黄连解毒汤对人细胞色素P450酶6个亚型的体外抑制作用研究

目的:研究黄连解毒汤对人肝微粒体6个亚型CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的体外抑制作用。方法:采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定对乙酰氨基酚、6α-羟基紫杉醇、4-羟基双氯芬酸、4-羟基美芬妥英、右啡烷、1-羟基咪达唑仑和6β-羟基睾酮,分别代表CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的活性;黄连解毒汤提取物和7种混合探针底物在人肝微粒体中共同孵育,并计算其IC50值表示对CYP450酶的抑制程度。结果:在人肝微粒体体外孵育体系中,黄连解毒汤对CYP2D6的IC50值为3.54μg/mL,对CYP1A2的IC50值为10.8μg/mL,对CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4_T和CYP3A4_M亚酶的IC50值依次为67.7、299、530、199和607μg/mL。结论:在正常剂量下,黄连解毒汤对人肝微粒体CYP2D6和1A2可能有抑制作用,对人肝微粒体CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4无明显抑制作用。     

丙戊酸代谢酶中CYP2C9、UGT1A6的基因多态性分析方法的建立

目的:研究药物代谢酶基因多态性对丙戊酸钠代谢的影响,并建立分析丙戊酸代谢酶中CYP2C9、UGT1A6的基因多态性的方法.方法:从人全血中抽取gDNA,设计引物扩增CYP2C9及UGT1A6,并运用限制性片段长度多态性(RFLP)技术的方法进行CYP2C9*2、CYP2C9*3、CYP2C9*4、CYP2C9*5、UGT1A6*2和UGT1A6*3的分型.结果:成功设计了引物用来扩增包含CYP2C9*3、CYP2C9*4、CYP2C9*5的片断,并测序验证.结论:建立了简单可靠的RFLP基因分型方法.     

10种心血管类中药注射剂对人细胞色素P_(450)7种亚型的体外抑制作用

目的:研究10种心血管类中药注射剂对人细胞色素P450(CYP)7种亚型(CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4/5)的体外抑制作用。方法:10种心血管类中药注射剂9个不同质量浓度的工作液分别与7种CYP亚型对应的混合探针药物在人肝微粒体中共同孵育,采用高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定这7种探针药物的代谢产物,即对乙酰氨基酚(CYP1A2)、羟基安非他酮(CYP2B6)、去甲阿莫地喹(CYP2C8)、4-羟基双氯芬酸(CYP2C9)、4-羟基美芬妥英(CYP2C19)、右啡烷(CYP2D6)、1-羟基咪达唑仑(CYP3A4/5)的质量浓度,计算半数抑制浓度(IC50),并确定对CYP有抑制作用的中药注射剂。结果:CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4/5的阳性抑制剂呋拉茶碱、塞替派、槲皮素、磺胺苯吡唑、噻氯匹定、奎尼丁和酮康唑对相应酶型均表现出明显抑制作用;10种心血管类中药注射剂中丹红注射液对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4/5均有明显抑制作用,红花注射液对CYP2C8有明显抑制作用。结论:在正常体积分数/质量浓度下,丹红注射液对人CYP 7种亚型在体外均有明显抑制作用;红花注射液对人CYP2C8在体外有明显抑制作用。     

肠道细胞色素P450代谢酶研究进展

细胞色素P450(CYP450s)为肠道主要I相代谢酶,目前发现有CYP1A1、CYP2C9、CYP2C19、CYP2J2、CYP2D6、CYP3A4、CYP3A5 7种同工酶。肠道CYP在药物代谢及药物相互作用中发挥重要作用,与药物疗效及不良反应密切相关。基因多态性及个体差异均影响药物代谢,导致临床疗效差别。该文就肠道CYP各亚型相关研究进展做一综述。     

