小鼠肺部肿瘤集聚髓源性抑制细胞实验研究

目的观察髓源性抑制细胞（MDSCs）在荷瘤小鼠肺部组织的表达情况。方法取12只C57BL/6小鼠随机分为实验组和对照组,每组6只。实验组：将体外培养的3LL细胞（0.3×106个）注射入小鼠尾静脉,成瘤后3周取小鼠肺组织,酶消化肺组织,制备肺组织单细胞悬液,采用流式细胞术检测MDSCs（GR1-FITC、CD11b-PE双染阳性）的表达量。对照组：在小鼠尾静脉注射PBS,其余步骤同实验组。结果实验组小鼠肺部组织高表达免疫抑制细胞MDSCs（GR＋CD11b＋双阳性）,表达量为（19.92±6.08）%;对照组MDSCs表达量为（7.06±2.67）%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。结论肺癌小鼠的肺组织高表达免疫抑制细胞MDSCs。     

宫颈癌患者外周血和宫颈组织中髓源性抑制细胞的检测及意义

［摘要］目的: 检测髓源性抑制细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSC)在宫颈癌患者外周血和癌组织中的比例及亚群分布,初步探讨其临床意义。方法: 采用流式细胞术分别检测17例宫颈癌患者治疗前和20例健康者外周血、17例宫颈癌组织和15例正常宫颈组织细胞悬液中MDSC比例及其亚群分布,并分析其与鳞状细胞癌抗原的相关性。结果： 与健康者相比,宫颈癌患者外周血中MDSC比例明显增高(P＜0.01),以CD15+粒细胞样亚群为主。与正常宫颈组织细胞悬液相比,癌组织细胞悬液CD45+细胞的比例明显增加(P＜0.05),但细胞中未见CD33+表面标志的表达。宫颈癌患者外周血MDSC比例与鳞状细胞癌抗原值呈正相关(r=0.715 4,P＜0.05)。结论： 外周血中粒细胞样的MDSC可能与宫颈癌的发生发展密切相关。     

中医药调控髓源性抑制细胞的研究进展

髓源性抑制细胞(MDSC)是骨髓和脾脏中的骨髓生成途径产生的一组具有高度免疫抑制活性的不成熟异质性骨髓细胞,与机体自身免疫性疾病、细菌感染、病毒感染等疾病密切相关。MDSC的主要功能为通过抑制T细胞活化、促进Treg的增殖以及与巨噬细胞相互作用而减弱或抑制机体的免疫反应。中医认为阴阳失调是导致疾病的主要原因,因而中医药治疗疾病是以借助中药的偏性帮助机体维持阴阳平衡为目的和手段。免疫系统及其功能的阴阳平衡与免疫功能及其病理变化密切相关。近年来,研究发现多种中药及其活性成分能够调控MDSC的表达参与机体免疫调控来治疗肿瘤等多种疾病。本文就近年来中医药调控MDSC的相关研究进展做一综述。     

脓毒症小鼠髓源性抑制细胞氨基酸代谢特点

目的: 探讨脓毒症小鼠髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)氨基酸代谢组学特点。方法: 采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)制备脓毒症小鼠模型,将小鼠随机分为假手术组(sham组, n = 10)和CLP组(n = 10)。术后第7天在各组存活小鼠中随机选取5只,分离小鼠骨髓MDSCs,采用安捷伦Seahorse XF技术测量MDSCs细胞的氧气消耗速率(oxygen consumption rate, OCR),采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术靶向检测细胞内氨基酸及寡肽含量。通过单维和多维检验分析差异代谢物和潜在生物标志物,并对潜在生物标志物进行通路富集分析。结果: CLP组小鼠骨髓中MDSCs比例(75.53% ± 6.02%)显著大于sham组的MDSCs比例(43.15% ± 7.42%, t = 7.582, P < 0.001),且CLP组小鼠骨髓中MDSCs的基础呼吸速率[(50.03±1.20) pmol/min]、最大呼吸速率[(78.07±2.57) pmol/min]和腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate, ATP)产生[(25.30±1.21) pmol/min]均显著大于sham组的基础呼吸速率[(34.53±0.96) pmol/min, (t = 17.41, P < 0.001)]、最大呼吸速率[(42.57±1.87) pmol/min, (t = 19.33, P < 0.001)]和ATP产生[(12.63±0.96) pmol/min, (t = 14.18, P < 0.001)]。亮氨酸、苏氨酸、甘氨酸等17种氨基酸含量显著增加(均P < 0.05),是脓毒症MDSCs的潜在生物标志物。增加的氨基酸主要富集在苹果酸-天冬氨酸穿梭、氨回收、丙氨酸代谢、谷胱甘肽代谢、苯丙氨酸和酪氨酸代谢、尿素循环、甘氨酸和丝氨酸代谢、β-丙氨酸代谢、谷氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等代谢途径。结论: CLP组小鼠MDSCs中线粒体氧化磷酸化增强,苹果酸-天冬氨酸穿梭和丙氨酸代谢增强,可能为线粒体有氧呼吸提供大量原料,从而促进MDSCs发挥免疫抑制功能,阻断上述代谢途径或将有助于调节MDSCs功能,为改善脓毒症预后提供新思路。     

