多药耐药基因-1及其多态性与癫痫耐药性的关系

癫痫是神经系统的常见病,约四分之一的癫痫患者为难治性癫痫,即用药物治疗得不到有效地控制。近年来,人们对多药耐药基因（人类简称MDR1,动物简称mdr1）及其多态性（SNP）与癫痫耐药的关系越来越感兴趣,但对他们的关系还存有争议。本文结合文献就其与癫痫耐药性的关系综述如下。     

难治性癫痫患者外周血多药耐药基因表达的研究

目的 研究人多药耐药基因(MDR1)、mRNA及其产物P-糖蛋白(P-gp)在外周血中的表达.方法 用流式细胞仪定量检测难治性癫痫(RE)患者(A组)、癫痫控制良好患者(B组)和健康献血者(对照组)的人外周血P-gP表达,荧光定量聚合酶链反应技术检测其MDR1-mRNA表达.结果 两种方法均显示,RE组MDR1-mRNA表达量较B组和对照组显著增高(P均<0.01);B组与对照组比较无统计学差异.A、B组及对照组P-gP阳性细胞表达率为0者分别为2、3、7例,而三组均有MDR1-mRNA表达,如表达量按>103为参考值,则RE组阳性率为100%.结论 定量检测癫痫患者外周血MDR1-mRNA表达,可同步反映其脑组织MDR1表达水平,作为RE诊冶的外周指标;荧光定量PCR较流式细胞仪检测MDR1-mRNA表达的灵敏度及特异性高.     

左乙拉西坦对癫痫幼鼠海马组织中多药耐药基因表达的影响

目的观察左乙拉西坦(LEV)对癫痫幼鼠海马组织中多药耐药基因(mdr)表达的影响。方法选择出生后7 d的雄性Wistar大鼠70只,随机分两组。癫痫组(38只)给予海人酸腹腔注射致痫,对照组(32只)腹腔注射相同剂量生理盐水。待自发性癫痫模型建立后,癫痫组随机分为癫痫观察(EP)组、癫痫治疗(EP+LEV)组;对照组分为生理盐水观察(NS)组和生理盐水治疗(NS+LEV)组。EP+LEV组和NS+LEV组给予LEV 300 mg/kg灌胃,1次/d,共6周;EP组和NS组给予同等剂量生理盐水灌胃,1次/d,共6周。各组大鼠断头取海马,PT-PCR检测其mdr1a、mdr1b mRNA。结果与NS相比,EP组mdr1a、mdr1b mRNA的表达明显升高(P均<0.01);与EP组相比,EP+LEV组mdr1a、mdr1b mRNA表达降低(P均<0.05)。结论癫痫幼鼠的海马组织中mdr1a、mdr1b mR-NA表达增加,LEV灌胃可使癫痫幼鼠海马组织mdr1a、mdr1b mRNA表达降低,但对正常幼鼠海马组织mdr1a、mdr1b mRNA的表达无明显影响。     

肺癌多药耐药现象与生物膜表面糖蛋白

肺癌化疗前后常产生多药耐药使化疗失败,目前认为生物膜上某些糖蛋白与多药耐药有关,本文拟对这些糖蛋白的结构、功能及与肺癌的多药耐药机制加以概述。     

逆转MDR—l基因相关的消化系统肿瘤多药耐药

消化系统恶性肿瘤细胞多药耐药是导致化疗失败的重要原因。多药耐药基因(MDR—1)过度表达P—糖蛋白(p-gp)是产生耐药的主要机制。逆转MDR—l基因相关的消化系统肿瘤多药耐药，提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性的方式有两类：一是直接抑制p-gp的药泵功能；二是干扰MDR—l基因的表达。     

难治性癫痫儿童外周血P糖蛋白检测的意义

目的探讨外周血P糖蛋白水平与儿童难治性癫痫（RE）耐药性的关系。方法采用ELISA方法检测RE患儿（RE组）、非难治性癫痫患儿（NRE组）及健康体检者（对照组）的外周血P糖蛋白浓度。结果 RE组初诊时血清P糖蛋白含量高于NRE组及对照组（P均〈0.05）,而NRE组与对照组比较无统计学差异（P〉0.05）;正规治疗1 a后,RE组血清P糖蛋白含量明显高于NRE组（P〈0.01）。结论 P糖蛋白在癫痫耐药的发病机制中起重要作用,其在外周血高表达可作为癫痫患者耐药的一个客观指标。     

多药耐药基因在癫痫患者外周血中表达的研究

采用荧光定量PCR方法,检测难治性癫痫(RE)、癫痫控制良好患者和健康献血者各30例的外周血中多药耐药基因(MDRI)mRNA表达量。结果显示RE患者MDRI mRNA表达量与癫痫控制良好患者及健康献血者比较均有统计学差异(P<0.01);后两者比较无统计学差异(P<0.05)。提示癫痫患者外周血中MDRImRNA表达水平可反映其脑组织MDRI mRNA表达水平,可作为诊冶RE的外周血指标。     