细胞色素P450 2D6、3A4和19A1基因多态性与乳腺癌的药物治疗

细胞色素P450(CYP)是一种重要的氧化代谢酶,参与多种药物的代谢。CYP酶具有基因多态性,对药物的代谢呈现明显的差异,对乳腺癌用药也有差异性影响。该文主要阐述细胞色素P450 2D6、3A4和19A1亚型的多态性,并就其多态性对临床乳腺癌治疗中重要的药物如他莫昔芬、芳香化酶抑制剂、紫杉醇类在治疗学方面的影响进行综述。     

CYP450酶特性及其应用研究进展

细胞色素P450（CYP450）是药物和其他内、外源物的主要代谢酶,本文综述了人体内参与药物代谢的几种主要代谢酶CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2E1、CYP1A2和CYP2A6的分子生物学特征,中药对药物代谢酶的影响及药物代谢酶在临床药物治疗和新药研究过程中的应用。     

肾移植病人中CYP3A4基因多态性对环孢素A代谢的影响

目的 用基因分析技术对CsA代谢酶CYP3A4进行基因分型,以阐述CYP3A4基因多态性对环孢素A代谢的影响及相互关系,从而预测血药浓度及安全性。方法 用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性分析法分别建立了CYP3A的CYP3A4基因亚型3个新突变点(CYP3A4~*4,~*5,~*6)的基因分型方法,并对中国肾移植人群进行基因分型,同时测定CsA及其代谢物浓度,以原形药与代谢物浓度的比值MR作为表型验证指标。结果CYP3A4~*4,*~5,*~6等位基因在中国肾移植人群中的突变率为:2/133,3/197,3/200。野生型病人中肝肾功能正常和异常者测得MR均值分别为0.47±0.13和0.82±0.21。3种突变型病人MR均值为0.90±0.30。结论CYP3A4~*4,~*5,~*6等位基因的存在有可能降低了药物代谢酶CYP3A4的活性,从而使环孢素A的代谢减慢。     

基于细胞色素P450的左金丸体外药物相互作用研究

目的:探讨左金丸对人肝细胞色素P450的CYP1A2/2C8/2C9/2C19/2D6/3A4亚型的体外抑制作用。方法:左金丸、黄连和吴茱萸的水提物分别与CYP1A2/2C8/2C9/2C19/2D6/3A4/3A4亚型的7种混合探针底物在人肝微粒体中共同孵育后,采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）同时测定这7种代谢产物（对乙酰氨基酚/6α-羟基紫杉醇/4-羟基双氯芬酸/4-羟基美芬妥英/右啡烷/1-羟基咪达唑仑/6β-羟基睾酮）的浓度,计算其IC₅₀值表示对该亚型的抑制程度。结果:在人肝微粒体体外孵育体系中,左金丸提取物对CYP2D6的IC₅₀值为11.6μg·ml^-1,对CYP1A2和CYP3A4的IC₅₀值分别为77.4μg·ml^-1和97.0μg·ml^-1,对其他亚型的IC₅₀值从334μg·ml^-1到690μg·ml^-1;黄连提取物对CYP2D6的IC₅₀值为5.8μg·ml^-1,对CYP1A2和CYP3A4的IC₅₀值分别为36.8μg·ml^-1和59.2μg·ml^-1,对其他亚型的IC₅₀值从163μg·ml^-1到476μg·ml^-1;吴茱萸提取物对CYPs的IC₅₀值均大于107μg·ml^-1。结论:左金丸在体外对人肝微粒体CYP2D6活性有抑制作用,对CYP1A2和CYP3A4活性有弱的抑制作用,其君药黄连在该抑制作用中起到了主要作用,在联合用药时应注意左金丸与CYP2D6相关的药物相互作用。     

