子宫腺肌病中PTEN和Akt的表达及其相关性研究

目的探讨子宫腺肌病病灶中10号染色体缺失张力蛋白磷酸酶(PTEN)和蛋白激酶B（PKB/Akt）的蛋白表达情况,旨在为子宫腺肌病的发生发展以及治疗提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测子宫腺肌病异位内膜(30例)、在位内膜（27例）、正常子宫内膜(20例)的腺上皮细胞和间质细胞中PTEN、Akt、磷酸化Akt （P Akt）蛋白的表达并进行比较。结果PTEN蛋白在腺上皮细胞中的表达,正常子宫内膜表达高于在位内膜和异位内膜（P＜0.05,P＜0.01）,子宫腺肌病在位内膜的表达高于子宫腺肌病异位内膜的表达（P＜0.01);Akt、P Akt蛋白在子宫腺肌病异位内膜的腺上皮细胞中的表达强度高于在位内膜（P＜0.05）和正常子宫内膜(P＜0.01),其在位内膜腺上皮细胞中的表达强度高于正常子宫内膜(P＜0.01)。PTEN蛋白在间质细胞中的表达,正常子宫内膜明显高于子宫腺肌病的在位内膜和异位内膜（P＜0.05）,但在位内膜与异位内膜之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）;Akt、P Akt蛋白在间质细胞中的表达,异位和在位内膜明显高于正常内膜,异位内膜和在位内膜两组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。PTEN与Akt、PTEN与P Akt在子宫腺肌病异位内膜、在位子宫内膜和正常子弓内膜中的表达均呈负相关（r＝-0.444;r＝-0.546）。结论PTEN蛋白表达在子宫腺肌病的在位、异位内膜中减少;Akt、P Akt蛋白表达增加。PTEN蛋白低表达不能有效的抑制Akt的激活,从而对子宫腺肌病的发生与发展起重要的作用。     

PTEN、Survivin蛋白在卵巢子宫内膜异位囊肿表达的相关性及临床意义

目的:探讨卵巢子宫内膜异位囊肿及正常子宫内膜组织中抑癌基因PTEN蛋白和凋亡抑制基因Survivin蛋白表达及其意义。方法:利用免疫组织化学二步抗法检测妇科手术切除的卵巢子宫内膜异位囊肿20例和正常子宫内膜20例中PTEN蛋白、Survivin蛋白的表达。结果:PTEN、Survivin蛋白在卵巢子宫内膜异位囊肿中的表达无明显周期性(P>0.05)。卵巢子宫内膜异位症中PTEN蛋白和Survivin蛋白的表达分别与正常子宫内膜表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);PTEN蛋白、Survivin蛋白表达在卵巢子宫内膜异位症无明显相关性(P>0.05)。结论:PTEN蛋白;Survivin可能促进了子宫内膜异位症的发生、发展,两者可能独立发挥作用。     

miRNA-221在EMS组织及间质细胞中的表达及对细胞增殖的影响

目的 探讨microRNA-221（miRNA）在子宫内膜异位症（endometriosis,EMS）患者组织及细胞中的表达及对EMS间质细胞增殖的影响。 方法 收集非EMS患者在位内膜（正常子宫内膜）及EMS患者卵巢异位内膜,分离培养及鉴定子宫内膜间质细胞,采用茎环法实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测在位、异位内膜组织及间质细胞中miRNA-221的表达;雌激素（17β-E₂,终浓度为10-8mol/L）刺激间质细胞48 h后检测miR-221-3p表达变化;异位间质细胞转染miR-221-3p inhibitor和inhibitor阴性对照（NC）后,观察其对miR-221-3p、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）表达和增殖的影响。 结果 miR-221-3p在EMS组织中的表达为正常子宫内膜组织的4.2倍（P=0.039）,在EMS间质细胞中的表达为正常子宫内膜间质细胞的2.66倍（P=0.029）。与正常子宫内膜组织及间质细胞相比,miR-221-5p在EMS组织及间质细胞中表达差异均无统计学意义（P>0.05）。雌激素处理正常及异位间质细胞48 h后miR-221-3p表达差异无统计学意义。抑制miR-221-3p功能后,异位间质细胞增殖抑制（P=0.018）,PTEN基因表达上调（P=0.021）。 结论 miRNA-221在EMS组织及间质细胞中表达上调,抑制miR-221-3p功能可促进PTEN表达从而抑制EMS间质细胞增殖。     

