参附注射液对再灌注期间肠黏膜上皮细胞凋亡的抑制

背景：肠上皮细胞异常凋亡是缺血再灌注期间肠黏膜损伤的主要原因，参附注射液对小肠黏膜损伤有良好的防治作用。目的：建立大鼠肠缺血再灌注模型，观察缺血再灌注时给予参附注射液对肠上皮细胞凋亡数目、凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2的表达及肿瘤坏死因子水平的影响。设计：随机对照实验。单位：武汉大学人民医院麻醉科。材料：实验于2002-12／2003-06在武汉大学人民医院麻醉科实验室完成。选取健康清洁级SD大鼠24只，随机分为空白对照组、肠缺血再灌注组、参附注射液组，8只／组。方法：各组大鼠给予氨基甲酸乙酯1mg／kg腹腔注射麻醉，肠缺血再灌注组和参附注射液组用血管钳夹闭肠系膜上动脉1h然后再灌注2h．空白对照组不用血管钳夹闭肠系膜上动脉。参附注射液组于阻断前30min静注参附注射液0．02mL／g，空白对照组和肠缺血再灌注组静脉输注等量生理盐水。制备切片进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-2蛋白的表达及细胞凋亡检测。主要观察指标：①各组大鼠细胞凋亡指数的比较。②各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达。③各组肠粘膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较。结果：实验选用24只大鼠，全部进人结果分析。①各组大鼠细胞凋亡指数的比较：参附注射液组的凋亡指数明显低于肠缺血再灌注组．但比空白对照组高【（7．75&;#177;1．89）％，（28．25＋8．50）％，（4．25＋2．63）％．P均〈0．01]。（（2）各组大鼠肠上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3及Bcl-2基因的表达：参附注射液组组半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达低于肠缺血再灌注组，但高于空白对照组[（0.2116&;#177;0．0875），（0．3547＋0．0778）．（0．1941&;#177;0.0574），P〈0．01，P〉0．051；Bcl-2的表达在肠缺血再灌注组比空白对照组显著增高（P〈0．05），参附注射液组的表达比肠缺血再灌注组明显降低（P〈0．01）。（2）各组肠黏膜匀浆中肿瘤坏死因子含量的比较：肠缺血再灌注组肿瘤坏死因子的表达显著高于空白对照组和参附注射液组[（189．7＋56．3），（38．6＋10．4），（47．5&;#177;18．7）mg／L，P均〈0．011，参附注射液组和空白对照组基本相似（P〉0．05）。结论：参附注射液通过抑制肿瘤坏死因子的含量、降低半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的表达、上调Bcl-2基因而抑制缺血再灌注期间肠黏膜上皮细胞的凋亡，从而减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。     