消癌平注射液等4种抗肿瘤中药注射剂对人肝微粒体中CYP450酶7种亚型的体外抑制作用研究

目的：考察消癌平注射液等4种抗肿瘤中药注射剂对人肝微粒体CYP450酶7种亚型CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4／5的体外抑制作用。方法：消癌平注射液等4种抗肿瘤中药注射剂分别与7种CYP450酶亚型对应的混合探针药物在人肝微粒体中共同孵育,采用液相色谱-串联质谱（LC—MS／MS）法同时测定这7种探针药物的代谢产物：对乙酰氨基酚、羟基安非他酮、去甲阿莫地喹、4-羟基双氯芬酸、4-羟基美芬妥英、右啡烷和1-羟基咪达唑仑的浓度,分别代表CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4／5的活性,其对CYP450酶亚型的抑制程度以IC50值表示。结果：在体外人肝微粒体孵育体系中,消癌平注射液对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4／5的IC50值分别为0．51％、1．34％、1．42％、0．939／6、1．09％和0．75％,艾迪注射液对CYP2C8的IC50值为0．21％;消癌平注射液对CYP2D6的IC10值为2．58％,艾迪注射液对CYP2B6、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4／5的IC50值分别为13．24％、16．31％、4．27％和3．73％,华蟾素注射液对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8和CYP2D6的IC50值分别为3．50％、28．01％、20．32％和32．59％,康艾注射液对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2D6和CYP3A4／5的IC50值分别为2．55％、15．32％、1．44％、1．72％和3．99％,均高于各自的日用药量浓度;在测定浓度范围内,艾迪注射液对CYP1A2和CYP2D6,华蟾素注射液对CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4／5,康艾注射液对CYP2C9和CYP2C19的活性抑制率均小于50％。结论：在体外,正常剂量下,消癌平注射液对人CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4／5,艾迪注射液体对人CYP2C8均有明显抑制作用;消癌平注射液对CYP2D6,艾迪注射液对CYP2B6、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4／5,华蟾素注射液对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8和CYP2D6,康艾注射液对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2D6和CYP3A4／5,均无明显抑制作用;艾迪注射液对CYP1A2和CYP2D6,华蟾素注射液对CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4／5,康艾注射液对CYP2C9和CYP2C19,均无抑制作用。     

评价HPPH对细胞色素P450酶体外代谢活性的影响

目的:评价HPPH在体外对大鼠及人肝微粒CYP450酶的6种亚型酶活性的影响,预测使用HPPH可能出现的药物相互作用。方法:将注射用HPPH与CYP450酶的6种亚型的特异性探针底物非那西汀(CYP1A2)、甲苯磺丁脲(CYP2C9)、S-美芬妥因(CYP2C19)、右美沙芬(CYP2D6)、氯唑沙宗(CYP2E1)、咪达唑仑(CYP3A4)和睾酮(CYP3A4)与大鼠及人肝微粒进行孵育反应,采用HPLC-MS/MS法测定对应的7种代谢产物(对乙酰氨基酚、羟基甲苯磺丁脲、4-羟基美芬妥因、O-去甲基右美沙芬、6-羟基氯唑沙宗、1′-羟基咪达唑仑、6β-羟基睾酮)的浓度。结果:在本实验条件下,HPPH浓度为1.00~50.00μmol·L-1时,未发现其对大鼠的CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4产生抑制作用。在本实验条件下,HPPH浓度为0.50~10.00μmol·L-1时,未发现其对人CYP1A2产生抑制作用;但对人CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1均存在抑制作用;对人CYP3A4,对底物咪达唑仑存在抑制作用,对底物睾酮未发现抑制作用。结论:HPPH对CYP450酶的抑制作用存在种属差异,在人体内HPPH与CYP450酶作用有待体内实验进一步证明。     

CYP3A4酶介导的人类药物代谢性别差异

药代动力学的性别差异是临床上药物疗效的重要影响因素。引起药代动力学性别差异的比较重要的分子因素包括药物代谢酶和药物转运体等。CYP3A4是人体含量最丰富的酶,具有广泛的代谢底物。大部分体内、外研究表明CYP3A4底物的代谢具有明显的性别差异,女性体内的代谢快于男性。该文系统综述人肝脏CYP3A4酶介导的药物代谢性别差异的研究进展。     

