人类β-防御素在眼表组织中的表达

背景:人类β-防御素主要定位于多种组织的表皮或上皮.在眼表中也存在防御素,但其在眼表中的分布及眼表疾病中的作用尚不十分清楚.目的:观察人类β-防御素在眼表组织中的分布,分析其在眼表疾病中的潜在作用.设计、时间及地点:以眼表组织为观察对象体外对照实验,于2006-10/2007-12在上海交通大学医学院附属新华医院中心实验室和中国科学院上海分院细胞生化所完成.材料:18个炎性结膜样本中包括6个胬肉表面球结膜、4个球结膜囊肿、4个酸烧伤结膜组织、2个热烧伤结膜组织和2个结膜肉芽肿组织;15个炎性角膜样本中包括6个病毒性角膜炎、4个霉菌性角膜炎、3个细菌性角膜炎和2个角膜穿孔伤后摘除眼球;9个尸体眼正常球结膜样本,8个尸体眼正常角膜样本.方法:RT-PCR法及免疫组织化学法检测50份样本人类β-防御素表达.主要观察指标:人类β-防御素1～3三种蛋白因子在正常及炎症眼表组织的表达和定位.结果:RT-PCR检测发现,人类β-防御素1,3在所有被检角结膜组织中均显示阳性;人类β-防御素2在大部分炎症眼表组织中显示阳性,在正常眼表组织几乎不表达.免疫组织化学结果显示,大多数炎性眼表组织中均同时表达人类β-防御素1,2,分布于上皮细胞层,以基底层为主,偶见基质细胞的浸润,仅少数无人类β-防御素2表达;正常角膜和球结膜样本中均有人类β-防御素1表达,分布于上皮细胞层,以基底层为主,仅极少数同时存在人类β-防御素2表达.结论:人类β-防御素1,3呈组成式表达于正常及炎性眼表组织上皮细胞表皮与基底上皮细胞表层和基底层,人类β-防御素2则呈诱导式表达于大多数炎性眼表组织上皮细胞表皮与基底上皮细胞表层和基底层,均以基底层居多;3种人类β-防御素在对抗眼表感染和促进眼表损伤修复中可能起重要作用.     

人β-防御素在空肠弯曲菌感染中的表达与调控

目的调查2012至2013年上海地区腹泻症候群调查研究及病原谱监测中空肠弯曲菌的感染现状,探讨在空肠弯曲菌引起的肠道感染中人β-防御素(hBD)的抗菌作用及其免疫调节功能。方法收集2012至2013年上海地区腹泻症候群调查研究及病原谱监测中分离到的空肠弯曲菌,分析其感染现状;采用琼脂稀释法检测空肠弯曲菌对庆大霉素(GEN)、四环素(TET)、阿奇霉素(AZI)、红霉素(ERY)、克林霉素(CLI)、环丙沙星(CIP)、萘啶酸(NAL)的最低抑菌浓度(MIC);采用十二烷基硫酸钠-脉冲场凝胶电泳(SDS-PFGE)分析其分子流行趋势;空肠弯曲菌标准菌株感染人类肠上皮细胞系Caco-2,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测肠上皮细胞hBD-1、hBD-2、hBD-3、TLR2和TLR4基因转录情况;采用蛋白免疫印迹法检测hBD-1、hBD-2、hBD-3、TLR2、TLR4蛋白表达情况。结果 2012至2013年上海地区腹泻患者空肠弯曲菌分离率为1.6%。37株空肠弯曲菌对TET和NAL的耐药性极高,分别达95.7%和97.8%。PFGE分为9个型别。hBD-1、hBD-2、hBD-3在Caco-2细胞感染空肠弯曲菌6 h时转录水平最高,而其蛋白表达量则在24 h时最高。TLR2在感染24 h的基因转录水平较0、6、10 h有显著升高,但TLR4则在感染6 h时基因转录水平最高,TLR2、TLR4蛋白表达与基因转录水平相一致。结论 hBD在空肠弯曲菌感染中起着一定的防御作用。     