参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤和修复时肠上皮细胞的保护作用

背景:细胞凋亡在肠缺血再灌注损伤和修复中起主要作用,参附注射液对肠缺血再灌注时肠上皮细胞凋亡的影响有待观察。目的:分析肠上皮细胞凋亡与肠缺血再灌注损伤和修复特征的关系。设计:随机对照动物实验。单位:湖北省咸宁市中心医院普外科及武汉大学人民医院普外科。材料:实验于2005-03/08在咸宁市中心医院中心实验室完成,选择54只健康雄性大鼠,体质量200～250g,购自武汉大学医学院动物实验中心。方法:随机摸球法将大鼠分为对照组6只,肠缺血再灌注组24只及参附处理组24只。①麻醉大鼠,分离其肠系膜上动脉,肠缺血再灌注组、参附处理组用无损伤血管夹阻断肠系膜上动脉血流1h,再灌注1,24,72h,参附处理组于阻断前30min经静脉输注参附注射液8mL/(kg·h),20mL/(kg·d),由人参和黑付子组成(雅安三九药液公司,批号:030302)。对照组不阻断肠系膜上动脉血流,对照组与肠缺血再灌注组于阻断前30min经静脉输注等量生理盐水,整个实验过程对大鼠进行面罩给氧。②肠缺血再灌注组和参附处理组分别于缺血后1h、再灌注1,24,72h取材,对照组于造模后取材,每组各6只。观察各组大鼠肠黏膜组织病理学改变(采用下列评分系统:0分,绒毛和腺体正常;1分部分绒毛顶端上皮轻度受损;2分,上皮下腺体轻度受损;3分,上皮下间隙扩大,毛细血管充血;4分,上皮与固有层中度分离,腺体受损;5分,部分绒毛顶端脱落;6分,绒毛明显脱落;7分,固有层绒毛脱落;8分,固有层开始消化分解;9分,出血、溃疡形成)和有丝分裂活性。③采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口未端标记实验结合激光共聚焦显微镜观察小肠黏膜上皮细胞凋亡情况,测定细胞凋亡指数,即每张切片随机取10个高位视野,每100个细胞中凋亡阳性细胞数。④在苏木精-伊红染色的肠黏膜上皮细胞间观察有丝分裂相,10个相邻肠黏膜上皮细胞间具有有丝分裂相的细胞数作为有丝分裂活性指数。主要观察指标:各组大鼠组肠黏膜组织病理学改变,细胞凋亡指数和有丝分裂活性的测定。结果:纳入大鼠54只全部进入结果分析。①参附处理组大鼠肠缺血1h、再灌注1,24h黏膜组织病理学改变评分分别为[(0.65±0.35),(3.87±0.86),(0.65±0.35)分,低于肠缺血-再灌注组[(7.11±1.01),(8.05±1.34),(1.53±0.48)分,P<0.05]。②参附处理组大鼠肠缺血1h、再灌注1,24,72h黏膜上皮细胞凋亡指数分别为(17.24±7.05),(24.20±9.87),(11.49±4.71),(6.02±2.16)个,低于肠缺血-再灌注组[(51.09±13.76),(54.89±15.58),(23.54±9.64),(12.47±5.52)个,P<0.05],缺血1h、再灌注1h有丝分裂活性分别为(10.37±2.03),(11.72±2.07)个,高于肠缺血-再灌注组[(8.24±1.69),(9.95±1.93)个,P<0.05]。结论:参附注射液能够降低肠黏膜上皮细胞凋亡,并增强肠黏膜上皮细胞有丝分裂活性,从而促进肠黏膜损伤的修复。     

亚低温缺血预处理对大鼠肠缺血再灌注诱导细胞凋亡的保护

背景：细胞凋亡在肠缺血再灌注损伤中起关键性作用。细胞凋亡的发生与凋亡抑制基因Bcl-2和凋亡促进基因Bax蛋白表达程度密切相关。目的：探讨亚低温缺血预处理对大鼠肠组织缺血再灌注后凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。设计：随机对照实验。单位：湖北省咸宁学院医学院外科学教研室与生物化学教研室。材料：实验于2002-04／12在咸宁学院医学院中心实验室完成。选用Wistar健康雄性大鼠32只，术前禁食24h，自由饮水。随机分为假手术对照组、缺血再灌注组、缺血预处理组、亚低温预处理组，8只／组。方法：除假手术对照组外，其余3组建立缺血再灌注模型。①假手术对照组仅暴露肠系膜上动脉而不夹闭，共2h，结束实验后取材；缺血再灌注组夹闭肠系膜上动脉60min后松夹60min再取材；缺血预处理组夹闭肠系膜上动脉5min和松夹5min作为预处理，余同缺血再灌注组；亚低温预处理组实施缺血预处理前在小肠周围充填碎冰造成小肠亚低温（33-35℃），余同缺血预处理组。②各组大鼠取中段小肠4cm，分为两段，分别置于甲醛和戊二醛中固定，制作电镜标本。免疫组化后显微镜下用图像分析系统检测各组吸光度值，每组选10个视野进行测量，计算平均值，肠黏膜损伤按Chiu标准进行分级。0级：正常黏膜绒毛；Ⅰ级：上皮下间隙增大，通常在绒毛的尖端，常伴有毛细血管淤血：Ⅱ级：上皮下间隙扩张伴随上皮层同固有层中度分离；Ⅲ级：绒毛两侧上皮层大量的同固有层分离，部分绒毛顶端破损；Ⅳ级绒毛破损伴随固有层毛细血管暴露，可能观察到固有层的细胞成分增多；Ⅴ级：固有层破坏和不完整、出血和溃疡。主要观察指标：①各组肠缺血再灌注后Bcl-2与Bax蛋白吸光度值的变化。②各组肠黏膜损伤分级。③各组肠黏膜组织学变化。结果：32只大鼠全部进入结果分析，中途无脱落。①各组肠缺血再灌注后Bcl-2与Bax蛋白吸光度值的变化：与假手术对照组比较，缺血再灌注组均明显升高（4．03&;#177;1．02，9．56&;#177;1．32，P〈0．01；5．67&;#177;1．34．19．07&;#177;1．63，P〈0．01）；与缺血再灌注组比较，缺血预处理组Bcl-2表达升高（9．56&;#177;1．32，15．03&;#177;1．44，P〈0．01），Bax表达降低（19．07&;#177;1．63，14．11&;#177;1．21，P〈0．01）；与缺血预处理组比较，亚低温预处理组Bcl-2表达仍有所升高（15．03&;#177;1．44，18．17&;#177;2．03，P〈0．05），Bax表达仍降低（14．11&;#177;1．21，11．58&;#177;1．04，P〈0．05）。②各组肠黏膜损伤分级情况：假手术对照组肠黏膜基本正常，损伤均为0级；缺血再灌注组肠黏膜损伤Ⅱ级2只，Ⅲ级3只，Ⅳ级3只，明显高于假手术对照组（P〈0．01）；缺血预处理组肠黏膜损伤Ⅰ级2只，Ⅱ级4只，Ⅲ级2只，明显低于缺血再灌注组（P〈0．01）；亚低温预处理组肠黏膜损伤0级1只，Ⅰ级3只，Ⅱ级4只，低于缺血预处理组（P〈0．05）。③各组肠黏膜组织学形态电镜观察结果：假手术对照组肠黏膜上皮微绒毛排列整齐，各细胞器形态正常；缺血再灌注组肠黏膜上皮微绒毛稀疏、变短、脱落，线粒体明显肿胀，空泡变性，内质网排列紊乱、肿胀；缺血预处理组肠黏膜上皮微绒毛排列基本整齐，线粒体内质网轻度肿胀；而亚低温预处理组肠黏膜上皮微绒毛排列整齐，线粒体内质网肿胀不明显。结论：肠缺血再灌注前进行缺血预处理可以上调Bcl-2蛋白的表达，并下调Bax蛋白的表达，从而抑制肠缺血再灌注诱导的细胞凋亡以保护缺血再灌注肠损伤。亚低温状态能增强缺血预处理的保护作用。     