哮喘小鼠脾细胞中粒细胞型髓源性抑制细胞和Th17细胞水平的变化

目的: 探索髓源性抑制细胞（myeloid derived suppressor cells,MDSCs）、Th17及调节性T细胞（Treg）在实验性哮喘小鼠脾脏中的水平。方法: 将6～8周BALB/c雄性小鼠随机分为PBS组和模型组;用卵清蛋白建立哮喘小鼠模型,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清中卵清蛋白特异性的IgE;采用HE染色和PAS染色观察小鼠肺组织的病理变化;用流式细胞术检测脾细胞中Th17、Treg、MDSCs的比例;采用免疫组化观察小鼠肺组织骨髓分化抗原（Gr 1）、白介素17（IL 17）、叉头样转录因子3（Foxp3）的表达水平。结果： 与PBS组相比,模型组小鼠气道炎性细胞增多,黏液分泌增加,血清IgE水平明显增高,脾细胞中Th17细胞的比例增加、Treg细胞比例减少;MDSCs中的粒细胞型亚群（G-MDSCs）的比例增加;同时肺组织中IL-17、Gr-1高表达,Foxp3低表达。结论： G MDSCs、Th17细胞比例增加,Treg细胞比例减少可能参与小鼠哮喘的发病。     

非酒精性脂肪性肝病患者髓源性抑制细胞和白介素-6的初步研究

目的：探讨非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）患者髓源性抑制细胞（myeloid-derived suppressor cells,MDSC）和白介素-6 (interleukin-6,IL-6)的表达及意义。方法：选取2018—2019年在汕头大学医学院第二附属医院就诊的NAFLD患者30例（NAFLD组）和同期健康体检者30名（正常对照组）。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中MDSC及其亚型Mo-MDSC、G-MDSC的比例,采用酶联免疫吸附测定技术检测血清中IL-6表达水平,采用Spearman相关分析判断MDSC及其亚型、IL-6与丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶等临床指标的关系。结果：NAFLD患者外周血中MDSC、Mo-MDSC、G-MDSC均明显低于正常对照组（P值均<0.05）,IL-6明显高于正常对照组（P<0.05）。NAFLD患者外周血中G-MDSC的比例与丙氨酸转氨酶/天冬氨酸转氨酶呈负相关（r=-0.403,P=0.030）。NAFLD患者外周血中MDSC、Mo-MDSC、G-MDSC比...     

肺癌患者外周血中髓源性抑制细胞的比例及其意义

目的: 研究肺癌患者外周血中髓源性抑制细胞(myeloid derived suppressor cells,MDSCs)比例的变化,分析其与T淋巴细胞亚群的关系及临床意义。方法: 选取20名健康体检者和30例肺癌患者,收集其外周血;此外,选择其中15例术后30 d的肺癌患者,收集其外周血。用流式细胞术检测外周血中HLA DRˉCD33+CD11+MDSCs比例和T淋巴细胞亚群的比例,并分析两者的相关性。结果： 与健康对照相比,肺癌患者外周血中HLA DR-CD33+CD11+ MDSCs比例明显增高(P<0.05)。肺癌患者CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+/CD8+T细胞比值均明显低于健康对照(P<0.05),但CD8+T细胞比例明显高于健康对照(P<0.05)。肺癌患者术后外周血中MDSCs比例明显低于术前(P<0.05)。淋巴结转移患者外周血中MDSCs比例明显高于无淋巴结转移患者(P<0.05),Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)。肺癌患者外周血中MDSCs比例与CD4+T细胞比例呈负相关(r=-0.524 4,P<0.01),与CD8+T细胞比例呈正相关(r=0.444 9,P<0.05)。 结论： 肺癌患者外周血中MDSCs比例增高,与T淋巴细胞亚群数量相关,可能对机体免疫具有抑制作用。     

