h)直至手术结束,在麻醉诱导前10 min（T1）,气腹解除后1 h（T2）,气腹解除后24 h（T3）分别取两组患者的静脉血,测定血清中紧密连接蛋白claudin-1和二胺氧化酶（DAO）含量,观察比较两组患者claudin-1和DAO的变化规律以及使用DEX预处理后对claudin-1和DAO表达的影响。结果:对照组患者血清claudin-1含量T2、T3时刻低于T1时刻,差异具有统计学意义（P＜0.001）,DAO含量T2、T3时刻均大于T1时刻,差异具有统计学意义（P＜0.001）;实验组患者claudin-1和DAO含量在不同时间点比较差异无统计学意义,实验组患者claudin-1蛋白含量在T2、T3时刻均高于对照组患者T2、T3时刻蛋白含量（P＜0.05,P＜0.01）,实验组患者DAO含量在T2、T3时刻均低于对照组患者T2、T3时刻DAO含量（P＜0.001,P＜0.05）。结论:妇科腔镜手术CO2气腹会造成一定的肠损伤;DEX预处理后,通过上调肠上皮细胞claudin-1蛋白表达,增强肠上皮细胞屏障功能,使释放入血的DAO含量减少,说明DEX干预对CO2气腹造成的肠损伤具有一定的防治作用。     

二甲双胍抑制食管癌前病变中HIF-1α和p53的表达

目的:探讨HIF-1α(hypoxia-inducible factor-1α)和p53的表达在二甲双胍（Metformin）治疗食管癌前病变中的临床意义。方法:选取我院2018年9月-2020年6月经胃镜检查及病理活检确诊食管低级别上皮内瘤变患者60例以及同期诊断为正常食管黏膜的健康志愿者30例,根据治疗方法分为三组:A组:未予以二甲双胍治疗3个月（非二甲双胍组）30例;B组:予以二甲双胍治疗3个月（二甲双胍组）30例;C组:同期诊断为正常食管黏膜患者且未予以二甲双胍治疗3个月（健康对照组）30例。对三组治疗前后分别进行胃镜检查并于同一部位取病理行HE染色和HIF-1α、p53免疫组化染色检查。结果:治疗前A、B、C三组HIF-1α蛋白表达水平分别为:0.098±0.065、0.100±0.067、0.025±0.016,具有显著差异性（F=19.173,P＜0.05）;p53蛋白的表达水平分别为:0.199(0.051,0.361)、0.200(0.100,0.395)、0.010(0.004,0.085),具有显著差异性（H=33.496,P＜0.001）;其中A组HIF-1α、p53蛋白的表达水平显著大于C组（P＜0.05）,B组HIF-1α、p53蛋白的表达水平显著大于C组（P＜0.05）,但A组和B组的HIF-1α、p53蛋白的表达水平均没有显著差异（P＞0.05）。治疗后A,B,C三组HIF-1α蛋白表达水平分别为:0.110±0.064、0.032±0.008、0.026±0.015,具有显著差异性（F=44.951,P＜0.001）;p53蛋白的表达水平分别为:0.209(0.091,0.378)、0.104(0.017,0.170)、0.012(0.005,0.123),具有显著差异性（H=26.376,P＜0.001）;其中A组HIF-1α、p53蛋白的表达水平显著大于B组和C组（P＜0.05）,B组HIF-1α、p53蛋白的表达水平均稍大于C组,但B组和C组HIF-1α、p53蛋白的表达水平没有显著差异（P＞0.05）。治疗前后A、B、C三组组内比较:A组治疗后HIF-1α、p53表达水平有所升高,但差异无统计学意义（t=-0.536,P=0.596;Z=-1.142,调整后P＞0.05）;B组治疗后HIF-1α、p53的表达水平均明显下降,差异有统计学意义（t=5.313,P=0.000;Z=-4.330,调整后P＜0.05）;C组前后HIF-1α、p53的表达水平无明显变化,差异无统计学意义（t=-0.316,P=0.754;Z=-1.093,调整后P＞0.05）。结论:二甲双胍能够有效降低食管低级别瘤变组织中HIF-1α及p53蛋白的累积,进而可能对食管癌前病变进一步进展产生抑制作用,为临床食管癌前病变的干预治疗提供参考。     

