改良的考马斯亮兰G-250染色法简便快速测定微量蛋白浓度

应用自制的考马斯亮兰 G- 2 50染色蛋白定量试剂进行微量蛋白测定。考马斯亮兰染料能与蛋白质定量结合 ,通过比色可测得蛋白浓度。蛋白浓度在 1 0 0～ 1 0 0 0 mg/ L范围内。该法的实测值与吸光度间呈良好的线性关系。其敏感性、稳定性、重复性及简便程度均优于经典的双缩脲法、Folin-酚法蛋白测定法。实验结果显示 ,改良的考马斯亮兰 G- 2 50染色法是一种简便、迅速且可靠的微量蛋白浓度测定法     

微量考马斯亮蓝G－250显色法测定尿蛋白

微量考马斯亮蓝Ｇ－２５０显色法测定尿蛋白侯林浦，施为红（检验科）以９６孔聚苯乙烯微孔板作容器将考马斯亮兰Ｇ－２５０检测尿蛋白法改进为微量法，不仅操作简单、快速、节省试剂，而且解决了比色过程中染料挂杯现象，与常规法相比其结果呈高度相关，可替代常规法，有...     

免疫比浊法检测脑脊液蛋白

应用兔抗人全血清建立了一种适用于生化自动分析仪的脑脊液微量蛋白的免疫透射经浊法。本法检测范围为１０－３０００ｍｇ／Ｌ，批内变异系数３．０％，批间变异系数３．５％，平均回收率１００．６％，与考马斯兰Ｇ－２５０法有良好相关具有快速、准确、简便等优点，适用于临床实验室作微量蛋白定量。     

一种新的考马斯亮兰R—250固相染料结合法测蛋白质含量的方法

本文介绍了一种用考马斯亮兰Ｒ－２５０固相染料结合法测蛋白质含量的方法。将蛋白样品点在滤纸上，甲醇固定，考马斯亮兰Ｒ－２５０染色，脱色，用洗脱液洗脱下与染料结合的蛋白质，在波长６１０ｎｍ处测其光密度（ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ．Ｏ．Ｄ）值。方法简便，所用样品少，灵敏度高，检测线性范围在０．１ｇ／Ｌ￣５ｇ／Ｌ之间，重复性较好，批内变异３．５６％￣６．６７％，批间变异１．４８％￣７．０２％。样品稳定     

考马斯亮兰G-250法测定胃液蛋白质含量及其临床意义

目的：探讨考马斯亮兰Ｇ２５０法测定胃液蛋白质含量的方法和意义。方法：采用改进的Ｂｒａｄｆｏｒｄ法对２６例正常人、８例胃癌、２４例溃疡及慢性胃炎、４例肠上皮化生以及４例萎缩性胃炎患者胃液进行蛋白质含量测定。结果：Ｇ２５０与胃液蛋白结合后的最大吸收波长为５９５ｎｍ，反应体系中加入２０μｌ１０ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ后明显提高光吸收值（Ｐ＜０．０５），线性范围在０～５００μｇ／ｍｌ间，比文献报道的高，胃液蛋白质与Ｇ２５０结合后３０ｍｉｎ内保持稳定，本法重复性好，回收率达９３．７％。结果还提示：胃癌组的胃液蛋白质含量明显高于正常对照组和其它胃疾病组（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。结论：用Ｇ２５０法测定胃液蛋白质含量是一种可靠、简便、快速、灵敏的方法，结果具有一定的临床意义。     

考马斯亮兰法测定壳聚糖中蛋白的含量

目的:运用考马斯亮兰G250显色剂测定壳聚糖中蛋白含量。方法:蛋白质分子均具有酰胺基团,考马斯亮兰G250染料上的阴离子与蛋白质上的酰胺结合,使溶液变为蓝色,于595nm处测定吸光度可计算出样品中蛋白质的含量。结果:考马斯亮兰G250分光光度法测定壳聚糖样品中蛋白质含量是可行的,相对标准偏差为3.6%～4.9%,回收率为93.2%～108.7%。结论:该法具有简便、快速、灵敏度高、重现性好等特点。     

