Raf激酶抑制蛋白、基质金属蛋白酶-9mRNA在前列腺癌中的表达变化及意义

目的:观察Raf激酶抑制蛋白(RKIP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA在前列腺癌(PCa)中的表达变化,并探讨其临床意义。方法:采用qPCR法检测PCa及良性前列腺增生(BPH)组织中RKIP、MMP-9mRNA的表达,并分析二者表达与临床病理特征关系及二者之间的相关性。结果:RKIP mRNA在PCa组织中相对表达量显著低于BPH组织(P0.01);MMP-9mRNA在PCa组织中相对表达量显著高于BPH组织(P0.01)。RKIP mRNA在PCa组织中相对表达量随着Gleason评分的增高而降低(均P0.05);在PCa组织T_2N_0M_0期以内的无侵袭转移组中的相对表达量高于侵袭转移组(P0.05)。MMP-9mRNA在PCa组织中相对表达量随着Gleason评分的增高而增高(P0.05);在PCa组织T_2N_0M_0期以内的无侵袭转移组中的相对表达量低于侵袭转移组(P0.01)。RKIP mRNA与MMP-9mRNA的表达呈负相关(P0.01)。结论:RKIP mRNA低表达与MMP-9mRNA高表达可能与PCa的发生发展有关,同时RKIP mRNA与MMP-9mRNA表达之间具有相关性,RKIP可能通过调控MMP-9从而促进PCa的发生发展。     

基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9在前列腺癌组织中表达的免疫组织化学研究

目的：探讨基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和基质金属蛋白酶－9（MMP－9）在胶列腺癌组织中的表达及其与前列腺癌侵袭的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测前列腺癌组织及良性前列腺增生组织中MMP－2和MMP－9的表达。结果：前列腺癌组织中MMP－2和MMP－9的表达显著高于良性前列腺增生组织（P＜0．01），前列腺癌组织中MMP－2，MMP－9的表达与侵袭程度呈正相关，结论：MMP－2和MMP－9是检测前列腺癌较好的分子标志，可用于前列腺癌的辅助诊断和预后判断。     

基质金属蛋白酶-9及其抑制因子在肾细胞癌组织中的表达和意义

目的　探讨基质金属蛋白酶 9(MMP 9)和金属蛋白酶组织抑制因子 1(TIMP 1)在肾细胞癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法　采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶 (SP)法检测 5 5例肾细胞癌中MMP 9和TIMP 1的表达情况。结果　MMP 9、TIMP 1蛋白在肾细胞癌和正常肾组织中的阳性表达率各为 63 .63 %和 10 .0 0 % (P <0 .0 5 ) ;60 .0 0 %和10 .0 0 % (P <0 .0 5 )。在肾癌中 ,MMP 9蛋白表达与肿瘤Robson分期、肾包膜侵袭和淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 ) ,而与组织学类型无关 (P >0 .0 5 ) ;TIMP 1蛋白表达与肾细胞癌的临床病理参数无关 (P >0 .0 5 )。结论　MMP 9蛋白高表达参与了肾癌的发展 ,MMP 9和TIMP 1的平衡失调可能在肾癌的侵袭转移中发挥重要作用。     

miR-143调控基质金属蛋白酶-13表达对骨肉瘤细胞迁移及侵袭的影响

目的:探究miR-143对基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase,MMP-13)表达的调节作用及其对骨肉瘤细胞迁移及侵袭能力的影响。方法:采用96孔板培养小鼠骨肉瘤细胞系143B细胞,设立空白组、阴性组、阳性组、干预组。空白组不做特殊处理,阳性组加入50 μg miR-143 mimic,阴性组加入等量mimic NC(miR-143 mimic的对照序列),干预组加入50 μg miR-143 mimic及10 μg MMP-13蛋白,继续培养3~6 h,最后吸出血清处理0.5 h。分别采用荧光定量PCR和Western-blot测定各组miR-143和MMP-13蛋白表达,采用Transwell、划痕实验测定细胞的侵袭与迁移能力。结果:阳性组及干预组MMP-13蛋白表达量明显低于空白组,阳性组低于干预组(P<0.05);空白组、阴性组、阳性组及干预组每个视野的侵袭细胞数均值分别为(1 000.01±44.77)、(959.25±46.32)、(245.04±4.33)、(634.06±33.78)个;阳性组及干预组划痕愈合率均明显低于空白组,阳性组低于干预组(P<0.05)。结论:MMP-13是miR-143作用的一个靶点,可以通过抑制MMP-13表达降低骨肉瘤细胞的迁移及侵袭能力。     

巨噬细胞迁移抑制因子、基质金属蛋白酶-9在胆管癌组织的表达及其临床意义

目的:探讨胆管癌组织中巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平及其与预后的相关性。方法:收集2010年1月至2012年1月河南省人民医院肝胆外科收治的87例胆管癌患者肿瘤病灶及癌旁组织的石蜡标本作为研究对象。用免疫组织化学法检测石蜡切片中胆管癌病灶和癌旁组织中的MIF和MMP-9的表达...     

