银杏外种皮多糖对人胃癌细胞凋亡及其凋亡诱导基因表达的影响

目的：研究银杏外种皮多糖对人胃癌细胞凋亡及其凋亡诱导基因表达的影响。方法：应用体外培养方法和流式细胞技术，检测人胃癌SGC-7901细胞的凋亡率及其凋亡诱导基因bax的阳性蛋白标记率。结果：银杏外种皮多糖40～160μg／ml可诱导人胃癌SGC-7901细胞的凋亡，在培养24h～72h期间，具有量效关系和时效关系。银杏外种皮多糖40～160μg/ml也同时促进bax基因的表达。结论：银杏外种皮多糖的抗肿瘤作用机制之一可能与其诱导癌细胞凋亡有关，其诱导癌细胞凋亡的作用机制之一可能与其影响bax基因的表达有关。     

银杏外种皮多糖对荷瘤鼠免疫功能的影响

体外实验，银杏外种皮多糖（ＧＨＥＰ）可促进ＣｏｎＡ诱导的荷瘤小鼠脾脏Ｔ淋巴细胞增殖和ＪＰＳ诱导的荷瘤小鼠脏Ｂ淋巴细胞增殖。体内实验，ＧＢＥＰ不仅促进荷瘤小鼠Ｔ淋巴细胞和Ｂ淋巴细胞增殖，还能增强荷小鼠ＮＫＣ活性及ＩＬ－２活性。 发     

银杏外种皮多糖对HL-60细胞的体外实验研究

目的:研究银杏外种皮多糖对体外HL-60细胞的作用.方法:运用MTT方法和流式细胞技术,检测HL-60细胞体外增殖、凋亡以及相关基因的表达.结果:银杏外种皮多糖(40～160 m/L,48h)可抑制HL-60细胞增殖及增殖促进基因c-myc的表达,可诱导HL-60细胞凋亡并下调凋亡抑制基因bcl-2的表达.结论:银杏外种皮多糖对HL-60细胞增殖及凋亡的影响涉及增殖促进基因c-myc和凋亡抑制基因bcl-2.     

银杏外种皮多糖的免疫活性研究

目的研究脱蛋白和未脱蛋白银杏外种皮粗多糖（GBEP）对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用。方法采用药物方法建立免疫抑制小鼠动物模型,利用腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、血清溶血素抗体生成实验及脏器系数的变化,研究银杏外种皮粗多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果银杏外种皮粗多糖可增强免疫抑制小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能、血清溶血素抗体水平以及能对抗环磷酰胺引起的脾脏萎缩。结论银杏外种皮粗多糖具有增强小鼠免疫功能的作用,脱蛋白粗多糖的免疫活性稍好于未脱蛋白多糖。     

银杏外种皮多糖的成分分析

本文报道银杏外种皮多糖的提取及成分分析。粗多糖得率为6.58％,其中总糖含量为89.7％,还原糖含量为5.1％,多糖为84.6％。粗多糖水解物中含葡萄糖、果糖、半乳糖及鼠李糖。茚三酮反应、UV光谱提示该多糖含氨基酸或蛋白质。IR谱有多糖的特征峰,表明含酰胺键和含呋喃糖构型,且为α-苷键。由此,可认为该多糖为α-苷键肽多糖。     

银杏外种皮多糖对小鼠肿瘤的抑制作用

银杏外种皮多糖(GBEP)体外可抑制s180细胞的增疽．灌胃路药，能延长EAc小鼠的生存期．抑制小鼠sⅧ移植l生实体瘤的生长；超微结构观察，该实体瘤细胞膜结构被破坏，部分细胞嚣裂解成碎片。GBEP对环磷酰胺所致小鼠骨髓有核知胞敷的抑制还具有保护作用。     

银杏外种皮多糖延缓荷瘤小鼠衰老的实验研究

在实验的第１周、第２周和第３周检测荷瘤小鼠血清ＳＯＤ和ＭＤＡ含量。结果，银杏外种皮多糖（ＧＢＥＰ）治疗组小鼠在实验第２周和第３周血清ＳＯＤ活力显著高于对照组，ＭＤＡ含量则显著低于对照组。表明ＧＢＥＰ可增强荷瘤小鼠清除氧自由基能力，并减少自由基对机体的攻击，提示ＧＢＥＰ可延缓荷瘤小鼠衰老。     