细胞核增殖抗原ki-67在异位和在位子宫内膜中的表达

目的 通过观察细胞核增殖抗原ki-67在子宫内膜异位症中的表达探讨子宫内膜细胞增殖能力对子宫内膜异位症发病的影响。方法 应用免疫组化SP法检测58例子宫内膜异位症(EMS)患者(包括36例卵巢子宫内膜异位症和22例子宫腺肌症)的异位内膜和在位内膜及15例子宫肌瘤患者子宫内膜(对照组)中ki-67的表达情况,以增殖指数为统计指标。结果 卵巢EMS组和子宫腺肌症的在位和异位内膜ki-67的表达差异均无显著性;对照组子宫内膜和EMS组在位内膜的腺体和间质的ki-67表达在增生期均显著高于分泌期,EMS异位内膜增殖指数在增生期和分泌期差异无显著性 (P>0.05);EMS异位内膜ki-67增殖指数在增殖期低于在位内膜,但在分泌期则显著高于在位内膜(P<0.01);EMS异位内膜腺体Ⅰ~Ⅱ期时的ki-67表达高于Ⅲ、Ⅳ期,但在位内膜的ki-67表达在不同临床分期中差异无显著性 (P>0.05)。结论 ki-67增殖指数反映了子宫内膜细胞的增殖活性,EMS异位内膜细胞持续增殖活跃可能在子宫内膜异位症发生发展中起重要作用。     

内异症中芳香化酶的表达与其局部雌激素异常合成的关系

目的 研究卵巢巧克力囊肿异位内膜腺上皮、间质细胞及卵巢内异症的在位内膜中P450芳香化酶蛋白和mRNA表达,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用及其临床意义.方法 采用反转录聚合酶联反应(RT-PCR)和免疫组化技术检测45例卵巢巧克力囊肿的囊壁(巧囊)、32例卵巢内异症的在位内膜和35例正常子宫内膜中P450芳香化酶(P450A)mRNA及蛋白的表达.结果 巧囊壁异位内膜P450A mRNA表达量高于在位内膜(P＜0.01);35例正常子宫内膜中仅有2例表达;免疫组化检测巧囊壁P450A蛋白其表达特征与mRNA一致.结论 子宫内膜异位症异位灶中有P450A表达,这种雌激素的合成酶能在异位灶局部合成异常的雌激素;卵巢内异症的在位内膜有P450A表达,提示在位内膜本身局部有雌激素的合成,其保护机制劣于正常内膜.子宫内膜异位症中P450A的表达在其发病中起到重要作用.     

P450A在巧克力囊肿异位内膜和在位内膜中的表达

目的研究卵巢巧克力囊肿异位内膜腺上皮、间质细胞及其在位内膜P450芳香化酶蛋白和mRNA表达,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用及其临床意义.方法采用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)和免疫组化技术检测45例巧囊壁、32在位内膜和35例正常内膜中P450芳香化酶(P450A)mRNA及蛋白的表达.结果巧囊壁异位内膜P450AmRNA表达量高于在位内膜(P＜0.01);35例正常内膜中仅有2例表达;免疫组化检测巧囊壁P450A蛋白其表达特征与mRNA一致.结论子宫内膜异位症P450A的表达在其发病中起到重要作用.     

Bcl-2和Bax蛋白在子宫内膜异位症的表达

目的 :研究凋亡调节蛋白Bcl 2和Bax在子宫内膜异位症发生中的病理生理作用。方法 :应用免疫组织化学ABC法检测 16例子宫腺肌病的正位和异位子宫内膜、12例卵巢内异症的异位内膜及 17例正常子宫内膜中Bcl 2和Bax的免疫定位和染色强度。结果 :①在正常和正位子宫内膜中 ,Bcl 2或Bax表达相同 (P >0 .0 5 ) ,主要见于腺上皮细胞 ,具有明显周期性变化。②子宫腺肌病异位内膜中 ,Bcl 2或Bax均持续表达 ,无周期性变化。③卵巢内异症的异位内膜 ,Bcl 2和Bax极少表达。结论 :①Bcl 2或Bax在正常和正位子宫内膜的周期性表达 ,提示它们可能参与月经周期调节 ;②子宫腺肌病异位内膜腺上皮细胞Bcl 2持续存在 ,使之得以长期增殖而发病 ,为研究腺肌病的发病机制和寻找防治对策提供了新的理论依据。③卵巢内异症极少表达Bcl 2可能是促成凋亡形成 ,引起巧克力囊肿的原因。     