创伤修复期间参附注射液对肠黏膜的保护作用

背景：创伤修复期间胃肠道存在再灌注损伤和灌注不全，引起肠黏膜损伤。目的：观察人用等效剂量参附注射液对创伤修复期间家兔肠pH、肠黏膜一氧化氮、丙二醛、Ca^2＋含量、血清双胺氧化酶的影响。设计：以实验动物为观察对象的随机对照实验。单位：武汉大学人民医院麻醉科。材料：实验于2003-08／10在武汉大学人民医院麻醉学研究室完成，选择健康家兔24只随机分为3组：参附注射液治疗组、单纯创伤修复组和对照组，每组8只。干预措施：通过股动脉放血[2mL／（kg&;#183;min）]，平均动脉压降至40mmHg并持续60min，回输自体血及等量平衡盐液制备免创伤修复模型；参附注射液组于回输自体血同时先静注参附注射液2．1mL／kg，随后持续注人参附注射液5mL／（kg&;#183;h）。主要观察指标：分别于实验前，创伤修复1h，及再灌注1，3h检测乙状结肠黏膜内pH、肠黏膜一氧化氮、丙二醛及钙含量、血清双胺氧化酶活性。结果：24只家兔均进人结果分析。①参附注射液治疗组再灌注1，3h肠黏膜pH为7．171&;#177;0．102，7．194&;#177;0．106，高于单纯创伤修复组（6．920&;#177;0.155，6．971&;#177;0．165，P〈0．05，P〈0．01）及对照组（7．329&;#177;0．038，7．322&;#177;0．101，P〈0．05）。②参附注射液治疗组再灌注1，3h血清双胺氧化酶为（35．090&;#177;1．184），（32．440&;#177;2．884）μkat/L，显著高于单纯创伤修复组[（50．994&;#177;2．684），（52．377&;#177;1．217）μkat／L，P〈0.01]及对照组[（15．970&;#177;1．734），（16．620&;#177;0．767）μkat／L，P〈0．05]。③再灌注3h肠黏膜一氧化氮、丙二醛含量参附注射液治疗组均显著低于单纯创伤修复组[（61．8&;#177;5．3，72．2&;#177;5．8）μmol／g，（68．2&;#177;4．9，96．9&;#177;8．5）μmol／L，P〈0．05]。再灌注3h肠黏膜Ca^2＋含量参附注射液治疗组为（2．43&;#177;0．27）μmol／L，低于单纯创伤修复组[（2．93&;#177;0．34）μmol／L，P〈0．05]，高于对照组[（2．26&;#177;0．31）μmol／L，（P〈0．05）]。结论：给予家兔人用等效剂量的参附注射液，增加了肠黏膜灌注及氧合作用，抑制了肠黏膜一氧化氮活性和清除氧自由基及减轻钙超载，对创伤修第期间肠黏膜具有良好的保护作用。     

