小麦中镰刀菌毒素DON和NIV气相色谱测定法

DON and NIV were extracted with methanol-water (3:1) and purified by Florisol column. The mycotoxins in the column eluates were derived by TMS reagent and then analysed by gas chromatography with electron capture detector. The average recoveries of DON and NIV, as counted into wheat, at 100, 500, 1,000 and 2000 ppb were 81.2% and 74.5% respectively. The limits of detection of toxins of wheat were 10 ppb for both DON and NIV.     

谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和雪腐镰刀菌烯醇的气相色谱测定

用乙腈—水（３＋１）提取毒素，经硅镁型吸附剂柱层析和活性炭柱净化后，用具电子捕获检测器的气相色谱仪测定。当小麦和玉米中添加毒素的量为０．１～０．５ｍｇ／ｋｇ时，小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的回收率为８７％～９６％，雪腐镰刀菌烯醇为７７％～８４％，玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的回收率为９１％～１０２％，雪腐镰刀菌烯醇为９３％，精密度小于８％，方法的检测限为０．０１０ｍｇ／ｋｇ。     

镰刀菌毒素与黄曲霉毒素的联合毒性研究--AFB1和DON的RDS实验

为了解黄曲霉毒素（ＡＦＢ１）与镰刀菌毒素的脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）对ＤＮＡ损伤修复的影响,用化学物质诱导的细胞增殖的变化实验,（ｒｅｐｌｉｃａｔｉｖｅ ＤＮＡ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ,ＲＤＳ）实验进行研究。结果表明：ＡＦＢ１和ＤＯＮ均可诱导细胞分化的Ｓ期ＤＡＮ的合成,并且二者间存在交互作用。结果提示：ＡＦＢ１与ＤＯＮ在肿瘤的发生中既以遗传毒性物质的形式发挥作用,又以非遗传毒性物质的形式共同发挥作用     

真菌毒素NIV研究进展

雪腐镰刀菌烯醇是一种单端孢霉烯族毒素,主要由某些镰刀菌产生。它对人和不同种属动物具有广泛毒性效应。本文综述了雪腐镰刀菌烯醇近年的研究进展,就其产生条件及分布、理化性质和毒性作用等作一简要介绍。     

镰刀菌毒素DON对心肌细胞膜电位的影响及硒的保护效应

目的 观察镰刀菌毒素单端孢霉烯族化合物脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对培养心肌细胞动作电位的影响及亚硒酸钠的保护效应。方法 取新生1～2d龄Wistar大鼠,分离心肌细胞,培养基为80％DMEM与20％小牛血清,于37℃,在含5％CO2与95％空气的培养箱内进行培养,于培养后第4天,引导心肌细胞动作电位为加入毒素前对照,然后向培养基中分别加入50、100和200mg／L DON,以观察不同剂量DON对心肌细胞动作电位的影响。在培养基中加入含0．5mg／L硒的亚硒酸钠,继续培养16h后,观察硒对DON致心肌细胞膜电位改变的保护作用。结果 DON使心肌细胞去极化过程发生改变,动作电位(APA)、最大除极速度(Vmax)、超射(OS)及阈电位(TP)均减小,部分参数指标存在较明显的剂量效应关系。OS在DON为50mg／L时出现增高现象。复极化过程的变化,复极动作电位时程(APD)明显延长;最大舒张电位(MDP)减小;动作电位发放频率(APF)受到明显的抑制,且存在明显的剂量依存关系。在培养基中加入含0．5mg／L硒的亚硒酸钠,继续培养16h后,200mg／LDON对其心肌细胞动作电位的抑制作用明显减弱,但部分参数(APA、Vmax、OS、TP、APD90及APF)没有完全保持在正常对照组水平,亚硒酸钠不能完全对抗DON引起的心肌细胞动作电位的改变。结论 DON能抑制大鼠培养心肌细胞的跨膜电位,初步表明亚硒酸钠可减轻DON对心肌动作电位的影响,呈现明显的保护作用。     

河北省玉米、面粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇污染调查

用薄层层析法测定了105份玉米和50份小麦面粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)含量,结果玉米中DON检出率为61.9%,平均含量为208.8μg/kg;小麦面粉中DON捡出率为54%,平均含量为75.2μg/kg。     