去甲斑蝥素对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤nm23、基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2的影响

目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤nm23、基质金属蛋白酶(MMP)2和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)2的影响。方法在培养人胆囊癌GBCSD细胞的基础上建立荷瘤鼠胆囊癌模型并进行移植瘤抑制实验,实验分为空白对照、5氟脲嘧啶(FU)、NCTD、NCTD+5FU4组,观测荷瘤鼠移植瘤大小改变、抑瘤率和细胞nm23、MMP2、TIMP2蛋白表达。结果NCTD对荷瘤鼠胆囊癌移植瘤有明显的抑制作用;NCTD组呈棕褐MMP2染色的细胞明显减少,胞浆着色变淡,表达率显著降低(P<0.05);而呈nm23、TIMP2表达棕褐染色的细胞数明显增多,胞浆着色变深、变浓,表达率显著增高(P<0.05);其中均以NCTD+5FU组的作用最明显(P<0.05)。结论NCTD可明显抑制人胆囊癌的侵袭和转移,若与5FU联合应用则具协同作用。其机制可能与NCTD影响转移和基质溶解相关基因蛋白表达有关。     

大肠癌组织中基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达及对微血管生成和肿瘤转移的影响

目的　探讨基质金属蛋白酶 -9(MMP -9)与基质金属蛋白酶抑制剂 -1(TIMP -1)在大肠癌中的表达及其与血管生成 ,侵袭转移之间的关系。方法　采用免疫组化S -P法 ,检测 46例大肠癌组织中MMP -9,TIMP -1的表达和微血管密度之间的关系。结果　MMP -9的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移明显相关 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;TIMP -1的表达与Dukes分期、淋巴结转移明显相关 ( P <0 .0 5或 P <0 .0 1) ;MMP -9表达阳性的大肠癌组织微血管密度 (MVD)值明显高于表达阴性者 (P <0 .0 1)。结论　MMP -9、TIMP -1的表达和微血管生成与大肠癌侵袭转移密切相关     

金属基质蛋白酶2和9在前列腺癌中表达的意义

目的探讨金属基质蛋白酶2(MMP2)和MMP9在前列腺癌中表达的意义及和临床的关系。方法采用免疫组化的方法对51例前列腺癌手术标本及10例前列腺增生手术标本进行MMP2、MMP9检测及分析。结果在10例前列腺增生病例中只有2例MMP2和MMP9表达阳性,与前列腺癌中的表达具有差异显著性;并且MMP2和MMP9的表达与前列腺癌的病理分级、Gleason评分及转移密切相关,但与血清前列腺特异性抗原(PSA)水平无关。结论MMP2和MMP9的表达可能在前列腺癌的发展及转移过程中起重要作用。     

乳腺癌中HER2基质金属蛋白酶-2和9的表达及其相互关系

目的　研究乳腺癌中HER2基因、基质金属蛋白酶 (MMP) 2、基质金属蛋白酶(MMP) 9的表达情况、与临床病理指标之间的关系以及它们之间的相互关系。方法　采用免疫组织化学的方法对 114例乳腺癌组织标本中HER2、MMP 2、MMP 9的表达情况进行检测。结果　乳腺癌组织中HER2、MMP 2、MMP 9的表达阳性率分别是 46.49%、78.95 %、68.42 %。HER2表达与淋巴结转移相关。原发肿瘤 >2cm或有淋巴结转移的患者中 ,其MMP 2、MMP 9表达明显高于原发肿瘤≤ 2cm或无淋巴结转移的患者 (P <0 .0 5 ) ,且MMP 2表达与临床分期相关 (P <0 .0 5 )。HER2表达与MMP 2、MMP 9表达相关 (P <0 .0 5 )。结论　HER2、MMP 2、MMP 9的阳性表达提示乳腺癌有较强的浸润转移能力 ,这 3种蛋白的表达在乳腺癌浸润转移过程中可能起协同作用。     