β-防御素-2在呼吸机相关性肺炎中的表达

目的观察机械通气大鼠铜绿假单胞菌(PA)肺部感染前后肺组织β防御素2(BD2)基因和蛋白质表达的变化,探讨肺组织BD2在呼吸机相关性肺炎(VAP)发生机制中的作用。方法58只健康清洁级雄性成年SD大鼠随机分为对照组和机械通气组。机械通气组大鼠采用经口气管插管机械通气24h后,经气管内注入PA复制肺部感染模型。对照组中大鼠无需机械通气,直接气管内接种PA复制肺部感染模型。采用逆转录聚合酶链反应(RTP-CR)和蛋白免疫印迹(Westernblot)技术测定大鼠BD2基因和蛋白质表达的变化。结果机械通气组重度肺组织病理变化大鼠占47.6%,明显高于对照组的28.5%(P<0.05)。机械通气组中BD2基因和蛋白质表达水平的上调在3h后显著低于对照组(P均<0.05)。机械通气组接种PA6h后血培养阳性率为40.0%,显著性高于对照组的6.7%(P<0.05)。机械通气组支气管肺泡灌洗液中PA培养阳性率持续为100.0%,而对照组从3h的100.0%降至24h的33.3%(P<0.05)。对照组存活率为80.0%,机械通气组为40.0%,两组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论BD2基因和蛋白质表达上调水平的下降可能与VAP的发生和发展有关。     

脆性组氨酸三联体和β-连接素在大肠癌中的表达及其意义

目的:探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)和β-连接素(β-catenin)蛋白在大肠癌中的表达及其临床病理学意义。方法:采用免疫组织化学EnVision两步法,检测76例大肠癌及癌周非瘤粘膜组织、30例腺瘤标本的FHIT和β-catenin表达。结果:腺癌组织中FHIT表达降低或缺失率为51.3%,明显高于腺瘤组(6.7%)(P<0.01)。在癌的组织学分级中显示高分化组占10%,与中分化(56%)或低分化组(62.5%)相比差异显著(P<0.05)。大肠癌、大肠腺瘤组织中β-catenin的异常表达率分别为86.8%、73.3%,均显著高于癌旁非瘤黏膜组织(0%)(P<0.01)。在肿瘤的组织学分级中,β-catenin的异常表达率在中、低分化组为90.9%,显著高于高分化组(60%)(P<0.05);在临床分期中,DukesC及D期的β-catenin异常表达率为95.7%,显著高于DukesA及B期(72.4%)(P<0.01);伴淋巴结转移的β-catenin的异常表达率为95.3%,显著高于无淋巴结转移(75.8%)(P<0.05)。β-catenin异常表达与FHIT表达降低或缺失之间呈显著正相关关系(r=0.244,P<0.05)。结论:FHIT表达降低或缺失及其β-catenin的异常表达在大肠癌的发生发展中起重要作用。部分大肠癌组织中β-catenin的异常表达可能由抑癌基因FHIT的表达降低或缺失所致。     

β-连环蛋白在卵巢癌组织中的表达

目的 探讨β连环蛋白（β-cat）在卵巢癌组织中的表达及意义。方法 ①应用4097点基因芯片对5例卵巢癌及5例正常卵巢组织进行基因表达谱分析，筛查差异表达基因。②对60例卵巢癌组织、24例卵巢瘤组织及24例正常卵巢组织石蜡标本进行免疫组织化学方法染色，检测β-cat的表达情况，分析β-cat的表达与临床分期及组织分级的相关性。结果 ①基因芯片筛查出卵巢癌差异表达基因58个，其中基因表达增高（上调趋势）30个，基因表达降低（下调趋势）28个，β-cat为表达增高基因。②β-cat在卵巢癌组织中的阳性表达率为88．33％，在卵巢瘤组织中的阳性表达率为33．33％，两组比较有显著性差异（P〈0．05）；β-cat在正常卵巢组织中的阳性表达率为20．83％，两组比较有显著性差异（P〈0．05）；临床分期越晚，β-cat阳性表达率越高，卵巢癌Ⅳ期β-cat阳性表达率为93．87％，卵巢癌Ⅰ期β-cat阳性表达率为77．77％，两组比较有显著性差异（P〈0．05）；不同组织分级β-cat阳性表达率不同，比较无显著性差异（P〉0．05）。结论 β-cat在卵巢癌组织中表达增高，β-cat表达程度与临床分期正相关，与病理分级无相关性。     

E-钙黏素和β-连接素在滑膜肉瘤中的表达及意义

目的研究上皮钙粘素(E-cadherin,E-cad)和β连接素(β-catenin,β-cat)在滑膜肉瘤组织中的表达特征及预后意义。方法应用免疫组化方法检测E-cad和β-cat在60例滑膜肉瘤组织中的表达情况,分析其与临床病理特征及患者术后生存时间的关系。结果 E-cad和β-cat的阳性表达率分别为28.3%(17/60)和23.3%(14/60);β-cat异常表达率为45%(27/60)。两者的表达均与滑膜肉瘤的病理学分型及组织学分级有关,β-cat的异常表达还与患者肿瘤部位、TNM分期及转移有关(P<0.05)。E-cad和β-cat表达组的生存情况明显优于β-cat异常表达组(P<0.05)。结论细胞黏附因子E-cad表达下调及β-cat的异常表达提示肿瘤细胞间的黏附力减弱、运动能力加强,肿瘤复发转移潜能增强,患者预后不良。     