婴儿型双歧杆菌对肠癌大鼠化疗性肠黏膜炎的影响

目的 探讨婴儿型双歧杆菌对肠癌大鼠化疗所致的肠道黏膜炎的疗效。方法 用皮下注射二甲基肼联合直肠黏膜种瘤造模方法建立肠癌大鼠模型41只,随机分为对照组（生理盐水）13只、化疗组（5-氟尿嘧啶+奥沙利铂）14只、双歧杆菌组（5-氟尿嘧啶+奥沙利铂+婴儿型双歧杆菌灌胃）14只,记录3组肠癌大鼠的腹泻、体重、绒毛高度、隐窝深度及促炎性细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α的水平。结果 41只大鼠中12只成功致瘤,对照组3只,化疗组5只,双歧杆菌组4只。在肠癌模型大鼠中,治疗72 h后,婴儿型双歧杆菌可以阻止由化疗引起的体重降低（P＜0.05）;减轻化疗后引起的腹泻次数（1.43±0.53 vs. 2.43±0.79,P＜0.050）;减轻由化疗所致的小肠黏膜炎症反应,使绒毛长度升高［379.37±53.80）μm vs. （335.33±89.54）μm,P＜0.05］,隐窝深度变浅［（219.22±38.05）μm vs. （331.24±69.24）μm,P＜0.05］;降低由化疗引起的肠道促炎性细胞因子IL-6、IL-1β水平的升高（P＜0.05）,亦可使TNF-α水平降低,但与化疗组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。而血浆中促炎性细胞因子水平的差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 婴儿型双歧杆菌可有效减轻肠癌大鼠化疗介导的黏膜炎。     

吴茱萸碱对急性放射性肠炎肠黏膜的保护作用及机制

目的:探讨吴茱萸碱对急性放射性肠炎疗效及对肠黏膜屏障保护的机制。方法:清洁级小鼠50只,随机分为正常组、模型组、吴茱萸碱预防加治疗组（简称预治组）、吴茱萸碱治疗组（简称治疗组）、思密达组。预治组提前灌胃给药1周。除正常组外的各组采用高能Ｘ射线照射,总剂量6Gy,建立急性放射性肠炎模型。照射后12ｈ连续灌胃给药1周。光学显微镜下观察及图像分析软件测定其相关形态学指标,并免疫组化法测定肠组织NF-κB p65蛋白活性,ELISA法测定肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。结果:各给药组小鼠肠组织隐窝深度、黏膜及全层壁厚度均显著高于模型组（P＜0.01）。NF-κB p65蛋白表达（P＜0.01）、TNF-α含量（P＜0.01）显著低于模型组。预治组好于治疗组和思密达组,差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗组与思、密达组比较差异没有统计学意义（P＞0.05）。结论:吴茱萸碱可明显升高放射性肠炎肠组织隐窝深度、黏膜及全层壁厚度,降低其NF-κB p65蛋白表达,降低TNF-α含量。吴茱萸碱上述作用与给药时机和时间相关,放射治疗前即开始预防性用药比单纯治疗给药保护肠黏膜的作用更强。     