银杏外种皮多糖延缓小鼠衰老的实验研究

银杏外种皮多糖(GBEP)可延长小鼠游泳时间及缺氧时的存活时间,表明GBEP可提高正常小鼠的应激反应;GBEP可提高荷瘤小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,减少血清脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成,表明可增强荷瘤小鼠清除氧自由基的能力以及减少自由基对机体的攻击;GBEP能对抗环磷酰胺(cy)所抑制的小鼠迟发型皮肤超敏反应(DCH),提高cy所抑制制的小鼠脾脏白细胞介素—2(IL—2)活性,表明可增强免疫抑制小鼠的免疫功能。这些结果提示GBEP可延缓小鼠的衰老。     

大孔吸附树脂纯化银杏外种皮多糖的研究

目的：探讨大孔吸附树脂AB-8对银杏外种皮多糖的吸附性能及其影响因素。方法：采用单因素实验优选AB-8树脂的纯化条件。结果：以流速为1．0ml／min，原样浓度为10mg／ml，pH值为7．4～7．6之间的组合上柱，银杏外种皮多糖的纯化效果最好。结论：AB-8树脂吸附性较好，多糖洗脱容易，纯化后多糖含量达81．3％。     

HPLC测定银杏外种皮多糖的分子质量及含量

目的:建立银杏外种皮多糖的分子质量及含量的HPLC测定方法。方法:以葡聚糖为标样,采用HPLC法,PL aquagel-OH MIXED(7.5 mm×300 mm,8μm)色谱柱,柱温25℃,示差折光检测器,流动相为超纯水,流速1.0mL.min^-1。结果:银杏外种皮多糖的分子质量为11 062.5,RSD 0.78% (n=6);含量为68.7%,RSD 3.4%(n=6),葡聚糖(分子质量为12 000)在1~20μg呈良好线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为97.9%,RSD 2.5%。结论:本方法灵敏度高,操作简便,重复性好,可用于银杏外种皮多糖的分子质量和含量的测定。     

红花桑寄生总黄酮提取物选择性抑制人源肿瘤细胞增殖和诱导凋亡

目的 观察红花桑寄生总黄酮提取物（Nispex）的体外抗肿瘤效果。方法 应用MTT法研究Nispex对人及小鼠多种肿瘤细胞和非肿瘤细胞增殖的抑制效果, 采用细胞集落培养法研究Nispex对人源肿瘤细胞中增殖细胞群的影响;采用AO/EB荧光染色、末端原位标记（TUNEL）法以及AnnexinV流式细胞术检测细胞凋亡。结果 Nispex能显著抑制人源肿瘤细胞增殖和诱导人源肿瘤细胞凋亡, 对肿瘤细胞中的增殖细胞群作用更为敏感。但Nispex对人源非肿瘤细胞的抑制作用不明显, 对鼠源细胞在检测浓度范围内未见有作用。结论 Nispex是一种对人源肿瘤细胞具有良好选择性的天然植物提取物。     

冬凌草甲素对骨肉瘤细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的机制研究

目的研究冬凌草甲素对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的分子机制。方法以流式细胞仪检测细胞周期变化;Western印迹检测CyclinD1、P21以及凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2和Bax表达的变化;TRAP-PCR-ELISA方法检测MG-63细胞端粒酶活性的变化;Z-IETD-fmk阻断试验检测Caspase-8阻断前后,冬凌草甲素对MG-63细胞凋亡影响的变化。结果冬凌草甲素增加G0/G1期MG-63细胞百分率,降低S期MG-63细胞百分率;浓度依赖性抑制MG-63细胞的CyclinD1、Survivin和Bcl-2蛋白表达,上调P21和Bax蛋白表达;浓度依赖性抑制MG-63细胞端粒酶的活性;Z-IETD-fmk阻断Caspase-8活性后,能部分逆转和减弱冬凌草甲素对MG-63细胞的凋亡诱导作用。结论冬凌草甲素通过影响细胞周期调节蛋白、阻断细胞周期G1/S期"稽查点";抑制Survivin、Bcl-2,上调Bax;抑制端粒酶活性以及活化Caspase-8等途径抑制MG-63细胞增殖及诱导MG-63细胞凋亡。     