电针治疗大鼠脑缺血再灌注期血清白细胞介素8水平的调节

目的：通过观察脑缺血后不同时间段白细胞介素8血清的表达及电针对其表达的调节，以探讨电针治疗缺血性脑损伤的可能作用。 方法：实验于2005—08／11在南方医科大学附属南方医院神经内科实验室内进行。取135只雄性清洁级SD大鼠随机数字法分成假手术组，缺血再灌注3，6，12，24h组。缺血再灌注3，6，12，24h＋电针组。每组15只。采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血1h后再灌注模型，于造模成功后电针缺血再灌注＋电针组大鼠的足三里、内关穴，频率2Hz，电压1．5V，连续渡30min／次。再利用夹心酶联免疫吸附法，检测每组白细胞介素8浓度；并对每组进行神经功能缺陷评分。 结果：实验过程中有2只动物死亡，133只动物进入结果分析。①缺血再灌注3h白细胞介素8表达开始增加，6h达高峰，12h开始下降，24h恢复正常；其中缺血再灌注3，6及12h组与假手术组比较差异有显著性意义[假手术组（73．56&;#177;8．27）μg／L，缺血再灌注3h（85．18&;#177;9．56）μg／L，6h（109．82&;#177;10．82）μg／L，12h（95．27&;#177;9．71）μg／L，24h（75．61&;#177;8．43）μg／L，P〈0．05]。②缺血再灌注3，6，12h＋电针组血清白细胞介素8与缺血再灌注相应时间点组比较。差异有显著性意义[缺血再灌注3h＋电针组（80．39&;#177;8．68）μg／L，缺血再灌注6h＋电针组（98．35&;#177;9．29）μg／L，缺血再灌注12h＋电针组（86．81&;#177;8．09）μg／L，P〈0．05]。③缺血再灌注3，6，12，24h＋电针组神经功能缺陷评分与相应时间点缺血再灌注组比较明显降低[缺血再灌注3，6，12，24h＋电针组分别为（2．85&;#177;0．38），（3．06&;#177;0．55），（2．98&;#177;0．46），（3．02&;#177;0．52）分；缺血再灌注3，6，12，24h组分别为（3．38&;#177;0．57），（3．86&;#177;0．43），（3．52&;#177;0．52），（3．56&;#177;0．62）分，P〈0．05]。 结论：电针治疗能降低大鼠脑缺血再灌注期血清白细胞介素8水平。     