考马斯亮兰G—250染料测定蛋白质方法的改进

考马斯亮兰G-250(简称G-250)酸性溶液呈红棕色,与蛋白质结合时变为兰色,A_(max)从465nm移至595nm。在一定条件下,蛋白质浓度与A_(595nm)成正比,据此作蛋白质定量。本法有快速、简便、灵敏和抗多种化学试剂干扰等优点,已得到广泛使用。但此法对不同的蛋白质定量有时差异较大,并时有不稳定的染料蛋白复合物沉出,影响测定准确度~4。作行用正交试验法选出了试剂配制的最佳条件,对经典法作了改进。     

溴酚兰丙酮比色法定量测定脑脊液和尿液蛋白

目的 建立一种快速灵敏的脑脊液和尿液蛋白质测定方法.方法 用溴酚兰丙酮与蛋白质结合,用白蛋白标准液作标准.结果 标本测定结果与考马斯亮兰-G250法相比无显著差异,相关系数r=0.99,线性范围0～1500mg/L,平均回收率100.5%.结论 溴酚兰丙酮比色法定量测定脑脊液和尿液蛋白,方法简便、快速、灵敏度高.     

鸡卵核提取物中诊断混合性结缔组织病的特异性抗原分析

目的：分析鸡卵核提取物中检测混合性结缔组织病（ＭＣＴＤ）的特异性抗原成份。方法：应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及考马斯亮兰染色技术对鸡卵核提取进行蛋白组份分析;应用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ技术对鸡卵核蛋白抗原进行免疫识别分别。结果：鸡卵核提取物中可见１３个蛋白成份,分子量分别为７８,７６,７２,６４,５７,５５,５０,４８,４６,４２,３,３２和２４ＫＤ。皮肌炎和多发性肌炎（ＤＭ／ＰＭ）及硬皮病（ＰＳＳ）病     

凝胶电泳后微量胰岛素的定量

胰岛素是常用降血糖药。其质量控制通常采用生物检定法。在研究胰酶-胰岛素联产新工艺过程中,为了对胰岛素进行追踪,需检测大量样品,如用生物检定法则需用动物较多,且耗资、费时。本文应用聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮兰R—250染色法,测定微量胰岛素,结果较满意。该方法简便快速、适用于生产过程中大量产品的检测。     

PAGE一步性低背景CBBR_（250）染色方法的探讨

传统的考马斯亮蓝Ｒ２５０（ＣＢＢＲ２５０）染色方法存在背景深，耗时长，试剂耗用多的缺点，考马斯亮蓝Ｇ２５０（ＣＢＢＧ２５０）虽然需时短，但其灵敏度效低。本文探讨了一步性低背景ＣＢＢＲ２５０染色方法在蛋白质ＰＡＧＥ中的应用，结果表明使用乙醇－乙酸－水染色系统，ＣＢＢＲ２５０的最佳工作浓度为０．００４‰～０．００８‰，染色时间为８～１０ｈ，灵敏度为０．５μｇ／带。一步性ＣＢＢＲ２５０染色方法与传统的ＣＢＢＲ２５０染色方法相比，有需时短，背景浅，试剂用量少的优点，可用于蛋白质的定性和定量研究。     

介绍一种脑脊液蛋白质定量测定方法

脑脊液蛋白质的定量常用磺基水杨酸和三氯醋酸比浊法。磺基水杨酸和三氯醋酸对脑脊液中的清蛋白及球蛋白的沉淀效力不一样,因而形成的浊度并不一致,测定结果的准确性欠佳。1978年Johnson和Lott报道了应用考马斯亮兰染料测定脑脊液中的蛋白质含量的方法。此法灵敏度高,所得结果较磺基水杨酸和三氯醋酸法准确,经我们实际应用,甚感满意,介绍如下。     

^125I—substance P测定家兔脑内P物质受体的新方法

目的 建立一种＾１２５Ｉ－ｓｕｂｓｔａｎｃｅＰ（ＳＰ）测定脑内ＳＰ受体的方法。方法 １５只家兔断头后取下丘脑和腹侧延髓,低温（０－４℃）离心法制备突触小体,考马斯亮兰蛋白测定剂检测匀浆受体蛋白含量,不同浓度的＾１２５Ｉ－ＳＰ与受体制品孵育后,离心法终止配体受结合反应,最后以γ闪烁计数仪测出总结合量和非特异结合量,计算特异结合值,根据Ｓｃａｔｃｈａｒｄ公式求出ＳＰ受体总数Ｂｍａｘ和平衡解离常数Ｋｄ。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳中一种快速敏感的蛋白质双染色法