髓源性抑制细胞在乳腺癌转移中的研究进展

乳腺癌患者好发骨、肝和肺转移,预后往往较差。根据Paget提出的“种子与土壤”学说,不同的组织微环境对癌细胞存在不同的吸引。研究表明,髓源性抑制细胞(MDSCs)可提前在乳腺癌转移部位募集,并在乳腺癌细胞多个转移环节中发挥重要作用,其在乳腺癌原发灶之外促进癌细胞转移的作用日益受到重视。本文总结了MDSCs的生物学特性、参与乳腺癌转移的多个环节,包括在外周循环、转移前微环境和转移灶中的促转移机制,以及靶向MDSCs治疗乳腺癌转移的研究进展。     

髓源性抑制细胞在胃癌患者外周血中的变化及临床意义

目的: 观察胃癌患者外周血中髓源性抑制细胞（myeloid derived suppressor cells,MDSCs）的数量变化并探讨其临床意义。方法：选取24例胃癌患者和15例健康志愿者,术前收集外周血2 mL;选择术后30天、门诊复诊经检查恢复顺利的患者18例与术前配对,收集外周血, 以CD14 /CD11b+/CD33+/HLA DR 作为MDSCs的表面标志物。用流式细胞仪检测MDSCs所占的比例,分析MDSCs的数量变化情况及其临床意义。同时对MDSCs在外周血中的表达与临床病理因素相关性进行分析。结果：健康对照组外周血MDSCs占（0.226±0.044）%,胃癌患者术前和术后复诊者外周血MDSCs所占比例分别为（1.903±0.247）%,（1.120±0.240）%。胃癌患者与对照组MDSCs比例差异有统计学意义（t=2.47,P<0.05）,手术前后MDSCs差异有统计学意义（t=2.14,P<0.05）。MDSCs在胃癌患者外周血的表达与性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、TNM分期以及有无淋巴结转移无关,与肿瘤的分化程度相关。 结论： MDSCs在胃癌患者免疫功能障碍中起重要作用,肿瘤负荷减轻后机体抗肿瘤免疫功能有所恢复。     

LPS诱导CD11b~+Gr-1~+髓源抑制性细胞在小鼠脾脏募集的研究

目的观察脂多糖(LPS)诱导的髓源抑制性细胞(MDSCs)在小鼠脾脏中的募集情况,以探讨诱导MDSCs募集的新方法。方法采用LPS反复腹腔注射的方法使小鼠产生内毒素耐受。流式细胞术检测正常小鼠和LPS注射小鼠第5、10天脾脏中CD11b+Gr-1+双阳性细胞,即MDSCs的比例。结果经LPS处理后第5、10天脾脏MDSCs的比例分别为(17.99±1.66)%和(27.37±6.62)%,较正常小鼠(4.53±3.00)%显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LPS可在短期内诱导大量MDSCs在小鼠脾脏中聚集。     

Increased circulating of myeloid-derived suppressor cells in myelodysplastic syndrome

Myelodysplastic syndrome (MDS) is a group of clonal hematopoietic stem cell disorders,characterized by varying degrees of peripheral cytopenia caused by ineffective dysplasia of the myeloid lineages.MDS also has a high risk of progression to acute myeloid leukemia.But the role of immune abnormalities in the pathogenesis of MDS is still not clear.     

Cyclooxygenase-2 blockade inhibits accumulation and function of myeloid-derived suppressor cells and restores T cell response after traumatic stress

Myeloid-derived suppressor cells （MDSCs） play a crucial role in T cell dysfunction, which is related to poor outcome in patients with severe trauma. Cyclooxygenase-2 （Cox-2） contributes to immune disorder in trauma and infection via production of prostaglandin E2. However, the role of Cox-2 in the accumulation and function of MDSCs after traumatic stress has not been fully elucidated. In the present study, we treated murine trauma model with NS398, a selective Cox-2 inhibitor. Then the percentages of CD1 lb＋/Gr-l＋ cells, proliferation and apoptosis of CD4＋ T cells were determined. Ar- ginase activity and arginase-1 （Arg-1） protein expression of splenic CDllb＋/Gr-I＋ cells, and de- layed-type hypersensitivity （DTH） response were analyzed. The results showed that Cox-2 blockade significantly decreased the percentages of CD1 lb＋/Gr-l＋ cells in the spleen and bone marrow 48 and 72 h after traumatic stress. NS398 inhibited arginase activity and down-regulated the Arg-1 expression of splenic CD1 lb＋/Gr-l＋ ceils. Moreover, NS398 could promote proliferation and inhibit apoptosis of CD4＋ T cells. It also restored DTH response of traumatic mice. Taken together, our data revealed that Cox-2 might play a pivotal role in the accumulation and function of MDSC after traumatic stress.     

