用固定化大肠埃希氏菌基因工程菌株转化戊二酰基-7-氨基头孢烷酸为7-氨基头孢烷酸的研究

用乙酸纤维将ＧＬ－７－ＡＣＡ酰化酶基因工程菌大肠埃希氏菌Ａ５６／ｐＭＲＣＵ－３３４菌株固定化,酶反应的最适温度为５０℃,最适ｐＨ为８．０,与游离细胞一致;固定化细胞对温度和ｐＨ的稳定性比游离细胞提高。用薄板层析分析固定化细胞裂解ＧＬ－７－ＡＣＡ反应液中产物７－ＡＣＡ的含量以及ＧＬ－７－ＡＣＡ的残存量,在ｐＨ８．０．３７℃时ＧＬ－７－ＡＣＡ的转化率达９０％,产生７－ＡＣＡ的能力为１２．３４ｍｇ／（ｇ固定化细胞·ｈ）。使用２０批之后,ＧＬ－７－ＡＣＡ的转化率仍达６６％。     

用固定化大肠埃希氏菌基因工程株转化戊二酰基—7—氨基头孢烷？…

用乙酸纤维将ＧＬ－７－ＡＣＡ酰化酶基因工程菌大肠埃希氏菌Ａ５６／ｐＭＲ ＣＵ－３３４株菌固定化,酶反应的最适温度为５０℃,最适ｐＨ为８．０,与游离细胞一致;固定化细胞对温度和ｐＨ的稳定性比游离细胞提高。用薄板层析分析固定化细胞裂解ＧＬ－７－ＡＣＡ反应液中产物７－ＡＣＡ的含量以及ＧＬ－７－ＡＣＡ的残存量,在ｐＨ８．０．３７℃时ＧＬ－７－ＡＣＡ的转化率达９０％,产物７－ＡＣＡ的能力为１２．３４ｍｇ／（     

固定化酵母催化的ATP生产与CO2释放率的关系研究

用Ｙ－Ｚ型多功能摇瓶，考察了固定化酵母转化腺苷生产三磷腺苷（ＡＴＰ）过程中ＣＯ２释放率（ＣＥＲ）与葡萄糖、腺苷、腺苷二磷酸、磷酸腺苷在反应液中的积累情况。结果表明，ＣＥＲ在整个反应过程中可分为缓慢上升、快速上升和下降３阶段。根据ＣＥＲ的变化可很快估算出葡萄糖的消耗状况，分析判断出反应进程，便于反应过程的在线控制     

Modulation of release of ATP in the major pelvic ganglion of rats

用荧光素－荧光素酶方法测定大鼠盆总神经节腺苷三磷酸（ＡＴＰ）释放．钠通道阻断剂河豚毒素（１μｍｏｌ·Ｌ－１）抑制电刺激诱发的盆总神经节ＡＴＰ的释放．灌流液中去除Ｃａ２＋并加入ＥＧＴＡ（１ｍｍｏｌ·Ｌ－１）后消除ＡＴＰ的释放．腺苷（１００μｍｏｌ·Ｌ－１），Ａ１腺苷受体激动剂环戊腺苷（０．１μｍｏｌ·Ｌ－１），毒蕈碱性受体激动剂氧化震颤素（１μｍｏｌ·Ｌ－１）和５－羟色胺（１００μｍｏｌ·Ｌ－１）减少ＡＴＰ的释放．Ａ１腺苷受体拮抗剂８－环戊基－１，３－二丙基黄嘌呤（１０ｎｍｏｌ·Ｌ－１），α２肾上腺素受体拮抗剂育亨宾（３μｍｏｌ·Ｌ－１），Ｄ２多巴胺受体拮抗剂舒必利（２０μｍｏｌ·Ｌ－１）和组胺（１００μｍｏｌ·Ｌ－１）增加ＡＴＰ的释放．结果提示，在大鼠盆总神经节存在着作为神经递质参与突触传递的ＡＴＰ释放．Ａ１腺苷受体，毒蕈碱性受体，α２肾上腺素受体，Ｄ２多巴胺受体，５－羟色胺受体及Ｈ１组胺受体激动剂或拮抗剂可以通过节前机制影响ＡＴＰ的释放     

