人类外周血基因组DNA提取方法的比较分析

目的:对2种提取外周血基因组DNA的实验方法进行了比较,建立一种本实验室有效的外周血基因组DNA的提取方法.方法:采用常规试剂盒和本实验室设计的2种外周血液DNA提取法.结果:本实验室使用的外周血基因组DNA提取方法与试剂盒提取外周血基因组DNA的纯度比较无明显差异.结论:本实验室使用的外周血液DNA提取方法简便、有效、经济,满足于基因组的研究.     

外周血DNA提取方法的比较及改良

目的 对3种提取外周血的实验方法进行了比较，并建立一种简便、快速、有效的外周血基因组DNA的提取方法。方法 采用常规酚／氯仿提取法、碘化钾法和外周血液DNA提取法。结果 外周血液DNA提取方法提取外周血基因组DNA的纯度高，通过电泳图明显可见。结论 外周血液DNA提取简便、快速、有效适用于临床标本的研究。     

一种快速微量外周血基因组DNA的提取方法

目的建立一种简便、快速、有效、微量外周血基因组DNA的提取方法.方法采用NaI作细胞裂解剂裂解细胞和细胞核,用氯仿:异戊醇(24:1)直接提取基因组DNA.结果该方法提取外周血基因组DNA的纯度高A260 nm/A280 nm=(1.87±0.11),提取效率每毫升外周血可得DNA(31±3.12)μg.结论该法简便、快速、有效,适应于批量临床标本的处理.     

全血基因组DNA快速提取法

目的　建立一种简便、快速、有效、微量外周血基因组DNA的提取方法。方法　采用NaI作细胞裂解剂裂解细胞和细胞核 ,用氯仿∶异戊醇 ( 2 4∶1 )直接提取基因组DNA。结果　该方法提取外周血基因组DNA的纯度高 ,A2 60nm/A2 80nm=1 .83± 0 .1 3,每毫升外周血可得DNA 33± 3.5 2 μg。结论　本法简便、快速、有效 ,适用于批量临床标本的处理。     

经典酚/氯仿抽提法和纯化试剂盒法提取全血基因组DNA的比较

目的 比较经典酚/氯仿法和纯化试剂盒法抽提全血基因组DNA的差异.方法 分别对两种方法抽提的全血DNA产物进行紫外分光光度仪、琼脂糖凝胶电泳和体外聚合酶链锁反应（PCR）扩增.结果 两种方法DNA的提取效率相似,TaKaBa试剂盒法提取的纯度[光密度（OD）260nm/280nm]较常规酚/氯仿法明显提高.结论 TaKaBa试剂盒法较传统酚/氯仿提取基因组DNA法快速、简便、经济,可用于PCR模板DNA的制备.     

全血基因组DNA快速提取法

目的　建立一种简便、快速、有效、微量外周血基因组DNA的提取方法。方法　采用NaI作细胞裂解剂裂解细胞和细胞核,用氯仿:异戊醇(2 4 :1)直接提取基因组DNA。结果　该方法提取外周血基因组DNA的纯度高,提取效率每毫升外周血可得DNA 33±3.5 2 μg。结论　本法简便、快速、有效,适应于批量临床标本的处理。     

用改良的盐洗法与酚-氯仿法提取基因组DNA效果比较

目的:探索更为安全可靠的基因组DNA提取方法.方法:采用改良盐洗法提取人外周血白细胞基因组DNA,与传统的酚-氯仿抽提法在提取效果、DNA纯度等方面加以比较.结果:通过对15份不同静脉血标本与酚-氯仿抽提法同步对比研究显示:改良盐洗法提取模板DNA无污染、无害,所提DNA质量好、纯度高,达到酚-氯仿抽提法所获DNA的水平;操作简单、快速,方法稳定可靠,无一例失败.结论:该方法提取的DNA可用于实验以及临床上DNA分型等研究.     