Bcl-2 fas及survivin在子宫内膜异位症患者卵巢异位内膜的表达变化及意义

目的研究与细胞凋亡相关因子Bcl-2 fas及survivin在子宫内膜异位症（EMS）患者卵巢异位内膜的表达变化,探讨EMS的发生发展与细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法检测49例卵巢异位内膜和48例正常在位内膜的Bcl-2f、as及survivin的表达。结果①Bcl-2在囊肿组异位内膜的表达显著高于对照组在位内膜（P〈0.01）。②fas在囊肿组异位内膜的表达显著低于对照组在位内膜（P〈0.01）。③survivin在囊肿组异位内膜的表达显著低于对照组在位内膜（P〈0.01）。结论①Bcl-2在EMS卵巢异位内膜表达显著增强,推测Bcl-2是异位内膜的主要抗凋亡因子之一,异位内膜Bcl-2的升高是促使EMS发生发展的因素之一。②fas在EMS卵巢异位内膜表达显著降低,推测EMS异位内膜凋亡能力降低,致使异位的子宫内膜组织在异位种植生长,促使EMS的发生发展。③囊肿组异位内膜survivin表达比对照组在位内膜显著降低,推测survivin有可能不是EMS的主要抗凋亡因子。     

p53p21MDM2蛋白在卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症中的表达及意义

目的通过检测p53、p21、MDM2蛋白在正常子宫内膜、卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症组织中的表达,探讨p53、p21、MDM2基因和细胞凋亡在子宫内膜异位症发生发展中的作用,为临床诊治提供理论依据。方法应用免疫组化染色法(S-P法)检测29例正常子宫内膜、30例卵巢子宫内膜异位症和29例子宫腺肌症组织标本的p53、p21、MDM2表达情况,对p53、p21、MDM2的表达及细胞凋亡之间的关系进行分析。结果 p53蛋白在正常子宫内膜组中分泌期表达高于增生期(P0.05),在卵巢子宫内膜异位症组织和子宫腺肌症组织中增生期与分泌期表达差异无统计学意义(P0.05)。正常子宫内膜组p53蛋白表达率高于卵巢子宫内膜异位症组(P0.05)和子宫腺肌症组(P0.05),差异有统计学意义。卵巢子宫内膜异位症组p53蛋白表达率与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义(P0.05)。P21蛋白在正常子宫内膜组的表达率高于卵巢子宫内膜异位症组(P0.05)和子宫腺肌症组(P0.05),差异有统计学意义。卵巢子宫内膜异位症组p21蛋白表达率与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义(P0.05)。MDM2蛋白在正常子宫内膜组织的表达率分别低于卵巢子宫内膜异位症组(P0.05)和子宫腺肌症组(P0.05)。卵巢子宫内膜异位症组与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义(P0.05)。在卵巢子宫内膜异位症组中p53与p21呈正相关(r=0.611,P0.01),p53与MDM2呈负相关(r=-0.541,P0.01),p21与MDM2在卵巢子宫内膜异位症组中表达无相关性(r=0.404,P0.05)。结论细胞凋亡调控蛋白p53、p21、MDM2与子宫内膜异位症和子宫腺肌症的发生发展相关,子宫内膜异位症和子宫腺肌症发病机制可能存在相同之处。     

瘦素在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 探讨瘦素在子宫内膜异住症中的作用.方法 应用免疫组织化学法检测瘦素在卵巢子宫内膜异位囊肿患者异位内膜36例、在位子宫内膜22例及正常子宫内膜20例中的表达特点.结果 腺上皮细胞中:瘦素在异位内膜和在位内膜中的表达均高于正常子宫内膜(P＜0.05);间质细胞中:瘦素在异位内膜中表达高于对照组内膜(P＜0.05),在位内膜与正常内膜之间的表达差异无显著性(P＞0.05);瘦素在异位内膜腺上皮细胞、间质细胞中的表达,Ⅲ～Ⅳ期患者高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P＜0.05).结论 瘦素可能在子宫内膜异位症的发生发展中发挥作用.     

