中药“骨愈合剂”熏蒸对糖尿病模型兔骨折愈合的影响

目的探讨中药"骨愈合剂"熏蒸对糖尿病兔骨折愈合过程中骨形态发生蛋白(BMP)表达的影响。方法实验兔随机分为四组,每组12只:A、B组为正常兔胫骨骨折模型组;A1、B1组为糖尿病兔胫骨骨折模型组。A、A1组采用"骨愈合剂"熏蒸;B、B1组为非熏蒸对照。术后2、4、6、8周采血,检测BMP2、转化生长因子β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、类胰岛素生长因子(IGF)和血小板衍生因子(PDGF)含量。X射线片检查,比较骨痂出现的时间及骨痂量的差异、骨折线的变化、骨性愈合及髓腔再通的情况。于术后8周取兔胫骨标本,进行组织学检查。结果术后4、6、8周,A1组BMP2、TGF-β、IGF高于B1组(P<0.05)。术后8周,A、B组成熟骨小梁及骨髓形成,A组的髓腔再通优于B组。A1组成熟骨小梁、骨髓形成良好。结论 "骨愈合剂"能够有效促进糖尿病兔骨折BMP2和骨生长相关因子的表达,促进骨折愈合。     

转化生长因子β1促进关节软骨缺损修复的临床应用

目的探讨转化生长因子β1促进关节软骨缺损修复临床应用的可行性。方法关节镜下准确定位后电动刨削器清理边缘。后用由3mm钻头向股骨中轴方向钻孔至髓腔，术后第2天1ml（100ng）活化TGF-β1关节腔内注射，每周1次。连用3周。结果9例膝关节软骨缺损3-9个月随访，优良率100％，未见骨软骨赘、创伤性骨关节炎和退行性改变发生。结论TGF—β1直接注射于关节腔内，能有效促进关节软骨缺损修复，临床应用前景广阔。     

BMP-7对TGF-β_1诱导人肾小管上皮细胞外基质表达的影响

目的观察骨形态发生蛋白-7(BMP-7)对TGF-β1诱导人近端肾小管上皮细胞(HK-2)细胞外基质(ECM)成分表达的影响,以探讨其延缓肾间质纤维化病变的作用机制。方法将体外培养的HK-2细胞分为空白对照组,3μg.L-1TGF-β1组,BMP-7组,TGF-β1加不同浓度BMP-7组。免疫荧光检测FN的表达;RT-PCR和Western blot分别检测FN、ColⅠα1mRNA及蛋白的表达。结果免疫荧光检测结果显示,3μg.L-1TGF-β1刺激HK-2细胞48h后,FN表达明显增强;加入200μg.L-1BMP-7干预后荧光明显减弱。RT-PCR和Western blot结果显示,TGF-β1刺激HK-2细胞48h后,FN、ColⅠα1mRNA及蛋白表达均明显高于对照组(P<0.01);BMP-7(100～400μg.L-1)可在mRNA及蛋白水平呈剂量依赖性下调TGF-β1诱导的FN、ColⅠα1的表达。结论BMP-7能抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞FN、ColⅠα1的合成。表明BMP-7抑制肾小管间质纤维化的进展、改善肾功能的作用,部分是通过抑制肾小管上皮细胞分泌细胞外基质实现的。     

骨质疏松性骨损伤愈合过程中细胞生长因子的动态表达

目的:从分子水平上探讨细胞生长因子转化生长因子-β1(TGF-β1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在骨质疏松大鼠骨损伤愈合过程中的表达水平及其相互作用.方法:3月龄雌性大鼠64只,以去卵巢方法建立骨质疏松大鼠模型,分为骨质疏松组(OVX组)32只和假手术组(SX组)32只.运用实时荧光定量PCR检测TGF-β1、bFGF在OVX和SX组大鼠骨组织中的表达水平.结果:(1)OVX组和SX组组内骨损伤后不同时间点TGF-β1、bFGF表达水平的差别具有统计学意义(P<0.01).5d开始逐渐升高,15 d时达到高峰,30d时同落到低水平.(2)OVX组TGF-β1、bFGF mRNA的表达水平均低于同时期SX组的水平.结论:TGF-β1、bFGF在骨损伤后存在约4周的周期性表达,并且于骨质疏松性骨损伤处表达减少,这是其愈合质量下降的重要因素.TGF-β1、bFGF的表达趋势类似,提示它们之间可能存在某种协同作用.     