提取陈旧血液标本中DNA的三种方法比较

目的寻找适合从陈旧全血中提取基因组DNA建立基因组库的方法。方法分别用改良的酚-氯仿法、SDS法、试剂盒法从陈旧全血中提取基因组DNA,采用聚合酶链反应（PCR）对提取的基因组DNA进行评估。结果提取的基因组DNA经统计学分析,3种提取基因组DNA的方法之间差异有统计学意义（P〈0.01）,以改良的酚-氯仿法提取的基因组DNA效率最高,试剂盒法次之,SDS法较差。结论建基因组库推荐改良的酚-氯仿法。     

三种全血基因组DNA提取方法的比较

目的：比较三种不同的DNA提取方法提取人全血基因组DNA对DNA提取效率、纯度以及PCR扩增的效果影响。方法：分别应用中山医科大学达安公司：DNA提取液，珠海黑马医学仪器有限公司DNA提取液，胍盐酸法三种不同的方法提取人全血基因组DNA。结果：三种方法提取的DNA纯度平均分别为：1．48，1．51，1．56，各组间差异无显著性。200μL全血中所提取DNA总量平均分别为1．6μg，2．3μg，4．1μg。用0．8％琼脂糖凝胶电泳鉴定胍盐酸法制备的DNA效果较其它两种方法好，PCR扩增效果差异不明显。结论：胍盐酸法提取的DNA总量明显高于其它两种方法，提取效率高，为三种全血基因组DNA提取方法中之首诜。     

普拉托宁对人免疫功能的调整作用

本文用末稍血淋巴细胞探讨了普拉托宁对人体免疫系统的影响。普拉托宁对淋巴细胞转化具有增强作用。用T细胞分裂原PHA,B细胞分裂原CowanI刺激时,对前者呈增强作用;对后者呈轻度抑制作用,在用PWM诱导Ig产生的实验系统中,经Platonin处理T细胞或B细胞,或T、B两者时,与未处理的相比,Ig分泌显著减少;而其淋转却无变化。用单克隆抗体分析T细胞亚群的结果表明,普拉托宁可使OkT8阳性T细胞比值增加。从以上结果可看出,普拉托宁可直接抑制B细胞;并可通过增强Ts/Tc的活性抑制Ig产生。     

人外周血淋巴细胞化学发光的实验研究

目的研究各种有丝分裂原诱导的Ｌｙ－ＣＬ反应动力学特征和参与ＣＬ反应的细胞类型。方法从正常人外周血分离ＰＢＭＣ、淋巴细胞和Ｍｏ,经各种有丝分裂原诱导,测定和比较ＰＢＭＣ、淋巴细胞和Ｍｏ的ＣＬ反应强度及动力学。结果ＣｏｎＡ、ＰＨＡ、ＳＰＡ和ＰＷＭ均能诱导淋巴细胞产生ＣＬ反应,其最适刺激浓度分别为：ＣｏｎＡ１００μｇ／ｍｌ、ＰＨＡ１００μｇ／ｍｌ、ＳＰＡ１２５μｇ／ｍｌ、ＰＷＭ＞８００μｇ／ｍｌ。用平皿粘附法去除ＰＢＭＣ中的Ｍｏ,对Ｌｙ－ＣＬ反应无明显影响。Ｍｏ本身对ＣｏｎＡ只能产生缓慢、微弱的ＣＬ反应,而且其动力学与Ｌｙ－ＣＬ具有显著性差异。结论淋巴细胞是有丝分裂原诱导的ＰＢＭＣ－ＣＬ反应的主要产生细胞,Ｌｙ－ＣＬ测定是一种简便、快速检测淋巴细胞早期活化的有效方法。     

健康成人外周血细胞Cu／Zn SOD的放免分析

本文报道健康成人外周血细胞成分中Cu/Zn SOD的放免分析结果,红细胞Cu/Zn SOD定量为37.88±9.60ng/10~6。淋巴细胞和多形核白细胞Cu/Zn SOD,浓度分别为335.00±120.50/及189.43±139.67/10~6细胞。淋巴细胞Cu/Zn SOD量>多形核白细胞,此结果同其他作者研究正常人外周血淋巴细胞SOD-1活性>多形核白细胞相符合,表明血细胞中SOD-1活性与其克分子数相关。本文还就红细胞,淋巴细胞及多形核白细胞SOD-1的生物学特性及其在某些疾病过程中的异常变化,作了简要论述。     

