乙酰氧基胡椒酚乙酸酯亚微乳对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的：研究乙酰氧基胡椒酚乙酸酯（ACA）亚微乳对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法：以处于对数生长期的人肝癌HepG2细胞为模型,采用MTT比色法检测5、10、20、40、80、160／amol／LACA亚微乳和ACA原料药作用24、48、72、96h后对细胞增殖的影响,计算半数抑制浓度（IC50）;流式细胞仪检测分析20、40、80pmol／LACA亚微乳和ACA原料药作用48h后细胞的周期分布和凋亡率。结果：与ACA原料药比较,ACA亚微乳对HepG2细胞的增殖抑制作用更明显（P〈0．05）,且呈浓度和时间依赖性;作用于细胞24、48、72、96h后,ACA原料药的IC51分别为160．05、135．56、124．18、109．30gmol／L,ACA亚微乳的IC。。分别为74．89、29．36、16．80、7．32lamol／L。ACA亚微乳可显著影响HepG2细胞周期的进程,使G。／G。期细胞减少、S期细胞增多;同等条件下,20、40、80lamol／LACA亚微乳作用后细胞的凋亡率[（34．60±0．73）％、（40．30±1．75）％、（50．60±2．12）％1均明显高于ACA原料药作用后细胞的凋亡率[（8．10±1．58）％、（11．80±1．62）％、（38．50±O．47）％]（P〈0．05）。结论：与ACA原料药比较,ACA亚微乳对HepG2细胞增殖的抑制作用更强,促凋亡作用更显著。     

姜黄素诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的 研究姜黄素对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖抑制和诱导凋亡作用.方法 MTT法检测姜黄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;流式细胞术(FCM)PI单染检测细胞周期;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 姜黄素对MCF-7细胞生长有明显抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;姜黄素能使MCF-7细胞阻滞在G1/S期,可以诱导细胞凋亡,Bax蛋白表达上调,而Bcl-2的表达减少.结论 姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有显著的抑制作用并可诱导细胞凋亡.其分子作用机制可能与其上调Bax基因表达水平的同时下调Bcl-2基因表达水平,从而诱导细胞凋亡有关.     

天花粉对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的研究天花粉对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法取对数生长期人乳腺癌MCF-7细胞以30,60,90,120μg·m L^-1的天花粉蛋白处理,作为实验组,对照组用等量的0.9%Na Cl处理,继续培养24,48,72h。观察并比较各组细胞形态学及细胞核凋亡形态学变化,以噻唑蓝(MTT)比色法检测各组人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制情况,分光光度法检测天花粉蛋白对人乳腺癌MCF-7细胞胱天蛋白酶(caspase)-3和caspase-8表达的影响。结果实验组人乳腺癌MCF-7细胞呈现明显的细胞凋亡及核凋亡现象,且随天花粉蛋白质量浓度的增加,其细胞核凋亡现象越明显;干预24 h后,30,60,90,120μg·mL^-1实验组增殖抑制率分别为(1.61±0.94)%,(2.81±1.01)%,(7.05±1.03)%和(9.59±1.12)%;干预48 h后增殖抑制率分别为(2.13±1.01)%,(6.14±1.12)%,(9.05±1.09)%和(19.60±1.15)%;干预72 h后增殖抑制率分别为(3.28±1.07)%,(7.18±1.51)%,(18.39±1.81)%和(29.59±1.63)%。实验组人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制率随作用时间的延长及天花粉蛋白质量浓度的增大而逐渐升高(均P<0.01);90μg·m L^-1实验组24,48,72 h caspase-3分别为1.49±0.15,2.36±0.25,2.15±0.23;caspase-8分别为1.94±0.26,1.56±0.19,1.39±0.20。对照组人乳腺癌MCF-7细胞caspase-3及caspase-8随作用时间的延长无显著变化(均P>0.05),而90μg·mL^-1实验组caspase-3先升高后降低(P<0.05或P<0.01),以48 h时最高;caspase-8则逐渐降低(P<0.01);且各时间点90μg·m L^-1实验组caspase-3及caspase-8均显著高于对照组(均P<0.01)。结论天花粉蛋白可有效促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡,抑制其增殖,且增殖抑制作用呈时间-剂量依赖性,其作用机制可能与上调人乳腺癌MCF-7细胞caspase-3及caspase-8表达相关。     