造血干细胞多药耐药P-糖蛋白的表达及多药耐药逆转剂对其功能的影响

了解多药耐药Ｐ－糖蛋白在造血干／祖细胞的表达,探讨多药耐药逆转剂在临床应用过程中可能对造血干细胞的损害。方法：采用ＭＲＫ１６单克隆抗体,利用流式细胞仪测定健康人骨髓ＣＤ３４阳性细胞表达Ｐ－ｇｐ的表达;将多药耐药逆转剂ＭＳ－２０９作用于造血细胞,检测ＭＳ－２０９对ＣＤ３４阳性细胞摄取染料Ｒｈｏｄａｍｉｎ－１２３的影响。     

P-糖蛋白介导的肿瘤多药耐药机制及其逆转策略

多药耐药（multidru gresistance,MDR）是影响肿瘤化疗疗效及预后的主要因素之一。而P-糖蛋白过度表达是引起多药耐药的常见原因,因此抑制P-糖蛋白介导的外排作用,从而提高细胞内的药物浓度进而逆转多药耐药,这已成为国内外研究的热点。现就P-糖蛋白介导的多药耐药机制及逆转策略简要综述。     

P-糖蛋白与类风湿关节炎多药耐药的相关研究

目的 检测P-糖蛋白(P-gp)在类风湿关节炎(RA)初发未治组、治疗有效组及难治组患者外周血淋巴细胞上的表达,分析RA患者的病程、用药时间与P-gp表达水平的关系,探讨P-gp与难治性RA多药耐药的相关性和难治性RA多药耐药形成的可能机制.方法 按照入组标准收集健康人20名,RA初发未治组、治疗有效组及难治组各20例.采用流式细胞仪间接免疫荧光法榆测外周血淋巴细胞P-gp.分析P-gp表达水平与RA治疗有效组及难治组患者的病程和用药时间的相关性.所有数据经t检验、单因素方差分析和直线相关分析进行统计学处理.结果 RA初发未治组外周血淋巴细胞P-gp荧光值(4.26±0.74)表达与健康对照组(4.03±0.34)相比无明显增加,2组间差异无统计学意义(t=1.26,P>0.05);RA治疗有效组外周血淋巴细胞P-gp荧光值(6.74±0.23)表达与健康对照组及RA初发未治组相比有轻度增加,差异有统计学意义(t=21.20,P<0.05);RA难治组外周血淋巴细胞P-gp荧光值(13.10±0.33)表达与健康对照组、RA初发未治组及RA治疗有效组相比有明显增加,差异有统计学意义(t=85.60,P<0.05);P-gp表达水平与RA患者的病程、用药时间均无相关性(r=0.380,P>0.05).结论 RA患者末接受改善病情抗风湿药(DMARDs)治疗前P-gp耐药蚩白表达无增高;甲氨蝶呤、来氟米特在治疗RA的同时,可诱导患者外周血淋巴细胞上的P-gp表达升高,导致RA患者耐药;P-gp参与难治性RA多药耐药,可能是难治性RA多药耐药形成机制之一;RA患者外周血淋巴细胞P-gp表达水平与病程和用药年限无明显关联.     

耐多药结核病患者外周血中多药耐药相关跨膜转运蛋白的表达

目的 评价耐多药结核病(MDR-TB)患者外周血中单核细胞P糖蛋白和多药耐药相关蛋白(MRP)表达水平的变化.方法选择2004年9月至2007年12月在武汉市结核病防治所住院治疗的MDR-TB患者89例为耐多药组,其中男52例,女37例;年龄17~62岁,平均(45±6)岁;平均病史3.5年;均符合MDR-TB的诊断标准.同期在武汉市结核病防治所住院的初治结核病患者55例为结核病组,其中男34例,女21例;年龄18~60岁,平均(48±8)岁;平均病史1.2年;痰涂片均为阳性.对照组为武汉市结核病防治所无肺结核史的工作人员31例,其中男19例,女12例;年龄25~62岁,平均(44±5)岁.抽取外周血,采用实时定量PCR法,分别检测单核细胞P糖蛋白和MRP的mRNA水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用SNK-q检验.结果 耐多药组P糖蛋白mRNA表达的吸光度值(1.34±0.32)与结核病组(1.12±0.23)和对照组(1.05±0.16)比较,差异无统计学意义(F=0.536,P>0.05).耐多药组MRP的mRNA表达(3.45±0.43)明显高于结核病组(1.23±0.34)和对照组(1.04±0.12),3组比较,差异有统计学意义(F=24.241,P<0.05),耐多药组分别与其他2组比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 MRP高表达与MDR-TB患者的多耐药存在一定的相关性.