肝细胞肝癌组织TGF-β和IGF-Ⅱ异常表达与HBV复制

目的 分析肝细胞肝癌(HCC)组织转化生长因子β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)表达与HBV复制间的关系.方法 以自身对照法收集HCC组织及非癌组织,以生物素标记的HBV DNA探针检测HCC组织中HBV DNA,采用免疫组织化学法检测组织中TGF-β1和IGF-Ⅱ的表达,以巢式PCR扩增TGF-β1 mRNA和IGF-Ⅱ mRNA基因片段,并分析TGF-β1和IGF-Ⅱ表达与HBV复制间的临床病理学关系.结果 HCC组TGF-β1和IGF-Ⅱ表达阳性率均为83.3%,TGF-β1 mRNA和IGF-Ⅱ mRNA阳性率均为100%,HCC组明显高于非癌组(P<0.01).HCC组中TGF-β1和IGF-Ⅱ阳性表达与肿瘤分化程度显著相关(P<0.05),与肿瘤直径、数日间未见明显相关(P>0.05);TGF-β和IGF-Ⅱ表达与HBV复制显著相关(94.7%),且HBV DNA阳性组显著高于HBV DNA阴性组(P<0.05).结论 HCC组织中TGF-β1和IGF-Ⅱ过度表达,且与HBV复制和肿瘤的分化程度有关.     

骨化三醇对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化影响的研究

目的观察幼年大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)肾组织中α-肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-Cad)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)mRNA的表达,探讨骨化三醇对肾小管上皮细胞转分化(EMT)干预效应及机制。方法 54只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(A组)、UUO模型组(B组)及UUO模型干预组(C组)各18只,灌胃满3、7、14d取肾。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组α-SMA、E-Cad、TGF-β1、BMP-7mRNA表达水平。结果与A组相比,B组E-Cad、BMP-7mRNA表达明显下降(P<0.01),α-SMA、TGF-β1mRNA表达显著增高(P<0.01);C组与B组相比,E-Cad、BMP-7mRNA表达明显上调(P<0.01),α-SMA、TGF-β1mRNA表达明显下降(P<0.01)。结论骨化三醇对UUO模型大鼠肾小管上皮细胞转分化有抑制作用,这种抑制作用可能与下调TGF-β的表达及上调BMP-7的表达有关。     

缬沙坦对兔髂动脉内皮损伤后转化生长因子β1表达的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂缬沙坦对兔髂动脉内皮损伤后转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法 新西兰兔24只随机平分为3组,普通饲料喂饲组(G1),高脂饮食喂饲+动脉内皮损伤组(G2),高脂饮食喂饲+动脉内皮损伤+缬沙坦治疗组(G3),G2、G3应用球囊损伤髂动脉内皮加高脂饲养的方法建立兔动脉粥样硬化狭窄模型,术后4周采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术对兔髂动脉壁TGF-β1表达的情况进行观察。结果 G2、G3TGF-β1蛋白和TGF-β1mRNA表达均显著高于G1,而G3 TGF-β1蛋白和TGF-β1mRNA表达显著低于G2(P<0.01)。此外,还观察到TGF-β1mRNA表达水平与内膜/中膜比值呈正相关(r=0.941,P<0.01)。结论 缬沙坦对内皮损伤后的血管病变有部分保护作用,其机制可能是部分通过下调TGF-β1的表达,减轻血管损伤后新生内膜的增生。     

慢性马兜铃酸肾病患者血清TGF-β1、BMP-7的改变

目的：探讨慢性马兜铃酸肾病（CAAN）患者血清转化生长因子-β1（TGF-β1）、骨形态发生蛋白-7（BMP-7）的变化及临床意义。方法：采用ELISA法测定30例CAAN患者血清TGF-β1及BMP-7水平,并用20例正常健康人作对照。结果：与对照组相比病例组TGF-β1明显增高（P〈0.05）,BMP-7明显降低（P〈0.05）。TGF-β1与BMP-7呈负相关（r=-0.379,P〈0.05）。结论：TGF-β1、BMP-7二者的表达水平及其相互间调节作用是慢性马兜铃酸肾病发病机制中的重要环节。     

