玫瑰糠疹与人类疱疹病毒6和人类疱疹病毒7相关的额外证据

为了阐明人类疱疹病毒6(H H V-6)和人类疱疹病毒7(HH V-7)在玫瑰糠疹(PR)发病机制中的作用,作者采用校准的定量实时PCR分析法检测病毒在血浆、外周血单核细胞(PBM C)和组织中的D N A载量。同时采用免疫组化法研究皮肤中的H H V-6和H H V-7特异性抗原,采用合胞体形成抑制试验研究抗H H V-7抗体的抑制活性。从31例PR患者(14例儿童,17例成人)、12例其他皮肤病患者和36例献血者中获取血浆和PBM C。从15例PR患者和12例其他皮肤病患者中取皮肤组织活检。在17%和39%的PR患者血浆中分别检测到H H V-6和H H V-7D N A,但在对照组血…     

多聚酶链反应检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞中的HBVDNA

本文应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了６９例乙型肝炎患者（其中慢性迁延性肝炎１７例，慢性活动性肝炎２３例，肝炎后肝硬化１２例，重症乙肝１７例）外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中的ＨＢＶＤＮＡ存在状态。结果显示，ＰＢＭＣ中ＨＢＶ－ＤＮＡ总阳性率为４６％，而各型乙肝间ＰＢＭＣ中ＨＢＶＤＮＡ阳性率差异无显著性（Ｐ＞０．０５），提示ＨＢＶ对ＰＢＭＣ的感染，似与乙型肝炎的临床类型无明显的相关性。     

建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术

建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术。人工合成adr、adw和ayw三个业型HBV的两个共有序列NC1和NC2作为引物扩增一长428bp且含一BglⅡ酶切点的HBV C基因片段。含FD酶的反应体系在水浴93℃30秒、55℃60秒、72℃90秒依序循环30周期,当克隆HBV DNA模板最小加量为10 fg时,产物作琼脂糖凝胶电泳经溴化乙锭染色在紫外线下观察仍可见428 bp位置的阳性荧光带。阳性产物经BgⅠⅡ酶切后分为125 bp和303 bp的两个特异片段。同一条件下的阴性对照则出现阴性结果。这一技术用以检测经常规DNA提取的127例HBsAg阳性血清,结果HBV DNA检出率达88％,其中HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为97％,抗HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为82％。     

泌尿外科的DNA和RNA扩增:多聚酶链反应

分子生物学的重要进展彻底改变了我们检测特异性基因序列的能力。新的技术已用于临床。扩增DNA和RNA:多聚酶链反应多聚酶链反应(PCR)技术的发展是分子学方法快速应用于临床的关键。现概述PCR的优点、局限性、设计、方法,并举例说明此技术在泌尿外科的应用。     

多聚酶链反应检测乙型肝炎后肝硬化患者血清HBV－DNA及其意义

为观察乙型肝炎后肝硬化患者体内ＨＢＶ的复制状况，为抗病毒治疗提供依据，以减少盲目用药。应用多聚酶链反应，对２６例乙型肝炎后肝硬化患者检测了血清ＨＢＶ－ＤＮＡ存在状态。结果显示，活动性乙型肝炎后肝硬化９例，血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性８例，阳性率８８．８８％，静止性乙型肝炎后肝硬化１７例，ＨＢＶ－ＤＮＡ脑性６例，阳性率３５．２９％。两组比较。血清ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率差异显著（Ｐ＜０．０１）。结果表明，应重点对活动性乙型肝炎后肝硬化患者进行抗病毒治疗。     

多重多聚酶链反应和原位杂交检测成人咽喉病变中人乳头瘤病毒感染

用多重我聚酶链反应（ＰＣＲ）和生物素标记探针的原位杂交方法对３６例石蜡包埋的成人咽、喉部乳头状瘤、上皮不典型增生和鳞状细胞癌的组织标本进行了检测。结果共检出６例ＨＰＶＤＮＡ阳性病例，全部为ＨＰＶ６／１１，其中仅１例伴ＨＰＶ１６型感染。６例阳性病例包括喉乳头状瘤３例，咽乳头状瘤、喉粘膜上皮高度不典型增生及喉鳞癌各１例。原位杂交显了ＨＰＶＤＮＡ在肿瘤组织、组织中的分布。     