抑癌基因PTEN在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的检测PTEN基因在子宫内膜异位症（EMs）和正常子宫内膜中的表达,探讨其在EMs发生．发展中的作用。方法收集45例EMs患者术后异位内膜及在位内膜标本（其中包括子宫腺肌病和卵巢子宫内膜异位症）,并收集非子宫内膜异住症的子宫内膜标本40例。用SP免疫组织化学方法检测PTEN在其中的表达。结果PTEN主要表达于子宫内膜腺上皮细胞的胞核中,在间质细胞中有少量表达。PTEN在非子宫内膜异位症的子宫内膜中高表达,为92．5％;在异位内膜中的表达水平明显降低,为37．8％;而PTEN在在位内膜中的表达为68．9％,介于正常内膜与异住内膜之间,两两比较差别有显著性。结论PTEN表达降低和缺失可能是EMs发生、发展的机制之一,PTEN可能参与了月经周期的调节。     

MMP9在卵巢子宫内膜异位症及子宫腺肌症中的表达及其意义

目的探讨MMP9在卵巢子宫内膜异位症及子宫腺肌症中的表达及临床意义。方法应用免疫组化方法对研究组39例子宫腺肌症合并卵巢子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜及异位子宫内膜及对照组27例正常子宫内膜进行MMP9检测。结果MMP9在卵巢子宫内膜异位症和腺肌症的异位内膜中表达差异无统计学意义(P>0.05);异位内膜与在位子宫内膜相比差异有统计学意义(P<0.05);异位内膜、在位内膜与正常内膜相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论MMP9表达增强可能与子宫内膜异位症及子宫腺肌症的发生、发展有关。     

CD147在巧囊合并子宫腺肌症中的表达及其意义

目的探讨CD147在卵巢巧囊合并子宫腺肌症中的表达及临床意义。方法应用免疫组化法对研究组45例子宫腺肌症合并巧囊患者的在位子宫内膜及异位子宫内膜及对照组33例正常子宫内膜进行CD147检测。结果CD147在巧囊和腺肌症的异位内膜中表达无统计学意义(P>0.05);异位内膜与在位子宫内膜相比差异有统计学意义(P<0.05);异位内膜、在位内膜与正常内膜相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论CD147表达增强可能与子宫内膜异位症合并子宫腺肌症的发生、发展有关。     

子宫内膜异位症中上皮型及诱生型一氧化氮合成酶的表达和意义

目的：检测上皮型一氧化氮合成酶（eNOS)及诱生型一氧化氮合成酶（iNOS)在异位子宫内膜腺上皮细胞中的表达,探讨NO／NOS卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌病中的作用。方法：应用免疫组织化学SP法检测异eNOS和iNOS71例异位子宫内膜和32例正常子宫内膜中的表达。结果：eNOS在子宫内膜腺上皮细胞的增生期表达较低,分泌期较高。iNOS在正常子宫内膜中的表达未见明显变化;异位子宫 内膜中的eNOS和iNOS的表达在增生期和分泌期均明显高于正常对照组;eNOS在子宫腺肌病组的表达高于卵巢子宫内膜异位位组,而iNOS的表达无差异;痛经组iNOS的表达明显高于无痛经组,而eNOS的表达无差异性。结论：eNOS和iNOS在异位子宫内膜中呈持续性过强表达,提示NO／NOS可能与卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌病的发病及进展有关。     

MMP7及TIMP1在子宫内膜异位性疾病中的表达及意义

目的探讨MMP7、TIMP1与巧克力囊肿（巧囊）及子宫腺肌病（AM）发病的相关性。方法应用免疫组化法检测正常子宫内膜33例,在位子宫内膜、巧囊及AM异位内膜各45例MMP7及TIMP1的表达情况。结果 （1）MMP7在巧囊及AM异位内膜中的表达高于其在位内膜及正常内膜中的表达（P〈0.01）;在位内膜中的表达又高于正常子宫内膜中的表达（P〈0.01）;（2）TIMP1在巧囊及AM异位内膜中的表达低于其在位内膜及正常子宫内膜中的表达（P〈0.01）;在位内膜中的表达又低于正常子宫内膜（P〈0.05）;（3）MMP7与TIMP1在巧囊及AM中的表达差异均无统计学意义（P〉0.05）。（4）MMP7与TIMP1在巧囊及AM中的表达呈负相关（P〈0.05）。结论 MMP7和TIMP1与子宫内膜异位症（EMS）及AM的发病有关,EMS与AM的疾病发生可能具有同源性。     