山柰酚诱导人乳腺癌耐阿霉素细胞MCF-7/阿霉素凋亡的研究

目的 研究山柰酚对人乳腺癌耐阿霉素细胞MCF-7/阿霉素(ADR)的增殖与凋亡的作用机制.方法(1)将人乳腺细胞MCF-7分为2组:空白组(培养基)和实验组.实验组分别用含不同浓度的山柰酚(20,50,100,150,200,300,400,500μmol·L-1)的培养基干预.干预48 h后,噻唑蓝(MTT)法测定细...     

槐米中槲皮素提纯、鉴定以及诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用

目的:研究从槐米中槲皮素(Quercetin,Que)提取、鉴定和对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制以及诱导凋亡作用.方法:采用碱溶解酸沉淀法提纯槐米中槲皮素,并进行红外光谱分析;采用体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,用不同浓度槲皮素处理;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长抑制率;采用细胞凋亡DNA Lad　der和FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞仪检测,槲皮素作用后MCF-7细胞凋亡情况.结果:不同浓度槲皮素对人乳腺癌MCF 7细胞有生长抑制作用,并呈浓度和时间依赖性(P＜0.05);10.0 mmol/L槲皮素作用MCF-7细胞2d,DNA电泳出现特征性的凋亡条带;10.0 mmol/L槲皮素处理MCF-7细胞1d、2d和3d,细胞凋亡率分别为(9.2±1.5)％、(30.0±11.8)％和(60.8±10.6)％.结论:用碱溶解酸沉淀法可从槐米中提纯槲皮素,提取的槲皮素对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制和诱导凋亡作用.     

氧化苦参碱诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的实验研究

目的　研究氧化苦参碱对MCF 7细胞的诱导凋亡作用机制。方法　用光学显微镜、电子显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和DNA凝胶电泳等技术观察细胞凋亡。结果　实验显示氧化苦参碱作用于体外培养的MCF 7细胞可诱导发生凋亡 ,凋亡细胞表现为细胞固缩 ,核染色质聚集或碎裂、胞质空泡化等 ;DNA电泳可见DNA梯形条带 ;激光共聚焦显微镜示DNA含量下降 ,流式细胞仪检测sub G1峰在G1期前出现 ,S期细胞比例增高。结论　氧化苦参碱对体外培养MCF 7细胞生长有抑制作用 ,机制与通过阻止细胞周期的进程 ,启动细胞自身调控程序 ,诱导肿瘤细胞凋亡有关     

桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,探讨其抗癌作用的机制。方法:应用MTT法检测桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,倒置显徽镜、HE染色及电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期及凋亡率,免疫细胞化学法(ICC)检测细胞增殖、凋亡相关调控蛋白的表达。结果:桃儿七根醇提物可明显抑制MCF-7细胞的增殖,1,2,3 mg．L~(-1)桃儿七根醇提物作用72h后,细胞生长抑制率分别为43．0%,54．9%,78．5%,抑制作用呈时间及浓度依赖性。形态学观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征,伴有多核细胞形成。FCM分析发现桃儿七根醇提物阻断MCF-7细胞生长于细胞周期的G_2/M期,凋亡诱导作用呈时间及浓度依赖性。免疫细胞化学结果显示,2mg·L~(-1)桃儿七根醇提物作用48h后,PCNA,Bcl-2蛋白表达较对照组显著下降;而p21~(WAFI-CIP1)和c-Myc蛋白显著增加(P＜0．01)。结论:桃儿七根醇提物可能通过增加p21~(WAFI-CIP1)蛋白表达及降低PCNA蛋白表达而抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并可能下调Bcl-2蛋白表达和上调c-Myc蛋白表达来促进MCF-7细胞凋亡。     