地塞米松诱导骨髓来源抑制细胞对同种异系小鼠皮肤移植排斥反应的作用

目的 探讨地塞米松诱导骨髓来源抑制细胞（MDSCs）在同种异系小鼠皮肤移植模型中的表达及免疫负调节作用。方法 以雌性BALB/c小鼠皮肤为供体,雄性C57BL/6小鼠为受体,建立同种异系小鼠尾—背皮肤移植模型（n=40）。受体小鼠随机分为实验组和对照组（n=20）,实验组每日地塞米松磷酸盐溶液5 mg/kg腹腔注射,对照组等体积生理盐水腹腔注射,观察小鼠移植皮肤排斥反应情况,确定移植皮肤排斥时间;术后第7日切取小鼠移植皮肤行病理学检查;术后第9日处死部分小鼠,获取脾脏及移植皮肤引流淋巴结,行流式细胞术检测。结果 实验组小鼠移植皮肤的中位生存期为（24±3.062）d,显著长于对照组小鼠的（9±0.816）d （P〈0.05）。石蜡切片苏木精-伊红（HE）染色可见,与对照组比较,实验组移植皮肤的排斥反应显著减轻。流式细胞术检测结果显示：在脾脏组织,与对照组比较,实验组CD11b＋GR1＋ 细胞比例明显增高（P〈0.05）,肿瘤坏死因子-α （TNF-α）表达下调（P〈0.05）、白介素-10 （IL-10）表达上调（P〈0.05）,并伴有趋化因子受体CXCR2和黏附分子CD44、CD62L表达增加（P〈0.05）;在引流淋巴结,与对照组比较,实验组CD11b＋GR1＋ 细胞比例显著增高（P〈0.05）,而CD4＋ T细胞比例及γ干扰素（IFN-γ）表达显著减少（P〈0.05）。结论 地塞米松可能通过诱导产生MDSCs,使其向移植物局部迁移并作用于CD4＋ T细胞,抑制其功能,从而达到减轻移植物排斥反应及延长移植物生存的效应。     

Hypertonic saline resuscitation contributes to early accumulation of circulating myeloid-derived suppressor cells in a rat model of hemorrhagic shock

Background Hemorrhagic shock is usually associated with complicated immune and inflammatory responses,which are sometimes crucial for the prognosis.As regulators of the immune and inflammatory system; ...     

Amplification of functional myeloid-derived suppressor cells during stem cell mobilization induced by granulocyte colony-stimulation-factor

The effects of granulocyte colony-stimulation-factor （G-CSF） on stem cell mobilization and its impact on the amplification of myeloid-derived suppressor cells （MDSCs） of donor mice were ex- amined. A mouse model of stem cell mobilization was established by consecutive subcutaneous injec- tion of 100 μg/kg G-CSF for 5 days. The blood from the donor mice was routinely examined during mobilization. Stem cells and MDSCs were analyzed by flow cytometry. The immunosuppressive mole- cules derived from MDSCs in serum and spleen, including hydrogen dioxide （H202） and nitric oxide （NO）, and the activity of nitric oxide synthase （NOS） were determined during the mobilization. Apop- tosis of T lymphocytes was assessed by using Annexin-V/PI. During stem cell mobilization, the number of lymphocytes and white blood cells in the peripheral blood was increased, and peaked on the 4th day. The number of stem cells in G-CSF-treated mice was significantly greater than that in controls （P〈0.01）. The expansions of MSDCs were also observed after G-CSF mobilization, with a more notable rate of growth in the peripheral blood than in the spleen. The activity of NOS and the production of NO were increased in the donor mice, and the serum H202 levels were approximately 4-fold greater than the con- trois. Consequently, apoptosis of T lymphocytes was increased and showed a positive correlation with the elevated percentage of MDSCs. It was concluded that G-CSF could provide sufficient peripheral blood stem cells for transplantation. Exogenous administration of G-CSF caused the accumulation of MDSCs in the peripheral blood and the spleen, which could lead to apoptosis ofT lymphocytes and may offer a new strategy for the prevention and treatment of graft versus host disease.     

