五苓散对糖尿病视网膜病变大鼠血-视网膜屏障的保护作用

目的：探讨五苓散对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠血-视网膜屏障的保护作用及其机制。

方法：SD雄性大鼠50只随机分为空白组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组,每组10只,采用高脂高糖饮食联合腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型。高剂量组和低剂量组大鼠采用五苓散水煎液灌胃,模型组和空白组大鼠采用等量生理盐水灌胃,阳性对照组大鼠右眼球内注射康柏西普。给药12wk后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清C反应蛋白(CRP)和可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)表达水平,HE染色观察视网膜组织结构,伊文思蓝(EB)渗漏试验观察大鼠血-视网膜屏障通透性,免疫组织化学法检测血管内皮生长因子(VEGF)在视网膜中的表达。

结果：模型组大鼠空腹血糖水平和视网膜组织EB渗透量、CRP和sICAM-1表达均较空白组明显升高,高剂量组大鼠视网膜组织EB渗透量、CRP和sICAM-1表达均低于低剂量组和阳性对照组(均P<0.05)。模型组大鼠视网膜神经节细胞层结构紊乱,视网膜水肿,VEGF表达明显升高; 与低剂量组和阳性对照组比较,高剂量组大鼠视网膜组织神经节细胞排列较清晰,水肿减轻。

结论：五苓散能有效降低糖尿病大鼠血清炎症因子水平,降低视网膜组织中VEGF的表达,减轻水肿,保护血-视网膜屏障。     

蒲黄提取物对糖尿病视网膜病变大鼠的保护作用

目的:探讨蒲黄提取物对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠的保护作用。方法:将50只SPF级大鼠随机分为对照组:正常饲养;DR组:给予等量的生理盐水灌胃;实验A组:蒲黄提取物50mg/(kg·d);实验B组:蒲黄提取物100mg/(kg·d);实验C组:蒲黄提取物200mg/(kg·d)。测定各组大鼠空腹血糖;HE染色观察各组大鼠视网膜病理学变化;ELISA检测各组大鼠血清中IL-6、TNF-α含量;Western blot检测视网膜组织VEGF、VEGFR2和Ang-1蛋白表达水平;q RT-PCR法检测视网膜组织VEGF、VEGFR2和Ang-1 mRNA表达水平。结果:与对照组相比,DR组和各实验组大鼠空腹血糖、血清中IL-6、TNF-α含量及视网膜组织VEGF、VEGFR2和Ang-1的蛋白及mRNA表达水平均显著升高(P<0.05);与DR组相比,各实验组大鼠空腹血糖均有下降,且实验B组和实验C组大鼠空腹血糖显著降低(P<0.05);此外,实验B组和实验C组大鼠血清中IL-6、TNF-α含量、视网膜组织VEGF、VEGFR2和Ang-1的蛋白及mRNA表达水平与DR组相比均降低(P<0.05)。HE结果发现,DR组大鼠视网膜光感受器细胞层结构被明显破坏,细胞出现水肿、间隙增宽;实验B组和实验C组大鼠视网膜组织病理学均有不同程度改善。结论:蒲黄提取物可下调DR大鼠炎症水平及VEGF、VEGFR2和Ang-1的表达,从而改善视网膜组织病变。     

胰激肽释放酶治疗早期高血压视网膜病变

胰激肽释放酶（TPK）为微循环障碍改善剂，具有舒张血管的作用。临床主要用于治疗轻中度高血压、肢体动脉硬化闭塞症、脑动脉硬化、血栓形成及闭塞性周围血管病等。该药可能有改善视网膜微循环作用。作者对40例资料完整的高血压视网膜病患者，经用TPK治疗3mo，取得较好效果，现总结如下。1对象和方法1．1对象40例（80只眼）高血压视网膜病变患者均来自眼科门诊病例，其中男22例，女18例，年龄45～62a，平均54a，患高血压病平均为6a，排除肾脏及其它系统疾病。1．2方法用检眼镜、裂隙灯检查眼底，40例中有30例合并有眼底改变（Scheie）。…     