本文报道了我们在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中改良了一种考马斯亮兰(Coomassic Brillant Blue,CBB)与铬银染色法相结合的新的蛋白质双染色法。这种方法比单一的CBB染色或单一的银染色敏感,比CBB与氨银双染法简便,一般实验室也能采用本法。     

双波长法快速测定蛋白质含量

目的　为了建立一种快速而灵敏的蛋白质检测方法。方法　在考马斯亮兰法测定蛋白质含量时,通过采用５９０ｎｍ 和４５０ｎｍ 双波长代替单波长检测,并以酶标检测仪取代紫外－ 可见分光光度计作为检测仪。结果　此种改进不但提高了考马斯亮兰法检测蛋白质的灵敏度（０ ．１２７μｇ／ｍｌ） 和检测范围（０ ．１２７ ～３１ ．２５μｇ／ｍｌ）,而且使大量标本的检测可在一次检测过程中完成。标准直线相关系数ｒ２ ＝ ０ ．９９６５,表明在检测限内Ａ５９５／Ａ４５０ 和蛋白质浓度Ｃ呈良好线形关系。结论　双波长法可作为一种快速、灵敏的蛋白质检测方法。     

一种简便的实验室测定母乳总蛋白的方法

对５０例母乳总蛋白进行测定，发现考马斯亮蓝法与微量消化定氮法的结果较为接近（分别为ｘ＝９．６＋２．３ｇ／Ｌｘ＝１１．４＋１．８ｇ／Ｌ），其相关系数为０．９７，相关性好，且ＣＶ值符合实验要求，但微量消化定氮法的操作步骤比较繁琐，而考马斯亮蓝法测母乳总蛋白较为简便、可靠。     

沙苑子及其伪品的可溶性蛋白质电泳鉴别

对沙苑子及其伪品进行了可溶性蛋白质电泳鉴别,同时比较了两种蛋白质染色剂考马斯亮蓝Ｒ－２５０和Ｇ－２５０的染色效果。     

人脑脊液中β—微量蛋白的纯化

β－微量蛋白（β－ｔｒａｃｅ）是存在于脑脊液（ＣＳＦ）中的一种微量蛋白，其功能和来源尚未明了。主要问题是其纯化问题未解决。β－微量蛋白经常与ＩｇＧ的Ｋａｐｐａ和ｌａｍｂｄａ轻链混杂，纯化时很难将它们分开。本研究用Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ７５和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ１５０柱层析，结合Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｇ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ亲和层析，去除ＩｇＧ轻链，得到纯粹的β－微量蛋白。     

PAGE一步性低背景CBBR250染色方法的探讨

传统的考马斯亮蓝Ｒ２５０（ＣＢＢＲ２５０）染色方法存在背景深，耗时长，试剂耗用多的缺点，考马期亮蓝Ｇ２５０（ＣＢＢＧ２５０）虽然需时短，但其灵敏度较低。本文探讨了一步性低背景ＣＢＢＲ２５０染色方法在蛋白质ＰＡＧＥ中的应用，结果表明使用乙醇－乙酸－水染色系统，ＣＢＢＲ２５０的最佳工作浓度为０．００４‰￣０．００８‰，染色时间为８￣１０ｈ，灵敏度为０．５μｇ／带。一步性ＣＢＢＲ２５０染色方法与传统的Ｃ     

双波长法快速测定蛋白质含量

目的 为了建立一种快速而灵敏的蛋白质检测方法。方法在考马斯亮兰法测定蛋白质含量时，通过采用５９０ｎｍ和４５０ｎｍ双波工代替单波长检测，并以酶标检测仪取代紫外－可见分光光度计作为检测仪。结果 此种改进不但提高了考马斯亮兰法检测蛋白质的灵敏度（０．１２７μｇ／ｍｌ）和检测范围（０．１２７￣３１．２５μｇ／ｍｌ），而且使大量标本的检测可在一次检测过程中完成。标准直线相关系数ｒ＾２＝０．９９６５，表明在检