聚合酶链反应(PCR)检测可疑HSK患者外周血及角膜上皮单纯疱疹病毒DNA

1　材料和方法1.1　材料　正常对照组20例,临床可疑单纯疱疹性角膜炎(HSK)患者50例(均为我院眼科中心住院或门诊患者).1外周血采集:肘静脉血2mL,取血清50μL备检.2角膜上皮细胞采集:用棉签擦拭病变处角膜上皮细胞(含泪液成分),置入含1.5mL生理盐水的Eppendorf管中,待检.试剂:选用上海prormega公司提供的检测人单纯疱疹病毒(HSV-)试剂盒.本技术用HSV-DNA基因高保守区设计的3条引物,扩增片段分别为469bp和391bp,采用PCR检测其特异性DNA片段.1.2　方法　1DNA模板制备:外周血标本:取50μL裂解液于离心管中,加入20μL待检血清,100℃煮…     

外周血白细胞和血浆中EB病毒DNA含量检测的比较

目的 探讨外周血白细胞和血浆中EB病毒DNA含量是否存在差异, 为实验室标本类型的选择提供依据。方法 收集延安大学附属医院423例疑似EB病毒感染的住院及门诊患者的抗凝全血标本, 用荧光定量PCR法, 分别于白细胞和血浆中提取EB病毒DNA, 进行PCR扩增定量检测, 并对结果进行比较分析。结果 423例标本中, 外周血白细胞标本EB病毒DNA阳性率为32.38%(137/423), 血浆标本EB病毒DNA阳性率为2.36%(10/423), 差异有统计学意义(P＜0.05)。且同为阳性的标本中, 白细胞中EB病毒DNA含量均明显高于血浆, 当白细胞中EB病毒的含量达到5次方以上时, 血浆中EB病毒的含量才能达到阳性。结论 外周血白细胞和血浆中EB病毒核酸载量, 二者比较有统计学差异, 外周血白细胞检测的阳性率高于血浆, 白细胞中EB病毒的含量达到一定程度, 血浆标本中才可检测到, 以外周血白细胞为检测标本更为灵敏, 可以减少漏诊。     

百色市献血者中人类疱疹病毒8型病毒DNA的PCR检测

目的聚合酶链反应检测百色市献血者中人类疱疹病毒8型的感染。方法取-80℃冻存的献血者肘静脉血679份,其中男性356份,女性323份。提取DNA,PCR法扩增血液标本中的HHV-8 DNA,PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳,出现369bp条带者为阳性。结果 679份血液标本中有9份标本检出HHV-8 DNA,阳性率为1.33%。其中356份男性献血者的血液标本中检出阳性标本5份,阳性率为1.40%;323份女性献血者的血液标本中检出阳性标本4份,阳性率为1.24%。χ2检验分析男性与女性献血者之间的HHV-8 DNA检出率P>0.05。结论百色市献血者中存在HHV-8感染,不同性别献血者之间的感染率差异无显著性。     

口腔扁平苔藓患者外周血白细胞中人类疱疹病毒5型的定量检测

口腔扁平苔藓（oral lichen planus，OLP）是口腔科临床比较常见的一种慢性疾病。到目前为止，该病的病因仍不明确。在临床上，有一些OLP病例能找到明显的发病原因，比如像齿科材料、药物、哮喘、心理及精神压力因素等等，但是这样的病例在临床上毕竟是占很少的一部分，而绝大部分病例却是原因不明而且反复发作的，并且往往在发病前有明显的身体抵抗力下降的诱因，这就使我们联想到存在着病毒感染的可能性。     

用逆转录酶和多聚酶链反应的方法在外周血中检测黑色素瘤细胞

实体肿瘤仅需少量细胞就可引起血源性转移。因现有的方法不够敏感,所以检测有困难。本文作者们用逆转录酶从外周血信息RNA中制造补体DNA,用多聚酶链反应(PCR)来扩大仅在肿瘤组织类型中积极转录的特定基因cDNA。     