Netrin-1对糖尿病视网膜病变大鼠的保护作用

目的　探讨Netrin-1对糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）大鼠的保护作用。方法　通过腹腔注射链脲佐菌素诱导DR大鼠模型,使用生理盐水作为对照。为了研究Netrin-1基因沉默对DR的影响,构建si-NC和si-Netrin-1大鼠模型,并随机分为4组:A组（si-NC大鼠）、B组（si-Netrin-1大鼠）、C组（si-NC大鼠+DR造模）、D组（si-Netrin-1大鼠+DR造模）。为了研究外源性Netrin-1对DR的影响,将WT大鼠随机分为3组:对照组、DR组、Netrin-1组。造模后3个月,HE染色检测各组大鼠视网膜组织各层厚度,免疫荧光染色检测Iba1表达情况,实时荧光定量PCR检测各炎症因子表达水平。结果　与C组相比,D组大鼠视网膜组织中内核层、外核层厚度降低,差异均有统计学意义（均为 P<0.05）;Iba1及IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α表达升高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。与DR组相比,Netrin-1组内核层、外核层厚度升高,差异均有统计学意义（均为 P<0.05）;Iba1及各炎症因子表达水平降低,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　Netrin-1基因沉默可加重糖尿病大鼠视网膜损伤和炎症,外源性Netrin-1则具有保护作用。     

肝X受体激动剂TO901317对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜的保护作用

目的 探讨肝X受体激动剂TO901317对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠视网膜的保护作用.方法 取24只健康SPF级SD大鼠,随机分为正常组、模型组、TO901317组,每组各8只.正常组大鼠不做任何处理;模型组、TO901317组大鼠在禁食24 h后测量空腹血糖浓度,腹腔内注射链脲佐菌素60 mg·kg-1,1周后采尾...     

PACAP38调控TRPC6表达对糖尿病视网膜病变大鼠的保护作用

目的探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽-38(pituitary adenylate cyclase-activating peptide-38,PACAP38)在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)过程中的视网膜保护是否由瞬时受体电位通道6(TRPC6)介导。方法将30只SD大鼠随机分为空白对照组和STZ组,每组15只。经单次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发大鼠糖尿病动物模型。根据不同的干预方式,在注射STZ 2周后,一次性向大鼠一眼玻璃体内注射100μmol·L^-1 PACAP38(STZ+PACAP38组),另一眼注射等量的PBS作为对照(STZ对照组)。采用Western blot和免疫组织化学分析视网膜组织中瞬时受体电位离子通道蛋白6(transient receptor potential channel 6,TRPC6)的表达情况。利用光学相干断层扫描检测各组大鼠的视网膜厚度。将视网膜神经节细胞系RGC-5细胞暴露于高血糖和低氧环境,分别给予PACAP38、TRPC6通道激动剂(OAG)、PAC1受...     

App-17肽对糖尿病大鼠神经网膜的保护作用

目的 评价App-17肽对早期糖尿病大鼠神经网膜的保护作用。方法 雄性Wistar大鼠腹腔注射STZ,建立糖尿病动物模型。模型建立后2周皮下注射App-17肽,1个月后处死大鼠取视网膜。电镜观察糖尿病大鼠神经网膜的病理改变及App-17肽对早期糖尿病神经网膜的保护作用。结果（1）模型组:与正常对照组比较,模型组大鼠神经网膜视锥视杆细胞层、外核层、微血管基底膜和周细胞未见明显改变,但其神经网膜从内核层至神经纤维层有明显病理改变,表现为线粒体数目减少、线粒体水肿、嵴变短甚至消失,线粒体内可见髓样小体,神经节细胞层有暗细胞形成。在神经纤维层和内丛状层细胞突起水肿明显,尤其在神经纤维层,由于细胞突起水肿严重,压迫其周围微血管,可见血管管腔狭窄、闭锁。（2）App-17 肽组:与模型组比较,神经网膜自内核层至神经纤维层有线粒体肿胀,嵴变短、消失,但明显减轻,髓样小体少见。细胞水肿明显减轻,细胞突起水肿明显减轻,微血管未见管腔狭窄和闭锁;神经节细胞层无暗细胞。结论（1）在糖尿病视网膜病变（DR）发病过程中,神经网膜神绎细胞超微结构病理改变早于微血管的改变。（2）糖尿病早期神经网膜神经细胞的损害可能是导致DR的发病机制之一,在DR前期和早期,若能扭转或减轻神经网膜神经细胞的损害,可预防和延缓D     