中草药对孕烷X受体和组成型雄烷受体等核受体通路影响的研究进展

孕烷X受体（pregnane X receptor,PXR）是核受体亚家族的成员之一,参与大量的外源性和内源性化学物质的生物转化,能被多种中草药激活,调节下游靶基因的表达,在药物代谢酶和转运体的调节中起重要作用。组成型雄烷受体（constitutive androstane receptor,CAR）和PXR一样能与外源性配体结合调节CYP2B6、CYP3A4、CYP2C19、UGT1A1的表达,共同参与CYP药物代谢酶的调节,成为药物作用的靶标。     

CYP3A4*1G基因多态性与紫杉醇血药浓度的关系研究

目的:研究乳腺癌化疗患者CYP3A4*1G基因多态性与紫杉醇血药浓度的关系。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定紫杉醇血药浓度,以聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)检测CYP3A4*1G基因多态性,探讨使用紫杉醇化疗患者CYP3A4*1G基因型与紫杉醇血药浓度的关系。结果:不同基因型患者紫杉醇血药浓度分别为:CC型(0.097 6±0.042 9)μg/ml、CT型(0.102 4±0.046 6)μg/ml、TT型(0.106 5±0.036 7)μg/ml。3种基因型之间,紫杉醇血药浓度差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CYP3A4*1G基因突变对紫杉醇血药浓度无影响。     

非甾体抗炎药药物代谢酶多态性的研究进展

非甾体抗炎药(NAIDs)是一类具有解热、镇痛和抗炎作用的药物,临床上用于治疗骨关节炎、类风湿关节炎等疾病,疗效确切但常伴有胃肠道不适等不良反应,其产生与其药物代谢酶的遗传多态性有关.参与NSAIDs氧化代谢的细胞色素P450酶系,主要有CYP2C9、CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4,本文就NSAIDs的药物代谢酶及其多态性和P450代谢的部分NSAIDs(双氯芬酸、布洛芬、氟比洛芬、萘普生和醋氨芬)等作一综述.     

喹硫平过量时激活核受体PXR介导的药物Ⅰ相代谢酶和Ⅲ相转运体转录促进毒物消除的解毒机制

目的:考察喹硫平(quetiapine,QTP)在常规剂量与中毒剂量下对大鼠肝脏、前额叶皮质与海马中PXR信号通路及下游代谢酶CYP3A4和转运体P-gp表达的影响,并考察药物过量中毒情况下给予PXR激活剂对大鼠PXR、CYP3A4与P-gp蛋白表达的影响,从而揭示通过激活PXR信号通路促进药物脑与肝内消除的分子机制。方法:SD大鼠随机分为4组,即空白组(Control组)、常规剂量组(Normal组)、QTP中毒未干预组(Toxic组)及QTP中毒DEX干预组(Toxic+Dex组),按分组进行4d处理后,利用Western-blot技术考察不同时间点各组大鼠的肝脏、前额叶皮质与海马中PXR、CYP3 A4、P-gp的表达。结果 :腹腔注射QTP可增加脑与肝脏内PXR、CYP3A4和P-gp的蛋白表达并呈剂量依赖性;合用地塞米松(dexamethasone,DEX)可加速中毒剂量的QTP对PXR、CYP3A4和P-gp的蛋白表达的诱导作用。结论:长期使用QTP可自我诱导核受体PXR-药物代谢酶CYP3A4/转运体P-gp这一信号通路,合用核受体PXR激动剂可加速该诱导过程。激活PXR信号通路可快速有效激活解毒系统,从而可能达到快速解毒以及保护器官的目的。本实验有助于阐明药物中毒时核受体PXR对代谢酶和转运体的调控特征及分子机制,从而为开辟新的药物中毒救治途径奠定基础,为研究新型解毒药物提供新的思路。     