对叶百部总生物碱抑制非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用机制

目的：观察对叶百部总生物碱对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：以非小细胞肺癌NCI-H460细胞作为研究对象,设置空白组和对叶百部总生物碱组(50、100、150、200、250 mg·L^-1)。通过噻唑蓝(MTT)比色法和平板克隆形成实验观察对叶百部总生物碱对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞增殖的影响;Hoechst33258染色法和流式细胞术观察细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测对叶百部总生物碱对胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和表皮生长因子受体(EGFR)mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测对叶百部总生物碱对Caspase-3、Bax、Bcl-2、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化(p)-Akt、EGFR、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及p-p38 MAPK蛋白表达的影响。结果：与空白组比较,对叶百部总生物碱组细胞增殖抑制率...     

人参皂苷诱导直肠癌细胞凋亡的临床观察

目的：观察人参皂苷对直肠癌细胞凋亡的影响。方法：经病理诊断为直肠癌的患者50例，随机分为两组。治疗组35例，对照组15例。治疗组术前每天用84．5％的人参皂苷40－60ml，保留灌肠4－6h ,连续用药6－8天。对照组用等量生理盐水同样方法灌肠。用药后手术切除肿瘤，术中取新鲜标本，送电镜检查。结果：治疗组用药后，25例便频、便血、肛坠感减轻，占71．4％，7例不全梗阻患者随痛全部减轻；电镜观察23例发现凋亡癌细胞，占65．7％。对照组无上述改变。结论：人参皂苷可诱导直肠癌细胞凋亡。     

虫草素抑制Ras蛋白表达并诱导非小细胞肺癌H358细胞凋亡研究

目的:研究虫草素在体外对K-Ras突变型非小细胞肺癌H358细胞的抑制作用及其相关机制。方法:用MTT法检测虫草素对H358细胞增殖的影响;以流式细胞术检测虫草素诱导H358细胞凋亡情况和对细胞周期的影响;用活性检测试剂盒检测Caspase3、8、9的活性变化;采用Western Blot方法检测K-Ras蛋白的表达情况。结果:不同浓度的虫草素对于H358细胞增殖均有一定的抑制作用,并以浓度依赖的方式诱导H358细胞凋亡和引起G1期周期阻滞;Caspase3、8、9均被不同程度激活;虫草素能够抑制H358细胞K-Ras的表达。结论:虫草素能够在体外有效诱导H358细胞凋亡并抑制H358细胞增殖,为进一步应用于临床治疗K-Ras突变型非小细胞肺癌等肿瘤疾病奠定了实验基础。     

花椒水提物通过抑制滑膜细胞增殖及诱导细胞凋亡治疗类风湿性关节炎

目的：探讨花椒水提物(ZBAE)对类风湿性关节炎的治疗作用。方法：将60只SD大鼠分为正常组、模型组[完全弗氏佐剂(CFA),10 mg·kg^-1]、甲氨蝶呤组(0.25 mg·kg^-1)和ZBAE低、中、高剂量组(90、180、360 mg·kg^-1)。甲氨蝶呤组腹腔注射给药2周,每周给药3次,ZBAE组连续灌胃给药14 d。给药期间,每3 d测量大鼠体质量和足跖肿胀度,同时进行关节炎评分。给药结束后,采用计算机断层(CT)扫描,苏木素-伊红(HE)染色及番红固绿染色观察ZBAE对滑膜增生及骨保护的作用。采用细胞增殖活性检测-8(CCK-8)试剂盒检测ZBAE对细胞增殖活力的影响;根据CCK-8实验结果确定最佳给药浓度与时间,设置空白组、ZBAE低、中、高质量浓度组(0.08、0.10、0.12 g·L^-1)。流式细胞仪分析花椒作用24 h后细胞的周期分布和细胞凋亡率;采用体外划痕实验检测类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)迁移能力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RA-F...     