全反式维甲酸对糖尿病大鼠肾脏组织BMP-7表达及细胞外基质代谢的影响

目的探讨全反式维甲酸（atRA）对糖尿病大鼠肾脏组织骨形成蛋白-7（BMP-7）、转化生长因子-β1（TGF-β1）表达和细胞外基质（E（M）Ⅳ、Ⅲ型胶原代谢的影响。方法随机选择24只舍SD大鼠制作糖尿病模型,其中12只入糖尿病模型（DM）组,另12只入糖尿病模型＋atRA（DM＋atRA）组,此外再随机选择12只正常大鼠作为空白对照（NC）组。分别于第8、12周末各组处死6只大鼠,通过光镜、电镜观察各组大鼠肾脏病理结果;通过免疫组织化学方法观察BMP-7,TGF-β1,Ⅳ、Ⅲ型胶原表达,并进行半定量分析;通过实时荧光定量PCR方法对TGF-β1 mRNA、BMP-7mRNA,进行相对定量分析。结果DM＋atRA组大鼠肾组织BMP-7表达较同时期DM组增加（P〈0.01）,主要表达于大鼠肾小管上皮细胞,而TGF-β1表达较同时期DM组减少（P〈0．01）：且DM＋atRA组大鼠肾组织ECM重要成分Ⅳ、Ⅲ型胶原表达与DM组相比较显著减少（P〈0．01）。同时观察到BMP-7蛋白与Ⅳ型胶原蛋白表达呈负相关（r=-0．75,P〈0．01）,与Ⅲ型胶原蛋白表达呈负相关（r=-0．71,P〈0．01）,与TGF-β1蛋白表达呈负相关（r=-0．86,P〈O．01）。荧光定量PCR结果表明,DM＋atRA组BMP-7mRNA水平升高,TGF-β1 mRNA水平下降,且两者星显著负相关（r=-0．83,P〈0．01）。结论atRA能减轻糖尿病大鼠肾脏病理损伤,延缓肾脏纤维化,这一防治作用可能与其增加BMP-7表达,下调TGF-β1表达从而减少肾组织ECM沉积有关。     

TGF-β1对体外培养兔软骨细胞增殖的研究

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对关节软骨细胞增殖行为的影响。方法 采用兔关节软骨细胞体外单层培养方法,将TGF-β1作用于软骨细胞,并用MTT比色分析法对其增殖行为进行分析,探讨其对关节软骨细胞增殖行为的影响。结果 TGF-β1组的最佳效应浓度为5．0μg／L,且72h在0．5～5μg／L浓度范围内呈明显剂量一效应关系,超过5μg／L后,浓度增加,作用反而下降。结论 运用TGF-β1后软骨细胞增殖较对照组高,可促进兔软骨细胞增殖。     

瘦素对大鼠关节软骨细胞转化生长因子-β1表达的影响

目的探讨瘦素对大鼠关节软骨细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法培养大鼠关节软骨细胞,按实验方法将瘦素(浓度为10ng/ml)作用条件下培养的软骨细胞作为实验组、将单纯培养的软骨细胞作为对照组;于不同时间(12、24、36、48、72h)检测2组TGF-β1水平。结果 (1)采用细胞体外培养方法成功培养出大鼠关节软骨细胞,并通过形态观察和特殊染色得到证实。(2)实验组TGF-β1基因表达明显高于对照组,最佳时间为作用24～48h;继续瘦素刺激细胞增殖不明显,并有抑制作用的趋势。结论 (1)低浓度瘦素可显著提高软骨细胞的活性;(2)低浓度瘦素能有效维持大鼠关节软骨细胞的表型,抑制软骨细胞"去分化"和退变,并通过上调TGF-β1的mRNA表达促进细胞外基质II型胶原和蛋白多糖的合成分泌;(3)瘦素可加强TGF-β1的mRNA表达,以防止细胞外基质降解,有修复软骨的潜能。     

舒筋健腰丸对骨关节炎大鼠关节软骨和血清中细胞因子的影响

目的研究舒筋健腰丸对骨关节炎大鼠的关节软骨和血清中细胞因子的影响。方法 90只SD大鼠随机编号,分为6组,每组15只：将双醋瑞因组,舒筋健腰丸低剂量组（0.75 g/kg）、中剂量组（1.5 g/kg）和高剂量组（3.0 g/kg）大鼠双膝关节腔均注射4%木瓜蛋白酶溶液0.2 m L,每隔3 d注射1次,连续注射3次即成模型。空白组和模型组给予等体积的生理盐水,4周后取材,检测血清中IL-1β、TNF-α、MMP-1、MMP-13的含量;切取关节,光镜下观察软骨组织。结果舒筋健腰丸各组均能降低大鼠血清中IL-1β、TNF-α、MMP-1、MMP-13的含量,且含量显著低于模型组（P〈0.05）;可显著的减缓骨关节炎所致的关节软骨损伤,促进软骨修复。结论舒筋健腰丸能够抑制血清中IL-1β、TNF-α、MMP-1、MMP-13的升高,达到治疗骨关节炎的作用。     