面粉加工工艺对小麦脱氧雪腐镰刀菌烯醇的影响

目的　了解加工工艺对小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (DON)含量影响的规律 ,探讨降低面粉中DON含量的有效方法。方法　用薄层层析法[1 ] 检测小麦在加工过程不同阶段DON含量并作出分析。结果　原麦中DON含量为 36 2 0 ppb ,经净化仍保持在 344 0 ppb。制粉过程各组分DON含量在 2 90 0～ 1 86 70ppb之间。霉变小麦DON含量高达 1 4 2～ 1 4 4 .2ppm ,外观正常小麦DON含量仅为 0 .8ppm。 结论　小麦在入磨前 ,利用风力、筛理等方法将干瘪、比重轻、易碎的赤霉病麦粒去掉 ,可使面粉中DON含量得到有效控制     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒理学研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇是一种单端孢霉烯族毒素，主要是由某些镰刀菌产生。它对人类和不同种属动物具有广泛的毒性效应。本文综述了脱氧雪腐镰刀菌烯醇近年的研究进展，就其生态学、污染状况、毒理学及其机制等作一简要介绍。     

小麦中DON的薄层色谱测定

作者对小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的薄层色谱的测定，主要改变了柱净化条件的薄层板展开方式以适合本地实验条件。用本法测定小麦中的DON在100ppb、500ppb两个水平，回收范围在75～90%、方法灵敏度为100ppb，本实验该项测定灵敏度可提高到40ppb．     

中国谷物制品中重要镰刀菌毒素膳食暴露评估研究

目的了解我国居民膳食暴露脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、雪腐镰刀菌烯醇(NIV)和玉米赤霉烯酮(ZEN)水平。方法超高效液相色谱串联质谱法对2009年国产小麦粉和玉米制品中DON等10种镰刀菌毒素含量进行检测,结合小麦粉和玉米制品的膳食消费量,重点对我国居民膳食暴露DON、NIV和ZEN3种毒素进行点评估。结果 (1)在平均消费水平,仍有2.5%的成人和10%的儿童摄入DON的量超过每日耐受摄入量(TDI)。在P75消费水平,人群通过不同DON污染水平的小麦粉和玉米制品(成人:小麦粉P90,玉米制品P97.5;儿童:小麦粉P50,玉米制品P75)暴露DON的量分别为TDI的1.72和2.02倍(成人)、1.19和1.09倍(儿童);无论小麦粉还是玉米制品,在毒素平均水平,儿童高消费(P90、P97.5及P99)人群的DON暴露量均超过TDI,分别是TDI的1.81～3.17倍(小麦)及1.47～3.97倍(玉米);在一般消费模式和高毒素污染水平(P99)、消费量P75和毒素污染水平P97.5以及消费量和毒素污染水平均为P90及以上的情况下,成人通过玉米制品暴露ZEN的量超过TDI,在消费量P50、P75、P90、P97.5和P99模式下,分别有多于1%、2.5%、25%、25%和50%的儿童通过玉米制品暴露ZEN的量超过TDI。(2)由成人和儿童小麦粉高消费量(P90、P97.5及P99)计算的DON关注水平、由玉米制品高消费量(成人:P99,儿童:P97.5和P99)计算的DON和ZEN的关注水平均低于各自的平均污染水平。(3)无论成人还是儿童,对污染高水平DON(P97.5及P99,儿童还有P90)的小麦粉和玉米制品的最大安全摄入量均低于各自的平均膳食消费量。成人由玉米制品中ZEN高污染水平(P99)计算的最大安全摄入量、儿童由小麦粉和玉米制品中ZEN高污染水平(P97.5及P99)计算的最大安全摄入量均低于各自的平均膳食消费量。结论儿童对3种真菌毒素的膳食暴露量均高于成人,是膳食暴露DON、NIV和ZEN的高危人群。长期摄入DON、ZEN高污染水平的小麦粉和玉米制品对健康造成危害的风险也较高。根据评估结果,我国现行DON和ZEN限量标准应下调。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇生物可及性体外消化模型的构建及验证

目的构建脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)生物可及性体外消化模型并验证,并对影响模型的主要因素进行优化。方法模拟胃肠道生理消化过程,研究消化时间、禁食和进食状态、消化液体积、消化液pH值、同时进食的多种食物成分等对DON在口腔、胃和小肠中生物可及性的影响,确定DON生物可及性体外消化模型最优技术参数,并对模型进行验证。结果经过优化,食品中DON释放到唾液、胃液、十二指肠液和胆汁中浓度达最高的最佳条件为:口腔、胃和十二指肠中的消化时间分别为6min、1.5h和1.5h;消化液pH分别为6.5、0.9、7.5和8.0;消化液体积分别为6、13、11ml和6ml;禁食和进食等各种状态下DON生物可及性范围为81.28%～99.58%,DON的生物可及性随胃内容物的增加而降低;食品基质类别(玉米和小麦粉)对DON生物可及性无影响;同时进食的其他食物成分可降低谷物中DON的生物可及性。结论构建的DON体外消化模型稳定性高、重复性好,完全可以满足对食品中DON生物可及性的研究。     