褪黑素对大鼠糖尿病视网膜病变的影响

目的： 探讨褪黑素对大鼠糖尿病视网膜病变的影响及其机制。

方法： 选用健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组,正常对照组、糖尿病组、低剂量褪黑素组和高剂量褪黑素组,HE染色观察视网膜结构改变,电镜观察视网膜神经节细胞超微结构变化,黄嘌呤氧化酶法检测视网膜组织中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平,Western Blot检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)及P53的蛋白表达水平。

结果： HE染色结果显示,正常对照组大鼠视网膜组织结构清晰,糖尿病组大鼠视网膜组织层次欠清晰,神经纤维层水肿,低剂量褪黑素组视网膜细胞分层基本分明,层间细胞排列较整齐,内外核层排列稍紊乱,高剂量褪黑素组大鼠视网膜组织结构较低剂量褪黑素组进一步改善; 电镜观察结果显示,与糖尿病组比较,褪黑素组大鼠视网膜神经节细胞形态均不同程度改善; 黄嘌呤氧化酶法检测结果显示,褪黑素组大鼠视网膜组织中SOD水平高于糖尿病组,MDA水平低于糖尿病组(均P<0.05); Western Blot结果显示,低、高剂量褪黑素组与糖尿病组比较,Bcl-2蛋白表达逐渐升高,Bax、P53蛋白表达明显降低(均P<0.05)。

结论：褪黑素可改善糖尿病大鼠视网膜形态变化,对糖尿病视网膜病变有一定抑制作用。     

天然抗氧化剂对糖尿病视网膜病变的预防和保护作用

氧化应激是糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）发生发展中常见的损伤机制,抗氧化剂作为氧化应激的抑制物在DR的预防与保护方面起一定的作用。天然抗氧化剂存在于植物或者食物中,具有易获取、患者易接受、副作用小以及部分可以通过饮食获取便可预防DR的进展等好处,成为目前应用抗氧化剂来预防及延缓DR研究的首选。多数抗氧化剂都可通过Nrf2信号通路发挥抗氧化作用,但信号通路上游及下游蛋白的复杂性导致其具体作用机制各不相同,因此各种抗氧化剂应用于DR的具体作用机制还有待进一步研究。（国际眼科纵览,2019, 43： 377-384）     

C肽与糖尿病视网膜病变

在过去的20a里,虽然不是所有的学者都认可,但很多通过人或动物的研究都表明,C肽在防止和逆转糖尿病的某些并发症方面发挥着重要作用。此综述的目的就是简要介绍C肽的作用及其作用机理,详细介绍目前有关C肽对糖尿病视网膜病变影响的认识。     

贝那普利对糖尿病大鼠视网膜微血管病变的保护作用

目的:探讨贝那普利(benazepril,BZ)对糖尿病大鼠视网膜微血管病变的保护作用及机制。方法:链脲佐菌素ip制备糖尿病大鼠模型,分为糖尿病组(DM)、贝那普利治疗组(BZ),同时设立正常对照组(Con)。治疗组每天灌胃给予BZ10mg/kg。24wk后放射免疫法测定血浆AngⅡ水平,免疫组织化学法和Westernblot技术检测视网膜VEGF蛋白表达,透射电镜观察视网膜血管基底膜厚度变化。结果:与Con组相比,DM组大鼠血浆AngⅡ水平明显增高(P<0.01),视网膜VEGF蛋白表达显著增强(P<0.01),视网膜微血管基底膜明显增厚;与DM组相比,BZ治疗后大鼠血浆AngⅡ水平明显降低(P<0.05),视网膜VEGF蛋白表达则显著减弱(P<0.01),视网膜微血管基底膜增厚明显减轻。结论:BZ可通过抑制血浆AngⅡ水平,减少糖尿病大鼠视网膜组织VEGF表达,抑制视网膜微血管基底膜增厚。     