氧化葡萄糖酸杆菌底物转化特性和与棒杆菌细胞共固定化合成2—酮基— …

采用聚乙烯醇（ＰＶＡ）－海藻酸钙包埋法制备固定化细胞,研究了氧化葡萄糖酸杆菌（ＡＴＣ９９３７）固定化细胞的有关性质。该菌株休止细胞能优先利用葡萄糖酸为产酸底物合成２,５－二酮基－Ｄ葡萄糖酸,并以５％的总浓度为优。固定化细胞的使用稳定性和贮存稳定性均比游离细胞有明显增加,而且固定化细胞对ｐＨ值有较宽的适应范围。根据细菌合成２－酮基－Ｌ－古龙酸的２,５－二酮基－Ｄ－葡萄糖酸途径,用聚乙烯醇－海藻酸钙包     

腺苷—磷酸对豚鼠主动脉的舒张作用

研究了腺苷－磷酸（ＡＭＰ）对豚鼠离体去内皮主动脉的松弛作用。并与腺苷进行了比较，ＡＭＰ和腺苷的ＥＤ５０分别是０．１２和０．１０ｍｍｏｌ·Ｌ－１．ＡＭＰ的作用可被腺苷脱氨酶抑制剂９－赤薄醇（２－羟基－３－壬基）腺嘌呤所增强；并可被５′－核苷酸外切酶抑制剂α，β－次甲基腺苷二磷酸抑制．后者还可抑制ＡＭＰ在豚鼠主动脉中的降解约５０％～８５％。这些结果提示。ＡＭＰ的松弛作用可能与其在′－核苷酸外切酶的作用下生成的降解产物腺苷有关，而其本身的作用十分微弱。     

酶法制取L—丙氨酸工艺中试研究

本文报导了从固定化细胞的连续生产Ｌ－丙氨酸的中试工艺研究，填补了我国应用固定化酶工艺生产Ｌ－丙氨酸技术的空白，该工艺用原料全部国产化，生产效率高，成本低，基本无三废，其底物转化率大于９８％，产率大于８５％，固定化细胞半衰期大于８０天，Ｌ－丙氨酸纯度大于９８．５％，各项指标均达到和超过了美国药典２２版标准。     

环戊腺苷和苯基异丙基腺苷对豚鼠窦房结起搏细胞的电生理效应

利用细胞内微电极技术，观察环戊腺苷（ＣＰＡ）和苯基异丙基腺苷（Ｒ－ＰＩＡ）对豚鼠窦房结起搏细胞电活动的影响。ＣＰＡ和Ｒ－ＰＩＡ不仅能增加豚鼠窦房结起搏细胞ＡＰＡ，ＭＤＰ和Ｖｍａｘ，且能减小ＶＤＤ，ＲＰＦ和ＡＤＰ９０。８－苯茶碱和格列苯脲能明显地抑制环戊腺苷的电生理效应。本文结果提示环戊腺苷的电生理效应是受体依赖性的和主要由腺苷受体耦联的ＡＴＰ敏感性钾通道的激活所中介。     

氯丙烯对神经细胞胞浆膜和线粒体膜 Ca~(2 )-ATP 酶,Na~ ,K~ -ATP 酶活性的影响

氯丙烯对神经细胞胞浆膜和线粒体膜Ｃａ２＋┐ＡＴＰ酶，Ｎａ＋，Ｋ＋┐ＡＴＰ酶活性的影响张磊谢克勤高树君孙克任（山东医科大学毒理学研究室，济南２５００１２）用鸡胚脑神经细胞研究１－烯丙基氯－３对细胞胞浆膜和线粒体膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶，Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ...     

开孔明胶固定酵母细胞生产三磷酸腺苷

用开孔明胶包埋啤酒酵母制成固定化细胞，在含15g／L单磷酸腺苷、150mmol／L葡萄糖、16mmol／L硫酸镁的250mmol／L磷酸二氢钠缓冲液（pH7．0）中35℃振荡反应2h，生产三磷酸腺苷（ATP）的转化率可达95％。在前一批底物溶液灭菌和添加烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的条件下，固定化酵母细胞可反复使用10次，ATP转化率稳定维持在90％以上。     