MMP-2、MMP-9及TIMP-3在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶2，9（MMP-2，MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子3（TIMP-3）在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法和高清晰度彩色医学图文分析系统对35例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜中MMP-2，MMP-9，TIMP-3的表达进行检测分析。结果MMP-2，MMP-9在膀胱癌中呈高表达，且随分期、分级的增高而增高；TIMP-3在膀胱癌中亦呈高表达，且与分级呈正相关，但与分期不相关。结论MMP-2，MMP-9和TIMP-3参与膀胱癌侵袭转移，在膀胱移行细胞癌中的表达对其预后判断具有参考价值。     

人类恶性胶质瘤细胞中变异型IκBα对基质金属蛋白酶-2、-9表达的调节作用

目的 探讨变异型IκBα（IκBαM）基因对人类多形性胶质母细胞瘤（GBM）细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、-9表达的调控作用。方法 通过构建质粒、基因转染以及IκBαM蛋白表达的筛选，建立稳定表达IκBαM的人类GBM细胞株，运用逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测细胞及肿瘤组织内MMP-2、MMP-9在RNA水平的表达；并将肿瘤细胞植入裸鼠皮下制作异位移植瘤生长动物模型，进一步通过免疫组织化学染色方法分析MMP-2、MMP-9的蛋白表达。结果RT-PCR结果显示，体外试验中，MMP-2与对应GAPDH平均吸光度值的比值分别为1．450±0．180（G36Δ-W）、0．292±0．040（G36Δ-M）、1．187±0．140（G36Δ-P）和1．463±0．160（G36Δ）；MMP-9与对应GAPDH平均吸光度值的比值分别为1．424±0．130（G36Δ-W）、0．275±0．020（G36Δ-M）、1．357±0．180（G36Δ-P）和1．608±0．240（G36Δ）。在体内试验中，MMP-2与对应GAPDH平均吸光度值的比值分别为0．870±0．060（G36Δ-W）、0．024±0．010（G36Δ-M）、0．785±0．070（G36Δ-P）和0．686±0．070（G36Δ）；MMP-9与对应GAPDH平均吸光度值的比值分别为0．768±0．010（G36Δ-W）、0．054±0．010（G36Δ-M）、0．802±0．020（G36Δ-P）和0．746±0．020（G36Δ）。在体外和体内试验中，G36Δ-M组与其余各组之间的差异均有统计学意义（P〈0．05），而其他3组间差异无统计学意义。体内试验肿瘤组织中，MMP-2及MMP-9的在G36Δ-M组中的染色显著低于G36Δ、G36Δ-W和G36Δ-P组；而在G36Δ、G36Δ-W和G36Δ-P三组间的表达差异无统计学意义。结论 IκBαM基因可以在分子及蛋白水平显著抑制人类恶性胶质瘤中MMP-2、MMP-9的表达，减弱肿瘤细胞的侵袭和浸润能力。     

Effects of gametogenetin-binding protein 2 on proliferation,invasion and migration of prostate cancer PC-3 cells

We aimed to assess the effects of gametogenetin-binding protein 2 (GGNBP2) on the proliferation, invasion and migration of prostate cancer PC-3 cells. PcDNA3-HisC-GGNBP2 was transfected to overexpress GGNBP2. Proliferation was tested by MTT assay, and migration and invasion were detected by Transwell assay. Cell cycle was detected by flow cytometry. The protein expressions of COX-2, cyclin D1, PI3K, Akt and p-Akt were detected by Western blot. A subcutaneous xenograft model of prostate cancer was established. Mice were randomly divided into three groups (n = 9) and intratumorally injected with pcDNA3-HisC-GGNBP2, pcDNA3-HisC and normal saline respectively. The xenograft tumour volume was measured every 3 days, and weight was measured after 2 weeks. After GGNBP2 overexpression, the proliferation, migration and invasion capacities of PC-3 cells decreased, and cell cycle was arrested in the G1 phase. The protein expressions of COX-2, cyclin D1, PI3K, Akt and p-Akt all reduced. The tumour volume and weight of pcDNA3-HisC-GGNBP2 group were significantly lower than those of pcDNA3-HisC group (p < .05). The proliferation capacity of GGNBP2-overexpressing prostate cancer cells is significantly attenuated, tumour growth is significantly inhibited, and cell cycle is arrested in the G1 phase. GGNBP2 overexpression affects the growth of castration-resistant prostate cancer via the PI3K/Akt signalling pathway.     