糖尿病大鼠视网膜氧化应激损伤及葛根素的干预作用

目的研究糖尿病大鼠视网膜氧化应激指标的变化及葛根素对其的干预作用。方法 40只清结级雄性SD大鼠,其中构建糖尿病大鼠模型30只,随机分为糖尿病模型组、葛根素低剂量组和葛根素高剂量组,每组10只;另设一正常对照组(10只鼠)。造模成功后,葛根素低剂量组与葛根素高剂量组分别给予葛根素250mg·kg-1·d-1和500mg·kg-1·d-1,正常对照组与糖尿病模型组每日给予3mL灭菌生理盐水。均经食道灌胃给药,每日1次,连续4周。4周后测定各组鼠血清及视网膜中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)、总抗氧化能力(total antioxidant capability,T-AOC)的变化,免疫组织化学法检测视网膜组织8-羟-2’-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHdG)和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]活性,Western blot法检测p38MAPK蛋白表达。结果造模后4周,与正常对照组相比,糖尿病模型组大鼠血清与视网膜组织中SOD活性明显下降,分别为(83.20±5.51)U·mL-1、(122.96±10.98)U·mg-1;MDA含量显著增高,分别为(29.58±0.41)μmol·L-1、(8.87±0.49)μmol·g-1;视网膜中T-AOC含量明显下降,为(1.72±0.31)U·mg-1(均为P<0.05)。gn糖尿病模型组相比,葛根素低剂量组血清SOD活性升高,为(97.80±1.75)U·mL-1(P<0.05),但其他指标变化不大(均为P>0.05)。与糖尿病模型组相比,葛根素高剂量组血清与视网膜组织中SOD活性升高,分别为(114.17±4.02)U·mL-1、(146.48±8.04)U·mg-1;视网膜TAOC含量升高,为(2.12±0.37)U·mg-1;血清和视网膜MDA含量降低,分别为(20.73±1.51)μmol·L-1、(5.73±0.76)μmol·g-1(均为P<0.05)。正常对照组大鼠视网膜中8-OHdG、PARP阳性细胞极少,糖尿病模型组表达较正常对照组明显增加,葛根素干预后表达明显减弱,葛根素高剂量组作用更显著。Western blot结果显示:各组大鼠视网膜中总p38MAPK表达无明显差异(P>0.05),但糖尿病模型组视网膜p38MAPK的磷酸化程度较正常对照组显著增强,高剂量葛根素干预后p38MAPK的磷酸化程度明显下降(P<0.05)。结论糖尿病大鼠存在视网膜的氧化应激损伤,葛根素可减轻该损伤作用,其机制可能与p38MAPK信号途径有关。     

Beneficial effects of protocatechuic acid on diabetic retinopathy in streptozocin-induced diabetic rats

AIM: To determine the effects of protocatechuic acid (PCA) on streptozocin-induced diabetic retinopathy (DR) in rats.METHODS: Wistar rats were given a 50 mg/kg intraperitoneal injection of streptozocin to induce diabetes. Animals were assigned randomly one of four groups (8 rats per group): control, diabetic, diabetic plus PCA (25 mg/kg•d), and diabetic plus PCA (50 mg/kg•d). After inducing diabetes, treatments were started one week later and continued for eight weeks. After the experiment, the rats were sacrificed, and their retinas were taken for biochemical and molecular analysis.RESULTS: PCA administration diminished the blood glucose and glycated haemoglobin levels relative to the diabetic group. In diabetic rats, PCA lowered elevated levels of advanced glycosylated end products (AGEs) and receptor for AGEs (RAGE). In the retina of diabetic rats, PCA effectively decreased inflammatory cytokine, nuclear factor-κB, tumour necrosis factor-α, interleukin-1β, and vascular endothelial growth factor, and increased antioxidant markers glutathione, superoxide dismutase, and catalase.CONCLUSION: The protective benefits of PCA against DR may be attributable to its suppression of the AGEs and RAGE and its antioxidant and anti-inflammatory properties.     

Thyrotropin releasing hormone: apparent receptor binding in retina.

Thyrotropin releasing hormone (TRH) binds with high affinity to sites on sheep retinal membranes. These sites closely resemble sheep pituitary receptors for TRH, as determined by direct comparison of binding in the two tissues. Specific [³H]TRH binding in sheep pituitary and retina was measured relative to blanks containing 1 μm [3-Me-His²]TRH, an analog more selective and 10-fold more potent than TRH. Incubations were at 0°C; bound radioactivity was separated by filtration. High affinity retinal TRH binding sites resembled pituitary receptors in (1) equilibrium dissociation constant (about 20–40 nm), (2) rate constant for association (about 1–2 μm^?1 min^?1), (3) rate constant for dissociation (about 0·07 min^?1), (4) effectiveness of 16 TRH analogs, ranging over six orders of magnitude in potency, in competing for binding. Major differences were (1) the retinal binding sites were present in only one quarter the concentration of pituitary receptors (about 5 pmol/g wet weight vs. 20 pmol/g wet weight) and (2) the pharmacological properties of retinal binding sites were partially obscured by the simultaneous presence of low affinity binding sites, absent in pituitary, with which 6 analogs appeared to compete more potently than for high affinity sites. These findings support the possibility that TRH or a closely related substance acts as a peptide neurotransmitter or neuromodulator in the retina.     