低氧预处理对大鼠缺血一再灌注性脑损伤中凋亡及Fas和Fas-L蛋白表达的影响

目的：观察分析低氧预处理对大鼠缺血-再灌注性脑损伤凋亡及Fas、Fas-L蛋白表达的影响。 方法：实验于2004-09／2006-04在新乡医学院神经生物学实验室完成。选择成年SD大鼠24只，随机抽签法分为假手术组、缺血-再灌注模型组、低氧预处理组，每组8只。参照Zea-Longa改良的动脉线栓法制备脑缺血-再灌注模型，以动物缺血侧上下肢体瘫痪，围绕缺血对侧呈逆时针绕圈（追尾现象）为模型制备成功表现。缺血-再灌注模型组大鼠缺血3h后再灌注24h。低氧预处理组的大鼠在以300mL／min流量灌入N2和O2混合气体的密闭容器中处理3h恢复12h后，采用动脉线栓法缺血3h再灌注24h后取材，经处理后制备切片；假手术组仅切开一侧皮肤暴露颈总动脉。各组切片标本采用苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色及TUNEL染色，观察神经组织学特征，Fas、Fas-L蛋白表达和细胞凋亡情况。并在不同时间（缺血1，2，3h再灌注1，4，8，24h）观察大鼠神经功能缺失情况。 结果：纳入大鼠24只，均进入结果分析，无脱失值。①缺血3h再灌注8h后低氧预处理组神经行为缺失计分低于缺血-再灌注模型组[（0．6&;#177;0．5），（1．3&;#177;0．5）分，t=2．546，P=0．023]；再灌注24h后低氧预处理组神经功能缺失计分显著低于各缺血-再灌注模型组[（1．1&;#177;0．6），（0．4&;#177;0．5）分，t=2．376，P〈0．051。②神经组织学特征：缺血-再灌注模型组缺血区中心神经组织结构完全破坏。神经元大部分坏死，细胞间隙明显增宽。缺血边缘区神经元肿胀、形态变为角形或扇形，神经元周神经纤维呈空泡状或海绵状，神经胶质细胞肿胀。低氧预处理组损伤程度轻于缺血-再灌注模型组。③低氧预处理组在缺血半球亦可监测到凋亡细胞，右侧均为阴性，凋亡细胞形态与缺血-再灌注模型组相似，但数量少于缺血-再灌注模型组[（23．1&;#177;4．4），（39．4&;#177;2．4），P〈0．05]。④假手术组及非缺血侧大脑半球Fas、Fas-L蛋白表达微弱。缺血-再灌注模型组和低氧预处理组缺血侧Fas、Fas-L蛋白有明显表达，与假手术组比较差异有显著性意义[（27．3&;#177;2．8），（11．1&;#177;2．2），（0．8&;#177;1．2）个／视野，P〈0．05]，[（24．6&;#177;3．6），（9．6&;#177;1．7），（0．5&;#177;0．8）个／视野，P〈0．05]。低氧预处理组Fas、Fas-L蛋白表达水平显著低于缺血-再灌注模型组（P〈0．05）。 结论：低氧预处理可减轻局灶性缺血再灌注脑损伤，减少大鼠脑缺血-再灌注后的脑细胞凋亡和神经功能缺失。抑制Fas、Fas-L蛋白表达可能是其发挥保护作用的分子机制之一。     

电刺激迷走神经对肠缺血再灌注大鼠血浆一氧化氮和内皮素水平的影响及其意义

目的：观察电刺激迷走神经对肠缺血再灌注模型大鼠血浆中一氧化氮、内皮素水平和血压，以及小肠组织损伤程度的影响。 方法：实验于2004-10／2005-04在中山大学省级药理毒理实验室完成。①选用清洁级健康Wistar雄性大鼠40只，体质量280～300g。按随机数字表法将40只大鼠分为4组（n=10）：对照组：双侧颈迷走神经分离＋仅分离而不阻断肠系膜上动脉；肠缺血再灌注组：双侧颈迷走神经分离＋夹闭肠系膜上动脉1h后松夹再灌注2h；双侧颈迷走神经切断组：双侧颈迷走神经分离并切断＋夹闭肠系膜上动脉1h后松夹再灌注2h。迷走神经刺激组：双侧颈迷走神经干切断＋在夹闭肠系膜上动脉前及再灌注开始时均采用智能型生物信号显示处理系统以5V，2ms和1Hz强度的电流持续刺激左迷走神经干远端20min。②在大鼠肠缺血再灌注2h时，采用放射免疫分析法检测内皮素水平，用硝酸还原酶比色法检测一氧化氮水平。苏木精-伊红染色后，光镜下观察肠组织结构的变化。对小肠组织损伤程度进行判定：0～9分，分数越高表示损伤越严重。于迷走神经刺激前，夹闭0，30min，再灌注0，30，60，90，120min记录平均动脉压。③多组均数比较使用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验。 结果：大鼠40只全部进入结果分析。①血浆一氧化氮水平变化：肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组明显低于对照组和迷走神经刺激组[（22．42&;#177;9．62），（24．66&;#177;10．10），（36．34&;#177;10．81），（52．08&;#177;19．25）μmol/L，P〈0．051。②血浆内皮素水平变化：迷走神经刺激组明显高于对照组、肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组[（270．49&;#177;75．43），（170．04&;#177;56．30），（190．73&;#177;62．85），（200．04&;#177;65．21）ng／L，P〈0．05]。③一氧化氮与内皮素比值比较：肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组明显低于对照组和迷走神经刺激组（0．11&;#177;0．04，0．12&;#177;0．04，0.23&;#177;0．10，0．18&;#177;0．07，P〈0．05），对照组明显高于迷走神经刺激组（P〈0．05）。④小肠组织损伤程度光镜下观察结果：肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组的肠黏膜结构受损最严重，迷走神经刺激组可减轻肠组织损伤程度。⑤肠组织病理损伤程度评分：对照组明显低于其他3组，而迷走神经刺激组明显低于肠缺血再灌注组和双侧颈迷走神经切断组[（5.3&;#177;0．9），（6．4&;#177;1.9），（7.0&;#177;1．2）分，P〈0．05]。⑥平均动脉压变化：各组大鼠在缺血期基本保持平穗。而在再灌注期，与对照组相比，其他3组随时间延长呈明显下降趋势（P〈0.05），而迷走神经刺激组较双侧颈迷走神经切断组、肠缺血再灌注组在各时间点能更明显提高平均动脉压（P〈0．05）。 结论：迷走神经刺激可能通过减轻一氧化氮与内皮素比值失衡，从而改善脏器微循环并延缓血压的下降，减轻肠缺血再灌注损伤。     