Abstract：

Objective To evaluate the expression of P-glycoprotein (P-pg) and multidrug resistance-associated protein (MRP) mRNA levels in peripheral blood mononuclear cells from multidrug resistant tuberculosis (MDR-TB) patients. Methods The subjects of this study included 3 groups: a non-TB control group, a TB control group and a MDR-TB group. The 31 subjects in the non-TB control group were staff from Wuhan Tuberculosis Prevention and Treatment Institute. The 55 cases in the TB control group were in-patients during September 2004 to December 2007 who were diagnosed as having pulmonary tuberculosis. The 89 cases in the MDR-TB group were in-patients during the same period, but who were diagnosed as having MDR-TB. Peripheral mononuclear cells were isolated and mRNA levels of P-pg and MRP were measured by real-time PCR. Comparisons of the data between different groups were performed using one-way ANOVA, and SNK q was used for comparison between 2 groups.Results There was no significant difference in the relative P-pg mRNA levels among the MDR-TB group (1.34±0.32), the non-TB control group (1.05±0.16) and the TB control group (1.12±0.23), F=0.536, P>0.05. The relative MRP mRNA level (3.45±0.43) was the highest in the MDR-TB group (3.45±0.43), as compared to the TB control group (1.23±0.34) and the non-TB control group (1.04±0.12), F=24.241, P<0.05. Conclusion Higher expression of MRP in peripheral mononuclear cells might be related to multidrug resistance in MDR-TB patients.     

急性白血病多药耐药基因表达的临床研究

为降低白血病细胞对化疗药物的敏感性，用逆转录聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，定量检测了各病期９１例急性白血病患者的多药耐药基因（ＭＤＲ１）表达水平，发现初治组、缓解组、难治复发组ＭＤＲ１阳性率分别为４０．０％、２８．１％、８２．８％，且难治复发组ＭＤＲ１基因表达水平０．４３８８±０．０６７９（±ｓ）明显高于初治组０．２２０８±０．０８９６和缓解组０．２４５６±０．０７６８。在３０例初治患者中，ＭＤＲ１阳性组化疗缓解率为４１．７％，明显低于阴性组的８８．９％（Ｐ＜０．０５）。在缓解病人中，ＭＤＲ１表达阳性组与阴性组复发率有显著的差异（６６．７％；１３．０％Ｐ＜０．０１）。认为ＭＤＲ１基因表达增加是急性白血病患者的一个不良预后因素，是判断早期高危因素及耐药复发的一个重要指征。     

至真方对人大肠癌多药耐药细胞株HCT-8/VCR中核因子-κB及P糖蛋白表达的影响

[目的]从核因子-κB（NF-κB）途径研究至真方对大肠癌多药耐药（MDR）细胞株———人大肠癌细胞株及长春新碱细胞株（HCT-8/VCR）的逆转作用及P糖蛋白（P-gp）表达的影响。[方法]CCK-8法测定HCT-8/VCR的MDR性及至真方含药血清对HCT-8/VCR细胞株的逆转作用;Real-time PCR及Western blot检测NF-κB/p65、MDR1mRNA,NF-κB/p65、P-gp蛋白的表达。[结果]至真方含药血清可明显抑制HCT-8/VCR细胞生长。不同浓度至真方含药血清作用24h后,HCT-8/VCR细胞NF-κB/p65、MDR1mRNA及NF-κB/p65、P-gp蛋白表达均降低,且呈浓度依赖性,与阴性对照组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。[结论]至真方对人大肠癌MDR细胞株HCT-8/VCR的逆转作用可能与其下调NF-κB、P-gp的表达相关。     

蛋白激酶C的激活剂及抑制剂对胃癌耐药细胞系P-糖蛋白功能及表达的影响

目的：探讨蛋白激酶C(protein kinase,C,PKC)的激活剂及抑制剂对胃癌耐药细胞系P－糖蛋白（P-glycoprotein,Pgp)功能及表达的影响。方法：用免疫细胞化学及流式细胞仪方法检测Pgp在胃癌耐药细胞系SGC7901／VCR及其药敏细胞系SGC7901的表达,并观察了PKC的激活剂佛波酯（phorbol 12-myristate 13-acctate,PMA)和抑制剂H－7作用不同时间Pgp表达的变化。用免疫荧光双标记及共聚焦显微镜技术观察PKC－α及Pgp在胃癌耐药细胞系及其敏细胞系的共同表达,用罗丹明123（Rohdamin123,R123)作为荧光探针检测PMA及H－7对细胞内药物浓度的影响。Pgp在耐药细胞系SGC7901／VCR表达呈阳性,在药敏细胞系SGC7901表达呈弱阳性。PKC-α与Pgp在SGC7901／VCR及SGC7901细胞系细胞膜均有共同表达,以SGC7901／VCR细胞系共同表达明显。PMA处理细胞,细胞内R123的平均荧光强度明显减低;Pgp的功能增强而表达减少,且时间依赖性：H－7处理细胞,细胞内R123的平均荧光强度明显增国Pgp的功能减弱而表达增加,也有明显依赖性。结论：PKC可能通过调节Pgp的功能与表达而参与与胃癌细胞多药耐药的形成。     