缺血缺氧对黑色素瘤局部浸润的相关分子机制影响的初步研究

目的：研究缺血缺氧环境下肿瘤生长、血液供应模式及浸润转移相关蛋白表达的变化。方法：建立小鼠缺血后肢黑色素瘤移植瘤模型,观察缺血环境下的肿瘤生长情况,计数各种血液供应模式,免疫组化染色检测HIF-1α、MMP-2、MMP-9及VEGF等在正常和缺氧环境中肿瘤细胞表达。结果：肿瘤生长早期,缺血组的肿瘤生长速度比对照组慢（t=0.858,P=0.039）,但最终两组肿瘤的平均体积比较差异无统计学意义（P=0.431）;缺血组瘤组织内的血管生成拟态（VM）多于对照组（P=0.037）,而内皮依赖性血管的差异无统计学意义;HIF-1α、MMP-2、MMP-9和VEGF也在缺血组瘤细胞内高表达（P分别为0.036,0.015,0.008和0.019）;缺血组内血管生成拟态数量和肿瘤体积与HIF-1α水平呈正相关（r=0.472,P=0.015;r=0.391,P=0.050）。结论：在缺氧环境中,黑色素瘤细胞能够通过HIF-1α上调MMP-2、MMP-9及VEGF等蛋白表达,肿瘤细胞更富有侵袭性,同时促进肿瘤血管生成拟态的形成。     

大鼠急性缺血性肾损伤的细胞死亡方式

目的探讨大鼠缺血再灌注损伤引起急性肾损伤的细胞死亡方式。方法应用光镜和电子显微镜技术、免疫组织化学染色及免疫印迹技术对缺血60min再灌注24h的大鼠肾脏进行了详细观察和分析。结果光镜可见皮质和髓质外带肾小管出现了①大面积细胞坏死：表现为细胞肿胀,空泡形成,崩解脱落;②坏死性凋亡：表现为细胞肿胀,核固缩;③细胞凋亡：分布于髓质外带肾小管坏死细胞之间,表现为细胞皱缩,核固缩。电镜下坏死细胞肿胀,细胞器也肿胀,崩解消失;凋亡细胞胞质皱缩,核染色质固缩边聚;坏死性凋亡呈坏死样细胞质含有一个凋亡样细胞核。免疫组化染色结果显示：PARP-1、RIPk3和caspase-3阳性细胞出现在缺血再灌注损伤肾组织内,主要分布于肾小管。免疫印迹分析结果表明：与Sham组比较肾缺血再灌注后肾组织PARP-1、RIPk3、caspase-3和TNFRa蛋白表达增强（P〈0．05）。结论大鼠肾缺血60min再灌注24h部分肾小管上皮细胞发生了三种方式死亡,即聚合糖性死亡、坏死性凋亡和凋亡。     

鞘内应用阿米洛利对皮肤癌痛小鼠ASIC-3表达及痛行为影响的实验研究

目的 研究经鞘内阿米洛利给药对皮肤癌痛小鼠酸敏感离子通道3（ASIC-3）表达及痛行为的影响。方法 Balb／c小鼠随机分为正常组（N组）、皮肤癌痛组（C组）、生理盐水组（S组）和阿米洛利组（A组）,每组10只。除N组外,其余3组小鼠足趾皮下接种肿瘤细胞建立皮肤癌痛模型;N组、C组不予干预措施,S组、A组分别经鞘内注射10 μl生理盐水和15 μg/μl阿米洛利溶液。应用热痛刺激仪分别检测各组给药前和给药后30、60、120、180 min小鼠热痛爪回缩潜伏期（TWL）值,并提取小鼠脊髓背角组织,采用Western blotting检测ASIC-3蛋白的表达。结果 肿瘤细胞接种前,4组小鼠的TWL值差异无统计学意义（P＞0.05）。接种后2周, C、S和A组小鼠TWL值分别由（9.66±0.54）s、（9.96±0.39）s和（10.15±0.40）s缩短为（4.32±0.25）s、（4.16±0.33）s和（4.26±0.24）s,差异有统计学意义（P＜0.05）。C、S组于小鼠鞘内注射给药后60、120、180 min小鼠TWL值分别为（4.05±0.37）s、（3.91±0.48）s、（3.89±0.32）s和（4.73±0.17）s、（4.29±0.25）s、（4.50±0.21）s,均低于A组的（6.03±0.23）s、（7.09±0.24）s、（6.49±0.19）s,差异均有统计学意义（P＜0.05）。A组脊髓ASIC-3蛋白的相对表达量为1.88±0.11,低于C组的2.23±0.32和S组的2.43±0.24,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 阿米洛利对皮肤癌痛小鼠脊髓背角ASIC-3表达有抑制作用并参与痛觉形成。