人β防御素2基因在衣原体感染女性生殖道组织中的表达

【目的】检测人β防御素-2基因(hBD-2)在正常及衣原体感染的女性宫颈的表达情况及与炎症程度的关系。【方法】采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测正常及衣原体感染的女性宫颈中hBD-2基因的表达情况,用-βactin作内参照。【结果】在正常及衣原体感染女性宫颈中hBD-2基因均有表达,且衣原体感染的女性hBD-2基因表达比正常女性的强,差异有显著性(P<0.01)。【结论】hBD-2在正常及衣原体感染的女性宫颈中的高表达,提示hBD-2在正常女性宫颈及在衣原体感染中有着重要的防御作用。     

肝细胞核因子3β在人类肺癌组织中的表达及意义

目的 探讨肝细胞核因子3β蛋白(HNF-3β)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和癌旁正常肺组 织中的表达情况,探讨其临床意义.方法 分别采用免疫组化法和RT-PCR 方法检测50 例NSCLC 组织及癌 旁正常肺组织中HNF-3β蛋白和mRNA 的表达.结果 HNF-3β蛋白在NSCLC 和正常癌旁组织中的半定量 评分分别为0.42 ±0.13,2.28 ±0.28,差异有统计学意义(P <0.05).HNF-3βmRNA 在NSCLC 和正常癌旁 组织中的半定量评分分别为1.32 ±0.23,3.68 ±0.32,差异有统计学意义(P <0.05).结论 初步认定HNF- 3β对人类非小细胞肺癌的形成起抑制作用.     

慢性鼻-鼻窦炎患者鼻黏膜β-防御素的表达及意义

目的检测人β-防御素(h BD)2,3,4在不同分型的慢性鼻-鼻窦炎(CRS)患者鼻黏膜和正常鼻黏膜上皮细胞中的表达,并明确各组间的差异,分析其在CRS的病因及疾病进展中的作用。方法收集2015年3至12月在山西医科大学附属汾阳医院耳鼻喉科的住院患者,分为3组:正常对照组15例(鼻中隔矫正术时取中鼻甲外侧壁黏膜),CRS不伴鼻息肉组30例(取钩突黏膜),CRS伴鼻息肉组30例(取息肉组织),采用免疫组化染色法分别检测各组织中h BD的蛋白表达。结果 (1)CRS各型及正常对照组鼻黏膜中h BD-2,3,4的蛋白均有表达,3组间h BD的蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。CRS伴鼻息肉组h BD-2,4蛋白表达水平高于CRS不伴鼻息肉组,在正常鼻黏膜中表达最低。CRS伴鼻息肉组患者h BD-3蛋白表达水平高于正常组,CRS不伴鼻息肉组表达最低。(2)免疫组化染色显示,h BD-2,3,4主要在腺上皮、间质细胞、炎性细胞中表达。结论 (1)鼻黏膜上皮细胞中h BD-2,3,4呈诱导性表达,CRS不伴鼻息肉组h BD-3表达最低,可能与激素抑制其表达有关。(2)免疫组化染色显示h BD-2,3,4蛋白主要在腺上皮、间质细胞及炎性细胞中广泛表达,这主要与细胞分泌防御素参与鼻黏膜免疫有关。     

人β-防御素2在幽门螺杆菌阳性胃黏膜中的表达及临床意义

目的探讨人β-防御素2(HBD-2)在幽门螺杆菌阳性胃黏膜组织中的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化法检测34例幽门螺杆菌阳性胃黏膜组织和18例幽门螺杆菌阴性胃黏膜组织中HBD-2蛋白的表达水平,并分析其与幽门螺杆菌感染与否及感染程度的相关性。结果幽门螺杆菌阳性组胃黏膜组织HBD-2蛋白表达水平显著高于幽门螺杆菌阴性组,差异具有统计学意义(χ2=23.406,P=0.000)。同时,轻度、中度、重度幽门螺杆菌感染的胃黏膜组织HBD-2蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(χ2=5.825,P=0.443)。结论幽门螺杆菌感染可诱导胃黏膜组织中HBD-2的表达,但不同幽门螺杆菌感染程度的胃黏膜组织的HBD-2表达水平并无明显差异,其中的内在机制值得进一步研究。     