苯并（a）芘对人血淋巴细胞的DNA损伤研究

应用非程序ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）、ＤＮＡ解螺旋荧光分析（ＦＡＤＵ）和ＤＮＡ复制合成抑制（ＤＲＳＩ）试验，综合检测了苯并（ａ）芘体染毒对人血淋巴细胞的ＤＮＡ损伤作用。结果表明，苯并（ａ）芘经Ｓ９代谢活化，可诱发ＤＮＡ修复合成增强、ＤＮＡ链断裂增多，ＤＮＡ复制合成抑制。三项指标的变化相互间呈正相关，与苯并（ａ）芘染毒浓度的对数值呈高度正相关。     

人发角蛋白桥接周围神经缺损后的相容性和降解性的实验研究

目的：探讨HHK（人发角蛋白）在桥接周围神经缺损后,诱导神经再生及与周围组织的相容和自身的降解情况。方法：用PLGA（聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物）套管装配HHK来桥接SD大鼠10mm长的坐骨神经缺损,术后3、6、9、12周取材,切片做组织学观察。结果：术后3周HHK毛小皮已经开始剥脱降解,并已有大量的雪旺细胞和神经纤维沿HHK长入,6周时HHK已均质化,9周、12周HHK继续降解,长入其间的雪旺细胞和神经纤维更多,排列更加规律。结论：HHK有很好的生物相容性,和可控的降解速率,能很好的诱导神经再生,可以作为支架材料应用于周围神经组织工程研究。     

介绍一种检测蚊虫DNA重复序列的方法

在一般分子生物学方法的基础上,介绍改进了的制备成蚊、幼虫和蛹的基因组DNA,并用限制性核酸内切酶消化基因组DNA,凝胶电泳分离、溴乙锭染色后显示代表重复序列DNA带的一系列方法。本法可直接检测、比较蚊虫DNA重复序列,不受发育阶段、性别的影响,取材方便,简易可行。     

用~3H-胸腺嘧啶核苷掺入抑制试验检测人外周血NK细胞活性

作者用~3H-TdR掺入抑制试验检测40例健康人(男18例,女22例)外周血NK细胞活性,结果显示:抑制百分率男性为45.6±9.1％,女性为43.2±9.0％,平均为44.3±9.1％,男女之间无显著性差异(P>0.20)。本法操作简便、重复性好,与常用的~(51)Cr释放试验比较,所需标本量少,~3H半衰期较~(51)Cr长,二者结果呈良好的正相关(r=0.873,P<0.01),是一种有应用价值的检测人外周血NK细胞活性的新方法。     

人外周血淋巴细胞化学发光的研究(Ⅰ)检测方法的建立

本文采用正交试验设计优选ConA 诱导的人外周血淋巴细胞化学发光(PBL—CL)测定体系中PBL、Luminol 及ConA 等三个主要因素的最佳组合。结果表明,PBL—CL 测定的最优实验条件为:0.5ml PBL 悬液(1×10~6/ml)、0.2ml Luminol 溶液(5×10~(-4)M)及0.2ml ConA 溶液(500μg/ml),反应液总量为1.0m。PBL—CL 测定是一种简便、怏速、敏感的检测淋巴细胞早期活化及功能的新方法。     

雷公藤多甙对肾性蛋白尿患者外周血单个核细胞作用的研究

通过琼脂糖凝胶电泳, Ｈ Ｅ 染色和流式细胞仪检测用雷公藤多甙治疗肾性蛋白尿患者 ２ 周后外周血单个核细胞的凋亡情况。经治疗后患者外周血单个核细胞在形态上出现典型的细胞核固缩、碎裂,琼脂糖凝胶电泳显现特征性的“梯状”带,流式细胞仪上出现亚二倍体峰。提示雷公藤多甙能诱导肾性蛋白尿患者外周血单个核细胞的凋亡。