DLC-1和MMP-2、MMP-9在肝癌组织中的表达及意义

目的：研究肝癌缺失基因1（DLC－1）和MMP－2、MMP－9在肝癌组织中的表达及其与临床病理分期的关系，为探讨对肝癌发生、发展及转移的分子机制提供依据。方法：采用免疫组化ABC法检测50例肝癌和26例肝脏良性病变肝血管瘤及其周围正常组织中DLC-1和MMP－2、MMP－9的表达情况，结合临床病理资料分析二者在肝癌中表达的意义。结果：DLC－1在原发性肝癌、肝血管瘤组织和周围正常组织中的表达率分别为31．2％，72．1％和81．7％（P〈O．01），MMP－2在3组中的表达率为77．1％，33．3％和26．7％（P〈O．05），MMP－9的表达率为74．3％，29，5％和23．7％（P〈O．05）。DLC－1和MMP－2、MMP－9在原发性肝癌组织中的表达呈明显负相关（Kappa值为－0．459，－O．523），DLC－1和MMP－2、MMP-9与肝癌的发生、分期和淋巴结转移关系密切（P〈0.01）。结论：DLC－1低表达或无表达和MMP－2、MMP－9高表达与肝癌的发生发展转移有关，DLC－1和MMP－2、MMP－9在影响肝癌发生、发展、转移方面存在－定的协同效应，DLC－1有可能成为肝癌早诊和预后判断的候选标志物。     

Expression of MMP-9 in mesangial cells and its changes in anti-GBM glomerulonephritis in WKY rats

Background Matrix metalloproteinase (MMP)-9, a member of the MMP family with specificity towards type IV collagen, is implicated in the turnover of the extracellular matrix in the kidney. To elucidate its physiological and pathophysiological significance, we examined the expression and localization of MMP-9 in the normal kidney and the changes in these features during the course of anti-glomerular basement membrane (GBM) glomerulonephritis induced in WKY rats, along with the changes in these features of tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP-1) and MMP-2.Methods The expression of MMP-9, TIMP-1 and MMP-2 mRNA was quantified by ribonuclease protection assay, and the gelatinolytic activities of MMP-9 and MMP-2 were evaluated by gelatin zymography. The localization of MMP-9 was visualized by immunohistochemistry and immunofluorescence microscopy.Results The ribonuclease protection assay indicated the almost exclusive expression of MMP-9 mRNA in the glomerulus of normal kidneys. Immunohistochemistry and double-label immunofluorescence microscopy showed that MMP-9 was localized in the mesangial cells. During the course of anti-GBM glomerulonephritis, the expression of MMP-9 mRNA in glomeruli increased on day 1, peaked on days 3 to 7, and then decreased on day 14. The change in MMP-9 mRNA expression was accompanied by parallel changes in the gelatinolytic activity of the active form of MMP-9, TIMP-1 mRNA expression, and MMP-9 immunoreactivity in mesangial cells. In contrast, glomerular MMP-2 mRNA expression and its activity increased after the decline of MMP-9.Conclusions MMP-9 mRNA was predominantly expressed in the glomerulus in normal rat kidneys and MMP-9 was present in the mesangium. The MMP-9 mRNA expression increased in the glomerulus 3 to 7 days after the induction of anti-GBM glomerulonephritis in WKY rats, in parallel with the development of abnormal glomerular histology and injury, suggesting a role of MMP-9 in proteolysis of the GBM during glomerulonephritis. MMP-2 may participate in the later phase of the nephritis.     

3-溴丙酮酸对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:观察3-溴丙酮酸(3-BrPA)对前列腺癌细胞PC-3增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其内在机制。方法:体外培养PC-3细胞,倒置显微镜下观察不同浓度3-BrPA对PC-3细胞形态学的影响;应用MTT法、细胞划痕和Transwell法检测不同浓度3-BrPA在不同时间段(24、48、72 h)对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响;应用Western印迹检测3-BrPA作用后各组PC-3细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和基质金属蛋白酶14、9、2(MMP-14、MMP-9、MMP-2)蛋白表达的变化。结果:在一定浓度范围内,随着3-BrPA浓度的升高,细胞形态的改变愈明显。MTT结果表明,随着3-BrPA浓度的增加、作用时间延长PC-3细胞抑制率增大(P<0.01)。细胞划痕和Transwell细胞侵袭实验显示:与对照组相比,培养24 h后25、50、100μmol/L 3-BrPA浓度组细胞划痕迁移愈合率降低,细胞侵袭数目减少,且培养48 h与24 h相比,各组细胞迁移愈合率和侵袭细胞数目均降低,表明细胞体外迁移率和侵袭细胞数目与3-BrPA作用浓度、作用时间有关,具有剂量和时间依赖性(P<0.01)。Western印迹检测结果表明:与对照组相比,25、50、100μmol/L 3-BrPA浓度组中GLUT1、MMP-14、MMP-9、MMP-2蛋白表达量明显降低(P<0.01)。结论:糖酵解抑制剂3-BrPA降低PC-3增殖、迁移和侵袭能力,可能与下调GLUT1、MMP-14、MMP-9及MMP-2蛋白表达有关。     