转化生长因子-β1在乳腺癌组织中的表达及意义

目的检测转化生长因子-β1(TGF-β1)在乳腺癌组织中的表达,探讨TGF-β1在乳腺癌发生发展过程中的作用。方法取65例手术切除乳腺癌蜡块标本及其周围正常组织,分为两组:A组为对照组,检测标本为乳腺癌癌旁组织;B组为实验组,检测标本为乳腺癌组织,采用免疫组化方法检测TGF-β1蛋白的表达。结果TGF-β1主要在乳腺癌组织的细胞浆中表达,TGF-β1在乳腺癌组织中的表达率为69.23%,明显高于正常组织(16.92%)中的表达(P0.05);不同年龄、不同大小肿块、不同病理类型的乳腺癌组织中TGF-β1的表达比较差异无统计学意义(P0.05),然而与组织学分级、淋巴结转移情况呈显著相关性(P0.05)。结论 TGF-β1在乳腺癌组织的表达高于正常乳腺组织,并促进乳腺癌的发展,可作为判断乳腺癌预后的新指标。     

尖锐湿疣皮损组织中白细胞介素-1、人β防御素-3表达与复发的关系

目的 探讨尖锐湿疣（condyloma acuminatum,CA）患者皮损组织中的白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、人β防御素-3(human beta-defensin-3,HBD-3)的表达情况及其与CA复发的关系。方法 选取2018年8月至2021年8月在十堰市人民医院（湖北医药学院附属人民医院）就诊的98例CA患者临床资料。治疗完成后均随访6个月,记录复发情况;并于治疗前后获取患者皮损组织标本,检测皮损组织中IL-1、HBD-3的表达情况,分析两者表达与患者复发的关系。结果 患者治疗后的IL-1 mRNA相对表达量、HBD-3 mRNA相对表达量均较治疗前降低,差异有显著性（P<0.05）。98例患者中,有31例复发,复发率为31.63%(31/98),复发时间1～6个月,中位复发时间6.00(3.00,6.00)个月。复发组的IL-1 mRNA相对表达量、HBD-3 mRNA相对表达量均高于临床治愈组,差异有显著性（P<0.05）。COX回归分析结果显示,IL-1 mRNA相对表达量、HBD-3 mRNA相对表达量表达与CA患者复发有关（P...     

P-选择素在乳腺癌中的表达及意义

目的 :探讨P -选择素与乳腺癌浸润、转移的关系。方法 :运用免疫组织化学SP法分别检测 2 5例乳腺纤维腺瘤、2 8例乳腺导管内癌、5 0例浸润性导管癌组织中P -选择素的表达情况。结果 :乳腺纤维腺瘤、乳腺导管内癌、浸润性导管癌组织中P -选择素的阳性表达率分别为 12 .0 % ( 3 /2 5 )、3 9.3 % ( 11/2 8)、74.0 % ( 3 7/5 0 ) ,三组间两两比较均有统计学意义 (P <0 .0 5 )。且其表达与肿瘤浸润、淋巴结转移有关 (P <0 .0 5 )。结论 :提示P -选择素参与了乳腺癌的发生、发展、浸润及淋巴结转移 ,有望成为预测乳腺癌转移和评估预后的重要指标。     

聚集素在大肠腺癌中的表达及其意义

目的:探讨Clusterin在大肠腺癌中的表达情况、作用及其与临床病理特征之间的相关性。方法:利用免疫组织化学法检测Clusterin蛋白的表达情况,分析其表达结果与临床病理间的关系。结果:免疫组化结果显示Clusterin在大肠腺癌中的表达明显高于大肠腺瘤及大肠正常黏膜(P<0.01),表达情况与有无淋巴结转移、浸润程度、Dukes分期及肿瘤组织分化程度呈正相关(P<0.01),但与性别及年龄无关。结论:Clusterin的高表达在大肠腺癌的发生、发展过程中可能起到重要作用。     

细胞间黏附分子-1和P-选择素在鼻息肉中的表达

目的:揭示细胞间黏附分子-1(ICAM-1,CD54)和P-选择素(CD62p)在鼻息肉发病机制中的作用.方法:收集鼻息内标本32例,炎性鼻甲黏膜11例,正常鼻黏膜12例作对照,应用FACScan流式细胞仪测定不同标本内表达这两种黏附分子的阳性细胞数量.结果:鼻息肉和炎性鼻甲黏膜ICAM-1和P-选择素的细胞阳性率均明显高于正常鼻黏膜(P＜0.001);鼻息肉和炎性鼻甲黏膜之间ICAM-1和P-选择素的细胞阳性率差异无显著性(P＞0.05);ICAM-1和P-选择素在鼻息肉中的表达有正相关关系(r=0.900 1,P＜0.001).结论:ICAM-1和P-选择素在鼻炎和鼻息肉发病过程中都起了重要作用,在鼻息肉中二者表达有一致性.     