不明原因持续肝功能异常患者肝组织和外周血单核细胞中HBV DNA检测分析

目的 :检测不明原因持续肝功能异常患者肝组织和其外周血单核细胞中 HBVDNA。方法 :采用原位分子杂交技术 ,分别检测随机选择的 40例不明原因持续肝功能异常患者外周血单核细胞和其肝组织中 HBV DNA。结果 :40例不明原因持续肝功能异常患者肝组织中 HBV DNA阳性 2 4例 ,阳性率为 5 8% ;外周血单核细胞中 HBV DNA阳性 1 8例 ,阳性率为 45 % ;两者比较 ,差异无显著性。结论 :对肝组织和外周血单核细胞进行 HBVDNA检测 ,有助于诊断隐性 HBV感染 ,后者对患者侵袭性小 ,取样简便。     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞和单核细胞人类白细胞抗原DR的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞和单核细胞人类白细胞抗原(HLA)DR表达的变化. 方法 57例SLE患者,其中稳定期患者18例,活动期患者39例(中度活动组28例,重度活动组11例);另选正常对照组23例.应用双色荧光抗体标记流式细胞术检测SLE患者外周血淋巴细胞和单核细胞HLA-DR表达的阳性百分率及荧光强度. 结果 ①与正常对照组比较,稳定期和活动期SLE组外周血淋巴细胞HLA-DR表达的阳性率和荧光强度均显著升高(P<0.001),而单核细胞HLA-DR表达的阳性率和荧光强度均显著降低(P<0.001);②活动期SLE组与稳定期SLE组比较,淋巴细胞HLA-DR阳性百分率和荧光强度均显著升高(P<0.001),而单核细胞HLA-DR的阳性百分率和荧光强度均显著降低(P<0.001);③活动期SLE重度组与中度组比较,淋巴细胞HLA-DR阳性百分率和荧光强度均显著升高(P<0.001),单核细胞HLA-DR的阳性百分率和荧光强度均显著降低(P<0.001). 结论 淋巴细胞HLA-DR表达的增高和单核细胞HLA-DR表达的降低与SLE的发病和发展有着非常密切的关系.     

系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞和单核细胞人类白细胞抗原DR的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞和单核细胞人类白细胞抗原(HLA)DR表达的变化。方法57例SLE患者,其中稳定期患者18例,活动期患者39例(中度活动组28例,重度活动组11例);另选正常对照组23例。应用双色荧光抗体标记流式细胞术检测SLE患者外周血淋巴细胞和单核细胞HLA-DR表达的阳性百分率及荧光强度。结果①与正常对照组比较,稳定期和活动期SLE组外周血淋巴细胞HLA-DR表达的阳性率和荧光强度均显著升高(P<0.001),而单核细胞HLA-DR表达的阳性率和荧光强度均显著降低(P<0.001);②活动期SLE组与稳定期SLE组比较,淋巴细胞HLA-DR阳性百分率和荧光强度均显著升高(P<0.001),而单核细胞HLA-DR的阳性百分率和荧光强度均显著降低(P<0.001);③活动期SLE重度组与中度组比较,淋巴细胞HLA-DR阳性百分率和荧光强度均显著升高(P<0.001),单核细胞HLA-DR的阳性百分率和荧光强度均显著降低(P<0.001)。结论淋巴细胞HLA-DR表达的增高和单核细胞HLA-DR表达的降低与SLE的发病和发展有着非常密切的关系。     

白血病患者血浆和外周血白细胞内维生素的研究

本文检测４５例正常人和４４例不同类型白血病血浆和外周血白细胞内维生素Ｅ、Ａ、Ｃ、Ｂ１２、β－胡萝卜素和叶酸浓度。结果表明，白血病血浆内β－胡萝卜素降低（Ｐ＜０．００１），Ｂ１２显著增高（Ｐ＜０．００１），外周血白细胞内维生素Ｅ、Ｂ１２和β－胡萝卜素均低于正常对照组（Ｐ＜０．００１和＜０．０５）。在各类型白血病比较中，ＡＬＬ血浆维生素Ａ和β－胡萝卜素高于正常对照组和髓系白血病（Ｐ＜０．００１），ＣＭ     

用逆转录─多聚酶链反应检测卵巢癌及大肠癌患者多药耐药基因的表达

应用逆转录─多聚酶键反应（RT－PCR）检测卵巢癌12例，大肠癌15例，肝癌2例肿瘤多药耐药基因（MDR1）表达。以长春新碱（VCR）敏感细胞株KB和耐药株KBr分别作阴性及阳性对照，卵巢癌患者MDR1表达增高者为50％（6／12），大肠癌增高者75％（10／15）卵巢癌MDR1表达低者化疗效果较好；大肠癌患者MDR1表达高者似与术前局部用化疗药有关。