槲皮素对HL—60细胞中蛋白激酶C和酪氨酸蛋白激酶活性的影响

目的：研究槲皮素（Ｑｕｅ）对ＨＬ－６０细胞中的细胞溶质和胞膜蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性的影响。方法：活细胞数的计数用苔盼兰拒染法，用组蛋白ⅢＳ，（γ＾３２Ｐ）ＡＴＰ与ＰＫＣ酶液一起保温测定ＰＫＣ活性，用聚谷氨酸．酪氨酸（４：１）多肽），（γ＾３２Ｐ）ＡＴＰ与ＴＰＫ酶液一起保温测定ＴＰＫ活性，结果：Ｑｕｅ对ＨＬ－６０细胞的增殖有抑制作用，呈剂量依赖关系，处理４８小时后，其ＩＣ５     

N-甲基小檗胺对豚鼠单一心室肌细胞ATP敏感钾电流的影响

目的　研究Ｎ 甲基小檗胺对豚鼠单一心室肌细胞ＡＴＰ敏感钾电流的作用。方法　膜片钳制技术全细胞记录模式。结果　Ｎ 甲基小檗胺抑制心室肌细胞ＡＴＰ敏感钾电流（ＩＫＡＴＰ）且具浓度依赖关系。指令电位为０ｍＶ时,３种浓度Ｎ 甲基小檗胺（０－１,１,１０μｍｏｌ·Ｌ－１）可使ＩＫＡＴＰ分别由给药前的（０－４６±０－０９）ｎＡ,（０－４３±０－１５）ｎＡ和（０－４７±０－１０）ｎＡ减少至给药后的（０－３７±０－０７）ｎＡ（ｎ＝４,Ｐ＜０－０５）,（０－２９±０－１８）ｎＡ（ｎ＝５,Ｐ＜０－０５）和（０－２１±０－０７）ｎＡ（ｎ＝４,Ｐ＜０－０５）。其抑制率分别为１８－８１％±６－１６％（Ｐ＜０－０５）,４１－４７％±２４－０５％（Ｐ＜０－０５）和５５－００％±１２－９４％（Ｐ＜０－０５）。其它指令电位下的ＩＫＡＴＰ的改变也符合此趋势。结论　Ｎ 甲基小檗胺阻断豚鼠心肌细胞ＡＴＰ敏感Ｋ＋钾通道。     

生产ATP液流循环式固定化细胞流化床反应器的参数研究

在液流循环式固定化细胞流化床反应器中，将底物浓度为４０ｍｍｏｌ／Ｌ的腺苷转化为ＡＴＰ，本文对其整个反应过程中葡萄糖的浓度，ｐＨ，溶氧的变化进行了检测，考察了这三个参数与反应转化率的关系，结果表明，随着转化率的升高，葡萄糖及溶氧呈下降趋势，而ｐＨ则呈先下降后上升的趋势。     

8－氯腺苷对小鼠肝癌H_（22）细胞的抑瘤作用研究

８－氯腺苷对小鼠肝癌Ｈ２２实体瘤的抑瘤率最高可达７１．７±１３．３％（ｉＰ）和６６．１±４．４６％（ｉｖ）（１００ｍｇ·ｋｇ－１ｄ－１×７ｄ）。腹水型Ｈ２２细胞经８－氯腺苷作用２４ｈ后，ｃＡＭＰ含量增加，ＤＡＧ含量下降；ＰＫＡＩ型调节亚基在药物作用后明显下降；凝胶阻滞分析表明，反式转录因子ＣＲＥＢ结合活性增加；原位杂交结果显示Ｐ５３抗癌基因表达增强。以上结果提示，８－氯腺苷抑瘤作用机制与第二信使系统和基因表达调控过程有关。     

牛磺酸对缺血大鼠心肌腺苷三磷酸酶的影响

目的观测牛磺酸（ｔａｕｒｉｎｅ，Ｔａｕ）对心肌缺血损伤时心肌肌膜和线粒体ＡＴＰ酶活性的影响。方法以异丙肾上腺素（Ｉｓｏ，５ｍｇ·ｋｇ－１）诱导心肌缺血损伤模型，用定磷法分别测定Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性。结果与对照组比较，缺血组心肌肌膜和线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性均降低，在注射ＩＳＰ前３０ｍｉｎ腹腔注射Ｔａｕ（２００ｍｇ·ｋｇ－１），则上述酶活性未见显著性变化。结论Ｔａｕ具有拮抗缺血大鼠心肌肌膜及线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶及Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性降低的细胞保护作用     