银杏叶提取物对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠ET-1、TGF-β_1的影响

目的:研究银杏叶提取物(EGb)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠中内皮素-1(ET-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法:实验分为3组,即正常对照、COPD模型、EGb组。采用熏吸香烟并经气管内注入脂多糖(LPS)法复制COPD大鼠模型,EGb组于COPD模型开始复制后第8天起每天igEGb200mg·kg-1,至第28天。对各组大鼠肺脏行病理学检测和支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、中性粒细胞(PMN)数、ET-1、TGF-β1的测定。结果:EGb组大鼠肺组织形态学改变较COPD模型组减轻;定量指标肺平均内衬间隔(MLI)较COPD模型组显著降低(P<0.05)。EGb组BALF中白细胞总数、PMN数和ET-1、TGF-β1浓度较COPD模型组显著下降(P<0.05)。结论:EGb对COPD模型大鼠的肺脏具有保护作用,而抑制COPD大鼠ET-1、TGF-β1水平可能是其重要作用机制。     

肾康注射液对单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质转化生长因子-β1和骨形成蛋白-7表达的影响

目的研究肾康注射液对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾间质转化生长因子-β1（TGF-β1）和骨形成蛋白-7（BMP-7）表达的影响。方法将SD雌性大鼠54只随机分为正常对照组、UUO模型组、肾康治疗组，肾康治疗组用肾康注射液灌胃，分别在手术后第5，10，15天处死大鼠，在光镜下观察肾组织病理改变，应用免疫组织化学方法检测肾小管间质中TGF-β1，和BMP-7表达。结果与正常对照组相比，UUO模型组大鼠肾脏TGF-β1表达明显升高，BMP-7表达明显减少，但在予肾康注射液治疗后能显著下调UUO模型大鼠TGF-β1表达，上调BMP-7表达。结论肾康注射液可减轻肾小管间质纤维化，延缓慢性肾功能衰竭进展。     

三氧化二砷对实验性小鼠支气管哮喘气道重塑及TGF-β1、VEGF表达的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对支气管哮喘气道重塑的影响。方法将实验BALB/c小鼠40只随机分为正常对照组、模型组、地塞米松治疗组和As2O3治疗组,模型组通过腹腔注射卵白蛋白（OVA）致敏及反复雾化OVA吸入激发8周,建立支气管哮喘气道重塑动物模型,地塞米松和As2O3治疗组每次雾化吸入前分别给予地塞米松2 mg/kg和As2O34 mg/kg腹腔内注射。应用HE染色,观察支气管、肺组织的病理形态改变,应用图像分析系统测定气道重塑指标,应用免疫组化法检测各组小鼠肺组织中的转化生长因子β1（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）的蛋白表达,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测各组肺组织中的TGF-β1和VEGF mRNA表达水平。结果模型组小鼠经过8周过敏原激发后,肺组织病理学发生了较典型的哮喘样改变;地塞米松组和As2O3组小鼠的肺部组织病理学改变较模型组为轻,两组之间无显著差异。模型组小鼠肺组织中TGF-β1、VEGF的蛋白和mRNA表达均增强;与模型组相比,地塞米松组和As2O3组肺组织中TGF-β1、VEGF的蛋白和mRNA的表达均较弱,但仍强于正常对照组。结论致敏后给予8周过敏原激发可成功建立小鼠哮喘气道重塑模型;地塞米松和As2O3治疗均可抑制哮喘的气道重塑过程,其作用机制可能与抑制TGF-β1、VEGF的表达有关。     

骨舒汤对骨性关节炎中血清NO和血液流变学的影响

目的:研究骨舒汤对骨性关节炎中血清一氧化氮(NO)和血液流变学的影响。方法:随机选择健康大耳白兔72只均分成6组,即空白(10mL生理盐水)、模型(10mL生理盐水)、壮骨关节丸(10mL,浓度:0.7g.mL-1)和骨舒汤高、中、低剂量(20、10、5mL,浓度:0.7g.mL-1)组。采用改良的Hulth法复制模型。ig给药,每天1次,连续8周。观察兔血清、软骨NO含量和血液流变学指标,电镜下观察兔膝关节切片。结果:模型组兔血清、软骨NO含量及血液流变学指标显著高于空白组(P<0.05)。骨舒汤高剂量组兔血清、软骨NO含量及血液流变学指标均较模型组显著下降(P<0.05)。切片可见,模型组兔骨切片可见坏死软骨细胞,排列紊乱,潮线不完整;骨舒汤高剂量组兔关节软骨面光滑、软骨细胞柱状排列,潮线完整。结论:高剂量骨舒汤可降低模型兔膝骨性关节炎血清和软骨中NO含量,同时降低血液流变学指标,调节血液功能,从而起到保护关节软骨的作用。     