白藜芦醇通过激活p38-p53通路诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

本研究探讨了白藜芦醇(resveratrol,RSV)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其作用机制。以MTT法检测白藜芦醇对MCF-7的细胞毒性;应用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡的形态学变化;采用流式细胞术检测细胞的凋亡率;以Western blotting检测相关蛋白的表达。结果表明,白藜芦醇可以时间和剂量依赖性地抑制MCF-7细胞的生长;60μmol.L-1白藜芦醇作用于MCF-7细胞48 h后可使细胞核皱缩、染色质凝聚,并形成明显的凋亡小体;白藜芦醇可以时间依赖性地诱导MCF-7细胞凋亡及p38和p53蛋白的活化。p38 MAPK抑制剂SB203580和p53抑制剂pifithrin-α可以显著降低白藜芦醇诱导的MCF-7细胞的生长抑制率和凋亡率;并且SB203580可以下调由白藜芦醇引起的p53的活化,而pifithrin-α对白藜芦醇引起p38的活化无影响。研究表明,白藜芦醇可以通过激活p38-p53信号通路诱导MCF-7细胞发生凋亡。     

阿司匹林联合长春瑞滨对人乳腺癌细胞MCF-7的作用机制研究

目的探究阿司匹林联合长春瑞滨(VNR)对人乳腺癌细胞MCF-7的作用机制。方法体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,分为空白对照组、VNR组以及阿司匹林+VNR低、高剂量组。使用MTT法检测MCF-7细胞的增殖情况,使用流式细胞仪检测MCF-7细胞的凋亡率及周期变化,使用Western Blot和RT-PCR定性、半定量检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、磷酸化丝氨酸苏氨酸激酶(P-Akt)和丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)的蛋白表达量。结果 MTT观察结果显示,与空白对照组比较,VNR组和阿司匹林+VNR低剂量组MCF-7细胞抑制率显著升高(P<0.01);与阿司匹林+VNR低剂量组比较,阿司匹林+VNR高剂量组MCF-7细胞抑制率有一定程度升高(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,与空白对照组比较,VNR组和阿司匹林+VNR低、高剂量组细胞凋亡率均显著增加,S期细胞数量比例显著增加(P<0.01)。与空白对照组比较,VNR组Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2和P-Akt蛋白表达显著降低(P<0.01);与VNR组比较,阿司匹林+VNR低、高剂量组Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2和P-Akt蛋白表达显著降低(P<0.01);与阿司匹林+VNR低剂量组比较,阿司匹林+VNR高剂量组Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2和P-Akt蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论阿司匹林联合VNR可通过下调抑凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax、凋亡调控因子Caspase-3和Caspase-9蛋白表达,抑制磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路达到抑制乳腺癌细胞增殖、促进乳腺癌细胞凋亡的效果。     

1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯注射液的稳定性研究及有效期预测

目的:考察1′-乙酰氧基胡椒酚乙酸酯(ACA)注射液的稳定性,预测其有效期。方法:采用高效液相色谱法测定注射液中ACA含量,考察ACA注射液在高温40℃、光照(4500±500)lx条件下的稳定性,并以经典恒温法得到其分解速率常数K,预测有效期。结果:ACA检测浓度线性范围为5～100μg·mL-(1(r=0.9999,n=5),平均回收率为99.76%,RSD=0.43%。在高温和光照条件下,ACA注射液含量下降,有关物质有所增加。25℃药物分解速率常数K及有效期分别为1.0156×10-5h-1、1.2年。结论:本品对光、热较敏感,高温不利于ACA注射液的稳定,需置于避光阴凉处保存。     