上海地区小麦中霉菌毒素的污染调查

采集上海郊县1995年的小麦样品100份．应用薄层层析法检测黄曲霉毒素B1（AFB1），用气相色谱法检测镰刀菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯酸（DON）和雪腐镰刀菌烯酸（NIV）。样品中DON、NIV和AFB1的污染率分别为53．0％、35．0％和45．0％，平均含量分别为280．9μg/kg、103．4μg／kg和0．86μg/kg。有17份样品同时检出AFB1，DON和NIV，可见镰刀菌毒素和黄曲霉毒素可共同污染粮食。本次调查我们还发现小麦中DON和NIV的含量存在相关关系（r＝0．55．P＜0．01），而AFB1与这两种毒素之间不存在相关关系（r＜0.10，P＞0.05）。     

气相色谱/质谱/质谱测定小麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇

确立了小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的气相色谱/质普及气相色谱/质谱的测定方法。以丙酮为溶剂超声波提取,弗罗里硅土柱净化,再以N-七氟丁酞咪唑衍生,采用GC/MS及GC/MS/MS确证和定量分析。方法灵敏、准确,检出限为0.01mg/kg,添加回收率为86.7％～90.3％。     

2013年中国小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇污染调查

目的了解2013年中国小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的污染状况。方法从中国28个省(自治区、直辖市)的流通环节,以随机抽样的方式采集定型包装或散装小麦粉样品,用高效液相色谱法测定其DON含量,并对结果进行分析、评估。结果共检测5678份小麦粉,DON检出率为58.74%,超标率为4.60%,平均含量为317μg/kg,含量范围0~56.1 mg/kg。结论 2013年中国小麦粉中DON污染比较普遍,但超标率并不高;各地区污染程度不同,总体上华东、西南和西北地区超标率相对较高,与当地温湿度条件相关;2013年污染水平与2010年和2011年基本一致,但低于2012年监测结果。     

毛细气相色谱方法检测谷物及豆类中脱氧雪腐镰刀菌烯醇

目的：建立检测谷物及豆类中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毛细气相色谱方法。并且通过与酶联免疫方法的比较来探讨此方法的优势与缺点。方法：用甲醇-水（3：1）提取毒素,经过硅镁型吸附剂净化,采用DB-5MS毛细柱以及配备微池电子捕获检测器（μECD）的毛细气相色谱仪测定。结果：方法的检测限为1.78μg/kg。在阴性样品中分别添加标准品浓度为0.09、0.15、0.3μg/ml的回收率为86.84%-101.85%,RSD〈10%。结论：此方法有很好的灵敏度、精确度和准确性。并且,通过与酶联免疫方法的比较,显示出了毛细气相色谱方法的显著优势。     

安徽省谷物及制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的污染调查

用薄层层析法调查厂安徽省１９８３～１９９１年小麦、玉米、大麦及面粉（标准粉）中脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）的污染水平及其影响因隶。其分析样品６７２件，ＤＯＮ阳性率为６３．２％，平均含量为９０８．７μｇ／ｋｇ，范围在０～１３３３０μｇ／ｋｇ。其中以小麦和面粉污染比较严重，明显高于玉米中ＤＯＮ的水平（Ｐ＜０．０１）。小麦中ＤＯＮ的污染水个个同年度和地区间差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１），经方差分析，提示与该年度和地区小麦赤霉病的流行程度有关，但玉米中ＤＯＮ污染水平不同年度和地区间差异均无显著性（Ｐ＞０．１０）。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小鼠的胚胎毒性和致畸作用