普乐可复血药浓度与肝药酶P450 3AP1和多药耐药基因多态性的关系

目的 :探讨普乐可复血药浓度的个体间差异与其在体内吸收、代谢相关基因肝药酶P4 5 0 3AP1(CYP3AP1)和多药耐药基因 1(MDR1)多态性的关系。　 方法 :观察 4 1例口服普乐可复治疗的狼疮或膜性肾病患者的体重、普乐可复剂量、普乐可复全血谷浓度 ,并利用PCR 限制性片断长度多态性的方法检测患者CYP 3AP1基因— 4 4位A/G和MDR1基因 3435位C/T多态性 ,分析浓度 /剂量比与基因型的关系。　 结果 :CYP 3AP1基因为AA型患者的血药浓度明显高于AG或GG型 (15 1 3± 93 4 ,n =2 1vs6 9 2± 39 4 ,n =2 0 ,P <0 0 0 1) ,MDR1基因为CC型患者的血药浓度明显低于CT或TT型 (73 7± 38 2 ,n =12vs 12 6 8± 91 3,n =2 9,P <0 0 5 )。　 结论 :CYP 3AP1和MDR1基因多态性与普乐可复的血药浓度显著相关。根据上述基因不同基因型药物代谢的特点 ,有针对性地进行剂量调整 ,或在用药前通过检测基因型更合理地选择患者 ,有助于提高普乐可复的疗效 ,减少其副作用     

环氧合酶-2、P-糖蛋白与肿瘤多药耐药

P 糖蛋白介导的肿瘤多药耐药是肿瘤细胞产生耐药性主要的机制之一。环氧合酶 2 是肿瘤发生的限制点之一,参与肿瘤发生发展的多个环节。近年来一些研究表明环氧合酶 2 系统可能参与 P 糖蛋白的表达。该文对环氧合酶 2与 P 糖蛋白的关系作一综述。     

多药耐药基因1 C3435T基因多态性对临床相关药物影响的研究进展

<正>多药耐药基因(MDR)1,又名三磷酸腺苷(ATP)结合盒亚家族B成员(ABCB)1是一个较保守的基因家族,是人体正常基因,编码P-糖蛋白(P-gp)。研究发现[1],P-gp为介导药物之间产生相互作用的重要环节,通过影响药物在细胞内外的转运过程,特别是在小肠部位的转运,而影响药物口服生物利用度的改变,从而进一步影响药物的疗效、毒性或产生耐药[2,3]。无论是在正常组织或肿瘤细胞中,若编码P-gp的MDR1基因发     

多药耐药基因的表观遗传调控与消化系肿瘤

消化系统恶性肿瘤细胞多药耐药基因过度表达p-糖蛋白，降低细胞内药物浓度，产生多药耐药是化疗失败的重要原因，MDR1的转录表达受多种因素的影响，其中表观遗传调控为肿瘤分子治疗提供新思路，MDR1基因甲基化和RNA干扰可通过转录抑制而逆转多药耐药性。     

结肠癌细胞多药耐药模型LoVo/Adr的建立及其耐药相关基因的表达

目的 建立结肠癌细胞多药耐药模型LoVo/Adr并研究其耐药机制。方法 采用阿霉素浓度递增法，建立人结肠癌细胞多药耐药模型LoVo/Adr，观察其生长规律；用MTT法鉴定耐药细胞株的耐药性；以流式细胞检测其周围分布；用RT－PCR方法检测耐药相关基因mdr1,MRP,GST-π及TopoⅡmRNA水平在诱导耐药过程中的变化；采用免疫组化法检测P-gp的表达。结果 LoVo/Adr细胞与LoVo细胞相比，生长缓慢，倍增时间延长，细胞形态较不规则，S期细胞减少，而G1，G24期增多P－gp染色阳性。LoVo/Adr对阿霉素，长春新碱，丝裂霉素，环磷酰胺和5－FU耐药倍数分别是61倍，14倍，3倍，9倍和1倍。亲本LoVo细胞mdr1不表达随着阿霉素诱导mdr1 mRNA水平逐渐增高，GST－πmRNA在诱导初期显著增高，但不随着对阿霉素耐受浓度增加而升高；ToopⅡmRNA水平一直无显著变化；未测到MRP的表达。结论 耐药株LoVo/Adr是一个表达MDR表型的多药耐药模型，主要由mdr1和GST－π基因介导耐药，与TopoⅡ和MRP基因无关。