低氧预处理对大鼠脑缺血再灌注B细胞淋巴瘤2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 mRNA表达的影响

目的：观察低氧预处理对大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型B细胞淋巴瘤2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA表达的影响，探讨其脑保护作用及可能机制。 方法：①实验于2004—10／2005—06在苏州大学附属第一医院神经内科完成。选用清洁级成年SD雄性大鼠55只，随机分为3组：假手术组，对照组（缺血再灌注组）和低氧预处理组。②采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型，假手术组只手术不插线。低氧预处理组在低氧预处理后12h制备脑缺血再灌注模型。③假手术组在缺血3h再灌注24h、对照组和低氧预处理组在缺血3h再灌注3，6，12，24，48h不同时间点，进行脑切片的苏木精一伊红染色、原位末端标记法检测细胞捅亡，免疫组化法检测B细胞淋巴瘤2水平、原位杂交染法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA表达。 结果：55只大鼠均进人结果分析。①假手术组无凋亡细胞，低氧预处理组的凋亡细胞较对照组明显减少（P〈0．05）。②低氧预处理组大鼠缺血再灌注3h可见B细胞淋巴瘤2阳性细胞数开始表达，再灌注24h达高峰，缺血再灌注6，12，24，48h均较对照组增高（101．40&;#177;2．78，68.20&;#177;1.45；137.92&;#177;2.41，81．34&;#177;9．28；172．21&;#177;289，103．12&;#177;2.61：105.68&;#177;12．67．60．12&;#177;1．47；P〈0.05）。③低氧预处理组和对照组缺血再灌注3h半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA阳性细胞数的表达逐渐增加，至24h达高峰；低氧预处理组缺血再灌注12，48h阳性细胞数的表达均较对照组减少（45．96&;#177;5．02，85．48&;#177;7．88；33．84&;#177;4．67，56．31&;#177;7．02；P〈0．05）。 结论：低氧预处理的脑保护作用与其抑制神经细胞凋亡有关；而上调B细胞淋巴瘤2及下调半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA的表达，可能是实现保护作用、抑制凋亡的机制之一。     

全脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡调节蛋白Bel-2和Bax的表达

背景：脑缺血再灌注对中枢神经系统的影响，除了急性期的细胞坏死，还有迟发性的神经元凋亡。目的：观察大鼠全脑缺血不同再灌注阶段海马神经元凋亡率、坏死率及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的表达情况，并探讨其对全脑缺血再灌注损伤的调节作用。设计：随机对照实验。单位：首都医科大学附属北京天坛医院的神经外科和麻醉科。材料：实验于2003-01／20014-01在首都医科大学附属北京神经外科研究所完成。选择清洁级成年雄性健康Wistar大鼠33只，随机分5组，缺血再灌注24h组7只、缺血再灌注48h组7只、缺血再灌注72h组7只、缺血再灌注7d组7只和假手术对照组5只。干预：制备大鼠全脑缺血再灌注模型。分别于再灌注24，48，72h和7d取脑海马组织，用流式细胞仪检测细胞凋亡率，坏死率，Bcl-2和Bax蛋白在大鼠脑海马神经元中的表达情况。主要观察指标：①流式细胞仪检测各组大鼠脑海马组织细胞凋亡率和坏死率。②Bcl-2和Bax蛋白表达百分率。结果：33只大鼠全部进入结果分析。①缺血再灌注7d组海马神经元的凋亡率最高[（24．59&;#177;0．97）％]，坏死率峰值出现在缺血再灌注24h组[（16．67&;#177;1．04）％]，明显高于假手术对照组[（1．28&;#177;0．50）％，（0．90&;#177;0．38）％]（P〈O．01）。②假手术对照组Bcl-2表达极低[（1．07&;#177;0．27）％]，但Bax有高表达[（46．09&;#177;5．37）％]。⑧Bcl-2蛋白峰值出现在缺血再灌注后48h[（14．41&;#177;0．67）％]，而Bax蛋白峰值出现在缺血再灌注之后72h[（77．38&;#177;1．52）％]。结论：全脑缺血再灌注损伤后海马神经元凋亡率逐渐增高，凋亡调控基因Bcl-2和Bax表达异常增高，提示Bcl-2和Bax蛋白参与了全脑缺血再灌注损伤的凋亡调节。     