目的研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)致小鼠胚胎毒性和致畸作用。方法将34只健康妊娠SPF级昆明小鼠随机分为空白对照(不做任何处理)组、溶剂对照(30%丙二醇)组和低(4 mg/kg)、中(6.4 mg/kg)组,每组6只小鼠,高(10 mg/kg)剂量DON染毒组10只小鼠。小鼠于孕期第7～10天连续进行腹腔注射染毒,染毒容量分别为11.4、18.3、28.6 ml/kg。于妊娠第18天处死孕鼠,记录活胎数、吸收(死)胎数、胎鼠体重。肉眼观察有无畸形;采用阿尔新蓝和茜素红进行活胎鼠骨骼、软骨双重染色,镜下观察骨骼发育情况。结果与溶剂对照组比较,高、中、低剂量DON染毒组活胎数、产仔数和胎鼠体重均较低,差异有统计学意义(P0.05);而吸收胎数均较高,但差异无统计学意义。随着DON染毒剂量的升高,活胎数、产仔数和胎鼠体重呈下降趋势,吸收胎数呈上升趋势。高剂量DON染毒组胎鼠出现尾部畸形(包括短尾、卷尾、短尾合并卷尾),发生率为58.06%(18/31)。各DON染毒组均不同程度地出现骨骼畸形,以中轴骨骼畸形为主,伴随四肢畸形。高剂量DON染毒组31只胎鼠均出现多发性骨骼畸形,且常出现多种畸形并存,以胸骨及肋骨畸形最为常见,其肋骨缺失率高达96%。空白对照组仅出现一例肢体(六趾)畸形,溶剂对照组未出现任何畸形。结论高剂量(10 mg/kg)DON对小鼠具有明显的胚胎毒性和致畸作用,可导致小鼠多发性骨骼畸形。     

安徽省赤霉病重度流行区谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的污染调查

对安徽省1989年江淮之间赤霉病重度流行的3个地区的小麦、面粉、玉米和大麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的污染水平进行了调查。检测样品共265份,DON的平均污染率为76.98%;平均含量为1539.8μg/kg;>1000μg/kg的样品占49.4%,>2000μg/kg的样品占21.89%。小麦中DON污染最严重,大麦次之,玉米污染程度较轻。     

2016年山东省居民馒头来源脱氧雪腐镰刀菌烯醇膳食暴露风险评价

目的了解山东省市售馒头中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)污染状况,评估居民膳食暴露水平及健康风险。方法 2016年7月在山东省5个区域的9个监测点,按照简单随机抽样方法,于流通环节采集105份馒头样本,采用高效液相色谱-串联质谱法检测DON。基于蒙特卡罗方法模拟,进行膳食暴露量计算,采用危害商值(hazard quotient,HQ)进行风险特征描述。结果 105份馒头中,DON检出率100%,含量均值为111.10μg/kg,最大值848.33μg/kg,低于GB 2761—2017限量值1000μg/kg,合格率100%。全人群各年龄组馒头来源的DON日暴露量(exposure daily intake,EDI)均值明显低于馒头摄食者相应各年龄组,7～12岁组EDI均值最高,全人群为1.04μg/kg,馒头摄食者为1.32μg/kg。DON的危害商值呈多概率分布,全人群和馒头摄食者中分别有83.5%和80.4%的人群DON风险处在安全水平。全人群和馒头摄食者7～12岁组DON健康风险不可接受概率值分别为29.9%和35.5%。全人群和馒头摄食者各年龄组存在0.1%～1.1%的HQ>10概率,馒头中DON含量是风险主要敏感因素。结论山东省市售馒头中普遍检出DON,含量存在地域差异,均处在合格水平。全人群和馒头摄食者均存在馒头来源的DON健康危害风险,概率值分别为16.5%和19.6%,高风险(HQ>10倍)概率值为0.1%和0.2%,7～12岁是馒头来源的DON高风险人群组。     

镰刀菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇对心肌细胞Ca2+通道的阻滞作用

目的观察镰刀菌毒素单端孢霉烯族化合物脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对培养心肌细胞Ca2 通道单通道电活动的影响.方法取新生1～2日龄Wistar大鼠,分离心肌细胞,培养基为80%DMEM与20%小牛血清,于37℃,在含5%CO2与95%空气的培养箱内进行培养,于培养24～48h期间进行实验记录.采用贴附式膜片钳技术,记录心肌细胞B、L、T三型Ca2 通道单通道电活动为加入毒素前对照,然后向培养基中加入1 mg·ml-1DON,以观察DON对心肌细胞Ca2 通道单通道电活动的影响.结果DON浓度为1 mg·ml-1时,心肌细胞B,L,T三型Ca2 通道均受到明显的阻滞.其阻滞作用表现在使B、L、T三型Ca2 通道的开放时间分别缩短47.3%,42.1%和17.1%,关闭时间分别延长283.3%,92.8%和40.7%,使通道的开放概率分别下降77.8%,71.1%和42.8%.而对流过B,L,T三型Ca2 通道的Ba2 流幅值均无明显影响.结论DON能抑制大鼠培养心肌细胞的Ca2 通道.