通气时间对呼吸机相关肺炎中β-防御素-2表达的影响

目的本研究观察大鼠肺组织β-防御素-2（BD-2）的基因和蛋白质在24h和48h两种机械通气时间的呼吸机相关肺炎（VAP）模型中表达水平。方法健康清洁级雄性成年SD大鼠随机分成24h通气组（n=29）和48h通气组（n=29）。两组大鼠分别在机械通气24h和48h后，从气管导管中注入1mol／L浓度的铜绿假单胞菌0．2mL复制VAP模型。采用RT—PCR和Western blot技术测定实验大鼠BD-2 mRNA和蛋白质表达的水平变化。结果48h组重度肺组织病理变化为66．7％，显著性高于24h组的28．6％（x^2=6．11，P=0．013）。48h组细菌血培养阳性率为62．5％，明显高于24h组的33．3％（x^2=4．09，P=0．043）。24h组5d存活率为60％，48h组为0（x^2=4．29，P=0．038）。两组接种细菌3h内BD-2 mRNA表达差异无显著性意义，24h组6h后表达上调水平显著高于48h组，并于12—24h时BD-2基因表达水平达峰值。结论随着机械通气时间延长，VAP大鼠中BD-2基因和蛋白质表达上调水平的明显下降，可能是更长时间机械通气易发生VAP的重要因素之一。     

TRAIL在Aβ25-35诱导的大鼠海马组织中的表达

[目的]研究Aβ25-35诱导的AD大鼠TRAIL蛋白表达的变化,进一步阐明AD的发病机制.[方法]选用智能正常的健康雌性Wistar大鼠,双侧海马注射Aβ25-35,制备AD大鼠模型,免疫组化法观察大鼠海马组织TRAIL蛋白的表达.[结果]与正常组相比.模型组TRAIL蛋白表达阳性率明显升高,雌激素治疗组与模型组相比,TRAIL蛋白表达明显降低.[结论]TRAlL蛋白的表达引起神经元凋亡是AD的发病机制之一.     

人类ERMAP基因在不同胎龄胚胎组织中的表达

人类ERMAP（human erythroid membrane associated protein,hERMAP）基因是从人胎肝cDNA文库中筛选出来的新基因。通过Northern blot检测，提示其高度特异表达于胎肝、成人骨髓等造血组织以及K562细胞；通过荧火蛋白转染试验证实其位于292T细胞膜和其他胞质小体上，通过对其所编码的蛋白分子的分析显示其为一跨膜蛋白分子，属免疫球蛋白超家族成员。     

白细胞介素-1β在激光损伤家兔视网膜组织中的表达变化

目的探讨白细胞介素-1β(IL-1β)在激光损伤视网膜组织中的表达变化。方法成年健康有色家兔72只,随机分为对照组(不做任何处理)、假手术组(除不进行532nm绿激光照射外,其余操作与损伤组相同)、损伤组(532nm绿激光进行视网膜激光损伤照射造模)各24只,以术后7d、术后14d、术后21d、术后28d作为观察时间点,每个时间点各处死对照组、假手术组、损伤组家兔6只。观察并计算各时间点家兔的视网膜细胞的凋亡指数,记录视网膜组织中IL-1β表达变化视网膜损伤形态与病理变化。结果损伤组术后7d激光斑中心呈灰色改变周围可见灰白色边缘;术后14 d激光斑呈黑灰色改变;术后21d和28d激光斑之间有融合的趋势。术后7d、14d、21d和28d损伤组家兔的视网膜细胞凋亡指数均显著高于对照组(P<0.05)。术后7d损伤组的IL-1β蛋白阳性信号显著高于对照组(P<0.05)在术后14d、21d和28d逐渐下降但仍显著高于对照组(P<0.05)。损伤组术后7 d视细胞内外节数量显著减少术后14d、21d和28d外节部分再生,盘膜排列疏松线体肿胀减轻。结论激光损伤家兔视网膜组织中早期伴随有IL-1β的大量表达,随着损伤愈合的进行,IL-1β表达量逐渐减少,可反映视网膜功能状态的变化。