α-黑素细胞刺激素对抗大鼠肠缺血再灌注损伤的作用及机制

目的：探讨α-黑素细胞刺激素(α-MSH)对抗大鼠肠缺血再灌注损伤的作用及机制。方法：60只大鼠随机数字表法分3组：假手术组、缺血再灌注组和治疗组，每组20只。采用大鼠小肠缺血60min再灌注模型，治疗组静脉注射α-MSH，用放免法检测血中肿瘤坏死因子α-(TNFα-)、白细胞介素6含量，用髓过氧化物酶(MPO)定量测定法评价缺血后肠组织中中性粒细胞浸润程度，免疫组化法检测肠黏膜Fas蛋白表达情况，并电镜观察超微结构的改变。结果：α-MSH能明显改善电镜下细胞超微结构的损害；与缺血再灌注组比较，治疗组再灌注后肠组织Fas表达下调，其光密度值由1．4509&;#177;0．0192下降为1．3241&;#177;0．0140，MPO，TNF-α，白细胞介素6含量于再灌注后6h，分别由(8．50&;#177;0．150)nkat／g下降为(5．17&;#177;0．317)nkat／g，(1．86&;#177;0．53)ltg／g下降为(1．41&;#177;0．39)μg／g．(301．06&;#177;67．23)ng／g下降为(201．56&;#177;26．42)ng／g，两组比较差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：α-MSH可能通过减轻肠缺血后炎症反应以及阻止肠组织细胞凋亡的发生等机制对肠缺血再灌注损伤具有保护作用。     

Continent intestinal reservoir

In this series, 170 patients have received a continent intestinal reservoir, with follow-up of one to eight years. In 126 a conventional ileostomy was converted to a continent intestinal reservoir, 38 at the time of coloproctectomy. Six had an unsatisfactory ileoanal or ileorectal anastomosis initially, and 26 (15%) required revisional surgery for problems involving the reservoir or valve. The incidence of valve slippage was 3%. Eighty-five percent achieved a normally functioning small bowel reservoir with one operation, and 19 more patients were added with one additional operation, for an ultimate good result of 96% with two operations at most. The average reservoir capacity is 400 ml, and most patients empty the pouch two or three times per day. Under favorable circumstances, the continent intestinal reservoir is preferable for most patients after coloproctectomy.     

Common intestinal parasites

Intestinal parasites cause significant morbidity and mortality. Diseases caused by Enterobius vermicularis, Giardia lamblia, Ancylostoma duodenale, Necator americanus, and Entamoeba histolytica occur in the United States. E. vermicularis, or pinworm, causes irritation and sleep disturbances. Diagnosis can be made using the "cellophane tape test." Treatment includes mebendazole and household sanitation. Giardia causes nausea, vomiting, malabsorption, diarrhea, and weight loss. Stool ova and parasite studies are diagnostic. Treatment includes metronidazole. Sewage treatment, proper handwashing, and consumption of bottled water can be preventive. A. duodenale and N. americanus are hookworms that cause blood loss, anemia, pica, and wasting. Finding eggs in the feces is diagnostic. Treatments include albendazole, mebendazole, pyrantel pamoate, iron supplementation, and blood transfusion. Preventive measures include wearing shoes and treating sewage. E. histolytica can cause intestinal ulcerations, bloody diarrhea, weight loss, fever, gastrointestinal obstruction, and peritonitis. Amebas can cause abscesses in the liver that may rupture into the pleural space, peritoneum, or pericardium. Stool and serologic assays, biopsy, barium studies, and liver imaging have diagnostic merit. Therapy includes luminal and tissue amebicides to attack both life-cycle stages. Metronidazole, chloroquine, and aspiration are treatments for liver abscess. Careful sanitation and use of peeled foods and bottled water are preventive.