VEGF和PTEN蛋白在子宫内膜异位症中表达及临床意义

目的 研究血管内皮生长因子（VEGF）和磷酸酶基因（PTEN）蛋白在子宫内膜异位症（EMs）中的表达及其调节,从血管形成和基因调控方面进一步探究它们在EMs发生、发展中的作用和意义.方法 取EMs异位内膜58例,EMs在位内膜25例,正常子宫内膜20例,应用免疫组化二步法对VEGF和PTEN蛋白的表达进行研究,结合病例的治疗、复发及受孕情况进行分析.结果 VEGF在EMs患者的异位内膜中表达高于在位和正常内膜中的表达率（P＜0.05）,但PTEN在EMs患者的异位、在位内膜均低于正常内膜中的表达（均P＜0.05）;VEGF在EMs在位和异位内膜中的增生期与分泌期中的表达比较差异有统计学意义（P＜0.05）,但正常内膜中差异无统计学意义（P ＞0.05）;而PTEN在EMs患者在位、异位和正常内膜中的增生期和分泌期中的表达差异无统计学意义（P ＞0.05）.在VEGF和PTEN 蛋白表达与患者的年龄、痛经情况、囊肿大小及术后受孕与否均关系不密切,但与临床分期和术后复发密切相关;VEGF和PTEN蛋白表达呈负相关（P＜0.05）.结论 VEGF直接参与EMs的血管生成,PTEN蛋白在EMs中表达存在缺失或减弱,从而上调VEGF的表达.它们可能参与EMs的血管生成,促进异位内膜细胞的种植和病情发展.     

环氧合酶-2在子宫内膜异位症子宫内膜组织中的表达

目的：研究环氧合酶-2（COX-2）在子宫内膜异位症（内异症）在位子宫内膜组织和异位子宫内膜组织中的表达及意义。方法：采用免疫组织化学方法检测30例卵巢内异症在位内膜、10例卵巢巧克力囊肿壁异位内膜及27例正常子宫内膜中COX-2的分布和表达。结果：COX-2在3组子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞中均可见表达。COX-2在正常对照组内膜和卵巢内异症组在位内膜腺上皮细胞中的表达均是分泌期高于增生期（P<0.05)，而在间质细胞中的表达分泌期与增生期比较无统计学差异（P>0.05)。COX-2在卵巢内异症组在位和异位内膜中的表达均高于对照组（P<0.05），而内异症患者在位和异位内膜中COX-2的表达则无统计学意义（P>0.05）。结论：COX-2在卵巢内异症在位和异位内膜中表达增高，可能与卵巢内异症的病理异常有关。     

HIF-1α和PTEN蛋白在异位子宫内膜中的表达及临床意义

目的 研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和PTEN蛋白在子宫内膜异位症（EMs）中的表达及其调节,从血管形成和基因调控方面进一步探究它们在EMs发生、发展中的作用和意义.方法 取EMs异位内膜58例,EMs在位内膜25例,正常子宫内膜20例,应用免疫组化二步法对HIF-1α和PTEN蛋白的表达进行研究,结合病例的治疗、复发及受孕情况进行分析.结果 HIF-1α在EMs患者的异位内膜中表达高于在位内膜和正常子宫内膜中的表达率差异均有统计学意义（均P＜0.05）,PTEN在EMs患者的异位、在位内膜低于正常子宫内膜中的表达（均P＜0.05）;HIF-1α在EMs在位和异位内膜中的增生期和分泌期中的表达比较差异有统计学意义（P＜0.05）,而在正常子宫内膜中差异无统计学意义（P ＞0.05）;而PTEN在EMs患者在位、异位和正常子宫内膜中的增生期和分泌期中的表达差异无统计学意义（P ＞0.05）.在HIF-1α和PTEN 蛋白表达与患者的年龄、痛经情况、囊肿大小及术后受孕与否均无相关性,但与临床分期和术后复发情况有相关性;HIF-1α和PTEN蛋白表达呈负相关,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 HIF-1α直接参与EMs的血管生成,HIF-1α可能是血管生成的核心调控因子.PTEN蛋白能够诱导EMs细胞凋亡,抑制其生长,它在EMs中表达存在缺失或减弱.它们相互作用对EMs细胞的异位种植和存活创造了条件.