复方山菊对自发性高血压大鼠主动脉损伤的保护作用及机制

目的:探讨复方山菊对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉的保护作用及可能机制.方法:SHR 35只,随机分为SHR(蒸馏水5 mL·kg-1·d-1,n=7)模型组、复方山菊高、中、低(0.45、0.15、0.05 g· kg-1·d-1,n=7)剂量组、卡托普利(0.03 g· kg-1·d-1,n=7)阳性对照组,另设WKY(蒸馏水5 mL·kg-1·d-1,n=7)阴性对照组,连续灌胃给药16周,每天1次.尾袖法每两周测定大鼠动脉血压.16周后,HE染色观察主动脉病理组织学变化;Masson染色观察主动脉胶原纤维变化;免疫组化法观察主动脉内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、转化生长因子-β1(TGF-B1)蛋白的表达.结果:随着复方山菊剂量的增加,主动脉的病理损伤得到不同程度的改善,主动脉中膜胶原面积逐渐减小,胶原纤维沉积逐渐减轻;主动脉TGF-β1蛋白表达逐渐减少,eNOS蛋白表达逐渐增加.结论:复方山菊可明显减轻主动脉的病理损伤,减少主动脉胶原纤维沉积,下调TGF-β1及上调eNOS蛋白的表达,对SHR主动脉具有一定的保护作用.     

扶正化瘀方抗肾间质纤维化作用机理的研究

目的探讨扶正化瘀方影响转化生长因子p（TGF-β）1信号转导与肾小管上皮细胞转分化的抗氯化汞中毒大鼠肾间质纤维化的作用机理。方法SD雄性大鼠44只，随机分为正常组、模型组、扶正化瘀方组（FZHY组）与维生素E组（Vit．E组），以8mg／kg氯化汞水溶液灌胃9周制备大鼠肾间质纤维化模型。从造模开始扶正化瘀方组以扶正化瘀方4．6g／kg大鼠体重灌胃，Vit．E组以100mg，kg大鼠体重VitE水溶液灌胃，1次／天，共9周。免疫荧光法观察肾组织α-平滑肌肌动蛋白、E-cadherin、TGF-β1表达，Western blot观察肾组织α-平滑肌肌动蛋白、E-cadherin、TGF-β1、TβR-1、Smad2、P-Smad2蛋白表达。结果与正常组相比，模型组肾组织E-cadherin表达明显降低，扶正化瘀方干预后其表达明显升高；模型组α-SMA、TGF-β1、TBR—1、P—Smad2表达明显升高，扶正化瘀方干预能降低其表达。各组大鼠Smad2表达无明显差异。结论扶正化瘀方可抑制肾小管上皮细胞转分化从而减轻肾间质纤维化，其机制与抑制纤维化肾脏TGF-β及其Ⅰ型受体的表达、下调Smad2活性，抑制TGF—β／Smads病理信号转导有关。     

塞来昔布对老年大鼠骨质疏松性骨折愈合过程中转化生长因子β_1的影响

目的探讨塞来昔布(Celecoxib)对老年大鼠骨质疏松性骨折早期愈合过程中转化生长因子(TGF)-β1的影响。方法选用22月龄老年雄性SD大鼠60只,经随机抽取10只测出全身骨密度,与随机抽取的10只12月龄雄性SD大鼠的骨密度对比并做统计学分析,数值降低(P<0.05),确立老年大鼠骨质疏松模型。将老年大鼠制成左股骨骨折模型,随机分为对照组和Celecoxib组,Celecoxib组于术后给予Celecoxib 3 mg·kg-1·d-1灌胃,对照组给予同体积0.9%氯化钠注射液灌胃,共10d。术后在不同阶段处死,取骨痂进行苏木素-伊红(HE)染色、TGF-β1免疫组织化学染色观察及免疫组织化学图像分析。结果HE染色:塞来昔布组软骨生成及软骨内成骨过程较对照组延迟;TGF-β1免疫组织化学染色:两组TGF-β1表达的定位无差别,经图像分析,塞来昔布组在各个时间段TGF-β1蛋白阳性表达的积分吸光度(IA)值均弱于对照组,差异有统计学意义。结论塞来昔布通过抑制TGF-β1的表达,延缓老年大鼠骨质疏松性骨折的愈合。