基质金属蛋白酶-9和组织金属蛋白酶抑制剂-1在骨肉瘤中的表达及其意义

目的　检测骨肉瘤组织中基质金属蛋白酶 (MMP) 9、组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP) 1的表达 ,探讨它们与骨肉瘤侵袭的关系及临床意义。方法　对 70例骨肉瘤、15例骨软骨瘤和 15例正常骨组织进行免疫组织化学染色 ;对 60例病例随访资料进行生存分析。结果　MMP 9与TIMP 1在骨肉瘤中呈普遍阳性表达 ,明显高于骨软骨瘤及正常骨组织 ;MMP 9与TIMP 1的表达与肿瘤浸润软组织及预后存在相关性 ;MMP 9阳性而TIMP 1阴性者发生软组织浸润的比率高 ,预后差。结论　MMP 9、TIMP 1在骨肉瘤中呈普遍表达 ,可作为骨肉瘤侵袭的分子生物学标志和骨肉瘤诊断的辅助指标。MMP 9、TIMP 1的表达与骨肉瘤的软组织浸润有关 ,直接或间接影响患者的预后。     

基质金属蛋白酶家族在骨关节炎软骨组织中表达的研究

[目的]观察骨关节炎关节软骨中MMP-7、MMP-9、MMP-13和TIMP-1的表达,探讨其与软骨退变的关系及可能的作用机制。[方法]选取20例因骨关节炎行关节置换的软骨组织,常规HE染色观察其组织学形态,ABC免疫组化法观察关节软骨MMP-7、MMP-9、MMP-13和TIMP-1的表达,2例因意外受伤截肢患者的正常膝关节软骨标本作为对照。统计采用Mann-Whitney U非参数检验及相关分析。[结果]骨关节炎关节软骨出现裂隙、纤维化,软骨细胞增多、排列紊乱,并出现大量簇聚软骨细胞和肥大软骨细胞。MMP-7和MMP-13在正常软骨全层均呈低表达,但在退变软骨中的表达则明显增多,光密度值行U检验,两组差异有显著性(P<0.01)。在正常与OA软骨的浅层,MMP-9和TIMP-1的表达无显著性差异(P>0.05);但在深层软骨中,OA软骨MMP-9和TIMP-1的表达较正常软骨明显增多,两组差异有显著性(P<0.01)。[结论]MMP-7,13在OA软骨全层表达均多于正常软骨;MMP-9,13仅在OA软骨深层出现过多表达。MMPs与TIMPs的失衡是导致关节软骨发生组织学退变的原因之一。     

人参皂苷Rg3对HT-29细胞株MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的:研究人参皂苷Rg3对HT-29结肠癌细胞株细胞增殖及对MMP-9和TIMP-1表达的影响,探讨其抑制肿瘤细胞侵袭、转移的机制.方法:分别用低剂量(25 μg/mL)、中剂量(50 μg/mL)和高剂量(100 μg/mL)人参皂苷Rg3及对照(0 μg/mL,DEME培养液和DMSO助溶剂)培养HT-29细胞24 h、48 h、72 h,采用RT-PCR方法检测MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA表达,MTT法检测肿瘤细胞增殖的抑制率.结果:人参皂苷Rg3可以抑制HT-29细胞MMP-9 mRNA的表达,抑制作用随着剂量的增加及时间的延长而增强;可以促进HT-29细胞TIMP-1 mRNA的表达,促进作用随着剂量的增加及时间的延长而增强;对HT-29细胞生长的抑制作用与随着药物浓度的增加及作用时间的的延长而增强.结论:人参皂苷Rg3抑制HT-29结肠癌细胞株MMP-9的表达,促进TIMP-1的表达,并具有抑制肿瘤细胞生长的作用.