棉酚对人胃癌细胞SGC-7901的抑制作用

目的研究棉酚(gossypol)对胃癌细胞的增殖抑制作用。方法将不同浓度棉酚与胃癌细胞株SGC-7901作用,采用MTT法检测凋亡情况。结果经棉酚处理后增殖能力降低,细胞显示明显凋亡征象,并随药物浓度增加和作用时间延长而增加。结论棉酚在体外能诱导胃癌细胞SGC-7901发生凋亡,抑制细胞增殖,是一种具有潜在抗肿瘤作用的药物,值得进一步临床试验。     

诱导细胞凋亡及抗凋亡的药物研究进展

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)又称程序性死亡 (ＰＣＤ) ,是一种生理的“细胞自杀”过程。ＰＣＤ与坏死性死亡不同 ,其主要靶目标是细胞核。ＰＣＤ可形成“死亡小体”(ａｐｏｐｔｉｘｂｏｄｙ) ,在琼脂糖凝胶电泳下可呈现典型的ＤＮＡ“梯状结构”(ｌａｄｄｅｒｐａｔｔｅｒｎ)。研究ＰＣＤ不仅可以揭示“死”的秘密 ,而且也是理解“生”的需要。如果该“亡”的细胞不能凋亡 ,而该“生”的细胞过早凋亡 ,都将影响机体正常“生”的需要。下面就将近年来人们在诱导凋亡及抗凋亡药物方面的研究进展作一概述。1　诱导细胞凋亡药物及其相关因素…     

肺癌平诱导Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞凋亡的形态学研究

目的：观察肺癌平对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞凋亡的影响。方法：选用Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞株，制作肿瘤动物模型后，分为盐水对照组、肺癌平组，进行光、电镜形态学观察。结果：实验组在20只受试Lewis肺癌小鼠中发癌数为16只，而对照组20只全部发癌，且与对照组比较，肿瘤团块较小，病理性核分裂较少，间质血管较少，淋巴细胞浸润。电镜下可见凋亡小体形成，且肺癌平能刺激淋巴细胞增生，在癌细胞间有许多淋巴细胞浸润，可见淋巴细胞侵入癌细胞并直接攻击破坏癌细胞。结论：肺癌平具有抗肺癌作用，其作用机理是通过诱导肿瘤细胞凋亡及刺激淋巴细胞增生的作用而实现的。     

金复康口服液诱导肺癌细胞A549凋亡的机制

目的:研究金复康口服液(JFK)诱导人非小细胞肺癌细胞A549凋亡的作用机制。方法:取对数生长期的人非小细胞肺癌细胞A549,随机分为空白组和药物组,采用溴化四甲基偶氮(MTT)比色法,考察不同质量浓度JFK(0.3,1.5,3,7.5,15,30 g·L~(-1))对A549细胞体外增殖能力的影响。通过平板克隆形成实验考察JFK对A549细胞平板克隆形成的影响,利用流式细胞仪考察JFK对A549细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)考察JFK对裂解DNA修复酶(cleaved PARP),活化型半胱天冬酶-3(actived Caspase-3),Wnt/β-联蛋白(β-catenin),细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的蛋白表达及对促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响,实验中设置空白组和药物组,药物组为A549细胞加入15,30 g·L~(-1)JFK,分别干预24 h,30 min。结果:JFK在1.5~30 g·L~(-1)呈质量浓度依赖性的抑制A549细胞外增殖(P0.01)。JFK抑制A549细胞的平板克隆形成在15~30 g·L~(-1),其中JFK 30 g·L~(-1)时抑制A549细胞的平板克隆最显著(P0.01)。与空白组比较,JFK 15~30 g·L~(-1)可提高AnnexinⅤ和PI双阳细胞率,诱导A549细胞凋亡(P0.05),且呈浓度依赖性提高cleaved PARP和actived Caspase-3的蛋白表达,并抑制β-catenin和cyclin D1在蛋白水平的表达(P0.05,P0.01)。JFK上调MAPK信号通路中JNK和p38的蛋白磷酸化水平(P0.05),同时下调Akt信号通路中Akt在T308和S473的位点磷酸化水平(P0.05)。结论:金复康口服液抑制人非小细胞肺癌细胞A549的体外增殖、平板克隆的形成并诱导其凋亡,部分通过调控JNK/p38/MAPK信号通路和Akt信号通路,抑制β-catenin和cyclin D1,同时提高凋亡相关蛋白cleaved PARP和actived Caspase-3的表达。