神经生长因子对糖尿病大鼠神经视网膜超微结构的影响

目的:通过观测实验性糖尿病动物的神经视网膜的超微结构变化,从视网膜的神经功能角度来探讨糖尿病视网膜病变的发生机制以及相关药物干预后的影响作用。方法:用链脲佐菌素制作糖尿病大鼠动物模型,分为正常对照组(CON组)、糖尿病对照组(DM组)、糖尿病神经生长因子治疗组(D+N组)。分别于病程3,6,9,12mo取大鼠眼球制备石蜡切片,将视网膜组织行HE染色,并将上述标本制备超薄切片,用透射电镜观察并分析。结果:从病程3mo开始,DM组视网膜血管内皮细胞及周细胞的核变形、线粒体肿胀变性、基底膜增厚。视神经节细胞水肿,胞器减少,线粒体变性。光感受器细胞(视锥、视杆)膜盘间隙扩大,线粒体及核也有病理改变。上述病变随病程延长而逐渐加重。经过NGF治疗后,上述DM改变有所减轻,主要表现在感光细胞外节膜盘间隙较DM组缩小,平行度好转;神经细胞突起水肿减轻,胞器水肿好转。各组DM大鼠的视网膜血管、神经网膜及视神经的糖尿病性病变之间未见明显的先后因果关系。结论:神经生长因子对DM大鼠视网膜形态学上所见的视网膜血管、感光细胞和神经节细胞的超微结构改变有着明确的改善作用。在DR的发病过程中,视网膜血管的病变与视网膜神经组织的病变可能是同时存在、互相促进,共同造成糖尿病视网膜病变和视功能的损害。     

滋肾健脾化瘀片对糖尿病大鼠早期视网膜超微结构的影响

目的观察病程为3个月的糖尿病大鼠神经及血管网膜超微结构的病理改变以及滋肾健脾化瘀片对其的影响。方法链脲佐菌素糖尿病大鼠随机分为模型组、导升明组、中药低剂量组、中药高剂量组，并设正常对照组，每日灌药1次，3个月后取后极部视网膜行消化酶铺片及透射电镜观察。结果糖尿病大鼠在3个月时视网膜血管出现管径粗细不均、排列紊乱、扭结和血管襻、未见微血管瘤，血-视网膜外屏障改变。神经网膜视细胞外节膜盘结构模糊，排列紊乱，肿胀变性，甚至溶解破坏。内节含有大量空泡样变的线粒体。内核层细胞内线粒体空泡样变增多。节细胞层核膜不连续、断裂，细胞核皱缩。中药组相对导升明组基底膜增厚减轻，血-视网膜外屏障紧密连接小带连接紧密，色素上皮的顶部微绒毛排列整齐；视细胞外节膜盘、内节线粒体、内核层及神经节细胞层都显示变性线粒体比例下降。结论病程3个月的糖尿病大鼠视网膜血管及神经网膜已出现病理改变，滋肾健脾化瘀片对糖尿病大鼠的视网膜血管及神经网膜具有保护作用，并能减轻血-视网膜外屏障的病理损害。     

MicroRNAs在糖尿病视网膜病变中的相关研究进展

MicroRNAs(miRNAs)是一种小分子非编码RNA,是转录后调节基因表达关键因子,参与调控细胞分化、增殖和新陈代谢等多种生物学过程。在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展过程中miRNAs表达差异改变明显,国内外多项研究表明miRNAs调控基因的表达与DR生理病理机制关系密切。部分特异性表达的miRNAs可以通过调控视网膜中氧化应激与炎症反应水平等影响DR发生发展,因此通过增强或抑制这部分miRNAs可以延缓DR病情进展。单个或多个miRNAs的组合可以作为DR新型的转录组学生物标志物,也是未来治疗DR的潜在有效靶点。目前针对血液或体液中特定miRNAs的检测有助于DR的早期干预治疗和病情随访追踪。因此,本文主要对miRNAs及其参与调控DR的分子机制、治疗前景及生物标志物的相关研究进展作一综述。