聚丁二炔生物传感器变色免疫法检测乳腺癌MCF-7细胞

目的 合成能特异性识别肿瘤细胞的聚丁二炔生物传感器。方法 超声乳化-共价修饰法制备聚丁二炔/磷脂(polydiacetylene/Phospholipid,PDA/PC)纳米囊泡,通过共价修饰法将鼠抗人细胞角蛋白抗体CK19共价修饰固定在PDA/PC纳米囊泡表面,制备可变色的PDA/PC生物传感器,用于检测肿瘤细胞。透射电镜负染技术,激光散射粒径测定仪、紫外-可见分光光度计扫描,计算比色响应(colorimetric response,CR)等对合成的PC/PDA生物传感器进行表征,以乳腺癌细胞株MCF-7为模型,模拟考察PDA/PC生物传感器识别鉴定外周血循环肿瘤细胞(circulating tumorcells,CTCs)可行性。结果 TEM检查结果显示制备的PDA/PC生物传感器呈球形或类球形、粒径均匀,平均粒径约为(223.4±23.6)nm;激光散射粒径分析仪显示生物传感器的强均粒径和多分散系数为298.4 nm和0.184;特异性抗原加入后,纳米粒发生团聚,颜色出现由蓝至红的变化,且CR值随着抗原浓度增加而增加,与高表达的乳腺癌细胞MCF-7发生特异性结合,充分混匀后,溶液颜色产生由蓝至红的变化。结论 成功合成由单克隆抗体抗CK19修饰的PDA/PC生物传感器,通过免疫化学显色技术,可快速、有效、灵敏的检测溶液中微量乳腺癌MCF-7细胞,为PDA/PC生物传感器技术在CTC识别上的应用奠定基础。     

冬凌草甲素对MCF-7细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用的实验研究

目的探讨冬凌草甲素对人乳腺癌细胞MCF-7细胞的生长抑制作用及诱导凋亡作用。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的MCF-7细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用Hoechst 33258荧光染色法以及流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果冬凌草甲素可显著抑制MCF-7细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,并呈现出一定的剂量-效应与时间-效应关系。Hoechst 33258荧光染色观察到典型的核浓缩、核碎裂等细胞凋亡的形态学变化。结论冬凌草甲素能显著抑制MCF-7细胞的生长,诱导细胞发生凋亡是其重要作用方式。     

紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用研究

目的:研究紫苏醇亚微乳剂对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制作用。方法:以紫苏醇溶液为对照,采用MTT比色法检测不同浓度(0、50、100、200、400、800μmol·L-1)紫苏醇亚微乳剂处理不同时间(24、48、72h)后对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制率及半数抑制量(IC50)值,并设立空白组进行比较。结果:与空白组比较,试验组与对照组在作用24h、浓度高于400μmol·L-1,48h、浓度高于100μmol·L-1,72h、浓度高于50μmol·L-1时均表现出明显抑制作用(P<0.05);后2组抑制作用比较无显著性差异;试验组与对照组对MCF-7细胞株的IC50值分别为353.9、377.9μmol·L-1。结论:紫苏醇制成亚微乳剂后与其溶液比较,对人乳腺癌细胞MCF-7具有相同的抑制作用。     

人参皂苷Rg3对乳腺癌MCF-7细胞增殖和侵袭的影响

目的 观察人参皂苷Rg3对雌激素受体阳性的乳腺癌细胞MCF-7增殖和侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 采用MTT法检测细胞的增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期分布以及凋亡比率,通过Transwell小室观察细胞侵袭力,RT-PCR法检测细胞中的MMP-9 mRNA的表达。结果 与对照组相比,人参皂苷Rg3能显著抑制MCF-7细胞的增殖;G₀/G₁期及S期细胞比例减少,而G₂/M期细胞比例显著增加;同时细胞凋亡比率亦明显提升,而细胞侵袭指数降低,且呈现良好的剂量、时间依赖性。同时人参皂苷Rg3还能显著抑制细胞中MMP-9 mRNA的表达水平(P<0.05)。结论 人参皂苷Rg3能抑制MCF-7细胞的增殖和侵袭,其作用机制可能与其能降低MMP-9基因的表达有关。     

辛基酚对MCF-7乳腺癌细胞增殖及凋亡作用研究

目的探讨辛基酚（octylphenols,OP）诱导乳腺癌细胞凋亡及抑制乳腺癌细胞增殖的可能机制。方法应用MTT法及流式细胞仪检测OP对乳腺癌细胞MCF-7的增殖抑制及细胞周期的变化;Real Time PCR和Western blot法检测OP对MCF-7乳腺癌细胞中细胞周期相关蛋白p27Kip1和CyclinE的mRNA及蛋白表达的影响及对凋亡抑制蛋白PAK4表达的影响。结果 OP对MCF-7细胞增殖有明显的抑制作用,MCF-7细胞阻滞在G0/G1期,使S期的细胞减少;Real Time PCR和Western Blot检测发现培养的MCF-7细胞,随着OP的处理浓度增加,CyclinE蛋白在分子水平和蛋白水平均降低,p27Kip1的表达量升高。结论 OP可能通过调控细胞周期相关蛋白的表达,抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖。     