21-10 固相萃取和HPLC测定生物样本中腺苷、S-腺苷高半胱氨酸与S-腺苷甲硫氨酸的含量

腺苷（Ａｄｏ）是大多数内脏器官的功能调节剂，既可扩张内源性平滑肌血管，也可引起肾内血管收缩、减小肾小球渗透率。Ａｄｏ通过两条途径生成：一条依循ＡＴＰ分解代谢路线，由５＇－核苷酸酶水解腺苷一磷酸（ＡＭＰ）形成。另一条是由Ｓ－腺苷高半胱氯酸（ＳＡＨ）水解生成，ＳＡＨ为Ｓ－腺苷甲硫氨酸（ＳＡＭ）的去甲基化产物。表明甲基化作用程度的细胞内部ＳＡＭ／ＳＡＨ值可作细胞内部甲基化反应的含量测定参数，而且急性肾病期，Ａｄｏ和ＳＡＨ的尿浓度或分泌率可代表诊断或预后参数。以前报道的分析方法变异性大。德国柏林大学药学…     

利用固定在不同载体上的双酶系统一步转化头孢菌素C成为7—氨？…

利用Ｄ－氨基酸氧化酶（ＤＡＯ）和戊二酰－７－氨基头孢烯酸（ＧＬ－７－ＡＣＡ）脱酰酶酶促转化头孢菌素Ｃ（ＣＰＣ）为７－氨基头孢烯酸（７－ＡＣＡ）时,为了最大限度提高催化活性和稳定性,将这两种酶分别固定在不同载体上。反应是同时利用这两种酶以类似一步方式进行。ＤＡＯ制剂中的过氧化氢酶杂质的影响可通过外加过氧化氢解决。在最适条件下,ＣＰＣ转化为７－ＡＣＡ的转化率高于９０％,副产物形成率低于４％。这种固定化     

Studies on the Antitumour Activities of 8-Chloroadenosine

（Ｓｐ）－８－氯腺苷３′，５′环磷酸辛酯（ＯＣＣ）是８－氯腺苷３′，５′环磷酸的新衍生物，对人白血病细胞ＨＬ－６０有很强的抑制作用和诱导分化作用。用细胞流式光度术发现ＯＣＣ阻断ＨＬ－６０细胞周期于Ｇ１期。ＯＣＣ对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ合成有显著抑制作用，但不影响ＲＮＡ和蛋白质合成。ＯＣＣ能激活ＨＬ－６０细胞浆中蛋白激酶Ａ。８－氯腺苷是ＯＣＣ的活性代谢产物，能在体外和体内实验中明显抑制肿瘤的生长。８－氯腺苷也能诱导人胃癌ＭＧｃ８０－３细胞分化和人Ｔ淋巴母细胞ＭＯＴＬ－４的凋亡。本文讨论了８－氯腺苷抗肿瘤作用的机理。     

聚乙烯醇固定化基因工程菌CTB2的研究

本文报道用聚乙烯醇（ＰＶＡ）为介质固定化基因工程菌ＣＴＢ２的研究，ＰＶＡ是一种新型固定化载体，研究结果表明，ＰＶＡ包埋的固定化细胞酶活力回收率为８９％，固定化细胞的最佳反应温度为３５℃最适ｐＨ为８．０，固定化细胞的半衰期为１１批次。     

8－氯腺苷对小鼠肝癌H_（22）细胞的抑瘤作用研究

８－氯腺苷对小鼠肝癌Ｈ２２实体瘤的抑瘤率最高可达７１．７±１３．３％（ｉＰ）和６６．１±４．４６％（ｉｖ）（１００ｍｇ·ｋｇ－１ｄ－１×７ｄ）。腹水型Ｈ２２细胞经８－氯腺苷作用２４ｈ后，ｃＡＭＰ含量增加，ＤＡＧ含量下降；ＰＫＡＩ型调节亚基在药物作用后明显下降；凝胶阻滞分析表明，反式转录因子ＣＲＥＢ结合活性增加；原位杂交结果显示Ｐ５３抗癌基因表达增强。以上结果提示，８－氯腺苷抑瘤作用机制与第二信使系统和基因表达调控过程有关。