采用重组人源CYP酶研究艾瑞昔布的体外羟基化代谢

目的　探讨新型抗炎镇痛药艾瑞昔布在人体内的羟基化代谢酶。方法　用体外重组的人源细胞色素P450(CYP)进行孵育代谢实验,液相色谱多级质谱法分析代谢产物和残留的母体药物,利用整体归一化法对4种CYP酶的代谢作用大小进行评估。结果　艾瑞昔布羟基化代谢可由CYP2C9,CYP2D6和CYP3A4催化,其各自作用大小分别为62.5%, 21.1%和16.4%。结论　CYP2C9为艾瑞昔布羟基化的主要代谢酶。     

采用重组人源CYP酶研究艾瑞昔布的体外羟基化代谢

目的 探讨新型抗炎镇痛药艾瑞昔布在人体内的羟基化代谢酶。方法 用体外重组的人源细胞色素P450（CYP）进行孵育代谢实验，液相色谱多级质谱法分析代谢产物和残留的母体药物，利用整体归一化法对4种CYP酶的代谢作用大小进行评估。结果 艾瑞昔布羟基化代谢可由CYP2C9，CYP2D6和CYP3A4催化，其各自作用大小分别为62.5%，21.1%和46.4%。结论 CYP2C9为艾瑞昔布羟基化的主要代谢酶。     

P450酶介导的EGFR-TKIs药物与其他药物的相互作用

目的探讨细胞色素P450酶介导的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)与其他药物的相互作用。方法查阅文献,统计国家药品监督管理局批准用于治疗晚期非小细胞肺癌的7个EGFR-TKIs与P450酶相关的药物相互作用。结果 7个EGFR-TKIs中,阿法替尼的代谢不经过P450酶途径,也并非CYP酶系的诱导剂或抑制剂;其余EGFR-TKIs主要经CYP3A4酶、CYP2D6酶及CYP1A2酶代谢,并可明显抑制CYP2D6酶、CYP3A4酶、CYP2C8/9酶的活性,药物相互作用较多。结论 EGFR-TKIs类药物中,除阿法替尼与P450酶底物发生相互作用的概率较低外,其余药物对P450酶均可产生明显的抑制作用,临床医师应结合患者病情合理选用该类药物,避免不合理合用。     

CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4基因多态性对磺脲类降糖药代谢的影响

磺脲类口服降糖药在人体内主要经过肝脏代谢。肝脏中的细胞色素氧化酶P450是一种重要的药物代谢酶系统,在人群中存在基因多态性,导致药物疗效和不良反应在个体间存在着较大的差异。本文将对CYP450中的几种重要的代谢酶亚型CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4的基本结构、基因多态性、种族差异及其对磺脲类降糖药代谢的影响作一综述。     

甲基原薯蓣皂苷对人肝微粒体中7种CYP450酶活性的影响

目的研究甲基原薯蓣皂苷对CYP450酶的7种亚型酶活性的影响。方法将MPD和CYP450酶7种亚型的特异性探针底物咖啡因(CYP1A2)、右美沙芬(CYP2D6)、甲苯磺丁脲(CYP2C9)、s-美芬妥因(CYP2C19)、氯唑沙宗(CYP2E1)、香豆素(CYP2A6)及咪达唑仑(CYP3A4)与人肝微粒体进行孵化反应,采用HPLC和LC-MS/MS法测定对应的7种代谢产物(1,7-二甲基黄嘌呤、去甲右美沙芬、4-羟基甲苯磺丁脲、4-羟基美芬妥因、6-羟基氯唑沙宗、7-羟基香豆素和1-羟基咪达唑仑)的浓度,通过与对照组比较,确定MPD对以上7种酶活性的影响。结果MPD在1~10μmol.L-1时对7种酶均无明显抑制作用,在100μmol.L-1时对CYP2D6有抑制趋势,但对其他6种酶无抑制作用,均无统计学意义(P>0.05)。结论MPD在与以上6种酶(CYP1A2、CYP2E1、CYP2C19、CYP3A4、CYP2C9和CYP2A6)代谢的药物联合用药时,发生药物相互作用的可能性较小。