体外观察雷公藤内酯醇对乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(triptolide,TP)对人乳腺癌细胞MCF-7增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测不同条件下TP对MCF-7细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜观察TP对MCF-7细胞形态学影响;流式细胞仪检测MCF-7细胞的凋亡情况;Caspase检测试剂盒测定Caspase-3,9的变化。结果:TP以剂量及时间依赖性方式明显抑制MCF-7细胞的增殖;TP作用MCF-7细胞后,细胞出现明显的形态学改变(形态不规则、脱落,细胞碎片等)。流式细胞仪检测5μg/mL的TP明显诱导MCF-7细胞凋亡;Caspase-3,9表达水平明显升高,和对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TP可能通过线粒体通路诱导MCF-7细胞凋亡而发挥其抑制作用。     

消瘤1号诱导MCF-7人乳腺癌细胞凋亡的研究

目的:研究中成药消瘤1号诱导MCF-7人乳腺癌细胞的凋亡作用,并通过分析其作用后MCF-7细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的变化,探讨其诱导MCF-7细胞凋亡的分子机制。方法:采用细胞培养技术,用1、10、100、1000μg·mL-1的消瘤1号处理MCF-7细胞24h,PI染细胞,流式细胞仪测定细胞周期的变化,Western Blot法检测Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果:流式细胞仪检测结果表明细胞阻滞在G0/G1期;Weston Blot法测定结果表明消瘤1号能够增加细胞中Bax蛋白表达,减少Bcl-2蛋白表达,且该2种蛋白的表达依赖于消瘤1号的浓度。结论:消瘤1号可通过调节Bax/Bcl-2蛋白表达的变化诱导MCF-7细胞凋亡。     

人参皂甙Rg3对乳腺癌MCF-7线粒体凋亡途径的影响

目的探讨20(R)–人参皂甙Rg3(SPG-Rg3)对人乳腺癌MCF-7细胞的诱导凋亡作用及其可能机制。方法人乳腺癌细胞MCF-7细胞株分为空白对照组、实验对照组及SPG-Rg3多个浓度组。利用MTT法观察人参皂甙Rg3对MCF-7细胞生长的抑制作用,并计算出IC-50,进一步确定其有效浓度;流式细胞术检测人参皂甙Rg3作用后MCF-7细胞周期的变化;利用AnnexinV-EGFP/PI双染法,检测人参皂甙Rg3诱导MCF-7细胞凋亡情况;免疫细胞化学染色检测MCF-7细胞凋亡与Fas、FasL蛋白表达的关系。结果 SPG-Rg3作用48h的IC-50为244.54μg/mL。流式细胞仪检测Rg3使MCF-7的S期细胞比率明显增加(P<0.01),凋亡率明显增加(P<0.01)。免疫细胞化学显示Rg3能使MCF-7细胞胞浆内细胞色素C增加(P<0.01)。结论 SPG-Rg3能诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡,其机制可能与诱导线粒体释放细胞色素C有关。     

芹黄素联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖、迁移及凋亡的影响

目的 探讨芹黄素联合紫杉醇对人乳腺癌MCF-7细胞株增殖、迁移及凋亡的影响.方法 采用MTT法测定人乳腺癌MCF-7细胞的增殖活性;用Transwell法测试细胞的迁移情况;用流式细胞仪检测细胞的凋亡.结果 芹黄素与紫杉醇单独用药对细胞的抑制作用随药物浓度的提高而增强,呈浓度依赖性,联合用药有协同作用;两药联用后,抑制细胞的迁移能力和诱导细胞的凋亡作用增强.结论 芹黄素与紫杉醇联用可协同抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖和迁移,并诱导细胞的凋亡.