Compound K 对小鼠CT26结肠肿瘤模型中髓系抑制细胞的抑制作用

目的探讨人参皂苷Compound K（C-K）对髓系抑制性细胞（myeloid derived suppressor cell, MDSC）凋亡、免疫抑制及促
炎症细胞因子分泌的影响。方法流式细胞术分选得到CT26 肿瘤小鼠骨髓MDSCs,分别用C-K或PBS处理后,Annexin V/
7-AAD检测细胞凋亡;qRT-PCR检测Cox-2 和Arg-1 的mRNA表达水平;ELISA技术检测细胞培养上清中IL-1β、IL-6和IL-17
的水平。体内实验中,C-K 或对照PBS处理的MDSCs和结肠癌细胞系CT26共同皮下免疫Balb/c小鼠,21 d后,对两组小鼠肿
瘤的大小以及组织形态学进行鉴定。结果C-K促进了体外培养的MDSC的凋亡,表现为早期细胞凋亡率及晚期凋亡细胞或
坏死率均增加（P<0.01,P<0.05）;并显著下调了MDSC中免疫抑制作用相关基因Cox-2及Arg-1的表达（P<0.05,P<0.01）;同时
抑制了MDSC中促炎症细胞因子IL-1β、IL-6和IL-17的分泌（P<0.05,P<0.001,P<0.05）。与对照组比较,C-K 处理后的MDSCs
在体内促进肿瘤细胞的增殖作用明显减弱（P<0.01）。结论C-K 能促进体外培养的MDSC细胞凋亡并拮抗其免疫抑制功能,
从而抑制肿瘤细胞的生长与增殖。
     

小剂量地塞米松对脓毒症小鼠CD11 b+ Gr-1+髓源抑制性细胞的影响

目的：：观察小剂量地塞米松对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症小鼠CD11b+Gr-1+髓源抑制性细胞(MDSCs)的影响。方法：将145只BALB/c雄性小鼠随机分成正常对照组(NC组)35只,脓毒症组(SE组)和小剂量地塞米松干预组(SD组)各55只;SE组和SD组腹腔注射LPS 10 mg/kg制备脓毒症小鼠模型,NC组腹腔注射等量0.9%氯化钠注射液。 SD组于注射LPS 2 h后经尾静脉注入地塞米松0.3 mg/kg,SE组和NC组经尾静脉注入等量0.9%氯化钠注射液。注射LPS后时刻记为0 h,于6、12、24 h检测血清干扰素-γ及白细胞介素-10水平,于12、24、48、72 h检测小鼠脾脏及骨髓中CD11b+Gr-1+ MDSCs的百分比。结果：与NC组比较,SD组及SE组在实验6 h干扰素-γ和12 h白细胞介素-10水平均增加(P<0.05~P<0.01);SD组与SE组差异亦有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,SE组脾脏MDSCs百分比在12~72 h均明显升高(P<0.01),SD组在12~48 h亦均升高(P<0.01);而SE组和SD组在24~72 h差异亦均有统计学意义(P<0.01)。与NC组比较,SE组和SD组骨髓MDSCs百分比在48 h和72 h均升高(P<0.05~P<0.01);而SE组和SD组在48 h和72 h差异亦均有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。结论：小剂量地塞米松可抑制LPS诱导的脓毒症小鼠MDSCs的产生及聚集。     

骨髓抑制性细胞在肝细胞癌患者外周血中的水平及其临床价值

 目的  筛选肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者外周血骨髓抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)并验证其抑制功能,同时检测外周血MDSCs水平。方法  收集2014年3月10月在复旦大学附属中山医院诊治的HCC患者60例、慢性肝炎患者25例和健康人50例。采用流式细胞仪方法检测HCC患者、慢性肝炎患者和健康人外周血的MDSCs水平,分析MDSCs在HCC患者、慢性肝炎患者和健康人之间的差异,并评价MDSCs在患者临床病理资料中的差异。结果   HCC患者外周血MDSCs水平显著高于慢性肝炎患者和健康人群,HCC患者外周血MDSCs水平与肿瘤包膜、微血管侵犯显著相关(P<0.05)。同时MDSCs具有抑制T细胞增殖和分泌的功能。结论  术前外周血MDSCs水平有助于提示HCC患者的病理情况,为HCC患者的治疗提供重要的辅助依据。